营养支持及干预对重度溃疡性结肠炎患者肠道菌群、Th细胞免疫应答、炎症反应的影响

目的:探讨营养支持及干预对重度溃疡性结肠炎患者肠道菌群、Th细胞免疫应答、炎症反应的影响。方法:选择2014年8月~2017年1月间在本院确诊并接受治疗的UC患者90例,经随机数表法分为对照组、营养干预组各45例。对照组患者接受UC临床常规治疗,营养干预组患者在常规治疗同时加入营养支持及干预。对比两组肠道菌群分布、Th1/Th2细胞因子含量、炎症介质含量的差异。结果:干预前,两组肠道菌群分布、Th1/Th2细胞因子含量、炎症介质含量的差异无统计学意义。干预后,营养干预组中肠杆菌、肠球菌的数量低于对照组,乳酸杆菌、双歧杆菌、丁酸梭菌的数量高于对照组;血清中IL-2、IFN-γ的含量低于对照组,IL-4、IL-10的含量高于对照组;血清中MCP-1、MIP-1a、HMGB-1的含量低于对照组。结论:重度溃疡性结肠炎患者接受营养支持及干预,可进一步均衡肠道菌群分布及Th1/Th2免疫应答,抑制全身炎症反应。

EV71感染手足口病患儿Th细胞免疫变化及其意义

目的探讨EV71感染手足口病患儿Th细胞免疫平衡变化及其对疾病进展的影响。方法选择84例手足口病患儿分为普通组和重症组,另选择30例健康儿童作为对照,采用流式细胞技术检测静脉血Th1/Th2细胞表达水平变化,采用酶联免疫吸附法检测血清IL-4及IFN-γ表达水平变化。结果重症组及普通组患儿静脉血Th1及Th1/Th2表达水平低于对照组,Th2高于对照组,IL-4及IFN-γ表达水平低于对照组。重症组Th1及Th1/Th2表达水平低于普通组,Th2高于普通组,IL-4及IFN-γ表达水平低于普通组。结论 EV71感染手足口病患儿Th细胞免疫异常,可能同手足口病患儿的发病及疾病进展有关。

儿童难治性肺炎支原体肺炎肺泡灌洗液病菌量与Th1/Th2细胞免疫应答的相关性研究

目的探究儿童难治性肺炎支原体肺炎肺泡灌洗液病菌量与Th1/Th2细胞免疫应答的相关性。方法随机选择郑州大学附属儿童医院诊治的96例难治性肺炎支原体肺炎患儿为研究对象,根据肺泡灌洗液中肺炎支原体DNA含量进行分组,即>106/m L为高菌量组(n=35),103~106/m L为中菌量组(n=30),<103/m L为低菌量组(n=31)。检测三组患儿肺泡灌洗液的炎性因子水平,对比三组的炎性因子水平、肺部影像学与实验室检查结果、临床表现和基础情况,分析肺泡灌洗液中肺炎支原体DNA含量与炎性因子的相关性。结果在体温高于39℃、热程高于10天患儿占比以及总发热时间、使用抗生素后热程、住院时间、乳酸脱氢酶、血小板计数、中性粒细胞计数、淋巴细胞计数上,三组比较差异有统计学意义(P<0.05),白细胞计数比较差异无统计学意义(P>0.05);双侧或大量胸腔积液、肺不张或者大片肺实变发生率、白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)水平比较,差异有统计学意义(P<0.05),三组之间的双侧肺病变、左侧肺病变、右侧肺病变发生率以及肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、干扰素(interferon-γ,INF-γ)、IL-8水平比较差异无统计学意义(P>0.05);肺泡灌洗液中IL-4与肺炎支原体DNA水平呈正相关(P<0.05),肺泡灌洗液中TNF-α、INF-γ、IL-8与肺炎支原体DNA水平无相关性(P>0.05)。结论儿童难治性肺炎支原体肺炎肺泡灌洗液病菌量与Th1/Th2细胞免疫应答具有相关性,肺炎支原体DNA菌量越高,肺内外损害和肺部炎症越严重,Th1/Th2免疫应答失衡。

银杏提取物对UC大鼠肠黏膜屏障功能的改善作用及对Th17/Treg细胞免疫稳态的影响

目的:探究银杏提取物对溃疡性结肠炎(UC)大鼠肠黏膜屏障功能的改善作用及对Th17/Treg细胞免疫稳态的影响。方法:雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组及银杏提取物低、中、高剂量组,除正常对照组外其余各组大鼠均给予硝基苯磺酸、乙醇复合诱导建立UC大鼠模型。造模成功后各给药组灌胃相应剂量药物,正常对照组和模型组大鼠灌胃相应体积生理盐水,共给药14 d。记录各组大鼠一般状态,并追踪记录疾病活动指数(DAI),采用腹壁回撤反应(AWR)检测大鼠内脏敏感程度,检测各组大鼠外周血Th17、Treg细胞比例和血清IL-2、IL-6、IL-8、IL-10、TNF-α水平,检测肠道菌群及结肠组织中TLR4、NOD2 mRNA及蛋白表达。结果:与治疗前比较,各给药组大鼠饮水量、体质量、肛温显著升高,DAI显著降低(P<0.05)。与正常对照组比较,模型组大鼠饮水量、体质量、肛温显著降低,DAI、AWR显著升高,外周血Treg细胞比例及血清IL-2、IL-10水平显著降低,外周血Th17细胞比例及Th17/Treg和血清IL-6、IL-8、TNF-α水平显著升高,肠道大肠杆菌、肠球菌水平显著升高,乳酸杆菌、双歧杆菌水平显著降低,结肠组织中TLR4、NOD2 mRNA及蛋白表达显著升高(P<0.05)。与模型组比较,银杏提取物各剂量组大鼠饮水量、体质量、肛温显著升高,DAI、AWR显著降低,外周血Treg细胞比例及血清IL-2、IL-10水平显著升高,外周血Th17细胞比例及Th17/Treg和血清IL-6、IL-8、TNF-α水平显著降低,肠道大肠杆菌、肠球菌水平显著降低,乳酸杆菌、双歧杆菌水平显著升高,结肠组织中TLR4、NOD2 mRNA及蛋白表达显著降低(P<0.05)。银杏提取物的作用呈现剂量依赖性。结论:银杏提取物可降低UC大鼠结肠组织TLR4、NOD2 mRNA及蛋白表达,改善肠黏膜屏障功能,维持Th17/Treg细胞免疫稳态,抑制其炎症反应。

痛泻安肠方对肠易激综合征小鼠短链脂肪酸代谢及Th1/Th2细胞免疫平衡的影响

目的观察痛泻安肠方对肝郁脾虚证腹泻型肠易激综合征(IBS-D)小鼠模型短链脂肪酸代谢及Th1/Th2细胞免疫平衡的影响。方法30只18~22 g的雄性C57BL/6小鼠随机分为空白组、模型组、痛泻安肠方低剂量组、痛泻安肠方中剂量组、痛泻安肠方高剂量组,每组6只。采用束缚应激联合番泻叶灌胃复制IBS-D小鼠模型,造模成功后分别予相应浓度中药灌胃14 d,每日1次,通过靶向代谢组学检测小鼠粪便中短链脂肪酸含量的变化,并通过流式细胞术检测肠系膜淋巴结中CD3+CD4+INF-γ+T细胞(Th1细胞)、CD3+CD4+IL-4+T细胞(Th2细胞)的占比情况。结果与空白组相比,模型组小鼠粪便短链脂肪酸(SCFAs)相对含量显著升高(P<0.01),尤其是乙酸、丙酸及丁酸的含量均显著升高(P<0.01或P<0.05);不同剂量痛泻安肠方治疗后,粪便总SCFAs相对含量显著降低(P<0.01),乙酸、丙酸及丁酸均有不同程度降低,其中痛泻安肠方各剂量组均可显著降低乙酸和丁酸的含量,差异具有统计学意义(P<0.01),低剂量组及中剂量组可显著降低丙酸的含量,差异具有统计学意义(P<0.01)。造模后,肠易激综合征小鼠肠系膜淋巴结的Th2细胞占比明显降低,而Th1细胞占比及Th1/Th2细胞比率明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05);治疗后,痛泻安肠方各剂量组Th2细胞占比均有升高,Th1细胞占比及Th1/Th2细胞比率降低。结论痛泻安肠方可以降低IBS-D小鼠粪便SCFAs的含量,调节小鼠Th1/Th2细胞免疫紊乱。

转化生长因子β_1对TH免疫及肺癌细胞系生长的影响

目的 :研究并分析转化生长因子 β1(TGFβ1)对TH细胞免疫的作用以及对肺癌细胞系生长的影响。方法 :利用酶联免疫吸附法 (ELISA)检测了体外培养的外周血单个核细胞在TGFβ1作用下TH1和TH2型细胞因子的分泌 ;利用MTT比色法了解TGFβ1对肺腺癌细胞系 (A5 4 9)生长的影响。结果 :在TGFβ1作用下 ,健康者外周血单个核细胞培养上清液中IL - 2和INFY水平 (32 9.6± 12 5 .9pg/ml,6 87.36± 2 0 9.78pg/ml)明显低于无TGFβ1作用的健康人组 (6 96 .11± 12 3.86 pg/ml,94 1.0 6± 191.18pg/ml) (P <0 .0 0 1) ,却显著高于非小细胞肺癌患者 (12 8.6 4± 14 .82pg/ml,4 4 7.6± 16 0 .0 2 pg/ml) (P <0 .0 0 1) ;IL - 10水平 (5 0 0 .2 8±82 .11pg/ml)高于健康对照组 (341.2 5± 134.83pg/ml) (P <0 .0 0 1) ,与肺癌组 (5 2 4 .16± 14 4 .2 7pg/ml)相比却差异显著 (P =0 .2 3)。TGFβ1对A5 4 9的生长没有影响 (P =0 .4 2 ,P =0 .80 )。结论 :TGFβ1能引起TH细胞免疫失衡 ;抑制TH1细胞免疫 ,增强TH2细胞免疫 ;TGFβ1对A5 4 9生长无影响。

自拟扶正平溃汤联合针灸治疗慢性溃疡性结肠炎的疗效及对肠道菌群失调和Th17/Treg细胞免疫平衡的影响

目的观察自拟扶正平溃汤联合针灸治疗慢性溃疡性结肠炎的疗效及对肠道菌群失调和Th17/Treg细胞免疫平衡的影响。方法将100例慢性溃疡性结肠炎患者随机分为观察组50例和对照组50例,2组均给予常规西医治疗,观察组在常规治疗基础上给予针灸联合自拟扶正平溃汤治疗,2组疗程均为3个月。记录2组治疗前后主要临床症状体征、结肠炎症评分、肠道菌群及Th17/Treg细胞免疫平衡变化情况。结果 2组治疗后腹痛、腹胀、大便次数、大便性状、血便、食少纳差、神疲少言、肢体乏倦评分均显著降低(P均<0.05),观察组上述评分均低于对照组(P均<0.05);2组治疗后结肠炎症评分均有显著改善(P均<0.05),观察组中0分、1分的比例高于对照组(P均<0.05),3分、4分的比例低于对照组(P均<0.05);2组治疗后双歧杆菌、乳酸杆菌数量均升高(P均<0.05),大肠埃希菌、肠球菌数量均减少(P均<0.05),观察组上述菌群的改善情况优于对照组(P均<0.05);2组治疗后Th17细胞比例、Th17/Treg比值显著降低,Treg细胞比例显著升高,观察组上述细胞比例改善情况优于对照组(P均<0.05)。结论自拟扶正平溃汤联合针灸能够显著缓解慢性溃疡性结肠炎患者的临床症状体征,抑制患者肠道黏膜炎性损害,机制可能与改善肠道菌群失调,促进Th17/Treg细胞免疫平衡,从而抑制炎性反应有关。

结核分枝杆菌抗原Ag85B优势诱导活动性结核患者Th1型细胞免疫反应研究

目的观察Ag85B抗原在诱导活动性结核患者细胞免疫应答中的作用。方法选取60例活动性结核患者,分离其外周血单个核淋巴细胞(PBMC),加Ag85B抗原刺激培养72h,ELISA法检测上清液中的IFN-γ、IL-2、IL-4及IL-10细胞因子浓度,流式细胞术(FCM)检测CD4^+T淋巴细胞内的细胞因子IFN-γ水平,定量PCR及Western blot法检测PBMC细胞转录因子T-bet、GATA-3的表达。结果检测活动性结核患者外周血单个核淋巴细胞(PBMC)培养上清液,Ag85B蛋白实验组Th1型细胞因子IFN-γ、IL-2浓度明显高于结核菌素(PPD)组(P<0.05),而Th2型细胞因子IL-4、IL-10水平与PPD组相比,差异无统计学意义(P>0.05),以上两组细胞因子水平均明显高于空白对照组(P<0.05)。流式细胞法检测CD4+T胞内细胞因子IFN-γ水平,Ag85B蛋白实验组高于PPD组及空白对照组(P<0.05)。定量PCR及Western blot法检测,T-bet水平Ag85B组高于PPD组(P<0.05),而GATA-3水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论结核杆菌抗原Ag85B可以通过上调Th1型转录因子T-bet诱导优势Th1型免疫反应,为结核病的预防及治疗提供理论基础。

基于Notch信号通路探讨芪蛭皱肺颗粒对慢性阻塞性肺疾病大鼠Th1/Th2免疫平衡的调节机制

目的探讨果蝇双翅边缘缺刻同源基因(Notch)信号通路在慢性阻塞性肺疾病(COPD)辅助性T细胞1(Helper T cells 1,Th1)和辅助性T细胞2(Helper T cells 2,Th2)失衡中的作用及芪蛭皱肺颗粒的干预机制。方法70只Wistar大鼠随机挑选10只作为空白对照组,其余大鼠均采用香烟烟雾(CS)联合气管滴注脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)法建立COPD模型,空白对照组及造模组各随机挑选3只大鼠验证造模是否成功。造模结束进行灌胃给药干预,造模组大鼠随机分为模型对照组、阳性对照组(67.5μg·kg^(-1))及芪蛭皱肺颗粒高中低剂量组(3.24、1.62、0.81 g·kg^(-1)),分别给予生理盐水、醋酸地塞米松混悬液、芪蛭皱肺高、中、低剂量混悬液进行灌胃干预,空白对照组同模型对照组,灌胃等体积生理盐水。经28天造模及28天治疗后,采用动物肺功能测试系统检测吸气峰流速(Peak Inspiratory Flow,PIF)和呼气峰流速(Peak Expiratory Flow,PEF),处死大鼠提取肺脏、脾脏、血清及支气管肺泡灌洗液(BALF),苏木素-伊红(HE)染色评价肺组织病理变化,酶联免疫吸附实验法(ELISA)测定血清及BALF中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,流式细胞仪检测脾脏Th1/Th2细胞水平,免疫组织化学法(Immunohistochemistry,IHC)及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肺组织Notch1、Hes家族发状分裂相关增强子1(Hes1)、Hey家族发状分裂相关增强子1(Hey1)蛋白水平,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR,RT-PCR)检测肺组织Notch1、Hes1、Hey1基因表达水平。结果与空白对照组比较,模型对照组大鼠肺功能显著降低(P<0.05),肺组织出现炎性细胞浸润、支气管结构破坏等病变,血清及BALF中TNF-α含量显著升高(P<0.05),脾Th1细胞百分比显著降低(P<0.05),Th2细胞百分比显著升高(P<0.05),肺组织Notch1、Hes1、Hey1蛋白及mRNA表达显著升高(P<0.05),差异均具有统计学意义;与模型对照组比较,各给药组大鼠肺功能显著升高(P<0.05),肺组织病理损伤均有所减轻,血清及BALF中TNF-α含量显著降低(P<0.05),脾Th1细胞百分比显著升高(P<0.05),Th2细胞百分比显著降低(P<0.05),肺组织Notch1、Hes1、Hey1蛋白及mRNA表达显著降低(P<0.05),差异均具有统计学意义。结论芪蛭皱肺颗粒通过抑制Notch信号通路调节Th1/Th2平衡,从而改善COPD大鼠肺功能及病理损伤,影响其免疫功能。

308nm准分子激光治疗前后对寻常型银屑病患者外周血Th17/Treg细胞免疫失衡的研究

目的探讨308 nm准分子激光治疗前后寻常型银屑病患者外周血Th17细胞与Treg细胞的比例、Th17/Treg比值,分析308nm准分子激光治疗前后Th17/Treg细胞免疫失衡与银屑病发病及病情严重程度之间的关系。方法选取60例寻常型银屑病患者作为试验组,同时选20例健康人作为正常对照组,采用流式细胞术检测寻常型银屑病患者308 nm准分子激光治疗前后及正常人外周血Th17细胞和Treg细胞的比例、Th17/Treg的比值,同时以银屑病面积和严重程度指数(PASI)评分评价寻常型银屑病患者病情的严重程度。结果寻常型银屑病患者308nm准分子激光治疗前外周血Th17细胞的比例、Th17/Treg比值显著高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.01);Treg细胞的比例显著低于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。寻常型银屑病患者308 nm准分子激光治疗后外周血Th17细胞的比例、Th17/Treg比值显著低于治疗前(P<0.01);Treg细胞的比例显著高于治疗前(P<0.01)。寻常型银屑病患者308 nm准分子激光治疗后外周血Th17细胞的比例、Treg细胞的比例、Th17/Treg比值与正常对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。寻常型银屑病患者PASI评分与Th17细胞的比例呈正相关(P<0.01);而Treg细胞的比例与疾病严重程度之间无相关性(P>0.05)。结论 Th17/Treg细胞免疫失衡可能对银屑病的发病至关重要,308 nm准分子激光治疗可望通过调节患者外周血Th17细胞与Treg细胞的比例,从而调节Th17/Treg细胞失衡达到治疗银屑病的目的。

免疫调节细胞Th17/Treg及程序性死亡配体1在子宫腺肌病中的意义

目的:分析免疫调节细胞Th17/Treg及程序性死亡配体1(PD-L1)在子宫腺肌病中的变化及意义。方法:选择98例子宫腺肌病患者,81例子宫肌瘤及67例健康体检女性,测定免疫调节细胞Th17/Treg及免疫蛋白PD-L1水平,按子宫内膜入侵子宫肌层程度进行病理分级,比较不同病理分级及治疗前后差异。结果:子宫腺肌病组Th17细胞、白介素-17(IL-17)、IL-23、PD-L1免疫组化评分均高于子宫肌瘤组和对照组,Treg细胞、IL-10、转化生长因子-β(TGF-β)水平低于子宫肌瘤组和对照组(均P<0.05)。病理Ⅲ级组Th17细胞、IL-17、IL-23、PD-L1免疫组化评分均高于Ⅱ级组和Ⅰ级组,Treg细胞、IL-10、TGF-β水平低于Ⅱ级组和Ⅰ级组(均P<0.05)。子宫腺肌病患者治疗前Th17细胞、IL-17、IL-23、PD-L1免疫组化评分均高于治疗后,Treg细胞、IL-10、TGF-β水平均低于治疗后(均P<0.05)。结论:免疫调节细胞Th17/Treg及PD-L1在子宫腺肌病发生中有重要作用,监测其表达可能为辅助诊断提供有效指标。

类风湿关节炎患者Th细胞亚群的检测及其临床意义

目的:探讨类风湿关节炎(RA)患者外周血和关节液中Th1、Th2型细胞在患者病情演变中的特点及临床意义。方法:用流式细胞术检测RA患者及健康人外周血单个核细胞(PBMC)和关节液单个核细胞(SFMC)中IFN-γ、IL-4阳性细胞比例。结果:RA患者外周血和关节液中以IFN-γ阳性细胞百分率和IFN-γ阳性细胞/IL-4阳性细胞比值明显增高;早期RA患者以IFN-γ阳性细胞百分率和IFN-γ阳性细胞/IL-4阳性细胞比值增高为主,非早期RA患者以IL-4阳性细胞百分率增高为甚。IFN-γ阳性细胞百分率与血沉、晨僵、休息痛、STOKE指数呈正相关关系。IL-4阳性细胞百分率与类风湿因子显著正相关。结论:RA患者外周血及关节液中存在Th细胞亚群比例失调。早期RA及关节液表现为Th1亚群细胞增多,而非早期RA以Th2亚群细胞增多。Th1、Th1/Th2与RA临床症状及活动指标密切相关,药物干预Th1/Th2失衡是RA治疗新的途径。

基于肠-免疫-皮肤轴探讨洋金花对银屑病小鼠肠道Th17/Treg轴的影响

目的探讨洋金花醉茄内酯类化合物对银屑病小鼠肠道中Th17/Treg细胞功能的影响。方法采用经典的银屑病小鼠模型,即咪喹莫特乳膏(IMQ)诱导小鼠背部皮肤产生银屑病样病理模型,并随机分为四组,即空白组、模型组、洋金花组和雷公藤阳性药物组。采用Psoriasis area and severity index(PASI)分析各组皮损严重程度;应用流式细胞法检测小鼠肠系膜淋巴结中Th17/Treg细胞数量表达;应用酶联免疫吸附法(ELISA法)依次检测肠粘膜中Th17/Treg细胞相关因子的含量。结果洋金花组能减少IMQ诱导的PASI评分,降低肠系膜中Th17细胞表达及相关细胞因子,而升高Treg细胞的表达及相关细胞因子。结论洋金花醉茄内酯类化合物可降低银屑病小鼠肠道Th17细胞功能,同时升高Treg细胞功能,进一步提示在肠-免疫-皮肤轴中,洋金花醉茄内酯类化合物通过影响肠道中的Th17/Treg细胞免疫平衡而达到防治银屑病的作用。

呼吸道合胞病毒肺炎患儿Th1、Th2细胞及其分泌的细胞因子与肺功能的相关性分析

【目的】探讨呼吸道合胞病毒(RSV)肺炎患儿辅助性T细胞(Th)1、Th2细胞及其分泌的细胞因子与肺功能的相关性。【方法】选取2017年11月至2020年12月在本院诊治的80例RSV肺炎患儿作为RSV组,另选取52例同期在本院进行健康体检的婴幼儿作为对照组。采用流式细胞技术检测两组外周血中Th1、Th2细胞百分含量,并计算Th1/Th2,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测Th1、Th2细胞分泌的细胞因子干扰素(IFN)-γ、白细胞介素(IL-4水平,采用肺功能检测仪检测两组肺功能,比较两组Th1/Th2、血清IFN-γ、IL-4水平及肺功能指标,采用Pearson分析Th1/Th2、血清IFN-γ、IL-4水平与肺功能指标的相关性。【结果】两组性别、年龄、体重指数(BMI)比较差异无统计学意义(P>0.05);RSV组外周血中Th1细胞百分含量、Th1/Th2、IFN-γ显著低于对照组,外周血中Th2细胞百分含量、IL-4显著高于对照组,其差异均有统计学意义(P<0.05);RSV组分钟通气量(MV)、潮气量(VT)、吸气时间(TI)、呼气时间(TE)、呼吸比(TI/TE)、呼气峰流速(PEF)显著低于对照组,呼吸频率(RR)显著高于对照组,其差异均有统计学意义(P<0.05);Th1/Th2与MV、VT、TE、PEF正相关(r=0.86、0.57、0.34、0.67,P<0.05),与RR负相关(r=-0.69,P<0.05);IFN-γ与VT、TI/TE、PEF正相关(r=0.47、0.64、0.70,P<0.05),与RR负相关(r=-0.81,P<0.05);IL-4与MV、VT、TI/TE、PEF负相关(r=-0.47、-0.60、-0.32、-0.63,P<0.05)。【结论】RSV肺炎患儿免疫应答以Th2优势应答为主要表现,Th1、Th2细胞及其分泌的细胞因子与肺功能指标显著相关,可作为病情判断、预后评估的指标。

细胞因子Th1/Th2失衡在AITD发病中的作用

分析Th1/Th2失衡在自身免疫性甲状腺疾病(AITD)发病中的作用。选取2013—2015年AITD患者55例,其中Graves病(GD)28例,桥本甲状腺炎(HT)27例。分析两组患者的甲状腺功能、甲状腺抗体、血清中Th1型细胞因子IL-2、TNF、IFN-γ和Th2型细胞因子IL-4、IL-5、IL-10水平。结果显示,GD组的FT3、FT4、TT3、TT4显著高于HT组,TSH显著低于HT组(P<0.05)。GD组的TGAb、TPOAb显著低于HT组,TRAb显著高于HT组(P<0.05)。GD组的IL-2、TNF、IFN-γ显著低于HT组,IL-4、IL-5、IL-10显著高于HT组(P<0.05)。GD中,IL-4、IL-5、IL-10和TRAb呈正相关(P<0.05);HT中,IL-2、TNF、IFN-γ和TGAb、TPOAb呈正相关,IL-4、IL-5和TGAb、TPOAb呈负相关(P<0.05)。结果表明,HT患者Th1细胞免疫占优势,GD患者Th2细胞免疫占优势,对于鉴别诊断具有一定临床意义。

约氏疟原虫感染早期易感和抵抗小鼠树突状细胞细胞因子的分泌特点

目的探讨在致死型约氏疟原虫（P.y17XL）感染早期,树突状细胞（DC）调控Th1细胞免疫应答的相关机制。方法用P.y17XL感染BALB/c和DBA/2小鼠,计数红细胞感染率;感染前和感染后3和5d制备脾细胞悬液,磁珠分选、纯化DCs并体外培养;ELISA方法检测DCs培养上清中IL-12p40、IL-10和TGF-β1的水平。结果DBA/2小鼠DCs培养上清中IL-12p40的水平在感染后3~5d明显升高,与感染前相比具有统计学意义;而BALB/c小鼠DCs培养上清中IL-12p40的水平始终未见明显升高;两种小鼠DCs培养上清中IL-10和TGF-β1水平在感染后3~5d均明显升高,但BALB/c小鼠DCs培养上清中IL-10和TGF-β1水平明显高于DBA/2小鼠。结论P.y17XL感染早期,BALB/c和DBA/2小鼠在DCs细胞因子的分泌模式上存在显著差异。

甲炎康泰对自身免疫性甲状腺炎大鼠T-bet/GATA3的影响

目的观察甲炎康泰(JYKT)复方颗粒对自身免疫性甲状腺炎(autoimmune thyroiditis,AIT)大鼠Th1/Th2细胞转录因子T-bet/GATA3的影响。方法50只Lewis大鼠,雌性,每组10只随机分为正常对照组、模型组、JYKT低、中、高剂量组。模型组与给药组大鼠皮下多点注射猪甲状腺球蛋白和弗化剂的方法建立自身免疫性甲状腺炎大鼠(AIT大鼠),大鼠造模6周后,正常、模型组大鼠每日予以0.9 mL/100 g双蒸水,中药组大鼠予以同体积药物混悬液连续8周。给药结束后RT-PCR检测各组大鼠脾脏中T-bet、GATA3mRNA的表达情况;Western Blot检测各组大鼠脾脏中T-bet、GATA3的蛋白表达情况;免疫组化法测定大鼠甲状腺组织T-bet、GATA3蛋白的表达情况。结果与正常组比较,模型组T-bet、GATA3 mRNA及蛋白表达均显著上升(P<0.01);与模型组比较,甲炎康泰低、中、高剂量组T-bet、GATA3 mRNA及蛋白均下降(P<0.05,P<0.01)。结论T-bet/GATA3是影响Th1/Th2平衡的关键转录因子,甲炎康泰可调控T-bet/GATA3表达,从而影响了自身免疫性甲状腺炎的发生与发展。

非全身型幼年特发性关节炎患儿外周血T辅助细胞1/2细胞因子水平分析

目的：分析非全身型幼年特发性关节炎（SOJIA）患儿外周血T辅助细胞1／2（Th1／Th2）细胞因子水平变化特点，了解相关病理机制，以期为治疗决策提供依据。方法：收集2012年11月至2015年5月浙江大学医学院附属儿童医院活动期非SOJIA患儿41例（非SOJIA组，n=41）的临床资料，其中多关节炎型11例，少关节炎型10例，附着点炎型20例。采用流式细胞术检测患儿血清IL-2、IL-4、IL-6、IL．10、TNF-α和γ干扰素水平，并与同期85例活动期SOJIA患儿及202名健康体检儿童（正常对照组，n=202）比较，同时分析非SOJIA患儿血清细胞因子水平与红细胞沉降率、c反应蛋白的相关性。结果：与正常对照组比较，非SOJIA组患儿血清IL-2、IL-6、γ干扰素升高（2．9pg／mL与2．6pg／mL，9．9pg／mL与6．4pg／mL，6．3pg／mL与5．1pg／mL，均P〈0.05），而TNF—α、IL-10降低（2．7pg／mL与3．9pg／mL，2．9pg／mL与7．1pg／mL，均P〈0．01）；与SOJIA组比较，非SOJIA组IL-6、IL-10降低（9．9pg／mL与33．5pg／mL，2．9pg／mL与4．1pg／mL，均P〈0．01），IL-4、1干扰素升高（3．1pg／mL与2．3pg／mL，6．3pg／mL与4．4pg／mL，均P〈0．05）。同时非SOJIA组附着点炎型、多关节炎型患儿血清IL-6水平高于少关节炎型（12．7pg／mL、11．0pg／mL与4．2pg／mL，均P〈0．05）；附着点炎型患儿血清IL-6、TNF-α水平与超敏CRP呈正相关。结论：非SOJIA患儿Th1／Th2细胞因子失衡且Th1细胞占优势，血清IL-6可能参与非SOJIA的发病机制。

Dectin-1受体、白细胞介素-17及白细胞介素-12在小鼠巨噬细胞活化后真菌性角膜炎中的表达

目的检测小鼠活化巨噬细胞真菌性角膜炎中的人树突状细胞源性C型凝集素样受体-1(Dectin-1)受体、白细胞介素-17(IL-17)及白细胞介素-12(IL-12)的表达水平。方法分别向小鼠角膜创口内注入乳胶微粒液或PBS液构成实验组与对照组。于感染后第1,3,5,7,9d,裂隙灯显微镜下观测各组小鼠真菌性角膜炎特点,H-E染色观测其病理特征;通过Realtime-PCR检测小鼠角膜中Dectin-1受体、IL-17及IL-12基因mRNA的表达。结果 (1)实验组角膜浸润混浊,于第7天多发穿孔,未发现新生血管;对照组角膜混浊,于第5天广泛分布新生血管,未发现穿孔。(2)实验组角膜大量炎症细胞汇集,第5天基质细胞排列紊乱,破坏严重。(3)Realtime-PCR结果表明感染后第3,5,7,9d,实验组Dectin-1受体、IL-17、IL-12基因mRNA的表达量显著高于对照组(P<0.05)。结论 Dectin-1受体、Th1及Th17细胞免疫可能在角膜抵御真菌感染的机制中发挥重要作用。

瑞喹莫德(R848)具有更强的免疫佐剂效应

目的选择目前常用的几种商业化Toll样受体(TLR)配体进行对比,考察各候选物在小鼠体内外诱导增强Th1型细胞免疫反应的特点,为新疫苗佐剂的研究和筛选提供支持。方法TLR配体多肌胞苷酸[poly(I∶C)]、单磷酰脂质A(MPLA)、瑞喹莫德(R848)、含CpG序列寡核苷酸C(CpG-C)体外刺激小鼠树突状细胞(DC),采用ELISA检测细胞上清液白细胞介素12(IL-12)的水平;以卵清蛋白(OVA)为抗原,各TLR配体为佐剂免疫小鼠后,流式细胞术检测引流淋巴结中DC、自然杀伤(NK)细胞比例和表型变化以及CD4^+T细胞、CD8^+T效应细胞比例的变化;ELISA检测免疫小鼠血清中抗OVA抗体IgG2a的浓度。结果在体外实验中,仅CpG-C和R848能显著增强IL-12的分泌。在体内实验中,与其他TLR配体佐剂相比,R848更有效地促进DC和NK细胞向小鼠淋巴结中聚集并诱导CD4^+和CD8^+效应T细胞生成,以及刺激产生大量抗OVA特异性IgG2a。结论与其他免疫佐剂相比,R848更具增强Th1细胞免疫作用。