结直肠癌酸性环境中Smad2/3-TGF-beta1调控轴抑制NK细胞杀瘤活性的机制研究

目的探究肿瘤酸性微环境下Smad2/3磷酸化激活调控结直肠癌细胞TGF-beta1分泌及对NK细胞杀瘤毒性影响。方法通过酸性环境培养结肠癌肿瘤细胞,蛋白质免疫印迹法检测磷酸化Smad2/3的含量,ELISA法检测肿瘤细胞上清中TGFbeta1的含量,并通过LDH释放的细胞毒性测定酸性环境下的肿瘤细胞对NK细胞杀瘤毒性的抑制作用。检测磷酸化Smad3入核的含量和TGF-beta启动子结合区域。最后分析结直肠癌患者的TGF-beta1的表达含量和生存影响。结果在酸性肿瘤微环境下结直肠癌细胞内Smad2/3磷酸化增强,入核结合在TGF-beta1的启动子区域加强TGF-beta1的转录和分泌。TGF-beta1的分泌增多抑制NK细胞的杀瘤活性,从而达到免疫逃逸的作用。

黄芪对TGF-β1致人腹膜间皮细胞分泌细胞外基质的影响

目的 :探讨黄芪对腹膜纤维化的作用及可能机制。方法 :人腹膜间皮细胞 (HPMC)作体外培养 ,在第三代 ,将细胞转板至细胞融合后 ,将其分为对照组 (F12 ) ,TGF β1组 (F12 +TGF β15ng/ml) ,TGF β1加黄芪 1组(F12加TGF β1加黄芪 ,黄芪终浓度为 10 0 μg/ml,TGF β1加黄芪 2组 (F12加TGF β1加黄芪 ,黄芪终浓度为 1mg/ml) ,分别在 2 4,48h采用ELISA法检测上清液中纤维连接蛋白 (FN)和纤溶酶原抑制剂 (PAI 1)的含量 ;FNmRNA ,PAI 1mRNA和碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)mRNA的表达采用半定量逆转录多聚酶链反应 (RT PCR)检测。结果 :①HPMC表达FN ,PAI 1和bFGF ;②HPMC在 5ng/mlTGF β1刺激下分泌FN及PAI 1明显的增加 ,与对照组比较差异有显著性意义 (P <0 .0 5 ) ;③HPMC在TGF β1和不同浓度的黄芪刺激后 ,在 2 4h内可使FN及PAI 1减少 ,尤其是PAI 1与TGF β1组比差异有显著性意义 (P <0 .0 5 )。④HPMC经TGF β1作用 12h后 ,FNmRNA ,PAI 1mRNA和bFGFmRNA半定量结果与对照组相比 ,其表达量分别上调 18.5 4%,8.6 %和 6 6 .9%,HPMC经 10 0μg/ml和 1mg/ml黄芪作用 12h后FN ,PAI 1和bFGFmRNA的表达与TGF β1组比较均下调 ,其结果分别为5 .3 %,1.3%,3 .8%和 5 .4%,74.3 %,2 3 .7%。结论 :TGF β1可促进HPMC合成?

Treg细胞和Th17细胞在鼻咽癌中相关性的研究

目的:检测鼻咽癌患者外周血中Treg细胞与Th17细胞的比例以及相关细胞因子如IL-6、TGF-β1的变化。方法:选取我院鼻咽癌患者50例,另选取健康志愿者50例,鼻咽炎患者50例作为对照。采用流式细胞术检测外周血中Th17细胞和Treg细胞百分率,ELISA法检测血清中细胞因子TGF-β1、IL-6的水平,分析其相关性。结果:鼻咽癌外周血中Treg和Th17细胞占CD4+T细胞的比例均升高,与鼻咽炎组、正常对照组比较,均有显著性差异(P<0.05);且Treg细胞与Th17细胞呈正相关(P<0.05);鼻咽癌外周血中TGF-β1、IL-6的水平均明显高于鼻咽炎组、正常对照组,均有显著性差异(P<0.05);鼻咽癌患者外周血Th17细胞、Treg细胞分别与血清中IL-6、TGF-β1水平呈正相关(P<0.05)。结论:鼻咽癌患者外周血中Treg、Th17细胞比例升高,且两者呈正相关;鼻咽癌患者患者血清中TGF-β1、IL-6水平升高,可能影响Treg与Th17细胞的平衡。

豹皮樟总黄酮调控瘦素、TGF-β1对肝纤维化大鼠的预防作用研究

目的研究豹皮樟总黄酮(TFLC)调控瘦素(leptin)和转化生长因子-β1(TGF-β1)对肝纤维化大鼠的预防作用。方法采用CCl4诱导大鼠肝纤维化模型,TFLC灌胃给药第12周末,检测ALT、AST及HA、LN、PⅢNP、CⅣ含量;检测Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)、瘦素、TGF-β1的含量;检测Hyp及组织病理变化;检测瘦素受体(OB-Rb)、TGFβ1Ⅰ型受体(TGFβR1)、Smad3 mRNA及蛋白表达。结果 TFLC(200、400 g.L-1)能明显降低肝纤维化大鼠肝纤维化指标及血清Ⅰ型胶原、瘦素、TGF-β1水平;降低Ob-Rb、TGFβR1、Smad3的mRNA及蛋白表达。结论 TFLC能有效预防CCl4诱导的大鼠肝纤维化,可能与下调肝内瘦素及其受体,抑制TGF-β1/Smad通路有关。

金三莪对实验性肝纤维化大鼠TGF-β_1、Smad3、Smad7及CTGF表达的影响

[目的]观察中药金三莪抗四氯化碳诱导大鼠肝纤维化的疗效及作用机制。[方法]将50只Wistar大鼠分为正常对照组、模型对照组、中药治疗1组及2组 ,于造模第1周及第4周开始用金三莪治疗。免疫组化技术检测转化生长因子β1(TGF - β1)、Smad3、Smad7及结缔组织生长因子(CTGF)在肝内表达及其在细胞中的定位 ,肝组织电镜检查 ,放射免疫法检测血清透明质酸 (HA)含量。[结果]经中药金三莪治疗后肝纤维化大鼠肝组织内TGF - β1、Smad3及CTGF表达降低 ,而Smad7的表达增加 ,TGF - β1、Smad3及CTGF的免疫阳性反应信号主要位于纤维间隔中的细胞浆 ,Smad7则主要在肝细胞浆表达。电镜检查中药治疗组大鼠肝细胞结构趋于正常 ,纤维组织变薄。模型组血清HA含量明显高于正常组 (P<0.01) ,中药治疗1、2组血清HA含量明显低于模型组 (P<0.05)。[结论]中药金三莪能有效地减轻四氯化碳诱导肝纤维化大鼠的损伤及纤维化程度 ,其机制可能是抑制肝内TGF - β1。

四神丸对脾肾阳虚型溃疡性结肠炎大鼠血清TGFβ1、IL-6及结肠组织TLR-4 mRNA表达的影响

目的:观察四神丸对脾肾阳虚型溃疡性结肠炎大鼠中血清转化生长因子β1(TGFβ1)、白介素6(IL-6)及结肠组织中Toll样受体4(TLR-4)mRNA含量的变化,探讨四神丸对脾肾阳虚型溃疡性结肠炎的作用机制。方法:采用番泻叶灌胃+氢化可的松注射液腹腔注射+2、4、6-三硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇法灌肠建立脾肾阳虚型溃疡性结肠炎大鼠模型。将60只wistar大鼠随机分为空白组、模型组、四神丸组及柳氮磺嘧啶(SASP)组,经药物干预后分别采用酶联免疫法检测各组大鼠血清中的TGFβ1、IL-6含量及半定量反转录-聚合酶链反应检测各组大鼠结肠组织中的TLR-4 mRNA含量。结果:与空白组比较,模型组大鼠中TGFβ1含量降低(P<0.05),IL-6含量升高(P<0.05);与模型组比较,各治疗组大鼠中TGFβ1含量升高(P<0.05),IL-6含量降低(P<0.05)。与空白组比较,模型组大鼠结肠组织TLR-4 mRNA表达显著增强(P<0.05);各治疗组TLR-4 mRNA表达减弱(P<0.05)。结论:四神丸能够通过下调IL-6和升高TGFβ1的表达,降低结肠组织中TLR-4 mRNA的含量,抑制炎症反应,调节肠上皮免疫系统,恢复肠粘膜微环境的免疫稳态,达到治疗UC的目的。

不同年龄增生性瘢痕转化生长因子β_1表达的检测及其意义

目的通过观察不同年龄增生性瘢痕与正常皮肤组织中转化生长因子β1(TGF-β1)的表达,初步探讨TGF-β1的表达与增生性瘢痕形成的年龄因素的关系。方法以增生性瘢痕为研究对象,正常皮肤组织为对照,采用SABC免疫组化方法观察1～19岁、20～50岁增生性瘢痕与各年龄组正常皮肤的细胞因子TGF-β1的表达。结果增生性瘢痕组织的TGF-β1含量显著大于正常皮肤。1～19岁增生性瘢痕组TGF-β1表达较20～50岁增生性瘢痕组的增高差异有具显著性意义(P<0.01)。胎儿组皮肤TGF-β1表达低于正常皮肤(P<0.01)。结论TGF-β1表达增高是增生性瘢痕形成的原因之一。

KDM2A在博来霉素诱导肺纤维化小鼠中的表达

目的 探讨KDM2A在肺纤维化进展中的表达变化,以期为寻求肺纤维化的发病机制提供具有潜力的新方向。方法 将8~10周的C57BL/6J雄性小鼠随机分配为正常组、14 d模型组与21 d模型组。取模型组小鼠麻醉后,气道滴定博来霉素诱导建立肺纤维化模型。分别于造模后第14天、第21天取材14 d模型组与21 d模型组小鼠肺组织,最后取材正常组小鼠肺组织。通过HE染色,Masson染色来评估小鼠肺泡炎及纤维化程度。免疫组化分析3组肺组织α-SMA、FN、TGF-β1及KDM2A蛋白表达情况并进行免疫组化评分。Western Blot法检测α-SMA、FN、TGF-β1及KDM2A蛋白表达量。结果 与正常组比较,14 d模型组肺泡炎评分明显增加(P<0.001);21 d模型组较14 d模型组比较,肺泡炎评分轻度增加,但差异无统计学意义(P>0.05)。与正常组比较,14 d模型组纤维化评分明显增加(P<0.01);21 d模型组较14 d模型组比较,纤维化评分明显增加(P<0.01)。免疫组织化学染色结果显示:与正常组比较,14 d模型组α-SMA(P<0.01)、FN(P<0.01)、TGF-β1(P<0.01)、KDM2A(P<0.01)蛋白免疫组化评分明显升高;21 d模型组较14 d模型组比较,α-SMA(P<0.01)、FN(P<0.05)、TGF-β1(P<0.01)、KDM2A(P<0.01)蛋白免疫组化评分升高。Western Blot结果显示:与正常组比较,14 d模型组α-SMA(P<0.01)、FN(P<0.01)、TGF-β1(P<0.01)、KDM2A(P<0.01)蛋白表达量明显升高;21 d模型组较14 d模型组相比,α-SMA(P<0.01)、FN(P<0.01)、TGF-β1(P<0.01)、KDM2A(P<0.01)蛋白表达量升高。结论 KDM2A在BLM诱导的肺纤维化小鼠肺组织中表达增强,其可能通过调控TGF-β1的表达来参与肺纤维化的形成。

上皮性卵巢癌组织中TGF-β1和MDR1表达与患者临床病理特征的关系

目的 探讨上皮性卵巢癌组织转化生长因子-β1(TGF-β1)及多药耐药基因1(MDR1)蛋白表达水平与患者临床病理特征的关系。方法 140例卵巢组织标本分为上皮性卵巢癌组(n=56)、卵巢良性肿瘤组(n=50)及正常卵巢组(n=34),采用免疫组织化学En Vision法检测3组卵巢组织中TGF-β1、MDR1的表达,分析上皮性卵巢癌组织中TGF-β1及MDR1表达与患者临床病理特征的关系,采用Speaman相关性分析上皮性卵巢癌组织中TGF-β1与MDR1表达的相关性。结果 上皮性卵巢癌组TGF-β1及MDR1阳性表达率明显高于卵巢良性肿瘤组及正常卵巢组,差异有统计学意义(P<0.05);卵巢良性肿瘤组TGF-β1及MDR1阳性表达率均高于正常卵巢组,但MDR1差异有统计学意义(P<0.05)、而TGF-β1差异无统计学意义(P>0.05);上皮性卵巢癌病理分级为Ⅲ/Ⅳ级患者的TGF-β1、MDR1阳性表达率均高于Ⅰ/Ⅱ级,有淋巴结转移患者的TGF-β1、MDR1阳性表达率高于无淋巴结转移患者,差异有统计学意义(P<0.05);Spearman相关分析显示上皮性卵巢癌组织TGF-β1与MDR1表达呈正相关(r=0.608,P<0.001)。结论 TGF-β1及MDR1在上皮性卵巢癌组织呈高表达,且患者的病理分级、淋巴结转移相关。

重组人TGF-β1对TGF-β1基因启动活性的影响

目的:探讨TGF β1对人TGF β1基因自身启动子活性的影响。方法:以人全血基因组DNA为模板,PCR扩增获得TGF β1基因转录起始位点上游5′端- 132 8～+812bp和+2 2 7～+812bp的片段,以此作为启动子与含氯霉素乙酰基转移酶(CAT)报告基因而不含启动子的pCAT enhancer质粒构建成重组质粒,并将其转染至大鼠星状细胞株nFSC中,细胞在DMEM培养基中进行培养,用不同浓度的TGF β1进行干涉,测定并比较细胞的CAT表达水平。结果:不同浓度的TGF β1对大鼠的肝脏星状细胞的增殖具有抑制作用,而且这种抑制作用在实验用的浓度范围内具有剂量依赖关系;浓度为2 5ng/mlTGF β1可以使转染phTGF0 5 85、phTGF1 12 0、phTGF1 4 2 3、phTGF1 6 80、phTGF2 14 0质粒的大鼠肝星状细胞的CAT活性分别增加2～5倍。结论:TGF β1在大鼠nFSC细胞中对TGF β1启动子活性具有自身促进作用,为进一步研究TGF β1的调节机制提供了依据。

术前介入化疗后直肠癌细胞凋亡和增殖改变与转化生长因子β1表达的相关性研究

目的探讨转化生长因子β1(TGFβ1)在直肠癌术前介入化疗后与肿瘤细胞凋亡和增殖改变的关系。方法32例直肠癌患者术前经供血动脉灌注5氟脲嘧啶、丝裂霉素和表阿霉素,分别于化疗前、化疗后1、23天和7～10天取直肠癌组织,免疫组织化学法检测TGFβ1和增殖细胞核抗原(PCNA)的表达,TUNEL法检测凋亡细胞。结果化疗后TGFβ1灰度值持续升高,化疗后7～10天升至27.11,明显高于化疗前(13.34);细胞增殖指数(PI)在化疗后第2天明显降低(38.88%),然后逐渐升高,化疗后7～10天较化疗前增高(62.70%),化疗后第1天凋亡指数(AI)显著升高(20.07‰),随后逐渐缓慢下降,但化疗后7～10天仍高于化疗前(11.79‰)。TGFβ1灰度值与PI值呈明显正相关(γ=0.54,P<0.01),而与AI值无关(γ=0.02,P>0.05)。结论介入化疗后7～10天内药物能持续诱导直肠癌细胞凋亡,但随着时间推移,其诱导作用减弱;而癌细胞增殖在化疗后2天内暂时受抑制,然后逐渐变活跃。TGFβ1参与促进化疗后直肠癌细胞增殖,而与化疗诱导直肠癌细胞凋亡无关。

肾移植术后尿TGF-β1与移植肾功能关系的临床研究

目的 探讨肾移植受者早期尿转化生长因子beta1(TGF beta1)与远期肾功能的关系。方法 1999年8月至2 0 0 1年6月期间对肾移植术后满1年、肾功能正常的患者检测血、尿TGF beta1浓度,并对上述患者进行3年以上的前瞻性观察,对观察期内肾功不全的患者,活检明确是否为慢性移植肾肾病(CAN)。共有13 4例患者完成了全程随访,其中有16例诊断为CAN的患者,比较CAN患者与非CAN患者在肾移植1年时的血、尿TGF beta1等有无差异;分析术后1年时尿TGF beta1浓度与远期肾功能的关系。结果 上述13 4例患者,术后1年时尿TGF beta1浓度为:(13 5 6～44 2 3 )pg mg·Cr ,其中,尿TGF beta1浓度高的患者,在3年观察期内Ccr减损量明显大于尿TGF beta1浓度低的患者(P <0 0 1) ;CAN患者在肾移植1年时,尿TGF beta1浓度(3 98±3 3 5 )pg mg·Cr明显高于非CAN患者(182 7±40 2 )pg mg·Cr(P <0 0 1) ;非CAN与CAN患者,血TGF beta1浓度分别为(3 2 1±4 7)和(3 1 9±4 8)ng ml,两者比较差异不显著(P >0 0 5 )。结论 TGF beta1可能在CAN的发生过程中起着重要的作用,CAN患者在肾功能异常前尿TGF beta1已显著升高,肾移植后早期检测尿TGF beta1对远期肾功能具有预测作用。

原发性高血压肾病患者血清TGF-β_1、RBP和Cys-C检测的临床意义

目的:探讨了原发性高血压肾病患者血清转化生长因子-β1(TGF-β1)、视黄醇结合蛋白(RBP)和胱抑素C(Cys-C)水平的变化及临床意义。方法:应用酶联法和生化法对35例原发性高血压肾病患者进行了血清TGF-β1、RBP和Cys-C检测,并与35名正常人作比较。结果:原发性高血压肾病患者血清TGF-β1、RBP和Cys-C水平均非常显著地高于正常人组(P<0.01),血清TGF-β1水平与RBP和Cys-C水平呈正相关(r=0.5948、0.6014,P<0.01)。结论:检测原发性高血压肾病患者血清TGF-β1、RBP和Cys-C水平的变化对了解病情、探讨其发展机理、预防和指导用药均有重要的临床价值。

特发性肺纤维化患者病情程度与血清TGF-β1、STAT1水平的相关性

目的:分析特发性肺纤维化(IPF)患者病情程度与血清转化生长因子-β1(TGF-β1)及转录活化因子1(STAT1)的相关性。方法:120例IPF患者作为观察组,50例同期健康体检者作为对照组,观察组于入院时、对照组于体检当日检测血清TGF-β1、STAT1水平,次日检测动脉血氧分压(PaO 2)、动脉血二氧化碳分压(PaCO 2)、动脉血氧饱和度(SaO 2)水平及用力肺活量(FVC)、第一秒用力呼气流量(FEV1);采用Pearson法分析血清TGF-β1及STAT1水平与IPF患者病情严重程度的相关性。结果:与对照组比较,观察组患者血清TGF-β1水平显著升高,血清STAT1水平、PaO 2、PaCO 2、SaO 2、FVC及FEV1水平显著降低,差异有统计学意义(P<0.05);Pearson相关分析结果显示,IPF患者血清TGF-β1水平与其PaO 2及SaO 2水平均呈负相关(r=-0.396、P<0.05,r=-0.457、P<0.001),血清STAT1水平与PaCO 2水平呈负相关(r=-0.411,P<0.001);IPF患者血清TGF-β1与其FVC水平呈正相关(r=0.573,P<0.001),与FEV1水平呈负相关(r=-0.462,P<0.001);血清STAT1与FVC呈负相关(r=-0.364,P<0.05)。结论:IPF患者血清TGF-β1及STAT1水平异常,且与患者血气指标及肺功能间均存在一定相关性。

银屑病患者转化生长因子-β1检测及其临床意义

目的检测银屑病关节炎(PsA)患者血清中TGF-β1的表达改变,探讨其在银屑病关节炎发病中的作用。方法收集该院2010年1月～2011年6月皮肤科住院的PsA患者82例,无关节炎的寻常性银屑病患者60例,该院体检中心健康体检者30例。ELISA检测TGF-β1的表达水平;FITC-CD4、PE-CD25双标记流式细胞仪检测Treg细胞的表达百分比。结果正常健康对照(A)组、无关节炎的寻常性银屑病(B)组和银屑病关节炎(C)组受检者血清TGF-β1的表达水平分别为(0.684±0.104)、(0.545±0.079)和(0.344±0.058)ng/mL,各组之间差异有显著性(F=7.69,P<0.05),银屑病关节炎患者TGF-β1的表达量出现显著性的减低。A、B和C组受检者血液Treg细胞的比率分别为(12.64±2.33)%、(10.58±1.24)%和(4.92±1.04)%,各组之间差异有显著性(F=8.35,P<0.05),银屑病关节炎患者Treg细胞的表达百分比也出现了显著性的减低。结论Treg细胞比例的减少所导致的TGF-β1表达下调可能是银屑病关节炎治病的主要原因,提高患者外周血TGF-β1的表达和Treg细胞的比例,可能成为银屑病关节炎治疗的新思路。

初次与再次动静脉内瘘术血液透析患者血管TGF-β1Smad3的表达及临床意义

目的比较维持性血液透析初次与再次动静脉内瘘术患者血管TGF-β1/Smad3的表达差异,并探讨其临床意义。方法收集我院2017年6月~2019年6月期间肾内科行初次(A组)与再次(B组)动静脉内瘘术患者拟废弃的静脉血管标本及相关临床参数,随访6个月,记录两组患者动静脉内瘘结局(成熟或未成熟),据此分为瘘成熟组及瘘未成熟组。血管标本行HE染色及免疫组化TGF-β1、Smad3染色。比较AB两组血管TGF-β1/Smad3表达水平及相关临床参数,并进一步分析瘘成熟组与未成熟组相关参数,探讨影响内瘘成熟的危险因素。结果纳入A组48例,B组46例,与A组相比,B组女性及糖尿病比例明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);B组见显著内膜增生,平滑肌细胞增生,血管腔明显狭窄;B组增生的内膜见TGF-β1及Smad3表达显著增强。与瘘成熟组相比,瘘未成熟组女性及糖尿病比例更高,桡动脉及头静脉内径更细,内膜TGF-β1及Smad3表达显著增强,差异具统计学意义(P<0.05)。多因素相关性分析显示:经多因素校正后,血管内膜TGF-β1及Smad3表达增加与瘘未成熟显著正相关(P<0.05)。结论再次内瘘组及术后瘘未成熟组静脉内膜TGF-β1及Smad3表达明显增强,且经多因素校正后,血管内膜TGF-β1及Smad3表达增加与瘘未成熟显著正相关,提示动静脉内瘘血管内膜TGF-β1/Smad3信号通路的过度活化不利于内瘘成熟;女性、糖尿病、桡动脉及头静脉内径细是影响血透患者瘘成熟的危险因素。

游泳运动通过TGF-β1/Smad3通路改善自发性高血压大鼠心肌间质纤维化研究

目的:观察游泳运动对自发性高血压大鼠心肌间质形态学及TGF-β1/Smad3信号通路的影响。方法:选取8只SPF级雄性WKY大鼠为正常对照组(C组); 20只SPF级自发性高血压大鼠随机分为模型组(H组)和SHR+运动组(EH组),每组均10只,各组大鼠给予普通饲料喂养。运动组大鼠进行为期12周不负重游泳训练,每周训练6天,休息1天。第1周为适应性训练,从第2周开始维持60 min/d的运动时间至12周结束。干预周期结束后检测检测各组大鼠CVF%、col I和col III; QRT-PCR检测心肌Smad3,放免法检测Ang II,Western-blot法检测NOX2、TGF-β1、HSP90蛋白表达。结果:(1) C组比较,H组大鼠心肌CVF%、col I、col III、血浆Ang II、心肌Ang II、心肌NOX2、TGF-β1、Smad3mRNA、HSP90表达显著性增加(P <0. 05或P <0. 01);与H组比较,EH组大鼠除了心肌HSP90蛋白表达显著性增加外(P <0. 05),其余指标均显著性降低(P <0. 05或P <0. 01)。结论:游泳运动能较好降低SHR大鼠心肌col I和col III蛋白表达水平,改善心肌间质纤维化,主要通过降低Ang II介导NOX2表达,抑制下游TGF-β1/Smad3通路激活,其中HSP90作为其上游因子,在其中可能起着重要的调节作用。

非小细胞肺癌肿瘤微环境中IFN-γ、TGF-β1、IDO表达变化及其相关性

目的:探讨不同分期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)肿瘤微环境中IFN-γ、TGF-β1和吲哚胺-2,3-双加氧酶(indoleamine-2,3-dioxygenase,IDO)表达的变化及IFN-γ、TGF-β1表达与IDO表达的相关性。方法:选取2013年1月至2015年6月间昆明医科大学第一附属医院胸外科手术切除或纤维支气管镜取得的107例NSCLC患者肿瘤组织(实验组)和19例肺部外伤患者的正常肺组织(对照组)进入研究,实验组按2010年AJCC第七版肺癌分期标准分为4组:1组,Ⅰ期患者28例;2组,Ⅱ期患者26例;3组,Ⅲ期患者28例;4组,Ⅳ期患者25例。ELISA法检测组织中IFN-γ、TGF-β1、IDO蛋白浓度;免疫组化染色检测组织中IDO表达水平;分析IFN-γ、TGF-β1浓度与IDO浓度的相关性,分析肺癌组织中IDO、IFN-γ和TGF-β1表达间的相关性。结果:与对照组相比,Ⅰ期NSCLC组织中IFN-γ的浓度显著升高(P<0.05),而Ⅲ、Ⅳ期组织中IFN-γ浓度显著降低(P<0.05),并且Ⅳ期浓度显著低于Ⅲ期(P<0.05);IDO浓度变化与TGF-β1相似,在Ⅰ期NSCLC肿瘤组织中的浓度与正常肺组织无显著差异(P>0.05),但在Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期肿瘤组织中浓度显著高于正常肺组织(P<0.05),且随分期升高而升高。Pearson相关分析显示,正常组织、Ⅰ期NSCLC肿瘤组织中IDO的浓度与IFN-γ浓度呈正相关(r=0.969,P<0.01;r=0.853,P<0.01),与TGF-β1无相关性。但Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期肿瘤组织中IDO的浓度与TGF-β1浓度呈正相关(r=0.678,P<0.01;r=0.810,P<0.01;r=0.630,P=0.01),与IFN-γ无相关性。结论:早期NSCLC患者免疫微环境中IFN-γ增高,但随着疾病进展,患者免疫力降低,IFN-γ表达减少,IDO、TGF-β1表达增加,早期IDO表达可能与IFN-γ有关,而晚期则可能与TGF-β1有关。

有柄石韦对小鼠皮肤伤口愈合及转化生长因子-β1水平的影响

目的:观察有柄石韦对小鼠皮肤伤口愈合的作用及转化生长因子-β1(TGF-β1)水平的影响。方法:90只昆明小鼠均分为空白组、有柄石韦组及云南白药组,所有小鼠均于背中线做1 cm×1 cm的全层皮肤切除伤模型;除空白组外,其余2组均连续5 d局部给予相应药物,空白组给予生理盐水,每组随机选出10只小鼠测算伤口缩小比例,每组剩余的20只分别于给药完后第3、7、14及18天分4批次处死,采用HE染色观察创缘组织愈合情况,采用蛋白免疫印迹(Western blot)方法检测创缘组织的TGF-β1表达水平。结果:与空白组小鼠伤口比较,云南白药组及有柄石韦组在第3天、第7天、第14天及第18天时的伤口缩小比例较大;而与有柄石韦组比较,云南白药组在此时点的伤口缩小比例更高,差异有统计学意义(P<0.05);HE染色结果显示,有柄石韦组与云南白药组小鼠创缘组织肉芽组织较空白组的肉芽组织生长紧凑、无水肿现象,上皮化程度较高;Western blot结果显示,有柄石韦组和云南白药组创缘组织的TGF-β1表达量在第3及第7天持续增高、于第14天开始下降,空白组第3天含量最高、之后持续下降。结论:有柄石韦对皮肤伤口有一定促愈作用,其机制可能是刺激TGF-β1表达、加速伤口愈合。

转化生长因子β_1和碱性成纤维细胞生长因子在肾小球纤维化病变中的表达

目的 :探讨转化生长因子 β1(TransformingGrowthFactorbeta1,TGF β1)和碱性成纤维细胞生长因子(basicFibroblastGrowthFactor,bFGF)在肾小球纤维化疾病中的表达部位及其作用。方法 :运用Masson′s三色染色法将 5 2例肾脏疾病标本按纤维化程度的不同分组 ,应用免疫组化法检测两种生长因子在各组中的表达情况。结果 :肾小球发生纤维化的过程中 ,TGF β1和bFGF在系膜细胞、肾小囊壁层上皮细胞、肾小管上皮细胞等内出现了增强表达且随着纤维化程度的加重 ,两者的表达水平也是逐渐增高的。结论 :TGF β1和bFGF参与了肾小球纤维化的过程且其表达水平与肾小球纤维化严重程度呈正比。