CST4和TGFB2在食管癌组织中的表达及临床意义

目的:探讨半胱氨酸蛋白酶抑制剂S(cysteine protease inhibitor S,CST4)和转化生长因子β2(transforming growth factor β2,TGFB2)在食管癌组织中的表达及临床意义。方法:通过生物信息学分析,了解CST4和TGFB2在癌症中的作用。纳入2010-2019年于我院确诊为食管癌的患者68例,采用免疫组织化学的方法检测CST4和TGFB2的表达水平;用Kaplan-Meier和COX回归模型分析CST4和TGFB2对患者生存的影响。结果:通过生物信息学分析我们发现CST4和TGFB2基因主要与细胞黏附、迁移和凋亡有关。通过免疫组化实验我们发现CST4和TGFB2在食管癌组织中的阳性表达率显著高于正常食管组织。同时CST4和TGFB2与食管癌患者的T分期、N分期显著相关性。此外,我们对纳入的68例患者进行了5年的随访,中位生存时间为26个月。通过Kaplan-Meier生存分析我们发现在食管癌患者中CST4(中位生存时间=21个月,P=0.004)和TGFB2(中位生存时间=19个月,P=0.01)的阳性表达与较低的5年总体生存率(overall survival, OS)显著相关。并且当CST4和TGFB2共同表达阳性时患者5年OS最低(中位生存时间=16个月,P=0.004)。经COX回归模型分析发现CST4和TGFB2均为患者不良预后的独立危险因素。与此同时CST4和TGFB2的表达水平呈正相关。结论:CST4和TGFB2在食管癌组织中呈阳性表达,且两者的阳性表达可能与患者预后不良有关。因此,CST4和TGFB2可能是预测食管癌患者预后的潜在新标志物。

大恒鸡与金阳丝毛鸡TGFB2基因在不同组织中的表达差异

【目的】探讨TGFB2基因对鸡肌肉生长发育的影响。【方法】利用定量PCR方法对TGFB2基因在鸡不同组织、不同生长发育阶段的表达差异进行了比较研究。【结果】研究结果显示:2周龄大恒鸡腿肌中TGFB2 mRNA表达量显著高于金阳丝毛鸡,并且达到最高值。10周龄金阳丝毛鸡母鸡胸肌组织中TGFB2 mRNA表达量均显著高于大恒鸡,并达到最高值;大恒鸡公鸡10周龄腿肌组织中TGFB2 mRNA表达量均与其他周龄差异显著,并达到最高值。金阳丝毛鸡、大恒鸡母鸡10周龄胸肌组织中TGFB2 mRNA表达量均显著高于2周龄。【结论】TGFB2基因可能是影响鸡肌肉生长发育的候选基因。

TBX1基因可能通过调控Tgfb2基因的表达参与心脏发育及先天性心脏病的发生

目的通过检测TBX1基因干扰后转化生长因子β2基因(Tgfb2)表达的变化探讨TBX1基因参与心脏发育及先天性心脏病发生的可能途径。方法根据处理因素不同,将细胞分为NC-siRNA组和TBX1-siRNA组。在大鼠胚胎心肌细胞H9C2中转染TBX1-siRNA,采用实时定量PCR法(qRT-PCR)检测干扰效率;收集转染TBX1-siRNA 48h后的H9C2细胞系,提取总RNA,qRT-PCR法检测干扰后Tgfb2基因mRNA的表达水平。结果(1)qRT-PCR检测心肌细胞TBX1 mRNA的表达:H9C2细胞转染TBX1-siRNA 48h后为0.22±0.02,与NC-siRNA(0.99±0.02)比较,TBX1mRNA表达显著下调,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)qRT-PCR检测心肌细胞Tgfb2mRNA的表达:H9C2细胞转染TBX1-siRNA48h后为2.19±0.01,与NC-siRNA(1.00±0.01)比较,Tgfb2mRNA表达明显上调,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 TBX1基因表达下调可能通过调控Tgfb2基因的表达参与心脏发育及先天性心脏病的发生。

血清lncRNA TGFB2-AS1水平与冠状动脉钙化及其严重程度的关系

目的:探究血清长链非编码RNA(lncRNA)TGFB2-反义RNA 1(TGFB2-AS1)水平与冠状动脉钙化(CAC)及其严重程度的关系。方法:选取2018年5月—2021年7月于丹东市第一医院行CT、冠状动脉造影检查的185例病人为研究对象,根据病人是否发生CAC将其分为非CAC组(47例)与CAC组(138例)。比较CAC组、非CAC组一般资料及血清lncRNA TGFB2-AS1、转化生长因子-β_(1)(TGF-β_(1))水平;比较不同CAC严重程度病人的血清lncRNA TGFB2-AS1、TGF-β_(1)水平;分析CAC病人血清lncRNA TGFB2-AS1表达水平与TGF-β_(1)的相关性;分析血清lncRNA TGFB2-AS1表达水平诊断CAC的价值。结果:CAC组病人高血压占比、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平、糖尿病占比、冠心病占比及TGF-β_(1)水平高于非CAC组(P<0.05),血清lncRNA TGFB2-AS1水平低于非CAC组(P<0.05);中度、重度CAC组病人血清lncRNA TGFB2-AS1表达水平低于轻度CAC组(P<0.05),TGF-β_(1)水平高于轻度CAC组(P<0.05);重度CAC组病人血清lncRNA TGFB2-AS1表达水平低于中度CAC组(P<0.05),TGF-β_(1)水平高于中度CAC组(P<0.05);CAC病人血清lncRNA TGFB2-AS1表达水平与TGF-β_(1)呈负相关(r=-0.589,P<0.05);血清lncRNA TGFB2-AS1诊断CAC的受试者工作特征(ROC)曲线下面积(AUC)为0.905,截断值为0.78,此时其敏感度为83.0%,特异度为87.7%。结论:CAC病人血清lncRNA TGFB2-AS1表达水平较低,与TGF-β_(1)相关,其有望成为临床诊断CAC并评估其严重程度的有效指标。

胎盘植入性疾病中TGFB2 mRNA表达上调的临床意义

目的探讨转化生长因子β2(TGFB2)mRNA在胎盘植入性疾病(PAS)中的临床意义。方法收集广西医科大学第一附属医院住院分娩的3例PAS患者胎盘组织,选取同期正常的5例非PAS患者胎盘组织作为对照组,对样本进行高通量测序,得到内部mRNA测序结果。之后从公共高通量数据库中筛选出3个相关数据集,先探讨各组之间TGFB2 mRNA的表达差异,再整合计算TGFB2 mRNA的标准均数差(SMD)和整合受试者操作特征(sROC)曲线,最后综合内部测序数据进一步分析TGFB2 mRNA在PAS与非PAS之间的表达差异。结果从公共高通量数据库筛选的3个数据集以及内部测序数据中TGFB2 mRNA表达水平相较于对照组均上调。整合计算3个数据集结果显示TGFB2 mRNA在PAS中表达显著上调(SMD=1.02,95%CI=0.02~2.02)。再结合本单位内部测序进一步综合分析证实,PAS中TGFB2 mRNA表达比非PAS样本显著上调(SMD=1.05,95%CI=0.47~1.64),sROC曲线下面积为0.87。结论高表达的TGFB2 mRNA可能促进PAS的发生发展,是潜在的生物标志物。

血管软化丸抑制血管炎症反应防治动脉粥样硬化的分子机制

目的观察中药复方血管软化丸防治动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)是否通过靶向调控长链非编码RNA-TGFB2-OT1、miR4459及其下游信号抑制炎症反应产生效果。方法建立AS模型,采用血管软化丸干预、以TGFB2-OT1 inhibitor作为阳性对照;干预8周后进行生化检测,HE染色观察主动脉病理改变,Real-time PCR法和Western blot法检测主动脉TGFB2-OT1、miRNA4459、LARP1、SQSTM1、CASP1、IL1B水平。结果与模型组相比,血管软化丸组TC、TG和LDL-C水平降低(均P<0.05),主动脉LA较大、IMT较薄、PA较小、LCA较小(P<0.05),主动脉TGFB2-OT1光密度值和荧光强度较低(均P<0.05),血清ICAM-1、VCAM-1、IL-8和MCP-1水平较低(均P<0.05),主动脉TGFB2-OT1、miRNA4459、LARP1、SQSTM1水平较低(均P<0.05),主动脉TGFB2-OT1、CASP1、IL1B蛋白表达水平较低(均P<0.05)。结论血管软化丸防治AS的分子机制与靶向调控长链非编码RNA-TGFB2-OT1、miR4459及其下游信号抑制炎症反应有关。

miR-152-3p对血管平滑肌细胞的作用及其机制研究

目的:研究miR-152-3p对血管平滑肌细胞(VSMCs)的作用及机制。方法:使用ox-LDL刺激血管平滑肌细胞,用ApoE基因敲除小鼠建立动脉粥样硬化动物模型。使用qRT-PCR检测miR-152-3p和转化生长因子-B2(TGFB2 Mrna)表达水平。分别使用CCK-8实验、transwell实验和TUNEL实验检测VSMCs增殖、迁移和凋亡。通过生物信息分析预测miR-152-3p的下游靶点。MiR-152-3p和TGFB2之间的相互作用通过双荧光素酶实验、qRT-PCR和Western blot进行验证。结果:在动脉粥样硬化小鼠主动脉平滑肌细胞和受到ox-LDL处理的VSMCs中miR-152-3p表达水平显著下调,并表现出浓度和时间依赖特性。过表达miR-152-3p显著抑制了VSMCs的增殖和迁移,诱导了细胞凋亡。从机制上来看,miR-152-3p通过靶向作用于TGFB2发挥作用。结论:miR-152-3p通过靶向抑制TGFB2抑制VSMCs的异常增殖和迁移。

miR-29a对MPP + 诱导PC12细胞凋亡影响及机制

目的研究微小RNA-29a(miR-29a)对1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP^+)诱导的PC12细胞氧化应激和凋亡的影响以及作用机制。方法不同浓度MPP^+(0、100、300、500μmol/L)诱导PC12细胞24 h,荧光定量PCR(qPCR)检测miR-29a的表达量,噻唑蓝比色法(MTT)检测细胞活力。PC12细胞分别采用0和500μmol/L MPP^+干预并转染anti-miR-29a或对照质粒,采用流式细胞术检测细胞的凋亡率。观察细胞活性氧(ROS)水平。TargetScan软件预测、双荧光素酶报告基因验证miR-29a与重组人转化生长因子诱导因子同源框2(TGIF2)的靶向关系。结果随着MPP+浓度的增加miR-29a表达量随之增加(F=590.067,P<0.05),而细胞活力则随之降低(F=153.561,P<0.05)。下调miR-29a表达可抑制PC12细胞凋亡(F=301.044,P<0.05),降低ROS水平(F=254.120,P<0.05)。TGIF2是miR-29a下游靶基因。结论miR-29a可能通过调控TGIF2抑制MPP^+诱导的PC12细胞氧化应激和凋亡。

miR-4298靶向TGIF2影响多发性骨髓瘤细胞的增殖和迁移的机制研究

目的研究微小RNA-4298(miR-4298)对多发性骨髓瘤细胞增殖、迁移、侵袭的影响以及作用机制。方法荧光定量PCR(qPCR)检测miR-4298在多发性骨髓瘤细胞系(U-266、SKO-007、RPMI-8226)中的表达量;RPMI-8226细胞随机分为对照组(常规培养细胞)、miR-NC组(转染miR-4298阴性对照)、miR-4298组(转染miR-4298模拟物);qPCR检测转染效果,分别采用细胞计数(CCK-8),细胞划痕和Transwell实验检测RPMI-8226细胞增殖、迁移和侵袭能力,TargetScan预测,双荧光素酶报告基因验证miR-4298与转化生长交互作用因子2(IGFIF2)的靶向关系,蛋白质印迹法(Western blot)检测TGFB诱导因子同源盒2(TGIF2)蛋白表达水平。结果miR-4298在多发性骨髓瘤细胞系(U-266、SKO-007、RPMI-8226)中表达量下调(P<0.05);上调miR-4298抑制RPMI-8226细胞增殖(P<0.05),降低其迁移、侵袭(P<0.05);TGIF2是miR-4298下游靶基因;miR-4298与TGIF2蛋白水平呈线性负相关;上调TGIF2能逆转miR-4298对RPMI-8226细胞增殖、迁移、侵袭的抑制作用。结论miR-4298在多发性骨髓瘤细胞系表达量下调,其可能通过抑制TGIF2阻碍RPMI-8226细胞增殖、迁移、侵袭。