转化生长因子β_1中和抗体对转化生长因子β诱导肌腱胶原和术后粘连的影响(英文)

背景： 研究表明，转化生长因子β1在肌腱损伤愈合过程中增加了肌腱细胞胶原的合成和术后粘连的形成。目的：观察转化生长因子β1抗体对转化生长因子β诱导的肌腱细胞胶原产生及术后粘连形成的影响。 设计、时间及地点：随机分组观察实验，于2005-09/2006-06在同济医学院实验动物中心完成。材料：选择2~5月龄新西兰大白兔，体质量3.5~4.5 kg。转化生长因子由美国Santa Cruz B iotechnology公司提供。方法：取兔屈指肌腱分离肌腱成纤维细胞、腱外膜细胞和腱内膜细胞，将细胞随机分成2组，实验组加入1 μg/L 转化生长因子β后，再加入0.1，0.5，1.0 mg/L转化生长因子β1中和抗体，对照组不添加任何试剂，酶联免疫吸附实验测定Ⅰ型胶原。取84只兔行中趾屈指肌腱切断吻合术，将其中36只兔随机分成3组，腱鞘内分别注入生理盐水、1.0，2.0 mg/L转化生长因子β1中和抗体，4，8周后取出肌腱行肌腱粘连检测、生物力学测定、组织学观察和扫描电镜观察；余48只兔随机分成2组，腱鞘内分别注入生理盐水和1.0 mg/L转化生长因子β1中和抗体，1，2，4，8周后取出肌腱，原位杂交方法测定肌腱转化生长因子β1和Ⅰ型胶原mRNA的表达。 主要观察指标：各组兔肌腱细胞胶原产生及术后粘连情况。结果：酶联免疫吸附实验显示，转化生长因子β1能明显提高肌腱细胞Ⅰ型胶原的产生；转化生长因子β1抗体能降低3种细胞Ⅰ型胶原的产生，随抗体质量浓度增加，Ⅰ型胶原水平逐渐降低，且呈剂量依赖性；术后4，8周，与1.0，2.0 mg/L 转化生长因子β1组比较，生理盐水组屈趾肌腱滑动距离较短，模拟主动屈曲度明显受限（P 〈 0.05），最大抗断裂载荷各组间比较差异无显著性意义（P 〉 0.05）。扫描电镜和组织学观察结果显示，术后4，8 周生理盐水组胶原纤维排列紊乱，1.0，2.0 mg/L 转化生长因子β1组胶原纤维排列整齐。原位杂交结果显示，术后各时间点1.0 mg/L 转化生长因子β1组转化生长因子β1 和Ⅰ型胶原mRNA表达均低于生理盐水组（P 〈 0.05）。 结论：转化生长因子β1抗体能有效抑制转化生长因子β1在肌腱损伤修复中的作用，减少粘连形成。

TGF-β1中和抗体对TGF-β诱导的肌腱胶原产生和术后粘连形成的影响

目的观察TGF-β1中和抗体对TGF-β诱导的肌腱细胞胶原产生及术后粘连形成的影响,探讨生物学调节在肌腱粘连防治中的作用。方法取6只成年新西兰大白兔12条屈趾肌腱分离肌腱成纤维细胞、腱外膜细胞和腱内膜细胞,将细胞随机分成2组,实验组加入1ng/mL TGF-β后,再加入不同浓度TGF-β1中和抗体,对照组不添加任何试剂,培养3d后ELISA测定ColⅠ的产生。取84只兔行中趾屈趾肌腱切断吻合术,随机分成3组,腱鞘内分别注入生理盐水(NS组,n=36)、1.0μg/mL TGF-β1中和抗体(1.0μg/mL TGF-β1组,n=36)和2.0μg/mL TGF-β1中和抗体(2.0μg/mL TGF-β1组,n=12)。术后4、8周取出肌腱行肌腱粘连检测、生物力学测定、组织学观察和扫描电镜观察。1、2、4、8周后取出NS组及1.0μg/mL TGF-β1组肌腱,原位杂交方法测定TGF-β1和ColⅠmRNA的表达。结果ELISA检测显示,TGF-β1能明显提高肌腱细胞ColⅠ的产生;TGF-β1抗体能降低肌腱成纤维细胞、腱外膜细胞和腱内膜细胞ColⅠ的产生,且呈剂量依赖关系。术后4、8周,NS组屈趾肌腱滑动距离较短,模拟主动屈曲度明显受限,与1.0μg/mL TGF-β1组和2.0μg/mL TGF-β1组比较差异均有统计学意义(P<0.05);最大抗断裂载荷各组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。扫描电镜和组织学观察结果显示,术后4、8周NS组胶原纤维排列紊乱,1.0μg/mL TGF-β1组和2.0μg/mL TGF-β1组胶原纤维排列整齐。原位杂交结果显示,术后各时间点1.0μg/mL TGF-β1组TGF-β1 mRNA和ColⅠmRNA表达水平均低于NS组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论TGF-β1中和抗体能有效抑制TGF-β1在肌腱损伤修复中的作用,减少粘连形成。