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茶黄素对ox-LDL诱导的THP-1巨噬细胞泡沫化和氧化应激的影响
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作者 石萌萌 黄锐 +4 位作者 黄子乐 胡军威 肖靖杰 刘艳红 武军驻 《中国动脉硬化杂志》 CAS 2024年第9期747-755,共9页
[目的]探索茶黄素对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的THP-1巨噬细胞泡沫化和氧化应激的影响及机制。[方法]使用50μmol/L茶黄素、10μmol/L核因子E2相关因子2(NRF2)抑制剂ML385预处理THP-1来源的巨噬细胞,随后加入100 mg/L ox-LDL刺激... [目的]探索茶黄素对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的THP-1巨噬细胞泡沫化和氧化应激的影响及机制。[方法]使用50μmol/L茶黄素、10μmol/L核因子E2相关因子2(NRF2)抑制剂ML385预处理THP-1来源的巨噬细胞,随后加入100 mg/L ox-LDL刺激细胞24 h建立泡沫细胞模型。通过CCK-8法和LDH释放量检测茶黄素对THP-1巨噬细胞活力的影响。通过RT-qPCR和Western blot检测炎症因子白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达;ELISA法检测炎症因子的释放。采用油红O染色检测细胞内脂质积累,DiL标记氧化型低密度脂蛋白(DiL-ox-LDL)染色检测脂质摄取,DCFH-DA探针检测活性氧(ROS)水平。通过Western blot和RT-qPCR检测脂质摄取、胆固醇外排及氧化应激相关蛋白的表达。[结果]经100 mg/L的ox-LDL处理,THP-1巨噬细胞活力明显降低,脂质摄取、积累明显增加,脂质摄取相关蛋白表达增加,胆固醇外排相关蛋白表达明显减少,炎症与ROS水平明显增加,髓过氧化物酶(MPO)和NADPH氧化酶2(NOX2)表达增加(P<0.05);加入茶黄素后,细胞活力升高,细胞内脂质积累明显减少,脂质摄取相关蛋白的表达明显减少,胆固醇外排相关蛋白表达明显增多,炎症因子IL-6、IL-1β、TNF-α的表达与释放明显降低,ROS水平降低,MPO与NOX2表达减少(P<0.05)。茶黄素预处理改变了NRF2信号通路中NRF2、血红素加氧酶1(HO-1)、Kelch样ECH关联蛋白1(KEAP1)的表达,增加了NRF2核易位,减缓了细胞内氧化应激。ML385预处理细胞后,NRF2、HO-1、KEAP1和CD36蛋白表达水平明显降低。[结论]茶黄素可以显著抑制THP-1巨噬细胞泡沫化,抑制ox-LDL诱导的THP-1巨噬细胞炎症并通过NRF2/HO-1信号通路减缓了氧化应激。 展开更多
关键词 茶黄素 泡沫细胞 thp-1巨噬细胞 氧化应激
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血红素氧合酶1介导阿托伐他汀在巨噬细胞极化和胆固醇蓄积中的作用 被引量:1
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作者 邓锐 黄科铭 +4 位作者 罗建 陈功 冯健 黄维义 魏刚 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2024年第1期62-67,共6页
背景:研究表明,阿托伐他汀可以上调血红素氧合酶1表达,增强细胞抗炎症及抗氧化损伤能力。但阿托伐他汀是否可以通过诱导血红素氧合酶1表达调控巨噬细胞极化、抑制炎症、减少胆固醇蓄积尚不明确。目的:探讨阿托伐他汀通过诱导血红素氧合... 背景:研究表明,阿托伐他汀可以上调血红素氧合酶1表达,增强细胞抗炎症及抗氧化损伤能力。但阿托伐他汀是否可以通过诱导血红素氧合酶1表达调控巨噬细胞极化、抑制炎症、减少胆固醇蓄积尚不明确。目的:探讨阿托伐他汀通过诱导血红素氧合酶1表达对氧化修饰型低密度脂蛋白刺激的RAW264.7巨噬细胞极化、炎症状态及胆固醇水平的影响和相关机制。方法:先将体外培养RAW264.7细胞随机分为6组,分别给予不同浓度的阿托伐他汀孵育24 h,检测血红素氧合酶1蛋白表达量及细胞活性,摸索阿托伐他汀的最适剂量用于后续研究。另将RAW264.7细胞随机分为对照组、阿托伐他汀组、血红素氧合酶1抑制组,分别用纯培养基、阿托伐他汀20μmol/L及阿托伐他汀20μmol/L+锌原卟啉Ⅸ10μmol/L预先孵育细胞24 h,再加入50 mg/L的氧化修饰型低密度脂蛋白孵育48 h。流式细胞术检测巨噬细胞极化结果;ELISA法检测转化生长因子β、白细胞介素10、白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α等炎症因子的分泌水平;Western blot检测血红素氧合酶1、LC3Ⅱ、LC3Ⅰ、P62、PPARγ、ABCA1的表达量;氧化酶法检测细胞内胆固醇含量并用油红O染色评价胞内脂滴的蓄积程度。结果与结论:①阿托伐他汀可呈剂量依赖性诱导巨噬细胞血红素氧合酶1蛋白表达;②氧化修饰型低密度脂蛋白可诱导巨噬细胞主要向M1极化并分泌促炎因子,增加胞内胆固醇蓄积;③与对照组相比,阿托伐他汀干预后巨噬细胞血红素氧合酶1蛋白表达增加,细胞转向M2型极化且主要分泌转化生长因子β、白细胞介素10等抗炎因子,同时,PPARγ、ABCA1、LC3II/I等反映胆固醇外排及自噬的信号分子表达增加,胞内胆固醇及脂滴含量均显著减少(P﹤0.05);④同步加入锌原卟啉Ⅸ预处理的血红素氧合酶1抑制组则显著逆转了阿托伐他汀组的上述改变;⑤结果表明,阿托伐他汀可能通过上调血红素氧合酶1的表达促进氧化修饰型低密度脂蛋白刺激的巨噬细胞向M2型极化、抑制炎症,并通过上调PPARγ/ABCA1信号通路和增强自噬等增加胞内胆固醇流出,降低细胞内脂质蓄积。 展开更多
关键词 阿托伐他汀 动脉粥样硬化 巨噬细胞极化 泡沫细胞 血红素氧合酶1 自噬 氧化低密度脂蛋白
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不对称二甲基精氨酸上调THP-1来源的巨噬细胞和泡沫细胞内胆固醇酰基转移酶-1的表达(英文) 被引量:2
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作者 朱振东 贾俊琴 +2 位作者 张旋 王庸晋 王殿华 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期2613-2618,共6页
目的观察不对称二甲基精氨酸(ADMA)对单核细胞THP-1来源的巨噬细胞和泡沫细胞中胆固醇酰基转移酶-1(ACAT-1)的表达及胆固醇含量的影响。方法分别采用RT-PCR和Western blot技术检测ACAT-1mRNA和蛋白表达水平。采用酶偶联比色法检测细胞... 目的观察不对称二甲基精氨酸(ADMA)对单核细胞THP-1来源的巨噬细胞和泡沫细胞中胆固醇酰基转移酶-1(ACAT-1)的表达及胆固醇含量的影响。方法分别采用RT-PCR和Western blot技术检测ACAT-1mRNA和蛋白表达水平。采用酶偶联比色法检测细胞内胆固醇含量。结果不同浓度的ADMA(0,3.75,7.5,15,or30μmol/L)对THP-1来源的巨噬细胞和泡沫细胞作用不同时间(6、12、24h)后,巨噬细胞和泡沫细胞内ACAT-1mRNA和蛋白的表达明显上调,细胞内总胆固醇的含量明显升高。结论 ADMA在巨噬细胞形成泡沫细胞过程中可能发挥了重要作用。抑制巨噬细胞和泡沫细胞内ACAT-1可能成为治疗动脉粥样硬化的潜在靶点。 展开更多
关键词 不对称二甲基精氨酸 单核细胞thp-1 巨噬细胞 泡沫细胞 酰基辅酶A 胆固醇酰基转移酶-1
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肥大细胞改变THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞胆固醇含量及抑制胆固醇流出 被引量:3
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作者 赵战芝 杨永宗 +1 位作者 王佐 危当恒 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期1457-1463,共7页
目的:以THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞为研究对象,探讨肥大细胞(MC)对THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞内胆固醇含量、分配和流出的影响及机制。方法:THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞在MC颗粒释放物存在或缺乏下与高密度脂蛋白3(HDL3)共育。高效液相... 目的:以THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞为研究对象,探讨肥大细胞(MC)对THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞内胆固醇含量、分配和流出的影响及机制。方法:THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞在MC颗粒释放物存在或缺乏下与高密度脂蛋白3(HDL3)共育。高效液相色谱检测泡沫细胞内总胆固醇(TC)、游离胆固醇(FC)和酯化胆固醇(EC)含量,用液体闪烁计数器检测细胞内胆固醇流出,运用逆转录聚合酶链反应检测三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)的mRNA水平,采用琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳检测HDL3及apoA-Ⅰ的降解。结果:MC组泡沫细胞内TC、FC明显高于对照组(TC对照组为527.3 mg/g,MC组为917.9 mg/g);EC/TC比值低于对照组(7.6%vs47.5%);细胞内胆固醇流出少于对照组(26.92%±2.6%vs40.98%±3.4%,P<0.05);而泡沫细胞ABCA1的mRNA水平与对照组无明显差异。MC颗粒释放物处理HDL3后,聚丙烯酰胺凝胶电泳结果显示,约有28%的apoA-Ⅰ被降解,在分子量26 kD左右处出现了新的条带,产生了1个26 kD的小多肽。结论:肥大细胞可通过降解HDL3及apoA-Ⅰ抑制细胞内胆固醇流出而增加细胞内胆固醇蓄积,这个作用与ABCA1表达无直接关系。 展开更多
关键词 肥大细胞 thp-1巨噬细胞源性泡沫细胞 胆固醇 脂蛋白类 HDL ATP结合匣式转运体
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仙人掌多糖对THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞胆固醇蓄积及其相关基因表达的影响 被引量:3
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作者 李恒 罗齐军 +1 位作者 卢向阳 曾富华 《湖南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期135-139,共5页
采用PMA和ox–LDL构建THP–1巨噬细胞源性泡沫细胞模型,观察不同浓度(5、10、15 nmol/L)仙人掌多糖(ODP–Ia)对泡沫细胞内脂质、胆固醇蓄积以及介导胆固醇流出的ABCA1、ABCG1、SR–BI基因表达的影响。结果显示:THP–1巨噬细胞泡沫化后... 采用PMA和ox–LDL构建THP–1巨噬细胞源性泡沫细胞模型,观察不同浓度(5、10、15 nmol/L)仙人掌多糖(ODP–Ia)对泡沫细胞内脂质、胆固醇蓄积以及介导胆固醇流出的ABCA1、ABCG1、SR–BI基因表达的影响。结果显示:THP–1巨噬细胞泡沫化后胞内蓄积了大量脂质,高剂量(15 nmol/L)ODP–Ia能够显著减少胞内脂质、胆固醇蓄积,并增强ABCA1、ABCG1、SR–BI m RNA及蛋白表达(与单独ox–LDL处理组比较,P<0.05),但效果均次于阳性对照依折麦布组(P<0.05),低、中剂量(5、10 nmol/L)ODP–Ia作用效果均不显著。本研究结果表明,ODP–Ia可通过增强ABCA1、ABCG1、SR–BI基因表达来减少胞内胆固醇蓄积。 展开更多
关键词 仙人掌多糖 THP–1巨噬细胞源性泡沫细胞 胆固醇蓄积
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THP-1源性巨噬细胞泡沫化过程中肝X受体-α乙酰化修饰改变与SIRT1有关 被引量:1
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作者 张弛 黄靓 +3 位作者 屈顺林 韦星 唐志晗 佘美华 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期25-28,共4页
目的为研究THP-1源性巨噬细胞泡沫化过程中,SIRT1与肝X受体-α是否发生相互作用、肝X受体-α的乙酰化修饰如何改变及其与细胞内胆固醇含量的关系。方法采用体外培养的THP-1细胞构建泡沫细胞模型,高效液相色谱法检测细胞内胆固醇含量的变... 目的为研究THP-1源性巨噬细胞泡沫化过程中,SIRT1与肝X受体-α是否发生相互作用、肝X受体-α的乙酰化修饰如何改变及其与细胞内胆固醇含量的关系。方法采用体外培养的THP-1细胞构建泡沫细胞模型,高效液相色谱法检测细胞内胆固醇含量的变化,免疫共沉淀检测肝X受体-α与SIRT1是否结合,免疫印迹法检测肝X受体-α的乙酰化修饰改变及SIRT1的表达改变。结果在氧化低密度脂蛋白诱导细胞分化12、24h和48h后,细胞内胆固醇含量增加,SIRT1与肝X受体-α共沉降,去乙酰化的肝X受体-α蛋白水平升高,SIRT1蛋白的表达增加。结论THP-1源性泡沫细胞形成过程中,肝X受体-α与SIRT1存在相互作用,肝X受体-α的乙酰化修饰逐渐降低,其机制与SIRT1的水平升高有关。 展开更多
关键词 thp-1源性巨噬细胞 肝X受体-α SIRT1 乙酰化修饰 泡沫细胞
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清热、活血类中药有效成分对THP-1巨噬泡沫细胞形成及分泌IL-1β、TNF-α的影响 被引量:4
7
作者 潘华新 王培训 +2 位作者 周联 曹柳英 梁瑞燕 《现代中西医结合杂志》 CAS 2009年第35期4325-4327,4329,共4页
目的探讨清热、活血类中药有效成分抑制巨噬细胞泡沫化的作用及机制。方法以氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)和细菌脂多糖(LPS)诱导THP-1细胞成为巨噬泡沫细胞,采用油红O染色脂质半定量分析法和ELISA法检测中药有效成分对THP-1巨噬泡沫细胞... 目的探讨清热、活血类中药有效成分抑制巨噬细胞泡沫化的作用及机制。方法以氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)和细菌脂多糖(LPS)诱导THP-1细胞成为巨噬泡沫细胞,采用油红O染色脂质半定量分析法和ELISA法检测中药有效成分对THP-1巨噬泡沫细胞形成及培养上清中白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量的影响。结果20μmol/L的黄连素、黄芩苷、大黄素、丹参酮ⅡA和100 mg/L的三七总皂苷可显著降低THP-1巨噬泡沫细胞油红O染色阳性率;20μmol/L的大黄素、丹参酮Ⅰ、丹参酮ⅡA可显著降低THP-1巨噬细胞的IL-1β分泌量;20μmol/L的黄连素可显著降低THP-1巨噬细胞的TNF-α分泌量。结论清热、活血类中药有效成分可抑制巨噬细胞泡沫化及其炎症因子IL-1β和/或TNF-α的分泌,抑制炎症因子的释放可能是其抗泡沫细胞形成的机制之一。 展开更多
关键词 thp-1 巨噬泡沫细胞 白细胞介素1Β 肿瘤坏死因子Α 清热类中药 活血类中药
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炎症应激通过激活mTOR通路诱导THP-1巨噬细胞泡沫化的实验研究 被引量:7
8
作者 赵爽 叶强 +1 位作者 李涛 范忠才 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期1105-1110,共6页
目的研究脂多糖(LPS)诱导的炎症应激是否通过激活m TOR通路,增加SCAP/SREBP2表达,干扰SCAP/SREBP2负反馈调控,增加THP-1巨噬细胞对非修饰低密度脂蛋白胆固醇(LDL)摄取,导致泡沫细胞形成。方法诱导分化成功的THP-1源性巨噬细胞在无血清... 目的研究脂多糖(LPS)诱导的炎症应激是否通过激活m TOR通路,增加SCAP/SREBP2表达,干扰SCAP/SREBP2负反馈调控,增加THP-1巨噬细胞对非修饰低密度脂蛋白胆固醇(LDL)摄取,导致泡沫细胞形成。方法诱导分化成功的THP-1源性巨噬细胞在无血清培养基中培养4 h后,分为对照组(5 mg·L^(-1)LDL)、炎症刺激组(5 mg·L^(-1)LDL+200μg·L^(-1)LPS)、炎症+雷帕霉素组(5 mg·L^(-1)LDL+200μg·L^(-1)LPS+10μg·L^(-1)Rapamycin)。以上各组细胞培养24 h后收获。油红O染色法检测各组细胞内脂质沉积情况,Real-time PCR法检测LDLr、SREBP2、SCAP、S6K1和m TOR mRNA水平,Western blot法检测LDLr、S6K1、mTOR蛋白表达,激光共聚焦法检测SCAP在内质网与高尔基体间的转位情况。结果油红O染色发现,炎症应激增加THP-1巨噬细胞内脂质沉积,雷帕霉素抑制炎症应激诱导的脂质聚积。Real-time PCR检测显示,炎症应激上调THP-1巨噬细胞LDLr、SREBP2、SCAP、S6K1和mTOR mRNA水平(P<0.05),雷帕霉素减少炎症应激诱导的LDLr、SREBP2、SCAP、S6K1和mTOR mRNA水平升高(P<0.05)。Western blot检测发现,炎症应激上调LDLr、S6K1和m TOR蛋白表达(P<0.05),雷帕霉素减少炎症应激诱导的LDLr、S6K1和mTOR蛋白表达水平升高(P<0.05)。激光共聚焦检测发现,炎症应激增加SCAP/SREBP2从内质网转位到高尔基体,雷帕霉素则抑制炎症应激诱导的SCAP/SREBP2复合物从内质网转位到高尔基体。结论炎症应激通过激活mTOR通路,上调SCAP/SREBP2表达,致SCAP/SREBP2复合体转位至高尔基体异常增加,LDLr表达上调,致使胆固醇聚积于细胞内,泡沫细胞形成。雷帕霉素能够逆转炎症应激诱导mTOR通路激活,减少细胞内胆固醇沉积,提示炎症应激状态下,mTOR可能是泡沫细胞形成的关键通路。 展开更多
关键词 thp-1巨噬细胞 脂多糖 炎症 LDLR 泡沫细胞 雷帕霉素
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姜黄素对THP-1源性巨噬泡沫细胞B类1型清道夫受体表达的影响 被引量:2
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作者 张岩 周雯 肖韩艳 《中国现代医生》 2019年第7期26-29,共4页
目的研究姜黄素对人单核细胞(THP-1)源性巨噬泡沫细胞B类1型清道夫受体(SR-B1)表达的影响。方法使用不同浓度姜黄素(12.5、25、50 mg/L)作用于THP-1巨噬泡沫细胞,观察三组不同浓度姜黄素作用的THP-1源性巨噬泡沫细胞SR-B1表达情况。结果... 目的研究姜黄素对人单核细胞(THP-1)源性巨噬泡沫细胞B类1型清道夫受体(SR-B1)表达的影响。方法使用不同浓度姜黄素(12.5、25、50 mg/L)作用于THP-1巨噬泡沫细胞,观察三组不同浓度姜黄素作用的THP-1源性巨噬泡沫细胞SR-B1表达情况。结果仅50 mg/L姜黄素作用24 h细胞存活率低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);其他浓度及时间姜黄素组细胞存活率与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。50 mg/L姜黄素组SR-B1、TRAF6、NF-κB以及IRAK1 mRNA表达水平明显低于其他组,差异有统计学意义(P<0.05);25 mg/L姜黄素组上述指标表达水平低于12.5 mg/L姜黄素组和对照组,差异有统计学意义(P<0.05);12.5 mg/L姜黄素组与对照组上述指标表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论一定浓度姜黄素可抑制THP-1源性巨噬泡沫细胞中SR-B1、TRAF6、NF-κB以及IRAK1 mRNA的表达,从而减少泡沫细胞,达到抗动脉粥样硬化的目的。 展开更多
关键词 姜黄素 thp-1源性巨噬泡沫细胞 SR-B1
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Vaspin对巨噬细胞THP-1向泡沫细胞转变的抑制作用 被引量:1
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作者 祝国富 林莹 李伟明 《同济大学学报(医学版)》 CAS 2015年第3期31-34,47,共5页
目的腹腔脂肪型丝氨酸蛋白酶抑制剂(visceral adipose tissue-derived serine protease inhibitor,vaspin)是新发现的脂肪因子,对代谢性疾病具有改善作用。该研究旨在研究vaspin对体外培养的THP-1细胞泡沫化的影响。方法 100 n M佛波酯... 目的腹腔脂肪型丝氨酸蛋白酶抑制剂(visceral adipose tissue-derived serine protease inhibitor,vaspin)是新发现的脂肪因子,对代谢性疾病具有改善作用。该研究旨在研究vaspin对体外培养的THP-1细胞泡沫化的影响。方法 100 n M佛波酯孵育THP-1巨噬细胞48 h后分为对照组,氧化低密度脂蛋白组(ox-LDL浓度50μg/ml,48 h),vaspin干预组(vaspin终浓度100 ng/ml,预孵24 h);采用油红0染色法检测vaspin对THP-1细胞泡沫化的影响;Real-time PCR和Western blot法检测vaspin对THP-1细胞中酰基辅酶A胆固醇酰基转移酶-1(acy1-coenzyme A:cholesterol acyltrasferase-1,ACAT-1)、ATP结合盒转运体A1(ATP binding casstte transporter A1,ABCA1)及细胞清道夫受体-A1(scavenger receptor-A1,SR-A1)mRNA及蛋白表达水平的影响。结果与oxLDL组比较,ox-LDL+vaspin组巨噬细胞泡沫化程度明显下降(P<0.05);ox-LDL+vaspin组ACAT-1和SRA1 mRNA及蛋白表达水平明显降低(P<0.05),而ABCA1 mRNA及蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。结论 vaspin能够抑制巨噬细胞向泡沫细胞的转化,发挥抗动脉粥样硬化(atherosclerosis,As)的作用。 展开更多
关键词 腹腔脂肪型丝氨酸蛋白酶抑制剂 巨噬细胞 泡沫细胞 酰基辅酶A胆固醇酰基转移酶-1 ATP结合盒转运体A1 细胞清道夫受体-A1
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Proteomic characterization of four subtypes of M2 macrophages derived from human THP-1 cells 被引量:3
11
作者 Pengfei LI Chen MA +8 位作者 Jing LI Shanshan YOU Liuyi DANG Jingyu WU Zhifang HAO Jun LI Yuan ZHI Lin CHEN Shisheng SUN 《Journal of Zhejiang University-Science B(Biomedicine & Biotechnology)》 SCIE CAS CSCD 2022年第5期407-422,共16页
Macrophages are widely distributed immune cells that contribute to tissue homeostasis.Human THP-1 cells have been widely used in various macrophage-associated studies,especially those involving pro-inflammatory M1 and... Macrophages are widely distributed immune cells that contribute to tissue homeostasis.Human THP-1 cells have been widely used in various macrophage-associated studies,especially those involving pro-inflammatory M1 and anti-inflammatory M2 phenotypes.However,the molecular characterization of four M2 subtypes(M2a,M2b,M2c,and M2d)derived from THP-1has not been fully investigated.In this study,we systematically analyzed the protein expression profiles of human THP-1-derived macrophages(M0,M1,M2a,M2b,M2c,and M2d)using quantitative proteomics approaches.The commonly and specially regulated proteins of the four M2 subtypes and their potential biological functions were further investigated.The results showed that M2a and M2b,and M2c and M2d have very similar protein expression profiles.These data could serve as an important resource for studies of macrophages using THP-1 cells,and provide a reference to distinguish different M2 subtypes in macrophage-associated diseases for subsequent clinical research. 展开更多
关键词 macrophage thp-1 cells M2 subtype PROTEOMICS Biological function
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牙龈卟啉单胞菌感染对THP-1源性巨噬细胞胆固醇代谢的影响
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作者 宋晓佳 陈利娇 +3 位作者 岑胜丹 任曼曼 喻文斌 邓辉 《口腔医学》 CAS 2015年第6期425-428,共4页
目的以THP-1来源的巨噬细胞为研究对象,初步研究牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.g)感染促进巨噬细胞形成泡沫细胞的影响。方法以160 nmol/L佛波酯(phorbol 12-myristate 13-acetate,PMA)诱导THP-1单核细胞48 h,使其分化为... 目的以THP-1来源的巨噬细胞为研究对象,初步研究牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.g)感染促进巨噬细胞形成泡沫细胞的影响。方法以160 nmol/L佛波酯(phorbol 12-myristate 13-acetate,PMA)诱导THP-1单核细胞48 h,使其分化为巨噬细胞。在负荷50μg/m L低密度脂蛋白的条件下,建立P.g感染巨噬细胞的体外模型,采用胆固醇测定法检测细胞内胆固醇酯含量的变化。结果经160 nmol/L PMA诱导48 h后,THP-1单核细胞成为巨噬细胞。6 h时P.g感染组细胞胆固醇酯(CE)与总胆固醇(TC)比值(CE/TC)为0.445±0.386,24 h时,P.g感染组CE/TC值为0.557±0.430,均显著高于空白对照组和6 h组(P<0.05)。结论本研究成功建立了P.g感染巨噬细胞的体外模型,P.g感染可显著促进巨噬细胞总胆固醇和胆固醇酯含量增加,从而可能参与心血管疾病(cardiovascular diseases,CVD)发生和发展。 展开更多
关键词 牙龈卟啉单胞菌 thp-1单核细胞 巨噬细胞 泡沫细胞
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发育型内皮基因座-1作用下氧化型低密度脂蛋白对巨噬细胞分泌TNF-α、MIP-1α及MIP-2的影响
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作者 路艳林 李方琴 +6 位作者 周明 彭进 万昌武 梁静伟 陈灿 王杰 夏冰 《贵州医科大学学报》 CAS 2023年第8期888-894,共7页
目的探讨发育型内皮基因座-1(DEL-1)作用下氧化型低密度脂蛋白(OX-LDL)对巨噬细胞中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1α)及巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)表达的影响。方法体外培养人单核-巨噬细胞系THP-1细胞株至对数生长... 目的探讨发育型内皮基因座-1(DEL-1)作用下氧化型低密度脂蛋白(OX-LDL)对巨噬细胞中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1α)及巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)表达的影响。方法体外培养人单核-巨噬细胞系THP-1细胞株至对数生长期,分为佛波脂(PMA)组(PMA诱导为贴壁的巨噬细胞)、OX-LDL组(OX-LDL诱导为泡沫细胞)、si-NC组(50 nmol/L siRNA-NC的小干扰转染细胞)及小干扰RNA-DEL-1(siRNA-DEL-1)组(50 nmol/L siRNA-DEL-1转染细胞),采用油红O染色鉴定泡沫细模型、并检测各组细胞中脂质积累,采用免疫荧光技术检测各组细胞中DEL-1的表达,采用实时聚合酶链反应(RT-PCR)及Western blot检测各组细胞中DEL-1、MIP-1α、MIP-2及TNF-α信使RNA(mRNA)和蛋白的表达;采用Pearson相关系数分析DEL-1蛋白表达与上述炎性因子的相关性。结果油红O染色结果显示,靶向敲低DEL-1泡沫细胞胞质内脂质积累减少;免疫荧光、Western blot及RT-PCR结果显示,OX-LDL组、siRNA-NC组细胞中DEL-1及下游炎性因子MIP-1α、MIP-2及TNF-α的蛋白及mRNA表达较PMA组上调(P<0.05),siRNADEL-1组细胞中上述因子表达较OX-LDL组及siRNANC组下调(P<0.05)。结论DEL-1介导了OX-LDL源性泡沫细胞分泌MIP-1α、MIP-2及TNF-α,可能参与了动脉粥样硬化(AS)的病变过程。 展开更多
关键词 泡沫细胞 动脉粥样硬化 肿瘤坏死因子α 发育型内皮基因座-1基因 巨噬细胞炎性蛋白1Α 巨噬细胞炎性蛋白2
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普伐他汀对泡沫细胞内胆固醇酯的影响及与小凹蛋白-1的关系 被引量:4
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作者 覃丽 秦旭平 +2 位作者 王佐 朱炳阳 廖端芳 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期47-52,共6页
本文旨在观察普伐他汀对鼠源巨噬细胞性泡沫细胞内胆固醇酯含量的影响,探讨此作用与小凹蛋白-1的关系。采用体外培养的鼠源性巨噬细胞株作为研究对象,加入氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)使其形成泡沫细胞,... 本文旨在观察普伐他汀对鼠源巨噬细胞性泡沫细胞内胆固醇酯含量的影响,探讨此作用与小凹蛋白-1的关系。采用体外培养的鼠源性巨噬细胞株作为研究对象,加入氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)使其形成泡沫细胞,运用高效液相色谱测定细胞内胆固醇酯的改变,同时运用Western blot检测细胞中小凹蛋白-1的表达,并观察普伐他汀对细胞内胆固醇酯和小凹蛋白-1影响的量效和时效关系。结果显示:普伐他汀可明显降低泡沫细胞内的胆固醇酯与总胆固醇的比值,且在一定范围内呈剂量依赖性和时间依赖性。在泡沫细胞中加入普伐他汀后能够促进小凹蛋白-1的表达,呈剂量依赖性和时间依赖性。上述结果提示普伐他汀通过降低细胞内胆固醇酯的含量,减轻细胞泡沫化程度。普伐他汀的这一作用可能与促进小凹蛋白-1表达上调有关。 展开更多
关键词 普伐他汀 小凹蛋白-1 胆固醇酯 泡沫细胞 动脉粥样硬化
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酰基辅酶A胆固醇酰基转移酶1基因过表达对泡沫细胞形成的影响 被引量:7
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作者 何平 成蓓 +1 位作者 王洪星 戚本玲 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 2007年第5期325-328,共4页
目的研究在三种不同细胞中过表达酰基辅酶A胆固醇酰基转移酶1基因对泡沫细胞形成的影响。方法构建携带酰基辅酶A胆固醇酰基转移酶1全长cDNA的pCDNA3.1质粒载体并稳定转染体外培养的人THP-1单核细胞、小鼠RAW264.7单核巨噬细胞和人胚肾29... 目的研究在三种不同细胞中过表达酰基辅酶A胆固醇酰基转移酶1基因对泡沫细胞形成的影响。方法构建携带酰基辅酶A胆固醇酰基转移酶1全长cDNA的pCDNA3.1质粒载体并稳定转染体外培养的人THP-1单核细胞、小鼠RAW264.7单核巨噬细胞和人胚肾293上皮细胞,以油红O染色法检测在乙酰化低密度脂蛋白作用下转染前后三种细胞形成泡沫细胞的情况。结果在相同的脂质负荷条件下,转染酰基辅酶A胆固醇酰基转移酶1基因的THP-1单核细胞和RAW264.7巨噬细胞同未转染的细胞相比泡沫细胞的形成数量增加,而人胚肾293上皮细胞无论是否转染酰基辅酶A胆固醇酰基转移酶1基因均不易形成泡沫细胞。结论单核巨噬细胞中过表达酰基辅酶A胆固醇酰基转移酶1基因可促进泡沫细胞的形成。 展开更多
关键词 病理学与病理生理学 酰基辅酶A胆固醇酰基转移酶1 巨噬细胞 单核细胞 泡沫细胞
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TREM-1、TNF-α和IL-8在单核细胞源性泡沫细胞中的表达 被引量:4
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作者 王宇石 刘心刚 郑杨 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期316-319,共4页
目的:探讨髓系细胞触发受体1(TREM-1)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素8(IL-8)在巨噬细胞源性泡沫细胞产生过程中的表达情况。方法:人单核细胞株(U937)经佛波酯(PMA)诱导贴壁后,分为PMA诱导组、低密度脂蛋白(LDL)诱导组及氧化型低... 目的:探讨髓系细胞触发受体1(TREM-1)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素8(IL-8)在巨噬细胞源性泡沫细胞产生过程中的表达情况。方法:人单核细胞株(U937)经佛波酯(PMA)诱导贴壁后,分为PMA诱导组、低密度脂蛋白(LDL)诱导组及氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导组。应用RT-PCR法检测上述3组细胞中TREM-1mRNA表达;用ELISA法检测上述3组细胞培养上清中TNF-α和IL-8含量。结果:与PMA诱导组、LDL组细胞比较,ox-LDL组细胞TREM-1mRNA表达水平均明显增高(P<0.05);ox-LDL组培养上清中TNF-α、IL-8含量明显高于LDL组及PMA诱导组(P<0.05)。结论:TREM-1、TNF-α和IL-8在动脉粥样硬化(AS)发生发展中可能存在相互诱导、相互协同作用,共同参与AS的形成。 展开更多
关键词 泡沫细胞/巨噬细胞 髓系细胞触发受体1 TNF-Α IL-8 动脉粥样硬化
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IL-10对TNF-α诱导的泡沫细胞三磷酸腺苷结合盒转运体A1表达的抑制作用 被引量:3
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作者 陈志坚 梅春丽 +2 位作者 廖玉华 彭红玉 王彦富 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2006年第3期520-522,共3页
目的:观察白介素10(IL10)对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的THP1巨噬细胞源性泡沫细胞三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)表达的干预作用。方法:THP1单核细胞经诱导转化为巨噬细胞源性泡沫细胞后随机分为4组:对照组,培养液中不加任何其他物... 目的:观察白介素10(IL10)对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的THP1巨噬细胞源性泡沫细胞三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)表达的干预作用。方法:THP1单核细胞经诱导转化为巨噬细胞源性泡沫细胞后随机分为4组:对照组,培养液中不加任何其他物质;TNF-α组,培养液中加10μg/LTNF-α;IL-10组,培养液中加10μg/LIL10;IL10+TNFα组,培养液中加10μg/LIL10预先孵育2h后,再加10μg/LTN-α。采用RT PCR和Western Blot检测各组0h、6h、12h、24h、48hABCA1mRNA和蛋白表达。结果:TNF-α组ABCA1mRNA和蛋白表达呈时间依赖性降低(F=782.94,F=768.12,P均<0.05)。IL10组ABCA1mRNA表达在24h和48h有轻微增加(P<0.05),但ABCA1蛋白表达在各时间点无明显变化。IL10+TNFα组ABCA1mRNA和蛋白表达也呈时间依赖性降低(F=697.23,F=749.64,P均<0.05),但同TNFα组相比,其下降程度有所减轻(P<0.05)。结论:IL10可部分抑制TNFα所引起THP1巨噬细胞源性泡沫细胞ABCA1表达的下调。 展开更多
关键词 肿瘤坏死因子-α 白介素-10 三磷酸腺苷结合盒转运体A1 thp-1巨噬细胞源性泡沫细胞
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白介素-1对单核细胞向泡沫细胞分化过程中ACAT-1蛋白表达和活性的影响 被引量:1
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作者 王庸晋 王治平 +1 位作者 魏武 周胜华 《中国心血管病研究》 CAS 2011年第9期691-695,共5页
目的探讨白介素-1(IL-1)对单核细胞向泡沫细胞分化过程中脂酰辅酶A-胆固醇酰基转移酶-1(ACAT-1)蛋白表达和活性的影响。方法200nmol/L佛波酯(PMA)诱导THP-1单核细胞48h使其转化为巨噬细胞,流式细胞术检测CDl4的表达;巨噬细胞与... 目的探讨白介素-1(IL-1)对单核细胞向泡沫细胞分化过程中脂酰辅酶A-胆固醇酰基转移酶-1(ACAT-1)蛋白表达和活性的影响。方法200nmol/L佛波酯(PMA)诱导THP-1单核细胞48h使其转化为巨噬细胞,流式细胞术检测CDl4的表达;巨噬细胞与80mg/L氧化型低密度脂蛋白(Ox-LDL)共孵育24h,使之向泡沫细胞分化,油红O染色观察细胞质内脂质沉积;Westernblot检测各组细胞(单核细胞组、巨噬细胞组、泡沫细胞组、泡沫细胞+IL-1组、泡沫细胞+IL-1/Anti-ILl组)ACAT-l的蛋白表达,液相闪烁计数法检测ACAT-1的酶活性。结果单核细胞株THP-1与200nM的PMA共孵育48h后,分化为巨噬细胞,CDld阳性表达率为85.7%;巨噬细胞与Ox-LDL共孵育24h后,油红O染色胞浆内可见大量吞噬的脂质小滴。与单核细胞组相比,巨噬细胞组、泡沫细胞组和泡沫细胞+IL-1组ACAT-1蛋白表达上调,活性升高(P〈0.05),泡沫细胞+IL-1/Anti-ILl组蛋白表达上调及活性升高不明显(P〉0.05)。结论IL-1对单核细胞向泡沫细胞分化过程中ACAT-1蛋白表达及酶活性有上调作用,IL-1单克隆抗体可以拮抗这种效应。 展开更多
关键词 白介素-1 巨噬细胞 泡沫细胞 脂酰辅酶A 胆固醇酰基转移酶-1
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冠蛋白1参与分枝菌酸诱导巨噬细胞的泡沫化 被引量:1
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作者 周芳妮 陈全 +2 位作者 周静瑶 刘革力 张路渝 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期451-456,共6页
目的研究巨噬细胞冠蛋白1(coronin-1)与分枝菌酸(MA)诱导巨噬细胞泡沫化的相关性及其可能机制。方法根据冠蛋白1表达水平的差异,实验分为RAW264.7-Cor.Plus、RAW264.7和RAW264.7-Cor.Minus三组。各组细胞经100μg/m L MA包被的聚苯乙烯... 目的研究巨噬细胞冠蛋白1(coronin-1)与分枝菌酸(MA)诱导巨噬细胞泡沫化的相关性及其可能机制。方法根据冠蛋白1表达水平的差异,实验分为RAW264.7-Cor.Plus、RAW264.7和RAW264.7-Cor.Minus三组。各组细胞经100μg/m L MA包被的聚苯乙烯微球作用24 h后提取总蛋白,用Western blot法检测细胞冠蛋白1的表达水平。分别用(0、25、50、75、100)μg/m L MA包被聚苯乙烯微球作为吞噬颗粒,在2μmol/L松胞菌素D(cty D)处理前、后,分别吞噬24 h^8 d,用总胆固醇(TC)酶法测定试剂盒、游离胆固醇(FC)酶法测定试剂盒分别检测各组细胞TC、FC,再通过胆固醇酯(CE)和CE/TC比值定量评估巨噬细胞泡沫化水平。将cty D处理细胞(RAW264.7-cty D、RAW264.7-cty D-MA)及其对照组分别用异硫氰酸荧光素标记的鬼笔环肽(FITC-phalloidin)染色,计算纤维型肌动蛋白(F-actin)重排率。结果各组细胞受MA诱导后,其冠蛋白1的表达量显著高于相应对照组,其表达量从高至低依次为RAW264.7-Cor.Plus、RAW264.7、RAW264.7-Cor.Minus。表达不同水平冠蛋白1的各组细胞的泡沫化水平与MA包被剂量和MA作用时间呈正比;冠蛋白1表达量最高的RAW264.7-Cor.Plus细胞泡沫化水平最高,冠蛋白1表达量最低的RAW264.7-Cor.Minus细胞泡沫化水平最低;cty D抑制巨噬细胞F-actin显著降低MA诱导的细胞泡沫化水平,但抑制F-actin对冠蛋白1与MA诱导细胞泡沫化的正相关性并无显著影响;经鬼笔环肽染色后,MA诱导组细胞的F-actin重排率显著高于非MA诱导的对照组细胞。结论 MA可诱导巨噬细胞冠蛋白1的表达,其表达水平与MA诱导的细胞泡沫化呈正相关,F-actin参与MA诱导的细胞泡沫化过程,但F-actin并非冠蛋白1调控MA诱导细胞泡沫化的关键和唯一途径。 展开更多
关键词 巨噬细胞 冠蛋白1(coronin-1) 分枝菌酸 泡沫细胞 纤维型肌动蛋白(F-actin)
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血管紧张素Ⅱ对巨噬细胞和泡沫细胞ACAT-1及PPAR-γ表达的影响 被引量:1
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作者 马志强 刘力 +1 位作者 成蓓 王志权 《心脏杂志》 CAS 2011年第2期169-172,共4页
目的:观察血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对巨噬细胞和泡沫细胞过氧化体增殖物激活型受体γ(PPAR-γ)和酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶-1(ACAT-1)表达的影响。方法:将单核细胞株THP-1与160 nmol/L佛波酯(PMA)孵育48 h,使之分化为巨噬细胞,继以100 mg/... 目的:观察血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对巨噬细胞和泡沫细胞过氧化体增殖物激活型受体γ(PPAR-γ)和酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶-1(ACAT-1)表达的影响。方法:将单核细胞株THP-1与160 nmol/L佛波酯(PMA)孵育48 h,使之分化为巨噬细胞,继以100 mg/L氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导巨噬细胞分化为泡沫细胞。将巨噬细胞和泡沫细胞用1×10-6 mol/L AngⅡ孵育48 h。运用RT-PCR和Western blot分别检测PPAR-γmRNA、ACAT-1mRNA及其蛋白的表达水平。结果:单核细胞在分化为巨噬细胞和泡沫细胞的过程中,PPAR-γ的表达明显降低(P<0.05),ACAT-1的表达显著增强(P<0.05);经AngⅡ干预后,巨噬细胞和泡沫细胞PPAR-γ的表达进一步降低(P<0.05,P<0.05),而ACAT-1的表达更加增强(P<0.05,P<0.05)。结论:AngⅡ不但可上调巨噬细胞和泡沫细胞中ACAT-1的表达,而且可抑制PPAR-γ的表达。 展开更多
关键词 胆固醇酰基转移酶-1 巨噬细胞 泡沫细胞 血管紧张素Ⅱ 动脉粥样硬化 过氧化体增殖物激活型受体Γ
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