二期骨折愈合过程中骨痂软骨细胞凋亡与VEGF和TGF-β_1的表达

目的 :探讨二期骨折愈合过程中骨痂软骨细胞凋亡与VEGF和TGF - β1的表达变化。方法 :建立 16只SD大鼠股骨二期骨折愈合模型 ,分别于骨折后 1、2、3、4周取材 ,对骨痂进行HE染色及VEGF、TGF - β1免疫组化染色 ,同时用TUNEL法及琼脂糖凝胶电泳法检测细胞凋亡。结果 :VEGF骨折后第 1周在间充质细胞未见阳性表达 ,但软骨细胞、成骨细胞及新生网织骨小梁表面基质内呈强阳性表达 ;第 2、3周时软骨细胞中有强阳性表达 ;第 4周在软骨细胞中表达强度开始下降。TGF - β1第 1周在间充质细胞内呈弱表达 ;第 2周在软骨细胞中表达最强 ;第 3、4周其在软骨细胞中呈下降趋势。骨折愈合的不同时期都有细胞凋亡的发生 ,第 3周表现最为明显。结论 :在骨折愈合的不同时期 ,VEGF、TGF - β1表达的强弱有一定的差异。TGF - β1在骨折愈合早期可能起着促进间充质细胞向软骨细胞转化的作用 ,到第 2周其表达最强。VEGF在骨折的第 2周表达最强 ,到第 3、4周开始下降。软骨细胞的凋亡主要发生在骨折后的第 3周。

小夹板固定对实验性骨折愈合的VEGF及TGF-β_1表达的影响

目的:通过观察小夹板局部外固定骨折愈合过程中骨痂组织内转化生长因子β1(transforming growth factorβ1,TGF-β1)及血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达,探讨骨折固定的方式与VEGF、TGF-β1及骨折愈合的关系。方法:选用45只健康家兔,在左侧胫骨中下三分之一处,复制3mm标准横形骨折模型,随机分成A组、B组、C组。A组与B组用石膏固定5d后改成小夹板外固定,将压力传感器置于夹板内侧骨折断端,但A组与B组夹板包扎松紧不一致,A组扎带上下移动3mm,B组移动7mm,此时读出A组压力传感器读数是18kPa,B组压力传感器读数是12kPa;C组钢板内固定;术后14d,24d,34d分批取死兔子,取胫骨标本作骨切片,采用免疫组织化学的方法(SP法)检验三组模型中VEGF和TGF-β1的表达情况。结果:A组骨痂组织中TGF-β1和VEGF表达量多,颜色深,VEGF、TGF-β1表达基本呈同步关系,即TGF-β1表达强时,VEGF亦表达强。结论:A组缩短骨折愈合所需的时间,提高骨折愈合质量。B组和C组骨折愈合较慢。

ER、VEGF、TGF-β1在增生期子宫内膜良恶性肿瘤中的表达及其相关性研究

目的探讨增生期子宫内膜良恶性肿瘤中ER、VEGF、TGF-β1表达及其相关性。方法纳入增生期子宫内膜良恶性肿瘤病例样本共计48例,对这48例增生期子宫内膜良恶性肿瘤病例采用逆转录实时定量聚合酶链反应RT-PCR的方法,对ER、VEGF、TGF-β1的相对表达量进行检测,同时总结增生期子宫内良恶性肿瘤与其表达量的关系。结果增生期子宫内膜肿瘤组ER、VEGF、TGF-β1mRNA的表达水平均高于对照组,且恶性肿瘤组高于良性肿瘤组ER、VEGF、TGF-β1 mRNA表达情况,组间比较差异具有统计学意义(P<0.05);子宫内膜组织中ER、VEGF、TGF-β1阳性表达率明显高于对照组组织(P<0.05),且恶性肿瘤组高于良性肿瘤组,两组比较差异具有统计学意义(P<0.05);ER、VEGF、TGF-β1表达与增生期子宫内膜恶性肿瘤的复发相关(P<0.05)。结论增生期子宫内膜肿瘤良恶性与ER、VEGF、TGF-β1表达量相关,ER、VEGF、TGF-β1相对表达量水平与增生期子宫内膜良恶性肿瘤的预后具有着相关性。

TGF-β1对HepG2细胞表达VEGF的作用

目的:研究ERK在TGF - β1刺激肝癌细胞表达血管内皮生长因子中的作用。方法:体外培养肝癌细胞系HepG2 ,施加外源性TGF - β1,并使用细胞外信号调节激酶ERK1/2的特异性阻断剂。免疫组化以及RT -PCR检测VEGF蛋白和mRNA的表达。结果:与空白对照组比较,施加外源性TGF - β1能够使肝癌细胞VEGF的蛋白及mRNA的表达显著增多,但是同时使用阻断剂组的VEGFmRNA表达与TGF组相比没有明显差异。结论:TGF - β1刺激肝癌细胞HepG2表达VEGF可能通过ERK/MAPK以外的信号通路实现。

α1,2-岩藻糖转移酶基因转染对卵巢癌细胞RMG-I裸鼠体内致瘤性及血管生成因子表达的影响

目的比较α1,2岩藻糖转移酶(α1,2-FT)基因转染前后卵巢癌细胞株RMG-I的裸鼠体内致瘤性及移植瘤组织中血管内皮生长因子(VEGF)、转化生长因子-β(1TGF-β1)及碱性成纤维生长因子(b-FGF)表达的变化。方法我们在前期工作中利用基因转染技术将α1,2-FT基因转入人卵巢癌细胞株RMG-I,建立了α1,2-FT及Lewisy高表达细胞株RMG-I-H。本实验将转染前后细胞种植裸鼠皮下建立人卵巢癌裸鼠移植瘤模型,观察两组肿瘤生长情况。5周后处死动物,测量移植瘤质量,免疫组织化学方法检测肿瘤组织VEGF、TGF-β1及b-FGF的表达。结果两组裸鼠均有皮下荷瘤形成,但转染组的成瘤时间(5.2±0.8d)早于未转染组(8.8±1.3d),且转染组的瘤质量和体积与未转染组相比亦明显增加(P<0.05)。转染组裸鼠移植瘤组织VEGF、TGF-β1及b-FGF的表达均明显高于未转染组(P均<0.05)。结论α1,2-FT基因转染能增强卵巢癌细胞RMG-I的体内致瘤性,上调裸鼠移植瘤组织VEGF、TGF-β1及b-FGF的表达。提示α1,2-FT及Lewisy抗原参与血管生成,其高表达在促进血管生成中可能发挥重要作用。

HIF-1α蛋白在烧伤后增生性瘢痕组织中的表达及临床意义

目的:探讨烧伤后瘢痕增生患者组织中HIF-1α蛋白的表达水平及其临床意义。方法:选取82例烧伤后瘢痕增生患者的增生性瘢痕组织作为实验组,同时取其自身正常皮肤组织为对照组。采用荧光定量PCR检测HIF-1α的mRNA表达水平;采用免疫组化检测HIF-1α的蛋白表达水平;采用Westernblot检测HIF-1α相关细胞因子,转化生长因子β(TGF-β)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)及血管内皮生长因子(VEGF)的蛋白表达水平。结果:与正常组织(0.29±0.03)相比,增生性瘢痕组织中HIF-1α的mRNA相对表达水平(1.45±0.16)显著增高,差异有统计学意义(P<0.05);免疫组化显示,与正常组织中HIF-1α的阳性表达率(8.54%)相比,增生性瘢痕组织中HIF-1α的阳性表达率(70.7%)显著升高(P<0.05);Western blot显示,与正常组织相比,增生性瘢痕组织中HIF-1α、TGF-β及VEGF蛋白表达水平显著增加,E-cadherin蛋白表达水平显著下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:HIF-1α在增生性瘢痕组织中高表达,并通过调控下游细胞因子TGF-β、VEGF及E-cadherin的表达参与增生性瘢痕的发生、发展。

人体皮肤创伤组织细胞因子表达的时间相关性

目的探讨TGF-β1、b—FGF和VEGF在人体皮肤创伤组织中的表达变化及其与损伤时间的关系。方法收集15例机械性致伤的人体皮肤组织(受伤5—120min内死亡),常规制作组织切片后进行免疫组化染色,并统计分析TGF-β1、b—FGF和VEGF因子的表达情况。结果 TGF-β1在16—50min组表达升高,60～120min组呈阳性至强阳性表达;b—FGF在16—50min组表达升高明显,强阳性表达亦出现在60～120min组;VEGF仅在60—120min组出现阳性表达。统计学分析表明,TGF—β1和b—FGF的表达升高分别在受伤60~120min(P【0.01)和在16—50min(P【0.01)有显著性意义,VEGF表达升高只在60~120min(P【0.05)有显著性意义。结论 TGF-β1、b—FGF和VEGF的表达时间和表达强度与损伤时间有关;TGF-β1、b—FGF和VEGF的表达可为人体短存活期损伤时间的推断提供参考。

尖锐湿疣皮损中TGF-β1和VEGF表达及微血管密度检测

研究表明，转化生长因子-β1（TGF-β1）和血管内皮生长因子（VEGF）与许多肿瘤的发生发展有关。而尖锐湿疣是一种由人乳头瘤病毒所致的良性肿瘤。我们采用免疫组化SP法检测尖锐湿疣皮损中TGF-β1和VEGF的表达以及真皮乳头层的微血管密度（MVD），分析TGF-β1、VEGF和真皮乳头层微血管密度的相关性．探讨TGF-β1、VEGF在尖锐湿疣发生、发展中的作用。

清肝化瘀方对大鼠肝癌血管形成的影响

目的:观察清肝化瘀方对大鼠肝癌前病变及癌变期血管形成的影响。方法:以二乙基亚硝胺长期灌胃诱发大鼠肝癌,以苦参素作对照,观察癌前病变及癌变期HE染色、VEGF和TGF- β1免疫组化染色、放免法检测血清中TNF-α含量的改变。结果:清肝化瘀方和苦参素癌前病变及癌变期病理改变较病理组明显减轻,VEGF和TGF- β1表达明显低于病理组,清肝化瘀方TNF-α水平显著低于病理组和苦参素组。结论:清肝化瘀方具有抑制肝癌血管形成的作用,这也是清肝化瘀方药抗癌的作用机理之一。

高强度聚焦超声对黑色素瘤小鼠局部肿瘤血管生长因子的影响

目的 检测黑色素瘤瘤小鼠高强度聚焦超声(HIFU)治疗前后局部(靶区及边缘)血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、转化生长因子(TGF) β1和TGF α等血管生长因子的表达,探讨HIFU治疗对局部肿瘤血管生长因子的影响。方法 采用B16黑色素瘤动物模型,实验分3组,即HIFU组、手术组和假照组。于治疗后第3天取各组靶区肿瘤组织(手术组除外)及边缘皮肤组织。采用免疫组织化学法检测VEGF、bFGF、TGF β1、TGF α的表达。结果 假照组靶区肿瘤组织VEGF、bFGF、TGF β1、TGF α表达阳性率分别为80 .0 %、5 0 .0 %、65 .0 %、80 .0 % ,而HIFU组为阴性表达;假照组边缘皮肤组织为阴性表达,而手术组及HIFU组边缘皮肤组织的上述4种血管生长因子的阳性表达率均为10 0 % ,两组差异无统计学意义(P >0 .0 5 )。结论 HIFU治疗能够破坏VEGF、bFGF、TGF β1、TGF α等血管生长因子在肿瘤组织中的表达。