复方五味子素B逆转人结肠癌细胞THC-8307/OXA多药耐药性机制研究

目的研究复方五味子素B对耐奥沙利铂人结肠癌细胞(TH C-8307/O X A)多药耐药性的逆转作用及其机制。方法采用噻唑蓝(M TT)比色法检测奥沙利铂(O X A)和复方五味子素B(γSC)的细胞毒性;碱性磷酸酶免疫组织化学法和W estern blot检测γSC对TH C-8307/O X A细胞G ST-п蛋白水平的影响。结果γSC(6.0、12.5和25.0μg/m L)对人结肠癌细胞(TH C-8307)和耐奥沙利铂人结肠癌细胞(TH C-8307/O XA)无显著毒性作用(P>0.05),O X A对TH C-8307的IC 50为0.06μg/m L,而对TH C-8307/O X A的IC 50为2.32μg/m L,TH C-8307/O X A是TH C-8307对O X A耐药的39倍,γSC(6.0、12.5和25.0μg/m L)能使O X A对TH C-8307/O X A细胞的IC 50从2.32μg/m L依次下降至0.370、0.128和0.057μg/m L,逆转倍数分别为6.2、18.1和40.7倍。碱性磷酸酶免疫组织化学法和W estern blot检测γSC(12.5μg/m L)处理48 h后,TH C-8307/O X A细胞G ST-п蛋白表达明显降低。结论γSC具有逆转耐奥沙利铂人结肠癌细胞的M D R作用,其作用机制与下调G ST-п表达有关。

黄连素对人结肠癌细胞株THC-8307奥沙利铂耐药性的影响

目的探讨黄连素对人结肠癌细胞株THC-8307奥沙利铂(OXA)耐药性的影响。方法(1)人结肠癌细胞株THC-8307和耐OXA结肠癌细胞株THC-8307/OXA均分为空白对照组、黄连素5μg/mL组、黄连素10μg/mL组、黄连素20μg/mL组进行实验,除空白对照组(不加入任何药物)外,各组加入相应浓度的黄连素进行干预。干预48 h后,观察各组细胞形态并检测各组细胞存活率。(2)THC-8307细胞和THC-8307/OXA细胞均分为OXA对照组、黄连素5μg/mL+OXA组、黄连素10μg/mL+OXA组、黄连素20μg/mL+OXA组进行实验,给予相应的药物进行干预48 h后,观察各组细胞形态,检测各组细胞存活率,并计算各组的半数抑制浓度(IC 50)及逆转倍数。结果(1)空白对照组、黄连素5μg/mL组、黄连素10μg/mL组、黄连素20μg/mL组的THC-8307细胞和THC-8307/OXA细胞形态和生长状态无明显差异,各组细胞存活率比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。(2)在THC-8307细胞中,OXA对照组、黄连素5μg/mL+OXA组、黄连素10μg/mL+OXA组、黄连素20μg/mL+OXA组的细胞形态、生长状态、存活率均无差异。在THC-8307/OXA细胞中,OXA对照组、黄连素5μg/mL+OXA组、黄连素10μg/mL+OXA组、黄连素20μg/mL+OXA组的细胞存活率依次降低,各黄连素组的IC 50低于OXA对照组,而逆转倍数高于OXA对照组(均P<0.05)。结论黄连素可逆转耐OXA结肠癌细胞株THC-8307/OXA的耐药性,从而提高OXA对细胞的抑制作用。

下调REV3通过激活p53诱导结肠癌细胞THC-8307凋亡

目的利用RNA干扰(RNA interference,RNA i)技术下调结肠癌细胞THC-8307中REV3表达,观察细胞凋亡并探讨p53在该凋亡过程中的作用。方法以人高分化结肠癌细胞系(THC-8307)为研究对象,进行REV3及p53干扰质粒的转染。通过实时荧光定量PCR技术(qRT-PCR)和免疫荧光技术检测干扰效率。利用流式细胞仪检测细胞凋亡率,以qRT-PCR和Western blot检测各组p53的表达量。同时,对REV3及p53进行两质粒共转染实验,同时下调REV3和p53后两组细胞的凋亡率。结果下调REV3诱导THC-8307细胞早期凋亡率和晚期凋亡率明显增加(P<0.01),且实验组p53表达量明显增高;REV3-p53同时下调与REV3单独下调相比,细胞凋亡率明显减低。结论下调REV3通过激活p53诱导结肠癌细胞THC-8307凋亡。

复方五味子素B对人结肠癌细胞多药耐药性逆转作用及其机制研究

目的:研究复方五味子素B(γSC)对耐奥沙利铂人结肠癌细胞(THC-8307/OXA)多药耐药性的逆转作用及作用机制。方法:采用噻唑蓝(MTT)比色法检测奥沙利铂(OXA)和γSC的细胞毒性;碱性磷酸酶免疫组织化学法和Western blot检测γSC对THC-8307/OXA细胞GST-п蛋白水平的影响。结果:γSC(6.0,12.5,25μg·ml^(-1))对人结肠癌细胞(THC-8307)和THC-8307/OXA无显著毒性作用(P>0.05),OXA对THC-8307的IC_(50)为0.06μg·ml^(-1),而对THC-8307/OXA的IC_(50)为2.32μg·ml^(-1),THC-8307/OXA较THC-8307耐药性提高39倍,γSC(6.0,12.5,25μg·ml^(-1))能使OXA对THC-8307/OXA细胞的IC_(50)从2.32μg·ml^(-1)依次下降至0.370,0.128,0.057μg·ml^(-1),逆转倍数分别为6.2,18.1,40.7倍。碱性磷酸酶免疫组织化学法和Western blot检测γSC(12.5μg·ml^(-1))处理48 h后,THC-8307/OXA细胞GST-п蛋白表达明显降低(P<0.01)。结论:γSC具有逆转耐奥沙利铂人结肠癌细胞的MDR作用,其作用机制与下调GST-п表达有关。

复方五味子素B对人结肠癌耐奥沙利铂细胞株THC-8307/OXA的逆转作用及其机制的研究

目的:研究复方五味子素B对结肠癌耐药细胞株THC-8307/OXA的逆转作用及其作用机制。方法:采用MTT比色法检测奥沙利铂(OXA)和复方五味子素B(γSC)的细胞毒性;碱性磷酸酶免疫组织化学法和Western blot检测γSC对THC-8307/OXA细胞MRP1蛋白水平的影响。结果:γSC(6.0,12.5,25mg·L-1)对人结肠癌细胞(THC-8307)和耐奥沙利铂人结肠癌细胞(THC-8307/OXA)无显著毒性作用,OXA对THC-8307的IC50为0.06mg·L-1,对THC-8307/OXA的IC50为2.32mg·L-1,THC-8307/OXA较THC-8307对OXA耐药39倍,γSC(6.0,12.5,25mg·L-1)能使OXA对THC-8307/OXA细胞的IC50从2.32mg·L-1依次下降至0.370,0.128,0.057mg·L-1,逆转倍数分别为6.2,18.1,40.7倍。碱性磷酸酶免疫组织化学法和Western blot检测γSC(12.5mg·L-1)处理48h后,THC-8307/OXA细胞MRP1表达明显降低。结论:γSC具有逆转耐奥沙利铂人结肠癌细胞的MDR作用,其作用机制与下调MRP1表达有关。