舒肌汤对左旋多巴诱发帕金森异动症大鼠神经保护作用的实验研究

目的:探讨舒肌汤对左旋多巴(L-dopa)诱导帕金森(PD)异动症大鼠的神经保护作用及机制。方法:SD大鼠单侧注射6-羟基多巴胺(6-OHDA)建立制备PD模型,随后腹腔注射L-dopa、苄丝肼诱导异动症,随机分为模型组、低剂量舒肌汤组(10 g/kg)、中剂量舒肌汤组(20 g/kg)、高剂量舒肌汤组(40 g/kg),同时设立假手术组,每组6只,连续灌胃给药28 d,于治疗的第1、7、14、21、28天进行不自主运动(AIM)评分。治疗结束时,测定大鼠负重单肢跨步数;ELISA测定脑组织MDA、GSH、SOD、IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-10水平,双荧光免疫染色测定CD11b^(+)Iba1^(+)小胶质细胞数量,Western blot测定络氨酸羟化酶(TH)蛋白表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠AIMs评分升高,单前肢跨步数减少,脑组织MDA、IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-10水平升高,GSH、SOD水平降低,CD11b^(+)Iba1^(+)小胶质细胞数量增加,TH蛋白表达减少(均P<0.01)。与模型组比较,治疗第7天后各组大鼠AIMs评分降低;治疗结束时各组大鼠单前肢跨步数增加,脑组织MDA、IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-10水平降低,CD11b^(+)Iba1^(+)小胶质细胞数量增加,TH蛋白表达增加(P<0.05);中、高剂量舒肌汤组大鼠GSH、SOD水平增加(P<0.05)。结论:舒肌汤对L-dopa诱导PD异动症大鼠的症状具有改善作用,其机制可能与抑制小胶质细胞激活下调各类炎性介质释放、减少氧化应激损伤、促进TH蛋白表达有关。

孔圣枕中丹对SHR大鼠前额叶皮质及纹状体TH、DAT蛋白和基因表达的影响

目的探讨孔圣枕中丹对注意缺陷多动障碍(ADHD)动物模型SHR大鼠前额叶皮质、纹状体TH、DAT蛋白和基因表达的影响。方法 90只SHR雄性大鼠分为3批,每批大鼠随机分为3组,分别用孔圣枕中丹、盐酸哌甲酯和生理盐水灌胃28 d,采用免疫组化法、WESTERN BLOT、原位杂交法和荧光定量PCR检测其前额叶皮质、纹状体TH、DAT蛋白和基因的表达。结果 SHR大鼠前额叶皮质及纹状体TH蛋白和基因的表达,孔圣枕中丹组高于盐酸哌甲酯组,盐酸哌甲酯组又高于生理盐水对照组;DAT蛋白和基因的表达孔圣枕中丹组低于盐酸哌甲酯组,盐酸哌甲酯组又低于生理盐水对照组,与对照组比较,P<0.05,有统计学意义。结论孔圣枕中丹可能通过影响调控中枢前额叶皮质-基底神经节环路的DA神经信号传导而治疗ADHD。

重组人MUC1-MBP融合蛋白诱导小鼠Th1活化

目的检测重组MUC1-MBP融合蛋白对小鼠Th1细胞的活化作用。方法通过生物活性法测定MUC1-MBP免疫鼠脾细胞培养上清液中IL-2I、FN和血清中TNF水平;通过免疫组织化学染色法检测CD4+T细胞在肿瘤组织中的浸润。结果MUC1-MBP免疫鼠脾细胞分泌IL-2和IFN及血清TNF水平较对照组明显增高;MUC1-MBP诱导小鼠CD4+T细胞在肿瘤组织中浸润。结论重组人MUC1-MBP融合蛋白可激活小鼠Th1细胞。

荧光法研究牛血清白蛋白与三羟基苯基荧光酮-钼(Ⅵ)配合物探针的作用机理

用荧光光谱法研究了三羟基苯基荧光酮(TH-PF)-钼(Ⅵ)配合物与牛血清白蛋白的结合反应。探讨了TH-PF-Mo(Ⅵ)配合物对蛋白质内源荧光的猝灭机理,并测定了不同温度下的结合常数,温度为25℃时,荧光猝灭法测得该反应的结合常数为K=4.78×104L.mol-1,温度为40℃时,荧光猝灭法测得该反应的结合常数为K=3.72×104L.mol-1。根据F rster非辐射能量转移理论,确定了给体-受体之间的作用距离和能量转移效率(E=0.314),并根据热力学参数确定了TH-PF-Mo(Ⅵ)配合物与牛血清白蛋白之间的作用力类型,以静电引力为主。

家蚕5龄幼虫蛋白质代谢研究初探

家蚕幼虫5龄期间蛋白质含量的变化约为体重变化的3倍,整个蚕体的蛋白质含量在第3和第4天之间有一个明显的突增。分析相应的蛋白水解酶活力变化,发现酶活力呈现先升后降的变化趋势,在第4和第5天时活力达到峰值。进一步提取血液、消化液以及脂肪体蛋白水解酶进行研究,结果表明血液和消化液蛋白水解酶的活力变化与蚕体消化、吸收和转化桑叶蛋白的生理进程基本一致。

兔出血症病毒VP60抗原优势区和Th细胞表位融合蛋白的原核表达及免疫效力测定

为检测兔出血症病毒(RHDV)衣壳蛋白VP60两个抗原优势区串联通用Th细胞表位的融合蛋白AB-Th的免疫效力,本研究采用融合PCR的方法以pBL-RHDV为模板扩增AB-Th基因并亚克隆至原核表达载体pET-30a(+)中,转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株,大量表达AB-Th融合蛋白。结果显示,融合蛋白以包涵体形式表达,并且具有良好的免疫原性。使用纯化后的融合蛋白免疫实验兔,并分别利用ELISA方法和MTS法检测兔免疫后的抗体水平和淋巴细胞增殖能力。结果表明该融合蛋白能够使兔产生针对RHDV VP60蛋白的特异性抗体和导致高水平的淋巴细胞增殖,并能够为实验兔提供100%的保护。

强直性脊柱炎患者外周血单个核细胞干扰素诱导蛋白10及Th1/Th2型细胞因子的表达

目的 探讨干扰素诱导蛋白 10 (IP 10 )在强直性脊柱炎 (AS)发病中的作用。方法 收集肝素抗凝的AS患者的外周全血 ,梯度离心得到外周血单个核细胞(PBMC) ,应用半定量RT PCR法测定IP 10、IFN γ和IL 4mRNA表达水平。结果 AS患者PBMC中IP 10、IFN γ和IL 4mRNA表达水平均较健康对照组高(P <0 0 1) ,同时IFN γ/IL 4值也较对照组高 (P <0 0 5 )。IFN γ和IL 4mRNA表达水平与C 反应蛋白呈负相关 ,IP 10mRNA表达水平与IFN γ、IL 4mRNA和IFN γ/IL 4值均呈正相关。结论 AS患者PBMC表达的细胞因子以Th1型为主 ,IP 10表达升高 ,IP

氯吡格雷治疗非ST段抬高型急性冠脉综合征疗效观察及对hs-CRP,TNF-α的影响

目的:观察氯吡格雷治疗非ST段抬高型急性冠脉综合征(NSTEACS)疗效以及对炎性因子hs-CRP,TNF-α影响.方法:选取NSTEACS患者80例,随机分为观察组和对照组,各40例.对照组首次顿服阿司匹林300mg,而后口服100mg/d.观察组首次顿服阿司匹林和硫酸氢氯吡格雷各300mg,而后口服阿司匹林100mg+硫酸氢氯吡格雷75mg/d.观察两组胸痛症状、心电图及心脏不良事件.分别在用药前、用药后7,30d抽取空腹静脉血,应用散射比浊法和ELISA检测高敏C-反应蛋白(hs-CRP)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)浓度.结果:治疗30d后观察组胸痛症状及心电图的改善情况明显优于对照组(P<0.05);观察组心脏再缺血事件发生率低于对照组.用药后7d,两组患者血清hs-CRP,TNF-α的浓度均降低(P<0.01);用药后30d,两组患者血清hs-CRP,TNF-α的浓度均进一步降低,且观察组hs-CRP和TNF-α的浓度较对照组下降明显(P<0.05).结论:氯吡格雷对NSTEACS具有心血管保护作用,减少心脏事件发生率,并且显著降低炎症因子hs-CRP,TNF-α水平,减轻动脉硬化炎症反应,进而抑制动脉粥样硬化的进展.

核小体Th表位和CTLA4Ig双基因共表达真核表达载体的构建

目的将核小体Th表位与CTLA4Ig融合基因融合,研究CTLA4Ig作为真核表达载体的可行性。方法用touchdownPCR法扩增CTLA4Ig基因,同时引入核小体Th表位(H2B14-28)。将PCR产物连接真核表达载体pcDNA3.1穴+雪,构建pcDNA3.1穴+雪-CTLA4Ig-H2B。将表达质粒转染COS-7细胞,Westernblot检测转染细胞裂解上清中融合蛋白的表达。将构建表达CTLA4Ig-H2B的减毒鼠伤寒沙门氏菌SL7207喂饲BALB/c小鼠,取脾脏进行免疫组化鉴定重组蛋白在动物体内的表达。结果酶切鉴定和基因序列测定显示重组质粒构建成功。在pcDNA3.1穴+雪-CTLA4Ig-H2B质粒转染后48h细胞裂解上清中,检测到CTLA4Ig融合蛋白的表达,该蛋白能与抗人CTLA-4单抗特异结合。重组蛋白在BALB/c小鼠脾脏免疫细胞胞浆中有阳性表达。结论成功构建了能稳定表达核小体Th表位和CTLA4Ig融合基因的真核表达载体。

血清NSE、SF、LDH、CRP检测对儿童神经母细胞瘤疗效及预后的评估的价值

【目的】探讨血清肿瘤标记物与C‐反应蛋白（CRP）等对儿童神经母细胞瘤（NB）疗效评价及预后评估的价值。【方法】对80例确诊为NB患儿的临床资料进行回顾性分析，对比治疗前后，肿瘤进展或复发前后血清神经元特异性烯醇化酶（NSE）、血清铁蛋白（SF）、乳酸脱氢酶（LDH）及CRP水平的变化；比较初诊时早期与晚期NB ，以及不同原发部位的 NB患儿血清 NSE、SF、LDH 及CRP水平的差异；分析血清 NSE与SF、LDH、CRP水平的相关性。【结果】治疗有效后血清NSE、SF、LDH及CRP水平显著降低（ P ＜0．001）；病情进展或复发后血清NSE、SF、LDH及CRP水平明显上升（ P ＜0．05）；晚期NB血清NSE、SF、CRP水平明显高于早期（ P ＜0．05），晚期NB血清LDH高于早期，但无统计学意义（ P ＞0．05）；腹部NB血清NSE、SF、LDH、CRP水平明显高于其他部位 NB（ P ＜0．05）。初诊时血清 NSE＞100μg／L 提示预后不良（ P ＜0．05）。血清NSE与SF（ r＝0．765，P＜0．05）、LDH（ r＝0．472，P＜0．001）、CRP（ r＝0．38，P＜0．001）均呈正相关。【结论】血清NSE对NB的病情监测、疗效评价及预后评估有一定的临床价值。

孔圣枕中丹对自发性高血压大鼠前额叶皮质及纹状体TH、DAT、DRD1、DRD2蛋白和基因表达的影响

目的探讨孔圣枕中丹对注意缺陷多动障碍(ADHD)动物模型——自发性高血压大鼠(SHR)前额叶皮质及纹状体(含伏核)中酪氨酸羟化酶(TH)、多巴胺转运体(DAT)、多巴胺D1受体(DRD1)、多巴胺D2受体(DRD2)蛋白和基因表达的影响。方法将36只SHR雄性大鼠随机分为三组,分别用孔圣枕中丹煎剂、盐酸哌甲酯和生理盐水灌胃28 d,采用免疫组化法和原位杂交法检测其前额叶皮质、纹状体(含伏核)中TH、DAT、DAR1、DRD2蛋白和基因的表达。结果①在SHR大鼠的前额叶皮质:TH的蛋白表达,孔圣枕中丹组(10.10±3.25)高于盐酸哌甲酯组(7.78±2.73),后者又高于生理盐水对照组(4.79±2.53);TH的基因表达,孔圣枕中丹组(23.00±2.10)高于盐酸哌甲酯组(19.26±1.26),后者又高于生理盐水对照组(16.63±3.09);DAT的蛋白表达,孔圣枕中丹组(9.06±1.81)低于盐酸哌甲酯组(14.20±1.19),后者又低于生理盐水对照组(17.57±3.74);DAT的基因表达,孔圣枕中丹组(9.32±1.40)低于盐酸哌甲酯组(16.45±3.23),后者又低于生理盐水对照组(26.28±4.48)。DRD1的蛋白表达,孔圣枕中丹组(14.67±1.49)和盐酸哌甲酯组(11.45±1.42)均低于生理盐水对照组(18.06±2.20);DRD1的基因表达,孔圣枕中丹组(22.54±2.69)和盐酸哌甲酯组(16.47±1.25)均低于生理盐水对照组(38.65±1.10)。DRD2的蛋白表达,孔圣枕中丹组(14.83±1.84)和盐酸哌甲酯组(11.01±1.03)均低于生理盐水对照组(17.83±3.36);DRD2的基因表达,孔圣枕中丹组(14.68±1.03)和盐酸哌甲酯组(11.18±1.01)均低于生理盐水对照组(17.44±2.84)。②在SHR大鼠的纹状体:TH的蛋白表达,孔圣枕中丹组(14.30±3.85)高于盐酸哌甲酯组(9.36±2.59),后者又高于生理盐水对照组(6.30±3.21);TH的基因表达,孔圣枕中丹组(22.92±1.87)高于盐酸哌甲酯组(19.24±0.77),后者又高于生理盐水对照组(16.47±1.19)。DAT的蛋白表达,孔圣枕中丹组(9.78±1.24)低于盐酸哌甲酯组(14.30±2.43),后者又低于生理盐水对照组(17.79±2.39);DAT的基因表达,孔圣枕中丹组(11.75±1.99)低于盐酸哌甲酯组(17.72±2.77),盐酸哌甲酯组又低于生理盐水对照组(30.54±9.08)。DRD1的蛋白表达,孔圣枕中丹组(14.24±2.19)和盐酸哌甲酯(11.22±2.78)组均低于生理盐水对照组(22.10±2.90);DRD1的基因表达,孔圣枕中丹组(17.29±1.27)和盐酸哌甲酯组(14.02±1.55)均低于生理盐水对照组(23.12±2.70)。DRD2的蛋白表达,孔圣枕中丹组(11.05±1.39)和盐酸哌甲酯组(13.83±1.20)均低于生理盐水对照组(16.64±0.72);DRD2的基因表达,孔圣枕中丹组(9.68±1.65)和盐酸哌甲酯组(12.70±0.70)均低于生理盐水对照组(17.15±1.05)。以上差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论孔圣枕中丹可能通过影响调控脑内前额叶皮质-纹状体环路的DA神经信号传导而治疗ADHD。

生长相关蛋白在电针治疗大鼠脊髓损伤中的表达及意义

[目的]探讨生长相关蛋白（Gap-43）在电针治疗大鼠脊髓损伤（SCI）中的变化及意义.[方法]以2个月龄Wistar大鼠（96只）为受试对象,随机分为对照组（A组）、损伤组（B组）、治疗对照组（C组）和电流刺激治疗组（D组）.B、C、D组于T9处行脊髓全横断,D组予电针治疗.用Western-blot测定各组损伤段脊髓中Gap-43不同时相点表达量及其变化,以苏木精-伊红和免疫组化染色对受损脊髓进行形态学观察.[结果]SCI后Gap-43有少量表达,经过电针治疗后,表达显著增多.[结论]Gap-43是SCI后神经纤维再生的重要因子,电针治疗对其表达具有明显的促进作用.

草酸钙肾结石大鼠肾组织Tamm-Horsfall蛋白表达及温肾化石汤调节

目的:研究草酸钙肾结石大鼠肾组织TH蛋白的表达,并用中药温肾化石汤调节,探讨该方防治肾结石复发的作用机制。方法:雄性SD大鼠60只,随机分为对照组、肾结石组、温肾化石汤组,每组各20只,肾结石组和温肾化石汤组以含有0.5%的乙二醇和0.5%的氯化铵的混合溶液致石剂代替饮用水,温肾化石汤组同时每日灌服中药温肾化石汤,二周后处死大鼠,解剖观察肾脏剖面结石形成,并用免疫组织化学法测定肾组织TH蛋白的相对表达量。结果:肾结石组肾脏成石程度最重,与温肾化石汤组比差异显著,对照组肾组织TH蛋白表达最强,其次为温肾化石汤组,肾结石组,三组相比差异显著。结论:TH蛋白可以抑制肾结石形成,中药温肾化石汤可以恢复大鼠肾组织TH蛋白表达量,推测此可能为该方防治肾结石复发的重要作用机制。

塞来昔布短期治疗对冠状动脉支架植入术患者hsCRP的影响

【目的】观察塞来昔布短期治疗对单支单处冠状动脉狭窄行经皮冠状动脉介入治疗(PCI)患者血浆高敏C反应蛋白(hsCRP)的影响,探讨COX2选择性抑制剂与PCI术后炎症的关系。【方法】23名单支单处冠状动脉狭窄患者随机分为两组,治疗组给予常规治疗+塞来昔布400mg/d,对照组给予常规治疗+安慰剂。术前、手术结束时和治疗d3后分别采血,采用透射比浊法测定hsCRP。【结果】①两组手术结束时和术后hsCRP均高于术前hsCRP(P<0.05;P<0.01);②术后治疗d3时,治疗组hsCRP较对照组hsCRP低(P<0.05)。【结论】塞来昔布能使单支单处冠脉病变患者PCI术后血浆hsCRP降低。提示塞来昔布可能减轻PCI术后冠状动脉局部的炎症损伤。

外周静脉血肿瘤异常蛋白检测对乳腺癌患者的疗效监测及评估价值

[目的]探讨外周静脉血肿瘤异常蛋白(TAP)检测对乳腺癌患者的疗效监测及评估效能。[方法]选取本院收治的80例女性乳腺癌患者(乳腺癌组)和同期在本院进行体检的68例健康女性志愿者(对照组),对比乳腺癌组和对照组外周静脉血TAP水平;依据化疗效果将患者分为有效组和无效组,对比有效组和无效组乳腺癌患者的临床资料.采用Logistie回归分析法分析乳腺癌患者治疗效果的影响因素;采用受试者工作特征曲线(ROC)分析外周静脉血TAP对乳腺癌患者治疗效果的评估价值。[结果]乳腺癌组治疗前TAP水平高于对照组,且差异有显著性(P<0.05);乳腺癌患者化疗总有效率为48.75%(39/80);无效组临床分期Ⅲ、低分化、有淋巴结转移、雌激素受体阳性、孕激素受体构成比及治疗后TAP水平高于有效组,且差异有显著性(P<0.05).无效组TAP下降率低于有效组(P<0.05);Logistic回归分析结果显示:临床分期、分化程度、淋巴结转移、TAP下降率均是影响乳腺癌患者治疗效果的影响因素(P<0.05);ROC分析显示:TAP评估乳腺癌患者治疗效果的最佳截断点为15.59%,灵敏度为73.17%,特异度为82.05%,曲线下面积(AUC)值为0.811。[结论]乳腺癌患者中外周静脉血TAP异常偏高,且乳腺癌患者治疗前后TAP水平变化与其治疗效果有关,其可用于对乳腺癌患者的疗效监测及评估。

IP-10对变应性接触性皮炎小鼠Th1/Th2型细胞因子表达的影响

目的:探讨干扰素诱导蛋白10(IP-10)对变应性接触性皮炎(ACD)小鼠体外培养淋巴细胞分泌Thl/Th2型细胞因子表达的影响,进一步探讨变应性接触性皮炎的发病机制。方法:建立ACD小鼠模型,分离纯化小鼠脾淋巴细胞,并和不同浓度的IP-10共培养,RT-PCR法检测与IP-10共同培养的小鼠脾淋巴细胞中IFN-γ及IL-4 mRNA水平,2-△△CT法分析结果。结果:IP-10高、中浓度组体外培养的ACD小鼠淋巴细胞IFN-γmRNA的表达明显高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.01和P<0.05),IP-10低浓度组体外培养的ACD小鼠淋巴细胞IFN-γmRNA的表达与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。IP-10 3个浓度组之间比较,IFN-γmRNA表达差异均具有统计学意义(P<0.01和P<0.05);IP-10 3个浓度组之间及与对照组比较,体外培养的ACD小鼠淋巴细胞IL-4 mRNA的表达差异均无统计学意义(P﹥0.05)。结论:IP-10可诱导IFN-γ生成增多,促使T细胞向Th1细胞趋化,使Thl/Th2分化失衡,促进了变应性接触性皮炎的发生发展。

整合素α5和caspase 3在肝细胞癌中的表达情况及意义

【目的】探讨整合素α5和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(caspase 3)在肝细胞癌(HCC)中的表达及其临床意义。【方法】收集2015年1月至12月40例在本院实施手术切除并经病理确诊为HCC病例的癌组织石蜡标本以及癌旁组织标本?备行免疫组织化学检查整合素α5、caspase 3于HCC中的表达情况;收集2016年1月至12月期间选择实施手术切除的HCC患者30例的新鲜HCC组织和对应的癌旁组织,备行荧光定量RTPCR和蛋白质印迹法检测整合素α5、caspase3的mRNA表达。【结果】肝癌组织中整合素α5表达率显著高于,caspase 3的阳性表达率低于癌旁组织(P<0.05);40例HCC患者的整合素α5蛋白质表达与TNM分期和肿瘤转移密切相关(P<0.05),caspase 3的蛋白质表达与HBsAg、TNM分期、肿瘤转移密切相关(P<0.05);肝癌组织中整合素α5和caspase 3的表达具有负相关性(P<0.05);肝癌组织中的整合素α5mRNA相对表达量明显高于癌旁组织,caspase 3 mRNA低于癌旁组织(P<0.05)。【结论】整合素α5与caspase 3呈负相关表达,其可能在肝癌细胞的凋亡期间进行参与,但它们对于肝癌细胞失巢凋亡的作用机制需要进一步的深入研究。

亚低温治疗对重症高血压脑出血患者血清IL-6及CRP的影响

【目的】探讨亚低温治疗对重症高血压脑出血患者血清白介素6（IL-6）及C反应蛋白（CRP）水平的影响。【方法】选取2011年1月至2015年6月本院收治的118例重症高血压脑出血患者。采用随机数字表法将其分为观察组和对照组，每组各59例。两组患者均行开颅血肿清除＋去骨瓣减压术，术后均给予常规治疗，观察组辅以亚低温治疗。治疗前及治疗d1、d3、d7检测两组血清IL6及CRP水平；治疗30d进行疗效评价；治疗3个月后进行格拉斯哥预后分级（GOs）。【结果】两组血清IL-6及CRP水平比较均无显著性差异（P〉0．05），观察组患者治疗后血清IL-6及CRP水平均显著降低（P〈0．05）；且d3、d7血清IL-6及CRP水平均显著低于对照组，差异具有统计学意义（P〈0．05）；对照组治疗d1、d7血清CRP水平显著低于治疗前，差异具有统计学意义（P〈0．05）。观察组总有效率为69．49％显著高于对照组50．85％，差异有显著性（P〈0．05）。观察组预后明显优于对照组。【结论】亚低温辅助治疗高血压脑出血，可降低患者血清IL-6及CRP水平，改善患者预后，值得临床推荐。

雷公藤多苷片对难治性肾病综合征患者血脂、尿蛋白肾组织KIM-1以及尿TH糖蛋白影响研究

目的:探究雷公藤多苷片对难治性肾病综合征患者血脂、尿蛋白肾损伤分子1(KIM-1)水平以及尿TH糖蛋白的影响。方法:选取我院肾内科收治的难治性肾病综合征患者187例,采用双盲法将其分为两组。对照组83例,予西医常规治疗;实验组104例,予以口服雷公藤多苷片治疗。观察患者治疗前后血脂、尿蛋白、肾组织KIM-1的变化情况。结果:1治疗后,实验组总胆固醇、甘油三酯以及尿蛋白显著低于对照组(P<0.05);2治疗后,实验组患者肾损伤分子1含量均显著低于对照组(P<0.05);3治疗后,实验组患者的尿TH糖蛋白含量显著低于对照组(P<0.05)。结论:雷公藤多苷片可有效降低难治性肾病综合征患者血脂、尿蛋白以及肾损伤分子1,对一般激素治疗无效的难治性肾病综合征患者治疗效果显著、见效快,值得临床广泛推广。

pCDR1 Th表位和CTLA4Ig双基因共表达真核表达载体的构建

目的构建能稳定表达pCDR1 Th表位和CTLA4Ig融合基因的真核表达载体,探讨其在小鼠体内的表达并对表达产物进行鉴定。方法用Touchdown PCR法扩增CTLA4Ig基因,同时引入pCDR1Th表位。将PCR产物连接真核表达载体pcDNA3.1(+),构建pcDNA3.1(+)-CTLA4Ig-pCDR1。将构建表达CTLA4Ig-pCDR1减毒鼠伤寒沙门菌SL7207喂饲BALB/c小鼠,取脾脏进行免疫组化鉴定重组蛋白在动物体内的表达。结果酶切鉴定和基因序列测定显示重组质粒构建成功。重组蛋白在BALB/c小鼠脾脏免疫细胞胞浆中有阳性表达。结论成功构建了能稳定表达pCDR1 Th表位和CTLA4Ig融合基因的真核表达载体。