CD68、TGF-β2及VEGF在良性前列腺增生中的水平变化及临床应用价值

目的分析巨噬细胞标志物(CD68)、转化生长因子标志物(TGF-β2)及血管内皮生长因子(VEGF)在良性前列腺增生中的水平变化及临床应用价值。方法选取2020年1月至2022年12月于重庆市永川区中医院进行治疗的良性前列腺增生患者207例(观察组)为研究对象,选取同期进行中老年男性健康体检者150名为对照组。对比两组血清CD68、TGF-β2、VEGF水平;对比观察组不同疾病程度BPH患者的CD68、TGF-β2、VEGF水平;采用Kappa一致性检验评估血清CD68、TGF-β2、VEGF单独以及联合诊断BPH与病理活检结果的一致性;绘制ROC曲线,分析血清CD68、TGF-β2、VEGF单独及联合诊断BPH的价值。结果对照组血清CD68、TGF-β2、VEGE水平均低于观察组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组血清CD68、TGF-β2、VEGE水平:Ⅲ度>Ⅱ度>Ⅰ度,差异有统计学意义(P<0.05);血清CD68、TGF-β2、VEGF单独以及联合诊断BPH与病理活检结果的一致性Kappa值分别为0.536、0.617、0.631、0.878;血清CD68、TGF-β2、VEGF三者联合诊断BPH的AUC为0.812,高于三指标单独检测(P<0.05)。结论可通过检测血清CD68、TGF-β2、VEGF水平变化,了解BPH的发展情况,三指标有利于临床对患者进行早期诊断以及预后评估。

TGF-β2和geneX对BrdU标记骨髓间充质干细胞增殖与成骨分化的作用

目的研究TGF-β2和gene X对Brd U标记的骨髓间充质干细胞增殖与成骨分化作用的影响.方法采用全骨髓贴壁培养法分离骨髓间充质干细胞,传代并鉴定,设实验组和空白对照组,实验组分4组:A组:Brd U标记后的BMSCs组;B组:Brd U标记后的BMSCs+TGF-β2组;C组:Brd U标记后的BMSCs+gene X组;D组:Brd U标记后的BMSCs+gene X+TGF-β2组.空白对照组为Brd U标记后的单纯BMSCs加入基础培养基避光培养.诱导培养后观察骨髓间充质干细胞生长形态、检测生长动力学(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)、碱性磷酸酶(ALP)和钙定量、进行细胞Von-Kossa法染色,观察成骨分化作用.结果 (1)4组BMSCs吸光度值(OD)分析比较显示:细胞组间差异有统计学意义(P<0.05);(2)各组BMSCs成骨诱导后碱性磷酸酶(ALP)和钙定量检测结果显示:细胞组间差异有统计学意义(P<0.05);(3)进行细胞Von-Kossa法染色,D组可见大量钙结节;C组可见较多钙结节;B组可见部分钙结节;A组可见少量钙结节;空白对照组未见钙结节.结论 (1)TGF-β2可促进骨髓间充质干细胞的增殖和诱导其向成骨细胞分化;(2)gene X可促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化,且在细胞因子TGF-β2联合作用下成骨分化作用更明显.

转化生长因子β2真核表达载体pcDNA3.1(+)/TGF-β2的构建及其在骨髓基质细胞的表达

目的 :构建人转化生长因子 β2的真核表达载体 pcDNA3.1(+) /TGF - β2 ,检测其转染骨髓基质细胞后的表达。方法 :用PCR方法从人胎盘cDNA文库DNA中扩增TGF - β2全长cDNA ,该基因片段两端设计了NheⅠ和XhoⅠ限制性酶切位点。将所得片段连接到T载体上测序证实。利用重组DNA技术将TGF - β2的cDNA构建到真核表达载体 pcDNA3.1(+)上 ,酶切鉴定。通过脂质体介导的转染技术 ,将所构建的载体导入从骨髓中分离培养的基质细胞中 ,体外单层培养。分别于转染后 2 4h和 4周利用RT -PCR和Western -Blotting方法检测目的基因的表达情况。结果 :经琼脂糖凝胶电泳及测序证实 ,PCR获得的片段与GenBank中登记的TGF - β2cDNA序列完全相同。pcDNA3.1(+) /TGF - β2酶切片段的长度与理论大小相符。转染后不同时期的骨髓基质细胞在mRNA和蛋白质水平均可检测到TGF - β2的表达。结论 :pcDNA3.1(+) /TGF - β2真核表达载体构建成功 。

替莫唑胺通过TGF-β2影响胶质瘤干细胞的侵袭性研究

目的探讨替莫唑胺能否抑制胶质瘤干细胞(GSCs)和分化的胶质瘤细胞株的侵袭,并降低免疫抑制作用和对转化生长因子-β2(TGF-β2)表达的影响。方法首先从原代培养胶质瘤干细胞(PCGCs),然后,我们通过免疫组化,细胞侵袭实验来研究替莫唑胺对侵袭力的影响,实时逆转录酶-聚合酶链反应(RT-PCR)和酶联免疫吸附试验(ELISA)等方法来证明TGF-β2的表达影响。结果 TMZ能够抑制胶质瘤干细胞和原代培养胶质瘤干细胞的侵袭力。此外,TMZ在mRNA和蛋白水平下调TGF-β2的表达。结论替莫唑胺能够通过影响TGF-β2的表达来抑制胶质瘤干细胞(GSCs)和分化的胶质瘤细胞株的侵袭,并降低他们的免疫抑制作用,替莫唑胺可作为胶质瘤治疗的免疫调节剂。

前列腺素F2α类药物对青光眼患者房水TGF-β2、NO及促红细胞生成素的影响

目的：探讨前列腺素F2α类药物对青光眼患者房水TGF-β2、NO及促红细胞生成素的影响。方法：选取2008—12／2010—01于本院进行治疗的40例青光眼患者为研究对象，将其设为观察组，对其采用前列腺素F2α类药物进行治疗，后选取40名健康人为对照组，分别于治疗前后对青光眼患者和健康人的房水TGF-β2、NO及促红细胞生成素进行检测，同时将患者的治疗效果及不良反应发生率等进行统计及比较。结果：经研究比较发现，治疗前青光眼患者的TGF-β2高于治疗后及对照组（P〈0．05），而治疗前青光眼患者NO及红细胞生成素高于治疗后及对照组（P〈0．01），均有统计学意义。结论：前列腺素砣仅类药物对青光眼患者房水TGF-β2、NO及促红细胞生成素的影响较大，对于患者的治疗效果较好，值得临床推广应用。

抗TGF-β2抗体对滤过泡瘢痕成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达的影响

目的观察抗转化生长因子-β2(TGF-β2)抗体对体外培养的滤过泡成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达的影响。方法利用手术修复人眼小梁切除术后失败滤过泡修复时切除下来的瘢痕组织进行组织块培养,获得成纤维细胞(FB)。将0、0.01、0.1、1μg/mL抗TGF-β2抗体作用于FB24h以及0.14μg/mL(半数抑制率质量浓度,IC50)抗体作用0、24、48、72h,通过生物化学显色法、RT-PCR法检测抗TGF-β2抗体对成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的表达量。结果在FB中加入0、0.01、0.1、1μg/mL抗TGF-β2抗体作用24h及IC50质量浓度处理0、24、48、72h,结果显示随着抗TGF-β2抗体质量浓度增加及作用时间延长,Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达依次减少,羟脯氨酸(HPr)及胶原含量逐渐降低(P<0.05)。结论抗TGF-β2抗体能减少Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的表达及合成。

牦牛TGF-β2基因片段的克隆测序及系统进化分析

克隆测序了牦牛的TGF-β2基因,并进行了Blastn比较分析。结果表明,牦牛TGF-β2基因片段长为559bp,与普通牛、人、黑猩猩、小鼠的相应片段的同源性分别达98%、95%、94%、93%。在5′端调控区域没有类似TATA盒元件,推测TGF-β2基因在脾脏、肾脏组织细胞中表达量不是很高。由于TGF-β对细胞的生长、分化和免疫功能都有重要的调节作用,牦牛TGF-β2基因研究对高原畜牧业发展提供了科学资料。

紫外辐射诱导人晶状体上皮细胞凋亡机制中TGF-β2/Smad-4细胞信号传导通路的作用

目的了解转化生长因子β2(TGF-β2)/Smad-4细胞信号传导通路是否参与B波段紫外线(UVB)辐射诱导人晶状体上皮细胞系(HLECs)的凋亡过程,探讨HLEC紫外线损伤的可能保护机制。方法HLECs预先在含0.01μg/ml AF-302-NA的培养基中孵育24h,行480mW/cm2的UVB照射。采用流式细胞仪(FCM)和TUNEL方法检测细胞凋亡,采用RT-PCR检测TGF-β受体(TβRs)和bax mRNA表达水平的变化,免疫荧光染色方法进行Smad-4蛋白定位。结果UVB照射组HLECs凋亡比例明显高于对照组;TβRs和凋亡促进子bax的mRNA表达水平增高,UVB照射后Smad-4表达量明显升高,并从HLECs细胞胞浆转移到细胞核内;AF-302-NA可以抑制UVB引起的Smad-4由细胞浆向细胞核的转移,部分抑制UVB照射引起的TβRs和bax mRNA表达量的增高,并可降低HLECs的凋亡比例。结论在UVB诱导HLECs凋亡机制中,凋亡信号通过TGF-β2/Smad-4信号传导通路传递,阻断TGF-β2/Smad-4信号传导通路可以在一定程度上抑制UVB照射所引起的HLECs凋亡。

2型糖尿病患者白内障术后黄斑水肿与房水中TGF-β2、FGF及MCP-1的研究

目的探讨房水中转化生长因子-β2(TGF-β2)、成纤维细胞生长因子(FGF)及单核细胞趋化因子1(MCP-1)水平与2型糖尿病患者白内障术后黄斑水肿的联系。方法选取在我院接受手术治疗的85例白内障合并2型糖尿病患者,将术后出现黄斑水肿的39例列为观察组,未出现黄斑水肿的46例作为对照组。对比两组研究对象视网膜厚度;分析两组研究对象房水中细胞因子(TGF-β2、FGF及MCP-1)水平;分析观察组患者TGF-β2、FGF及MCP-1与视网膜厚度的关系。结果观察组研究对象黄斑区全层视网膜各部位厚度中中心凹、鼻内侧、颞内侧及平均厚度水平显著高于对照组;观察组研究对象TGF-β2、FGF及MCP-1水平明显高于对照组;观察组患者房水中TGF-β2、FGF及MCP-1与视网膜平均厚度值呈正相关。结论房水中TGF-β2、FGF及MCP-1与2型糖尿病患者术后黄斑水肿关系紧密,可作为评价其相关的特异性指标,为临床上预防及减轻黄斑水肿的发生提供有关依据。

TRPV1及TGF-β2的检测对儿童UACS诊断意义的探讨

目的探讨对瞬时受体电位香草酸受体1(TRPV1)及转化生长因子β2(TGF-β2)的检测在儿童UACS中的诊断价值。方法选择32例于我院行腺样体手术的腺样体肥大患儿,其中上气道咳嗽综合征(UACS)组16例,对照组16例。所有患儿均于术前采血进行ELISA检测,术中取腺样体标本进行免疫组化试验。结果 UACS组与对照组相比,用ELISA法和免疫组化法进行检测,TRPV1及TGF-β2的检测值为(14.84±4.38)pg/ml和(159.02±2.17)pg/ml,较对照组[(4.90±5.64)pg/ml和(101.49±1.70)pg/ml]明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。ELISA与免疫组化检测结果之间无统计学意义的相关性。免疫组化的敏感性较高,阴性预测值较高,ELISA的特异性较高。结论 TRPV1及TGF-β2的ELISA及免疫组化检测对UACS有辅助诊断价值。此两项诊断试验具有一定程度的互补性。

基于TGF-β2/Smad2信号通路探讨长链非编码RNA NEAT1对膀胱癌T24细胞生物学行为的影响

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)NEAT1调控TGF-β2/Smad2信号通路对膀胱癌(BC)T24细胞上皮间质转化(EMT)和生物学行为的影响及潜在分子机制。方法:收集2015年3月~2018年5月于我院接受手术治疗的128例BC患者癌组织及距离癌组织超过2cm处的正常组织,qRT-PCR检测lncRNA NEAT1在BC及相应的正常组织、不同BC细胞系中的表达情况;以T24为空白对照,构建lncRNA NEAT1沉默细胞系T24-siNEAT1及阴性对照T24-NC,分别采用MTT、平板克隆实验及Transwell实验检测lncRNA NEAT1对T24细胞增殖和侵袭能力;免疫荧光实验检测E-cadherin、Vimentin表达;生物信息学网站starBase预测可与lncRNA NEAT1互补结合的miRNA,根据Targetscan网站预测相应miRNA可靶向结合的基因;Western blot检测TGF-β2/Smad2信号通路蛋白和E-cadherin、Vimentin表达情况。结果:qRT-PCR结果显示,BC组织和癌细胞中lncRNA NEAT1表达水平明显高于正常组织和正常细胞(P<0.05);与空白对照组和T24-NC组相比,T24-siNEAT1组细胞OD 492值明显下降,细胞克隆数、通过matrigel基质胶的数量明显减少,E-cadherin表达明显升高、Vimentin明显降低(P<0.05);starBase网站预测结果显示,lncRNA NEAT1可与miR-200a-3p互补结合,Targetscan网站预测分析显示,miR-200a-3p与TGF-β2存在靶向结合位点;qRT-PCR和Western blot结果显示T24-siNEAT1组中miR-200a-3p、TGF-β2及p-Smad2表达明显低于空白对照组与T24-NC阴性对照组(P<0.05);空白对照组和T24-NC组中上述指标的表达量无统计学意义(P>0.05)。结论:lncRNA NEAT1在BC组织及细胞中高表达,高表达lncRNA NEAT1可能通过上调miR-200a-3p水平强化TGF-β2/Smad2信号通路,促进EMT过程,影响BC进展。

鸡TGF-β2基因启动子区多态性分析

为了研究鸡TGF-β2基因启动子区的SNP及其对启动子功能元件的影响,采用PCR-SSCP方法对16个鸡种的TGF-β2启动子区的554~824 bp（即3号染色体的19 433 476~19 433 746 bp）进行基因分型,经测序,共检测到3个有效的SNPs位点,分别是679位点的C/G,699位点的G/A,774位点的T/C。其中大骨鸡和太湖鸡在3个位点均检测到SNP存在,AA鸡在3个位点都没有发现SNPs。分别利用生物信息学软件JASPAR和Meth Primer预测TGF-β2基因启动子区转录因子结合位点和Cp G岛,发现SNP位点可改变转录因子结合位点且位于Cp G岛上,表明TGF-β2启动子区SNPs可能通过不同方式影响基因表达调控。

TGF-β2 mRNA及蛋白在睾丸癌癌组织中的表达及临床意义

目的:探讨转化生长因子β2(TGF-β2)mRNA及蛋白在睾丸癌癌组织中的表达及临床意义。方法:病例选取西安交通大学医学院附属三二○一医院2013年4月至2016年12月期间经手术切除的睾丸癌标本,总共160例,另选取30例同期活检正常睾丸标本作为对照。采用荧光定量法和免疫印迹法检测TGF-β2在睾丸癌组织和正常睾丸组织中的表达水平,并分析TGF-β2在睾丸癌组织中表达的临床意义。结果:睾丸癌组织中TGF-β2 mRNA表达水平和蛋白表达水平高于正常睾丸组织,差异有统计学意义(P<0.01);单因素分析结果显示,TGF-β2蛋白表达水平与患者年龄和肿瘤分化程度无关,差异无统计学意义(P>0.05);与肿瘤大小、临床分期以及淋巴结转移相关,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:睾丸癌组织中TGF-β2表达水平升高,可能与睾丸癌发生发展有关,有助于睾丸癌术前临床分期以及预后评估。

补肾活血方在兔胫骨截骨延长过程中对TGF-β2基因表达的影响

目的探讨补肾活血方在牵张骨区域对转化生长因子-β2(TGF-β2)基因表达的影响。方法取健康雄性新西兰大耳白兔随机分为假手术组、模型组、补肾活血方组,造模完成后,假手术组不予任何药物灌胃;模型组以生理盐水灌胃;补肾活血方组采用中药灌胃。牵张成骨8周后处死,取各组兔右侧胫骨标本,进行HE染色病理组织形态观察、免疫组织化学检测、RT-PCR实验、影像学观察等。结果影像学、病理组织形态观察可见补肾活血方组兔截骨断端有新生骨生成,骨小梁排列、密度及面积较模型组整齐。模型组TGF-β2生长因子几乎没有(-)或仅有微弱表达(+/-),而补肾活血方组在间质细胞、骨细胞、成骨细胞及骨基质中TGF-β2均有表达;补肾活血方组与假手术组TGF-β2基因m RNA表达量明显高于模型组(0.512±0.080、0.546±0.087比0.381±0.093,P<0.05)。结论补肾活血方对兔截骨延长区TGF-β2基因表达具有明显的调控作用,通过对成骨细胞、骨基质等影响,刺激TGF-β2的分泌和合成,有利于新骨的生成。

miRNA-193a-3p靶向TGF-β2基因诱导肝癌细胞凋亡的分子机制研究

目的探讨微小RNA(micro RNA,miRNA)-193a-3p在肝癌组织中的表达及其对肝癌细胞迁移、凋亡的影响和潜在的分子机制。方法利用实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,qRT-PCR)检测miR-193a-3p在肝癌及其癌旁正常组织中的表达;将miR-193a-3p mimic转染肝癌HepG2细胞系(NC为对照组),利用CCK-8(cell counting kit-8)实验、Transwell实验及流式细胞仪评估HepG2细胞的活性、迁移及凋亡情况;利用生物信息学分析、qRT-PCR及双荧光素酶报告实验确证miR-193a-3p对下游靶标转化生长因子(transforming growth factor,TGF)-β2的影响;在miR-193a-3p过表达的HepG2细胞中转染TGF-β2质粒,检测过表达TGF-β2对miR-193a-3p诱导HepG2细胞活性、迁移及凋亡的影响。结果miR-193a-3p在肝癌组织中的表达显著低于正常肝脏组织,差异有统计学意义(P<0.01):与NC组比较,miR-193a-3p组细胞的增殖活性及迁移数量减少,细胞凋亡率显著增加,差异有统计学意义(P<0.05),且以时间依赖性方式诱导HepG2细胞凋亡:miR-193a-3p与靶基因TGF-β2的互补结合序列在进化上高度保守,TGF-β2是miR-193a-3p的下游靶标;与miR-193a-3p+空质粒组比较,miR-193a-3p+TGF-β2组肝癌细胞的增殖活性及迁移数量增多,细胞凋亡率显著减少,差异有统计学意义(P<0.05)。结论miR-193a-3p在肝癌组织中表达减少,miR-193a-3p通过靶向调控TGF-β2基因抑制HepG2细胞的活性和迁移,促进HepG2细胞的凋亡。

胶质瘤治疗的新靶点:TGF-β2

胶质瘤是原发于颅内预后较差的肿瘤,尤其是胶质母细胞瘤,其中位生存期不到1年半。目前针对于胶质瘤的治疗包括手术治疗、放射治疗、化疗,新兴的免疫治疗也逐渐获得临床医生的认可。转化生长因子-β2在胶质瘤的免疫过程中起到了非常重要的作用。本文主要阐述TGF-β2在胶质瘤中的作用及未来治疗策略,从而为治疗胶质瘤提供新的治疗途径。

稽留流产中Furin、TGF-β2、TNF-a因子作用机制的相关研究

目的:探讨Furin、TGF-β2、TNF-a三种因子在稽留流产组织中的表达及临床意义。方法:应用免疫组化法检测30例因稽留流产行人工流产的妊娠组织(实验组,孕周6~10周)和30例正常妊娠行人工流产的妊娠组织(对照组,孕周6~10周)中Furin、TGF-β2、TNF-a三种因子的染色情况,采用H-评分法评价三种因子在不同组织中的表达。结果:1) 两组细胞滋养层细胞中,Furin表达无统计学差异(P 】0.05);而TGF-β2、TNF-a两种因子在稽留流产组织中的表达明显高于正常妊娠组织,差异有统计学意义(P 【0.05)。2) 两组合体细胞滋养层细胞中,Furin、TGF-β2、TNF-a三种因子均高表达,三种因子在稽留流产组织中表达明显高于正常妊娠组织,差异有统计学意义(P 【0.05)。3) 在蜕膜组织中,Furin在稽留流产组织中的表达明显高于正常妊娠组织,差异有统计学意义(P 【0.05);而TGF-β2、TNF-a两种因子在正常妊娠组织中的表达明显高于稽留流产,差异有统计学意义(P 【0.05)。结论:Furin、TGF-β2、TNF-a三种因子在稽留流产组织中不同程度的表达,可能在胚胎植入、启动蜕膜化及抑制胚胎免疫排斥、阻碍流产过程中发挥重要作用。

基于LCS探讨重组人TGF-β2对HTF细胞增殖及转分化的作用

目的基于活细胞工作站(LCS)探讨不同剂量重组人转化生长因子-β(transforming growth factor-beta,TGF-β2)对人Tenon’s囊成纤维细胞(HTF)增殖及转分化的作用及机制,为确定建立青光眼滤过术后HTF纤维化瘢痕细胞模型的最佳实验条件提供理论基础。方法培养原代HTF,分别用不同浓度TGF-β2(0,1,5,10,20,100 ng/ml)培养。CCK-8检测细胞活性。LCS分析不同浓度TGF-β2处理0,12,24,48,72 h时细胞增殖率。流式细胞术碘化丙啶染色检测细胞周期。Western blot检测细胞增殖指标增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白,细胞转分化指标α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、纤连蛋白(FN)蛋白的表达。结果1~100 ng/ml的TGF-β2对HTF无明显细胞毒性作用。相对于TGF-β2干预0,12,24,72 h时,TGF-β2干预48 h时促HTF增殖作用最为显著(P<0.05),因此采用TGF-β2干预HTF 48 h进行后续研究。与0 ng/ml的TGF-β2相比,5,10,20 ng/ml的TGF-β2干预促进HTF细胞转分化指标α-SMA、FN的表达(P<0.05)。与0 ng/ml的TGF-β2比较,5,10 ng/ml的TGF-β2干预促进HTF增殖(P<0.05),提高HTF增殖指标PCNA的表达(P<0.05),降低G0/G1期细胞的比例(P<0.05),增加S期细胞的比例(P<0.05)。结论LCS系统是研究TGF-β2对HTF细胞作用的有效方法。5~10 ng/ml的TGF-β2能有效促进HTF细胞转分化,通过促进细胞进入S期增加增殖期细胞的比例,进而促进HTF细胞增殖。推荐5~10 ng/ml的TGF-β2干预48 h建立HTF纤维化瘢痕细胞模型。

TGF-β2、TGFβRⅡ在妊娠期糖尿病患者中的表达及意义

目的研究并分析在临床诊治妊娠期糖尿病患者的过程中,检测TGF-β2、TGFβRⅡ的表达水平,评价其诊断价值。方法选择2016年4月—2017年4月于该中心同级别的人民医院收治的妊娠期糖尿病患者为研究对象,随机抽取128例作为该研究对象,分别检测TGF-β2、TGFβRⅡ两种指标的表达水平并评价诊断意义。结果通过Real-time PCR和WB检测两组孕妇的TGF-β2、TGFβRⅡ的m RNA和蛋白表达水平发现,其在试验组中的表达水平显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论临床诊治妊娠期糖尿病患者的过程中,TGF-β2和TGFβRⅡ细胞因子的表达水平与病情的进展密切相关,可作为其早期诊断的重要辅助指标之一,应广泛推广。

幼年牦牛不同部位皮肤毛囊的组织学结构及TGF-β2与HIF-1α差异性表达分析

旨在探究幼年牦牛皮肤毛囊的组织学结构和TGF-β2及HIF-1α对幼年牦牛皮肤毛囊生长发育的影响,选取10头健康幼年牦牛,采集其颈部、背部、胸部、腹部、小腿部、腋下及阴囊皮肤组织,制作石蜡切片后,采用HE和Sacpic染色,对各部位皮肤组织中毛囊进行观察和计数,并筛选出多毛及少毛部位。利用qRT-PCR、Western blot及免疫组织化学法对TGF-β2和HIF-1α在幼年牦牛多毛皮肤和少毛皮肤进行定位与定量的初步研究。结果表明,幼年牦牛皮肤的毛囊分布于真皮层,常与汗腺及皮脂腺伴行,毛髓质及内根鞘结构不完整。Sacpic染色可见毛囊内根鞘为红色,外根鞘为苍绿色,结缔组织鞘为蓝绿色。腹部皮肤的毛囊数量最多[(2085±15)个·cm-2],阴囊数量最少[(158±15)个·cm-2]。免疫组织化学结果显示,TGF-β2及HIF-1α主要表达在表皮层、毛囊外根鞘、皮脂腺及汗腺。TGF-β2在阴囊和腋下的mRNA转录水平和蛋白质表达水平均显著高于腹部和背部。HIF-1α在腹部的mRNA转录水平和蛋白质表达水平均显著高于其他三个部位。幼年牦牛的毛囊处于退行期,在腹部数量最多,背部次之,阴囊最少;TGF-β2和HIF-1α在不同部位皮肤中的表达水平存在显著差异,为进一步研究TGF-β2和HIF-1α对牦牛皮肤毛囊生长发育的影响提供理论依据。