噻替派(Thiotepa)滴眼液对人癌细胞和正常细胞的细胞毒作用

目的了解0.05%Thiotepa滴眼液对各种不同的人癌细胞和正常细胞生长的影响。方法采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法进行体外细胞毒试验,测定Thiotepa滴眼液对人癌细胞和正常细胞的生长抑制作用,以半数抑制浓度(IC50值)进行评价。结果Thiotepa滴眼液在50μg/ml～0.78μg/ml浓度下对人癌细胞Glc-82、K-562、Bel-7402、Hela和CNE2的IC50值依次为:22.7μg/ml、10.6μg/ml、15.3μg/ml、11.2μg/ml和9.6μg/ml。对人正常细胞Hk-293、ECV-304、HRPE、Fibro和小鼠3T3细胞的IC50值分别为:1.4μg/ml、12.5μg/ml、17.8μg/ml、36.6μg/ml和14.4μg/ml。结论Thiotepa滴眼液对各种细胞有明显的生长抑制作用;0.05%Thiotepa滴眼液对各种人癌细胞和正常细胞均有强的细胞毒作用,且对人癌细胞无明显的选择性抑制作用。

原发中枢神经系统淋巴瘤患者的临床特征及预后分析

目的:探讨原发中枢神经系统淋巴瘤(PCNSL)患者的临床特征及预后。方法:回顾性分析2015年1月至2022年9月在本院收治的46例新诊断PCNSL患者的临床特征、治疗方案与预后的关系。运用Fisher确切概率法分析不同亚组临床资料的差异,采用Kaplan-Meier生存曲线分析不同治疗方案患者的总生存率(OS)和无进展生存率(PFS),并分析影响患者生存的影响因素。结果:46例PCNSL患者病理类型均为弥漫大B细胞淋巴瘤,其中男性26例(56.5%),女性20例(43.5%),中位年龄为54(17-71)岁。Hans分型中,GCB亚型14例(30.4%),non-GCB亚型32例(69.6%),Ki-67≥80%者32例(69.6%)。36例完成至少2疗程治疗并有随访资料的患者,2疗程后疗效评估:完全缓解(CR)率为47.2%、总缓解率(ORR)为63.9%,其中达完全缓解17例,部分缓解(PR)6例,1年PFS率与1年OS率分别为73.6%和84.9%,2年PFS率及2年OS率分别为52.2%和68.9%。17例以RMT方案治疗的患者ORR为76.5%(13/17),CR率为52.9%(9/17)。对以RMT(利妥昔单抗/甲氨蝶呤/替莫唑胺)方案、RM-BTKi(利妥昔单抗/甲氨蝶呤/BTK抑制剂)方案与RM-TT(利妥昔单抗/甲氨蝶呤/塞替派)方案作为一线治疗的3组患者进行单因素分析显示,脑深部浸润与PCNSL患者不良PFS相关(P=0.032),治疗方案与不良OS相关(P=0.025)。结论:PCNSL患者脑深部浸润是PFS的不良预后因素,治疗方案对OS有影响。新药BTKi的加入能够延长复发/难治PCNSL患者的总生存期,在高危患者的一线治疗中显示出其良好的耐受性及治疗潜力。

TBM预处理方案自体造血干细胞移植治疗高危神经母细胞瘤患儿疗效分析

目的研究TBM[即塞替派(thiotepa)+白舒菲(busulfan)+美法伦(melphalan)]预处理方案自体造血干细胞移植治疗高危神经母细胞瘤患儿的临床疗效。方法选取2021年11月5日至2022年9月8日于新疆维吾尔自治区人民医院血液病科移植中心接受TBM预处理自体造血干细胞移植患儿7例为研究对象,评估造血重建情况及移植相关不良反应。分析7例高危神经母细胞瘤患儿临床疗效和疗效相关指标,以及随访结果和治疗前后的营养指标。结果患儿治疗后及末次随访不同时期的临床疗效比较,差异无统计学意义(P>0.05)。7例高危神经母细胞瘤患儿中位年龄6.2岁(2~13岁),所有患儿均移植回输前期采集冻存自体干细胞,中位计数单个核细胞(MNC)为12.17×10^(8)/kg[(8.65~28.81)×10^(8)/kg],CD34^(+)为4.15×10^(6)/kg[(2.11~13.12)×10^(6)/kg]。所有患儿均获得造血重建,中性粒细胞中位植入时间为11 d(9~18 d),血小板植入时间为16 d(13~31)d。随访期间所有患儿均存活,其中发生Ⅲ级以上黏膜炎4例,发生率为51.7%;发生Ⅲ~Ⅳ级呕吐腹泻等胃肠道不良反应5例,发生率为71.4%;发生药物性肝损伤2例,发生率为28.5%;未见神经系统、肾脏以及肝窦隙阻塞综合征等预处理相关毒性反应。患儿治疗前后的前白蛋白(PAB)、清蛋白(ALB)及血红蛋白(Hb)等营养指标比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论TBM方案用于高危神经母细胞瘤患儿自体造血干细胞移植预处理中的疗效较佳,且不良反应常见可控,然而仍需进一步扩大病例数临床验证。

多西他赛联合塞替派与多西他赛联合卡培他滨治疗转移性乳腺癌的随机、对照临床研究

目的：比较多西他赛联合塞替派方案和多西他赛联合卡培他滨方案治疗转移性乳腺癌的临床疗效及其安全性。方法：选择北京大学临床肿瘤学院乳腺肿瘤内科2006年8月至2008年9月收治的女性乳腺癌患者共46例,采用多西他赛联合塞替派（A组）或卡培他滨（B组）方案进行随机、对照临床治疗试验,A组第1、8天多西他赛35 mg/m2静脉滴注,第1天塞替派60-65 mg/m2静脉滴注,B组第1、8天多西他赛35 mg/m2静脉滴注,第1-14天卡培他滨1 000 mg/m2,口服,每日2次。21 d为1个周期,至少应用2个周期。结果：多西他赛联合塞替派组22例,多西他赛联合卡培他滨组24例,两组患者基线情况一致。可评价疗效多西他赛联合塞替派组21例,多西他赛联合卡培他滨组22例。两组疗效分别为部分缓解9.52%vs.27.27%（2/21例,6/22例）,稳定52.38%vs.31.82%（11/21例,7/22例）,进展38.10%vs.40.91%（8/21例,9/22例）,疾病控制率分别为61.90%vs.59.09%（13/21例,13/22例）,中位无进展生存期分别为7.9个月（95%CI0.77-15.03）vs.8.3个月（95%CI4.01-12.59）,1年生存率分别为88.2%vs.81%,P值均〉0.05,每两组间差异无统计学意义。无化疗相关死亡病例。多西他赛联合塞替派组和多西他赛联合卡培他滨组最常见的不良反应为骨髓抑制,主要不良反应Ⅲ-Ⅳ度发生率分别为白细胞减少45.45%vs.26.09%,中性粒细胞减少45.45%vs.21.74%,血小板减少9.09%vs.0%,手足综合征0%vs.13.04%,P值均〉0.05,每两组间差异无统计学意义。结论：多西他赛联合塞替派方案治疗转移性乳腺癌有一定近期疗效,不良反应可耐受,可以作为经济、有效的解救方案。

塞替派诱发永生化人支气管上皮细胞的恶性转化(一)

目的 研究塞替派对人类支气管上皮细胞的致癌转化效应。方法 利用永生化人支气管上皮细胞(BEAS 2B)为靶细胞模型 ,以塞替派诱导BEAS 2B细胞的恶性转化 ,并伴随研究了塞替派转化细胞 (EBAS TE)的增殖动力学、细胞周期和锚着独立生长能力等转化表型特征。结果 经传代和软琼脂培养基筛选 ,BEAS TE具有较为稳定的转化表型和细胞生物学特性。结论 塞替派对人支气管上皮细胞具有较强的恶性转化效应。

环磷酰胺及塞替派诱导人支气管上皮细胞恶性转化的超微结构

为了解抗癌化疗药环磷酰胺 (CP)及塞替派(TE)诱导的永生化人支气管上皮细胞恶性转化过程中的细胞超微结构的动态变化 ,采用透射电镜方法观察的细胞模型由对照永生化人支气管上皮细胞(BEAS- 2 B) ,受环磷酰胺 (BEAS- CP)和塞替派(BEAS- TE)诱导的恶性转化细胞组成 .发现经 CP和 TE暴露的细胞可出现细胞死亡 ,凋亡和转化 ,它们具有各自的超微结构特征 .说明逃逸细胞死亡 ,凋亡的支气管上皮基细胞呈增生性改变 。

环磷酰胺及塞替派诱导的人支气管上皮恶性转化细胞的细胞周期相关蛋白表达

目的 了解细胞周期调控系统各正、负调节因子在细胞发生恶性转化过程中的变化情况。方法 采用免疫组化技术分别检测了经环磷酰胺(CP)和塞替派 (TEPA)诱导永生化人支气管上皮细胞 (BEAS 2B)发生恶性转化的BEAS CP和BEAS TE细胞中P5 3、P16、P15、细胞周期蛋白 (cyclin)D1和RB蛋白的表达。结果 BEAS 2B细胞中表达阳性的P16、P15及RB蛋白 ,在BEAS CP和BEAS TE细胞中表达缺失 ;BEAS 2B细胞中检测呈阴性的P5 3蛋白 ,在BEAS CP和BEAS TE细胞中呈阳性 ;cyclinD1蛋白在 3株细胞中检测均为阳性。结论 转化细胞中P16、P15及RB蛋白的表达异常可能影响了细胞周期中P16 (P15 ) /cyclinD1 CDK4 /pRB调控途径的自稳平衡。两转化细胞P5 3蛋白的阳性表达提示转化细胞P5 3蛋白的功能已发生改变。

斜纹夜蛾化学不育研究初报

选用塞替派注射液做雄性不育剂,氟脲嘧啶注射液作雌性不育剂;采用成虫饲喂法致不育;利用2种不育剂单独饲喂或混合饲喂,然后合笼配合交配的办法;以校正不育卵率作为评价指标,进行了2种不育剂对斜纹夜蛾的不育作用研究。结果表明:在室内条件下0.01%塞替派饲喂雄蛾,0.02%塞替派饲喂雄蛾,0.01%塞替派、0.025%氟脲嘧啶分别饲喂雄雌蛾,及0.01%塞替派和0.025%氟脲嘧啶混合饲喂雌雄蛾,平均校正不育卵率均在96%以上;0.025%氟脲嘧啶饲喂雌蛾平均校正不育卵率为86.59%;雌蛾第一次能否与不育雄蛾交配,是影响雄性不育效果的关键因素;0.01%塞替派饲喂雄蛾交配竞争力略低于正常雄蛾。

2周期大剂量化疗联合自体外周血干细胞移植治疗转移性乳腺癌的临床疗效观察

目的 观察2周期大剂量化疗方案联合自体外周血干细胞移植(D HDC )治疗转移性乳腺癌的疗效及其安全性。方法 将2 8例转移性乳腺癌患者分为2个组。D HDC组预处理方案:多西紫杉醇(DXL) 110～13 0mg/m2 +噻替哌(THPA ) 3 0 0～40 0mg/m2 +卡铂(CBP) 65 0～75 0mg/m2 ,预处理后第2天回输外周血干细胞,间隔3～5周重复,共治疗2个周期;S HDC组预处理方案:DXL 110～13 0mg/m2 +THPA 3 5 0～45 0mg/m2 +CBP 75 0～95 0mg/m2 ,预处理后第2天回输外周血干细胞,治疗1个周期。分别评价2组肿瘤客观缓解率和治疗相关的不良反应。结果 D HDC组和S HDC组的客观缓解率分别为66.7% (10 /15 ) ,5 4.5 % (6/11) ;2组白细胞毒性相近,但D HDC组血小板毒性较低,Ⅲ～Ⅳ度发热,恶心呕吐,腹泻和黏膜炎的发生例数较少。结论 D HDC治疗转移性乳腺癌客观缓解率较高,血小板毒性较轻,Ⅲ～Ⅳ度非血液学毒性发生例数较少,患者耐受性良好。

塞替派诱发人支气管上皮恶性转化成瘤细胞的生物学特性

目的 为进一步阐明化学致癌剂的作用机制提供实验依据。方法 利用原代细胞培养,细胞免疫化学分析获得并鉴定恶性转化成瘤细胞,以BEAS 2B细胞和BEAS STE细胞为参照,研究恶性转化成瘤细胞的增殖动力学和锚着独立生长能力等表型特征。结果和结论 经原代细胞培养获得可传代的具人类上皮来源的恶性转化成瘤细胞。

塞替派诱发人支气管上皮恶性转化成瘤细胞的染色体畸变

目的 旨在了解转化细胞在成瘤过程中的细胞遗传学改变。方法 运用染色体G显带技术研究永生化人支气管上皮细胞 (BEAS 2B)恶性转化后的裸小鼠接种成瘤细胞 (BEAS TT)的染色体畸变。结果 瘤细胞在传代早期基本以近二倍体细胞为主 ,随着细胞代龄的增加 ,各肿瘤细胞系的细胞染色体数目变化趋势不同 ,其中BEAS TTa逐渐形成以多倍体细胞为主的细胞群 ,而BEAS TTb ,BEAS TTc则以近二倍体细胞为主份额细胞。核型分析表明 3个瘤细胞系的核型与BEAS TE不同 ,在其基础上有新的染色体 (14号染色体 )丢失和标记染色体 (M4 )的增加。结论 细胞染色体数目不稳定 ,14号染色体的丢失和M4染色体的增加 ,可能与BEAS

塞替派、环磷酰胺诱发的人支气管上皮恶性转化细胞的致瘤性

目的 观察塞替派 (TE)及环磷酰胺 (CP)能否诱发永生化人支气管上皮恶性转化细胞成瘤。方法以永生化人支气管上皮细胞 (BEAS 2B)为对照 ,以TE诱发转化细胞 (BEAS TE)的琼脂糖克隆扩增细胞(BEAS STE)及CP诱发转化细胞 (BEAS CP)的琼脂糖克隆扩增细胞 (BEAS SCP)为靶细胞接种于 3～ 4周龄裸鼠 ,每组接种 6只 ,♂♀各半。结果 接种后2 6周 ,对照组无一长出肿瘤 ,BEAS STE组有 5只长出肿瘤 ,BEAS SCP组有 1只长出肿瘤 ,其中BEAS STE组有 3只裸鼠的肿瘤直径在 1cm以上。经病理组织形态和免疫组织化学检查证实肿瘤为低分化癌肉瘤组织。结论 TE、CP诱发恶性转化的人支气管上皮转化细胞均具有裸鼠致瘤性。

环胞霉素A和噻替哌预防翼状胬肉术后复发

目的:评价环胞霉素A和噻替哌滴眼剂降低翼状胬肉术后复发率的效果。方法:50例(50只眼)翼状胬肉患者随机分为两组行翼状胬肉单纯切除术,一组术后局部滴用1％环胞霉素A滴眼剂,另一组术后局部滴用0.05％噻替哌滴眼剂。结果:平均随访10个月,环胞霉素A组有一例复发(复发率5％),噻替哌组有3例复发(复发率10％),均比单纯翼状胬肉切除术术后复发率(30％～88％)明显降低。结论:环胞霉素A和噻替哌可以抑制翼状胬肉切除术后胬肉组织增生,降低复发率。眼科学报1999;15:91—92。

环磷酰胺或塞替派诱导人支气管上皮细胞恶性转化的形态计量学

以永生化人支气管上皮细胞 (BEAS- 2 B)分别受环磷酰胺 (BEAS- CP) ,塞替派 (BEAS- TE)暴露并发生转化的细胞为模型 ,对转化细胞进行形态计量学研究 ,期望寻找人类上皮细胞恶性转化的形态计量指标 .结果表明 :BEAS- 2 B经两种药物处理后可生成转化型和非转化型细胞集落 .转化细胞的形态计量参数中 ,细胞和细胞核面积 ,最大直径 ,最小直径 ,等效直径 ,形状因子的数值按 BEAS- 2 B,BEAS- CP,BEAS- TE的组序递升 .表达细胞形态为异形的指标 :细胞和细胞核异形指数 ,核浆比则沿BEAS- 2 B,BEAS- CP,BEAS- TE的顺序递减 .结果提示 。

环磷酰胺及塞替派诱导的人支气管上皮恶性转化细胞的p16^(INK4a)及p15^(INK4b)基因突变

目的 了解环磷酰胺 (CP)和塞替哌 (TEPA)诱导永生化人支气管上皮细胞 (BEAS 2B)的恶性转化株内BEAS CP和BEAS TE细胞p16和p15基因的突变情况。方法 采用聚合酶链反应 (PCR)、聚合酶链反应 单链构象多态性分析 (PCR SSCP)及DNA序列分析技术。结果 BEAS CP细胞p15基因的外显子 1和外显子 2都出现了异常带型。BEAS TE细胞p16基因的外显子 1及外显子 2a出现了异常带型和迁移率滞后现象 ;p15基因外显子 1的 2条单链带之间出现异常条带。DNA序列分析发现BEAS CP细胞的p15基因外显子 1的 182位有C的插入 ,2 0 6位有G的插入 ;外显子 2的第 30 8位密码子有C→T(TCC→TTC)转换 (Ser→Phe) ,第 32 7位密码子有T→A(AAT→AAA)颠换 (Asn→Lys)。BEAS TE细胞的p16基因外显子 2a的第 12 5位密码子有G→A(CGC→CAC)转换 (Arg→His)。结论 p15基因在CP诱导BEAS 2B发生恶性转化的过程中发挥了重要作用。在TEPA诱导BEAS 2B细胞发生恶性转化的过程中可能涉及了p16基因的失活。

塞替派诱发人支气管上皮细胞恶性转化过程中的基因突变(二)

目的 观察抗癌药物塞替派诱发永生化人支气管上皮细胞恶性转化过程中相关基因的突变并分析其意义。方法 以塞替派作为致癌原诱导永生化人支气管上皮细胞 (BEAS 2B) ,获得转化细胞 (BEAS TE)和克隆化多倍体癌前转化细胞 (BEAS STE)。采用PCR SSCP法检测上述 3种细胞p5 3、p16和Ki ras 3种基因是否出现点突变 ,进一步测序确定其突变情况。结果 SSCP结果阳性的有BEAS TE细胞p5 3第 7外显子 ,BEAS STE细胞p5 3第8外显子以及这二种细胞的p16基因第 1外显子 ;Ki ras基因第 1外显子的结果仅为可疑阳性。测序证明 ,p5 3、Ki ras基因存在多位点的碱基突变 ,而p16基因仅为单位点的碱基突变。结论 塞替派可诱发人支气管上皮细胞p5 3、Ki ras多位点的碱基突变和p16的单位点突变。分析前者为塞替派诱导细胞转化过程中发生的重要分子事件 。

环磷酰胺、噻替哌诱发人支气管上皮细胞的染色体畸变

目的与方法 :以永生化人支气管上皮细胞 (BEAS - 2B)受环磷酰胺、噻替哌诱导并发生癌性转化的细胞为模型 ,运用染色体G—显带技术 ,观察环磷酰胺、噻替哌的遗传毒作用引起的细胞转化过程中的染色体动态畸变。结果 :BEAS - 2B细胞染色体众数 46条 ,近二倍体 ,核型稳定 ,携带有M1,M2 ,M3三个标志染色体。环磷酰胺转化细胞 (BEAS -CP)为二倍体核型 ,丢失了 1个 14号染色体 ,增加了M 4异常染色体 ,该畸变可能与细胞转化的始动 ,促进和进展有关。噻替哌转化细胞 (BEAS-T)在培养过程中渐趋多倍体细胞 ,15代以后部分细胞的 14和 2 1号染色体各丢失 1条 ,BEAS -T 2 3代在软琼脂上形成克隆的细胞 (BEAS -ST)是多倍体细胞 ,并具有高频率的非稳定性畸变 ,BEAS -T 2 5代时为 3% ,BEAS -ST为 34 % ,多倍体背景上出现 2对巨型三着丝粒染色体。结论

塞替派诱发人支气管上皮恶性转化成瘤细胞的基因突变

目的 旨在了解转化细胞在成瘤过程中的p15 ,p16 ,p5 3和K ras基因编码序列突变情况。方法 运用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)技术和DNA测序技术。结果 转化各阶段细胞p15和K ras基因编码序列为野生型。在转化进程中 ,各转化细胞均携带与细胞永生化有关的p5 3第 4 7密码子CCG→TCG(脯氨酸→丝氨酸 )转换 ,在此基础上无新的错义突变发生。p16基因在BEAS 2B细胞和BEAS STE细胞中均为野生型 ,在BEAS TTb细胞中第 4密码子发生TCG→TAG(丝氨酸→终止密码子 )碱基转换 ,结果为无义突变 ,第 19,5 2密码子分别发生GAG→AAG (谷氨酸→赖氨酸 )转换 ,GCG→ACG(丙氨酸→苏氨酸 )转换的错义突变。BEAS TTc细胞中第 19密码子发生GAG→AAG(谷氨酸→赖氨酸 )转换的错义突变 ,而没有可检测的BEAS TTa细胞的mRNA存在。结论 p16基因的突变或表达缺失与恶性转化细胞的成瘤过程相关。

多西他赛单药及其联合塞替派治疗转移性乳腺癌的疗效比较

【目的】比较多西他赛单药及其联合塞替派对转移性乳腺癌的疗效及其预后。【方法】86例转移性乳腺癌患者，依据化疗方案不同，分为多西他赛治疗组（A组，n=42）和多西他赛＋塞替派组（B组，n=44），比较两组化疗后近期疗效、不良反应和远期生存率。【结果】A组治疗有效率为50％（21／42），临床控制率为80．95％（34／42），B组分别为56．82％（25／44）和90．91％（40／44），两组相比较差异无显著性（P〉0．05）；B组中性粒细胞减少症、贫血症、血小板减少症毒副反应程度较A组严重，且差异有显著性（P〈0．05）；A组无进展生存期为12．64个月，B组为14．26个月，两组比较差异无显著性（P〉0．05）；两组1年、2年肿瘤局控率和生存率比较差异无显著性（P〉0．05）；但A组3年生存率低于B组，且差异有显著性（P〈0．05）。【结论】多西他赛单药或联合塞替派治疗转移性乳腺癌近、远期疗效相当，单用多西他赛化疗虽毒副反应小，但3年生存率低于联合用药组，临床上还需依据患者个体情况制定化疗方案。

高频透热合并膀胱灌注噻替哌预防表浅性膀胱癌复发的疗效观察

目的 评价高频热疗合并膀胱灌注噻替哌 (HTT)在预防表浅性膀胱癌术后复发中的作用。方法 对 1985年 5月至 1997年 5月间应用HTT预防表浅性膀胱癌术后复发 ,并与单独应用噻替哌膀胱灌注化疗 (TT)患者进行随机对照观察 ,两组各 6 8例 ,随访 3～ 15年。结果 136例患者中 12 4例获随访 ,总随访率为 91.2 %。HTT组 2 6例复发 ,复发率为 39.4% ;TT组 47例复发 ,复发率为 81.0 % ,两组相比 ,χ2 =2 2 .11,P <0 .0 1。HTT组首次复发间隔时间为 (5 3.6± 41.2 )个月 ,TT组为 (33.5± 2 8.2 )个月 ,两组相比 ,U =3.2 1,P <0 .0 1。HTT组出现骨髓抑制 14例 (2 1% ) ;TT组为 9例 (16 % ) ,两组相比 ,χ2 =0 .6 6 ,P >0 .0 5。结论 HTT较TT治疗可推迟复发时间 ,降低复发率 ,无明显不良反应 ,可提高患者生存质量。