健脾益肠散对溃疡性结肠炎大鼠IFN-γ、IL-10、TGF-β1的影响

目的:观察健脾益肠散对溃疡性结肠炎(UC)大鼠血清IFN-γ、IL-10、TGF-β1的影响。方法:将60只SD大鼠按体质量随机分为正常组、模型组、健脾益肠散高、中、低剂量组和柳氮磺吡啶组,每组10只;采用2、4、6-三硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇法复制UC大鼠模型;给药21天后,ELISA法测定各组大鼠血清IFN-γ、IL-10、TGF-β1含量。结果:模型组大鼠血清IFN-γ、TGF-β1含量增加,IL-10含量减少,与正常组比较均有统计学差异(P<0.01);与模型组比较,健脾益肠散高、中剂量组IFN-γ、IL-10含量和高剂量组TGF-β1含量均明显改善(P<0.05或P<0.01);健脾益肠散高剂量组血清IFN-γ、IL-10、TGF-β1的变化与柳氮磺吡啶组比较差异无统计学意义(P>0.05),但其明显优于健脾益肠散低剂量组(P<0.05)。结论:健脾益肠散对UC肠黏膜免疫的保护作用可能与调节外周血IFN-γ、IL-10、TGF-β1的含量有关。

慢性乙型肝炎患者血清中IFN-γ、IL-10、TGF-β1水平与HBV-DNA载量的关系

目的探讨慢性乙型肝炎患者(CHB)血清中γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素10(IL-10)、转化生长因子β1(TGF-β1)的水平与HBV-DNA载量的关系。方法采用酶联免疫吸附实验(ELISA)测定血清中IFN-γ、IL-10、TGF-β1的水平,荧光定量PCR法测血清HBV-DNA载量。结果IFN-γ水平与HBV-DNA载量呈负相关(r=-0.325,P<0.01);IL-10水平与HBV-DNA载量呈正相关(r=0.343,P<0.05);TGF-β1与HBV-DNA载量无明显相关性(r=0.093,P<0.01)。结论血清中细胞因子IFN-γ、IL-10及TGF-β1与HBV-DNA复制密切相关。

血清IFN-γ、IL-10、TGF-β1在乙型病毒性肝炎患者中的表达及其临床意义

目的:探究血清IFN-γ、IL-10、TGF-β1在乙型病毒性肝炎患者中的表达及其意义,为临床明确乙型肝炎类型及治疗提供参考。方法:选取医院2016年10月—2017年10月间收治的乙型病毒性肝炎患者78例资料作为研究对象,根据感染状态的不同将患者分成急性乙肝组18例、慢性HBV携带组20例、慢性乙肝组24例及非活动性HBs Ag携带组16例;另选取15例非乙型肝炎病毒志愿者体检资料(对照组);比较5组研究对象的血清ALT、AST、ALB水平及血清IFN-γ、IL-10、TGF-β1水平测得值的差异。结果:急性乙肝组、慢性HBV携带组、慢性乙肝组及非活动性HBs Ag携带组患者ALT、AST及ALB水平测得值明显高于对照组(P<0.05);5组研究对象血清IFN-γ、IL-10、TGF-β1水平测得值经组间比较其差异有统计学意义(P<0.05),根据患者血清IFN-γ、IL-10、TGF-β1水平测得值的差异可判别表达乙型病毒性肝炎的类型(P<0.05)。结论:不同类型的乙型病毒性肝炎患者的血清IFN-γ、IL-10、TGF-β1水平存在不同的表达及意义,临床上通过对患者的血清学检测可以初步判定患者所患乙型肝炎类型。

抗纤维化细胞因子对TGF-β1基因启动转录活性的影响

转化生长因子β1(transforming growth factor-β1)是一类现已明确的致纤维化细胞因子,具有广泛的生物学效应,对细胞外基质(ECM)基因表达、降解、细胞增殖分化、凋亡及免疫功能都具有重要调节作用。前期我们研究发现,TGF-β1启动调控序列中单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点-509C>T与肝纤维化进展及血浆中TGF-β1浓度有明显的相关性。本研究旨在探讨抗纤维化细胞因子(IL-10、HGF、IFN-γ)对含TGF-β1基因-509C>T启动调控序列活性的影响。我们以特定-509C>T基因型患者DNA为模板,用PCR方法扩增得到一对长度为2.14kb(-1328^+812)含有-509C>T变异的TGF-β1上游基因片段,并将其与不含启动子的pCAT3-enhancer报告基因载体重组,构建重组体phT-GF2.14C和phTGF2.14T。用脂质体转染法将两种重组体分别转染至正常人肝脏细胞中,分别用IL-10(4ng/ml)、HGF(10ng/ml)、IFN-γ(20ng/ml)干预转染后细胞。ELISA法测定转染细胞的报告基因CAT活性。结果表明:肝细胞转染重组体phTGF2.14C细胞的CAT活性明显高于转染重组体phTGF2.14T(t=12.5882,P=0.0002)。IFN-γ对TGF-β1基因启动子phTGF2.14C、phTGF2.14T均具有显著抑制作用。细胞因子IL-10和HGF对其调控作用不显著。TGF-β1基因-509C>T中C等位基因可明显增强TGF-β1基因上游启动调控序列的转录活性,IFN-γ作为一种抗纤维化细胞因子在基因转录水平对含有两种等位基因-509C>T的TGF-β1基因上游启动调控序列均具有抑制作用。而作为抗纤维化细胞因子的IL-10与HGF在2.14Kb(-1328^+812)区域内对TGF-β1基因上游启动调控序列的作用不显著。

TGF-β1改善体外培养小鼠胚胎种植率及其作用机制的研究

目的探讨TGF-β1在体外对小鼠胚胎发育及胚胎种植的影响及其作用机制。方法①收集小鼠2-细胞期胚胎,在含不同剂量TGF-β1的M16培养液中进行体外培养,观察胚胎发育情况,并进行胚胎移植,观察着床率;②测定移植后小鼠外周血及胚胎种植部位母胎界面IL-10/INF-γ水平。结果①1 ng/mL和10 ng/mLTGF-β1能提高2-细胞期胚胎体外发育速率、质量和胚胎着床率。其中TGF-β1 10 ng/mL时作用最显著,TGF-β1浓度过高对体外胚胎发育不利;②M16+TGF-β1 10 ng/mL组体外培养囊胚移植后母胎界面INF-γ低于M16组,差异有统计学意义〔(30.89±11.31)pg/mL vs.(43.23±18.09)pg/mL,P<0.05〕。两组间IL-10水平无明显差异。结论①小鼠胚胎体外培养基中加入适宜浓度TGF-β1可提高2-细胞期胚胎体外发育速率、质量和胚胎着床率;②TGF-β1可能通过促进体外胚胎发育速率和质量,改善胚胎和内膜发育同步性,促进母胎界面Th1/Th2平衡向Th2偏移而促进胚胎着床。

IL-27与乙酰半胱氨酸对博来霉素诱导的小鼠肺纤维细胞因子变化的影响

目的对比研究IL-27与N-乙酰半光氨酸(NAC)对博来霉素诱导的小鼠肺纤维化进程中肺组织中相关因子的浓度。方法经小鼠支气管内注入博来霉素建立模型后,分为正常组(A组)、BLM组(B组)、BLM+IL-27组(C组)、BLM+NAC组(D组),各组分别于7、14、28天处死小鼠5只,肺组织行HE染色及Masson染色,右肺部分组织ELISA法测IFN-γ、TGF-β1、IL-6、IL-10、IL-17等因子的浓度。结果IFN-γ:不同时间点:A组无差异(P>0.05),B、C、D组差异均表现为:第7天最高、第14天其次、第28天最低(P<0.05);同一时间点:B、D组在第14天和第28天两两比较无差异(P>0.05),其余各组均表现为:C组最高、B组最低(P<0.05)。TGF-β1:不同时间点:A组无差异(P>0.05),B、C、D各组差异均表现为:第28天最高、第14天其次、第7天最低(P<0.05);同一时间点:各时间点各组间差异表现为:B组最高、D组其次、C组再次、A组最低(P<0.05)。IL-6:A组无差异(P>0.05);B、C、D各组差异均表现为:第14天最高、第28天其次、第7天最低(P<0.05);同一时间点:各时间点各组间差异表现为:B组最高、D组其次、C组再次、A组最低(P<0.05)。IL-10:不同时间点:A组无差异(P>0.05);B、C、D各组差异表现为:第7天最高、第14天其次、第28天最低(P<0.05);同一时间点:各时间点各组间差异表现为:B组最高、D组其次、C组再次、A组最低(P<0.05)。IL-17:A组无差异(P>0.05);B、C、D各组差异均表现为:第28天最高、第14天其次、第7天最低(P<0.05)。同一时间点:各时间点各组间差异表现为:B组最高、D组其次、C组再次、A组最低(P<0.05)。结论IL-27、NAC组肺组织IFN-γ浓度明显高于肺纤维化模型组,TGF-β1、IL-6、IL-10、IL-17的浓度明显低于肺纤维化模型组。IL-27与NAC均可以抑制肺纤维化,但IL-27较NAC效果更明显。

一氧化碳中毒及迟发性脑病与血清中免疫相关细胞因子的表达

目的:检测一氧化碳中毒后迟发性脑病(DEACMP)患者血清中IL-4、IL-10、IFN-γ、TGF-β1的水平,探讨DEACMP与神经免疫的相关性。方法:实验分为一氧化碳中毒后迟发性脑病组(DEACMP组)、急性一氧化碳中毒未发生迟发性脑病组(ACOP组)及健康对照组。应用酶联免疫吸附法(ELISA)测定30例DEACMP患者、27例ACOP患者及28例健康对照者中血清IL-4、IL-10、IFN-γ、TGF-β1水平,运用相关统计方法分析比较各组数值的差异。结果:DEACMP组IL-4水平低于健康对照组(P<0.05),ACOP组低于健康对照组(P<0.05);DEACMP组IL-10水平低于ACOP组(P<0.05),ACOP组高于健康对照组(P<0.05);DEACMP组IFN-γ水平高于ACOP组及健康对照组(P<0.05),ACOP组高于健康对照组(P<0.05);DEACMP组TGF-β1水平低于ACOP组及健康对照组(P<0.05),ACOP组高于健康对照组(P<0.05)。结论:一氧化碳中毒后迟发性脑病的发生与神经免疫损伤机制有关。

NK-κB在EAN中的作用及鼻粘膜耐受的影响

目的 :探讨核转录因子NF κB在EAN中的作用以及鼻粘膜耐受的影响。方法 :采用RT PCR和Western blot法检测Wistar大鼠脾脏淋巴细胞IFN γ、TGF β1、IL 10mRNA表达和P6 5蛋白表达。 结果 :IFN γmRNA在发病早期表达明显增加 ,恢复期下降 ;IL 10、TGF β1mRNA在恢复期表达最明显 (P <0 0 5 )。鼻粘膜耐受后大鼠发病率和发病程度减轻 ,IL 10、TGF β1mRNA表达增加 (P <0 0 5 )。P6 5蛋白表达与IL 10、TGF β1mRNA表达呈负相关 ,与IFN γmRNA表达呈正相关。 结论 :P6 5蛋白可能参与EAN的发病 ,鼻服抗原诱导T细胞产生IL 10、TGF β1,通过抑制P6 5蛋白表达这一途径 ,有效预防EAN发生。