探讨HBV X、TGF-alpha,c-myc及beta-catenin基因与高发区肝癌的相关性

目的 研究HBVX基因、TGF alhpa、c myc、beta catenin等癌变相关基因及 2 49密码子突变的p5 3蛋白在高发区肝细胞癌癌变发生及其恶性表型维持所发挥的作用。方法 以肝癌高发区启东的肝癌细胞株 770 1和 770 3标本作为研究对象 ,以PCR及DNA测序分析方法确定HBVX基因在细胞DNA水平的整合。以RT PCR及Western blot检测HBVX基因的转录与表达。用PCR RFLP方法确定 p5 3基因 2 49密码子的错义突变。应用免疫组织化学法分析TGF alhpa ,c myc ,beta catenin的表达。结果 2株细胞在DNA水平都存在HBVX基因片断的整合 ,但未见完整的转录和蛋白水平表达。序列分析显示 2株细胞的HBVX基因的序列各有特异性 ,并存在 13 0、13 1密码子的热点突变。PCR RFLP分析说明 2个细胞株中p5 3基因 2 49密码子均属野生型。免疫组化显示 2株细胞中TGF alpha ,c myc和beta catenin蛋白均有显著的积累。 结论 本实验的结果显示HBVX基因对这 2株细胞恶性表型的维持并不存在必然的关联 ,而是 1种HBV感染的遗传标志。未见HBVX基因蛋白表达 ,可能由于X基因 3′端缺失变异所致。免疫组化的结果显示TGF alpha ,c myc和beta catenin蛋白的显著积累 ,说明多种癌基因的相互协同 ,可能与肝癌的发生。

三七总皂苷提取物Rg1对CsA慢性肾毒性大鼠肾组织TGF-β1及α-SMA表达的影响

目的:探讨人参皂苷Rg1对环孢素A(Cs A)引起的肾间质纤维化的保护作用。方法:雄性SD大鼠24只,随机分为正常组、模型组、G-Rg1干预组,采用低盐饮食及Cs A灌胃的方法建立Cs A慢性肾纤维化的模型。观察Rg1对大鼠尿量、肾功能、肾脏病理及纤维化指标TGF-β1、α-SMA表达的影响。结果:Rg1能减轻肾组织的病理改变,并下调TGF-β1、α-SMA在肾组织的表达。结论:Rg1通过抑制TGF-β1及α-SMA的表达而发挥保护肾脏的作用。

消化性溃疡患者治疗前后血清Gas、TGF-α和IL-8检测的临床意义

目的:探讨了消化性溃疡患者治疗前后血清胃泌素(Gas)、转化生长因子-α(TGF-α)和IL-8水平的变化及意义。方法:应用放射免疫分析和ELISA对56例消化性溃疡患者进行了治疗前后血清Gas、TGF-α和IL-8检测,并与35名正常健康人作比较。结果:消化性溃疡患者在治疗前血清Gas、IL-8水平均非常显著地高于正常人水平(P<0.01)而TGF-α水平则低于正常人(P<0.01)。治疗三个月后则与正常人比较无显著性差异(P>0.05)。结论:检测消化性溃疡患者血清中Gas、TGF-α和IL-8水平的变化可作为病情及预后评估的重要指标。

RhoA／ROKα反义寡核苷酸抑制TGF-β1诱导的血管外膜成纤维细胞α-SM-actin表达

目的α-平滑肌-肌动蛋白(a-SM-actin)的表达是血管外膜成纤维细胞/肌成纤维细胞表型转化的分子标记。本研究观察阻断RhoA-ROKα信号转导通路对于转化生长因子β1(transfor- ming growth factorβ1,TGF-β1)诱导的血管外膜成纤维细胞α-SM-肌动蛋白(actin)表达的影响,以揭示RhoA-ROKα信号通路在血管外膜成纤维细胞表型转化为肌成纤维细胞过程中的作用。方法使用贴壁法体外培养大鼠胸主动脉外膜成纤维细胞；用Western blot技术测定RhoA和ROKα在血管外膜成纤维细胞表型转化为肌成纤维细胞过程中的表达。结果RhoA-ROKα在血管外膜成纤维细胞表达,TGF-β1可以诱导RhoA表达上调。用反义寡核苷酸技术抑制RhoA或ROKα的表达后能够抑制α-SM-actin的表达。结论RhoA-ROKα信号转导通路参与了TGF-β1诱导的血管外膜成纤维细胞表型转化为肌成纤维细胞的过程。

43例广东汉族单纯性腭裂患者转化生长因子α基因多态性的研究

目的探讨广东汉族单纯性腭裂患者转化生长因子α(TGF-α)基因多态性。方法应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性核苷酸分型技术,以TaqⅠ限制性内切酶消化PCR扩增产物,对43例单纯性腭裂(CPO)患者、68例正常人的TGF-α/TaqⅠ等位基因进行分析。结果单纯性腭裂患者的C2等位基因频率比正常对照组明显增高,差异有统计学意义(P<0.05)。单纯性完全腭裂患者的TGF-α/TaqⅠ基因型与单纯性部分腭裂患者差异无统计学意义(P>0.05)。结论TGF-α基因多态性与广东汉族人的单纯性腭裂的发生有关。

转化生长因子-α mRNA表达与胃癌发生的关系及其临床意义

目的 探讨胃癌组织、癌旁组织及胃溃疡组织中转化生长因子 α(TGF α)mRNA表达水平变化及其临床意义。方法应用逆转录—聚合酶链反应法 (RT PCR )和数字成像扫描技术 ,对 2 3例胃癌组织、癌旁组织及 11例胃溃疡组织中TGF αmRNA进行定量检测。结果 胃癌组织及癌旁正常组织中TGF αmRNA表达水平均明显高于胃溃疡组织 (P <0 .0 5 ) ;胃癌组织与癌旁组织中TGF αmRNA表达无显著性差异 ;胃癌TGF αmRNA表达与肿瘤分期、淋巴结转移无关。结论 TGF αmRNA过度表达与胃癌发生呈正相关作用 ,是胃癌前病变的 1项有意义的指标 ,有助于胃癌患者的早期发现。

α-硫辛酸对糖尿病大鼠肾脏的保护作用及其可能的机制

目的观察α-硫辛酸(ALA)对糖尿病大鼠肾脏的保护作用,并探讨其可能的作用机制。方法复制糖尿病大鼠模型,分为糖尿病组(DM组)、糖尿病硫辛酸组(ALA组),并设置正常对照组(NC组)。实验6周后处死全部大鼠,测定相应生化指标和相关氧化应激指标;HE、Masson染色观察肾组织的形态变化;免疫组织化学和Western blot检测大鼠肾组织中核转录共抑制因子(SnoN)、转化生长因子(TGF-β_1)、Collagen I、Collagen IV表达水平。结果 (1)DM组大鼠肾重/体重、血糖、血总胆固醇、三酰甘油、24 h尿蛋白均高于NC组,ALA组除了血糖外以上其余指标均低于DM组。(2)DM组总抗氧化物酶活性(T-AOC)、总超氧化物歧化酶活性(T-SOD)、过氧化氢酶活性(CAT)低于NC组,丙二醛含量(MDA)增多;ALA组T-AOC、T-SOD、CAT活性高于DM组,MDA含量降低。(3)病理检查显示,DM组大鼠出现肾纤维化改变,ALA组肾纤维化病变明显改善。(4)免疫组织化学和Western blot结果显示:与NC组相比,DM组大鼠SnoN蛋白水平降低,TGF-β_1、Collagen I和Collagen IV增高;与DM组相比,ALA组SnoN蛋白水平升高,TGF-β_1、Collagen I和Collagen IV降低。结论α-硫辛酸可以增强DM大鼠肾脏的抗氧化能力,上调SnoN蛋白的表达,从而抑制TGF-β_1信号通路而减少细胞外基质沉积,对糖尿病大鼠肾脏起到保护作用。

氯沙坦及霉酚酸酯对单侧输尿管梗阻大鼠肾脏的保护作用

目的观察氯沙坦及霉酚酸酯对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾脏转化生长因子(TGF)β1、Ⅲ型胶原、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达介导的肾间质纤维化的作用。方法雌性SD大鼠30只,随机分为假手术组(Sham)、UUO组、氯沙坦组(LSRT)、霉酚酸酯组(MMF)和联合用药组(L+M)。制备UUO大鼠模型后,LSRT组给予氯沙坦(50mg.kg-1.d-1)灌胃、MMF组给予霉酚酸酯(25mg.kg-1.d-1)灌胃、L+M组给予氯沙坦霉和霉酚酸酯(剂量同前)灌胃,用免疫组织化学方法检测术后14d肾组织α-SMA、TGF-β1、Ⅲ型胶原表达量,并进行Masson染色评分。同时测定收缩压、尿蛋白及肌酐清除率。结果各组大鼠收缩压、尿蛋白及肌酐清除率均无差异(P>0.05)。与Sham组比较,UUO组及治疗组α-SMA、TGF-β1、Ⅲ型胶原表达及Masson染色评分均增高,且UUO组高于各治疗组(P<0.05),而联合治疗组低于单用药组(P<0.05)。结论氯沙坦及霉酚酸酯可通过下调α-SMA、TGF-β1、Ⅲ型胶原表达减轻UUO术后肾组织间质纤维化,联合用药作用优于单独用药。

α-硫辛酸对高糖环境下心肌成纤维细胞TGF-β_1/Smads信号通路的影响

目的:探讨α-硫辛酸(α-LA)对高糖环境下心肌成纤维细胞(CFb)转化生长因子-β1(TGF-β1)/Smads信号通路的影响。方法:将原代培养乳鼠CFb按培养液不同分为正常糖组(5.5 mmol/L葡萄糖),高糖组(25.5 mmol/L葡萄糖),α-硫辛酸干预组:高糖+不同浓度α-硫辛酸(100、200、300μmol/L)。噻唑蓝四氮唑(MTT)比色法检测成纤维细胞增殖情况,酶联免疫吸附法(ELISA)检测胶原Ⅰ的含量,蛋白质印迹法检测TGF-β1、磷酸化Smad2/3(p-Smad2/3)、Smad2/3、Smad7蛋白的表达。结果:与正常糖组相比,高糖组CFb增殖明显增加(P<0.01),胶原Ⅰ分泌量增加,TGF-β1、p-Smad2/3、Smad2/3蛋白表达增加、Smad7蛋白表达降低。经不同浓度α-硫辛酸(100、200、300μmol/L)处理后,CFb增殖、胶原Ⅰ含量明显降低,TGF-β1、p-Smad2/3、Smad2/3蛋白表达降低,Smad7蛋白表达升高。结论:α-硫辛酸抗糖尿病心肌病心肌纤维化作用可能部分通过抑制TGF-β1/Smads信号途径实现。

胎儿和成人皮肤组织中TGF-β1,2,3因子蛋白含量的变化及其与创面无瘢愈合的关系

目的:观察转化生长因子β三种异构体(TGF-β1、2和3)和α-平滑肌肌动蛋白(α-ASMA)在胎儿和成人皮肤组织中的表达特征以及与胎儿创面无瘢愈合的关系。方法:12例被测标本中包括不同胎龄的胎儿皮肤6例,其对应的成人皮肤组织6例。用免疫组化方法和常规病理技术确定这四种蛋白在胎儿和成人皮肤组织中的定位及表达量的变化规律。结果:TGF-β1、2、3细胞因子的阳性信号主要见于表皮基底层细胞、汗腺和毛囊细胞的胞浆和胞外基质中,α-ASMA蛋白则定位于肌动成纤维细胞内。在胎儿生长发育过程中,TGF-β1、2、3和α-ASMA等蛋白在皮肤组织中的阳性细胞率逐渐升高,在成人皮肤组织中,四种蛋白的含量更加明显增大。在胎儿发育的不同时期,这四种蛋白在皮肤组织内的含量变化规律相近似。结论:在成人皮肤组织内,TGF-β1和α-ASMA两种蛋白含量的升高可能与伤口愈合形成瘢痕相关,而胎儿皮肤中这两种蛋白含量的降低可能与胎儿创面无瘢愈合密切相关,而TGF-β2、3在其中所起的作用尚需进一步深入研究。

136例广东地区汉族人TGF-α/BamHI基因多态性分析

目的 研究TGF -α基因BamHI限制性片段多态性在正常中国广东汉族人群的分布 ,计算各型的基因频率。方法 用盐提取法提取 136例广东地区正常汉族人白细胞的DNA ,用聚合酶链反应 -限制性片段长度多态性技术检测TGF -α基因BamHI多态性 ,并与其他人群做了比较。结果 TGF -α基因的BamHIA突变点A1(BamHI- )、A2 (BamHI+)等位基因频率分别为 6 %和 94 % ;A1A2和A2A2基因型频率分别为 12 5 %、87 5 %。与高加索人群比较无显著差异 (P >0 0 5 )。结论 该位点在中国广东汉族人群中具有多态性 ,与高加索人群不存在明显差异 ,为TGF -α基因BamHI多态性在广东正常汉族人群分布提供依据。

136例广东地区汉族人TGF-α/TaqI基因多态性分析

目的 :研究转化生长因子 α基因 Taq I限制性片段长度多态性在正常中国广东汉族人群的分布 ,计算各型的基因频率。方法 :用盐提取法提取 1 36例广东地区正常汉族人白细胞的 DNA,后再用聚合酶链反应 -限制性片段长度多态性技术检测 TGF- α基因 Taq I多态性 ,并与高加索人群比较。结果 :TGF-α基因的 Taq I C突变点 C1 ( Taq I- )、C2 ( Taq I+ )等位基因频率分别为 92 %和 8% ;C1 C1、C1 C2和C2 C2基因型频率分别为 84%、1 5 %、1 %。与高加索人群比较差异无显著性 ( P>0 .0 5 )。结论 :该位点在广东汉族人群中具有多态性 ,与高加索人群比较差异无显著性。

TACE-TGF-α相互作用参与胚泡着床的机制研究

目的:探讨胚泡着床过程中转化生长因子α(Transforming growth factor-α,TGF-α)对肿瘤坏死因子-α转化酶(Tumor necrosis factor-converting enzyme,TACE/ADAM17)的反馈调控机制。方法:用逆转录聚合酶链反应(Reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)和免疫组化的方法分别检测实验组(注射TGF-α抗体)和对照组(注射小鼠血清)后子宫内膜TACE mRNA和蛋白的表达。结果:对照组TACE mRNA和蛋白明显高于实验组。结论:在胚胎着床过程中,TGF-α能反馈调控TACE在子宫内膜的表达,TACE-TGF-α-EGFR途径可能是胚胎着床的调控机制之一。

TGF-β1、TNF-α及α-SMA与肾间质纤维化

肾间质纤维化(RIF)是多种慢性肾病进展到终末期肾病的最终共同病理改变,其中促纤维化因子的释放在肾脏纤维化的形成中起着重要作用。该文通过对文献的梳理,就转化生长因子-β1(TGF-β1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)在RIF形成中的作用进行了概括。

转化生长因子α(TGF-α)在肿瘤治疗中的应用现状及展望

转化生长因子α(transforming growth factor alpha,TGF-α)是表皮生长因子(epithelial growth factor,EGF)家族成员之一,能与表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)特异性结合并激活其下游信号通路,发挥调节细胞增殖、分化、迁移等一系列生物学功能,在肿瘤的发生发展中起到重要作用,TGF-α有望成为肿瘤治疗的靶点或工具。本文将阐述TGF-α与肿瘤的关系,着重探讨TGF-α在肿瘤治疗中的应用现状及前景。

α-硫辛酸对糖尿病大鼠肾脏miR-21和Smad7表达及纤维化的影响

目的:观察α-硫辛酸(ALA)对糖尿病(DM)大鼠肾脏的保护作用,并探讨其作用机制。方法:将SD大鼠分为正常对照(NC)组、DM组和ALA组,给药6周后处死大鼠测定相应生化指标和肾脏指数。HE和Masson染色观察肾组织的形态结构变化; Western blot检测大鼠肾组织中转化生长因子β1 (TGF-β1)、p-Smad2/3、Smad7、collagen I和collagen III的蛋白表达水平; RT-qPCR检测肾组织微小RNA-21 (miR-21)的表达。结果:与NC组相比,DM组大鼠肾重/体重、血葡萄糖(BG)、血总胆固醇、血甘油三酯和24 h尿蛋白均显著增高,肾脏病理学检查显示出现肾纤维化改变,Smad7蛋白水平显著降低,TGF-β1、p-Smad2/3、collagen I和collagen III显著增高,miR-21水平亦显著升高(P <0. 05); ALA治疗后,DM大鼠除了BG无明显变化外,其余生化指标和肾脏指数均明显低于DM组,肾脏病理学检查显示肾纤维化病变明显得到改善,Smad7蛋白较DM组显著升高,TGF-β1、p-Smad2/3、collagen I和collagen III较DM组显著降低,miR-21水平较DM组显著降低(P <0. 05)。结论:ALA可抑制DM大鼠肾脏纤维化的发生发展,其机制可能是通过抑制TGF-β1和miR-21表达而上调Smad7蛋白的表达水平,使细胞外基质沉积减少。

缺氧在大鼠肝纤维化形成中的作用机制

目的探讨缺氧在大鼠肝纤维化形成中的作用机制。方法建立胆管结扎(bile duct ligation,BDL)大鼠肝纤维化模型,术后1、3、7、14、21、28 d取材,观察肝脏组织学及超微结构的改变;逆转录PCR检测转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、Ⅰ型胶原(collagenⅠ,Coll-Ⅰ)mRNA的表达;蛋白免疫印迹检测缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1 alpha,HIF-1α)、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)的表达;缺氧培养原代肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC),逆转录PCR检测HIF-1α、TGF-β1、Coll-I mRNA的表达,蛋白免疫印迹检测α-SMA的表达。缺氧/常氧下,加TGF-β1中和抗体、HIF-1α诱导剂氯化钴(cobalt chloride,CoCl2)或抑制剂2-甲氧雌二醇(2-methoxyestradiol,2 ME2),逆转录PCR检测Coll-I mRNA表达的变化。结果①电镜下显示大鼠肝脏术后出现缺氧的表现;②术后3 d时,HIF-1α的蛋白表达升高,7 d时,TGF-β1、Coll-I mRNA及α-SMA蛋白的表达升高;③缺氧诱导HSC表达HIF-1α、TGF-β1、Coll-I mRNA及α-SMA蛋白表达的升高;④常氧下CoCl2诱导Coll-I mRNA的表达,中和抗体及2 ME2抑制缺氧诱导Coll-I mRNA的表达。结论缺氧激活HSC,增加细胞外基质的沉积,促进大鼠肝纤维化的形成,其机制与TGF-β1和HIF-α的介导信号通路密切相关。

肺炎支原体肺炎患儿血清白介素18、TNF-α、TGF-β1的临床意义

目的 探讨肺炎支原体肺炎（MP）患儿血清白介素18、肿瘤坏死因子（TNF-α）、转化生长因子（TGF-β1）水平及其临床意义.方法 采集2011年5月～2012年12月入住我院的60例肺炎支原体患儿与40例健康儿的血清,采用酶联免疫吸附法测定其血清IL-18、TNF-α及TGF-β1,比较MP急性期及恢复期与对照组、MP重症患者与轻症患者急性期、MP重症患者与轻症患者恢复期上述指标的水平.结果 MP恢复期及急性期与对照组血清IL-18、TNF-α及TGF-β1水平相比,差异均具有统计学意义（P＜0.05）,且MP急性期与恢复期相比,差异具有统计学意义（P＜0.05）;MP重症患者与轻症患者急性期血清各指标差异具有统计学意义（P＜0.05）;MP重症患者与轻症患者恢复期血清各指标差异具有统计学意义（P＜0.05）.结论 健康儿与MP患儿血清IL-18、TNF-α、TGF-β1具有明显差异,且在不同发病期、病情轻重方面也具有明显差异,对于MP的临床诊断具有重要意义.

雷贝拉唑联合磷酸铝凝胶治疗消化性溃疡患者的疗效及对TGF-a和Gas水平的影响

目的探讨雷贝拉唑联合磷酸铝凝胶治疗消化性溃疡患者的疗效及对血清TGF-a和Gas水平的影响。方法选取2014年1月至2017年1月潮州市中医医院消化内科收治的消化性溃疡患者98例,随机分为对照组和观察组各49例。对照组患者单用雷贝拉唑治疗,观察组患者在此基础上联合磷酸铝凝胶治疗,治疗4周后比较两组患者的临床疗效,比较治疗前后患者血清TGF-a和Gas水平改变情况以及不良反应发生情况。结果观察组患者的治疗总有效率为95.92%,对照组为83.67%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前两组患者血清Gas、TGF-a水平比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗4周后,两组患者血清Gas水平显著降低、TGF-a水平显著升高(P<0.05),观察组患者Gas水平显著低于对照组、TGF-a水平显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组不良反应发生率(6.12%)显著低于对照组(20.41%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论与单用雷贝拉唑治疗比较,雷贝拉唑联合磷酸铝凝胶治疗消化性溃疡患者,能显著降低TGF-a水平,提高Gas水平,提高临床治疗效果,减少不良反应的发生。

葡萄胎患者化疗前后血清TGF-α、TNF-α水平检测的临床意义

目的探讨葡萄胎患者化疗前后血清中TGF-α、TNF-α水平的变化。方法应用放免法测定了30例葡萄胎患者血清中TGF-α和TNF-α含量,并与35名正常健康人作对照。结果化疗前葡萄胎患者血清中TGF-α、TNF-α水平非常显著地高于正常人组(P<0.01),化疗后3个月则与正常人比较,差异无显著性(P>0.05)。结论检测葡萄胎患者血清中TGF-α、TNF-α水平的变化对了解患者病情和预后密切相关。