Thrsp蛋白在乳腺癌MCF-7、MDA-MB-231细胞株中表达及鉴定

目的鉴定Thrsp甲状腺激素应答蛋白(Thrsp,S14)在乳腺癌MCF-7和MDA-MB-231细胞株中的表达,并建立2株细胞的标准生长曲线,为研究甲状腺激素应答蛋白在乳腺癌细胞转移增殖中的作用及机制奠定基础。方法取对数生长期的乳腺癌MCF-7、MDA-MB-231细胞,用CCK8法检测,用Excel自带统计软件求平均值并绘制生长曲线。细胞爬片,Thrsp蛋白免疫组化SP法染色,DBA显色,显微镜下观察,采用Western Blot法检测2株细胞中Thrsp蛋白表达及相对量。结果连续培养72h MCF-7、MDA-MB-231细胞株达到对数生长期。Thrsp蛋白在乳腺癌细胞株MDA-MB-231中呈弱阳性表达,在MCF-7中呈阳性表达。Thrsp蛋白电泳大小位于17ku。MBA-MD-231细胞株中Thrsp蛋白表达水平低于MCF-7细胞株,与免疫组化结果一致。结论 Luminal A乳腺癌细胞株MCF-7细胞株中Thrsp蛋白表达正常;Basal细胞株MDA-MB-231中Thrsp蛋白表达下调。

乳腺癌组织中THRSP蛋白表达及临床意义

目的探讨THRSP蛋白在人类乳腺癌组织中的表达及临床意义。方法选取102例乳腺癌患者,取本组患者的石蜡标本,采用SP法对乳腺癌组织以及癌旁组织中的THRSP蛋白表达进行检测,对本组患者的临床资料进行整理,观察并分析THRSP蛋白表达与患者雌雄受体(ER)、孕激素受体(PR)、人类表皮生长因子受体2(HER-2)的表达以及基因分型、临床分期、淋巴结转移率、组织学分级的关系。结果THRSP蛋白阳性表达主要定位于细胞核,细胞质有少量的表达。乳腺组织中THRSP蛋白阳性表达率为56.86%(58/102),高于癌旁组织中THRSP蛋白阳性表达率3.92%(4/102),差异明显(P<0.05);乳腺组织中THRSP蛋白的异常高表达与组织学分级有关,与患者的年龄、原发肿瘤的大小、ER、PR、HER-2状态、基因分型、临床分期、淋巴结转移等无关。结论乳腺癌组织中THRSP蛋白的阳性表达高于正常乳腺组织中的THRSP蛋白阳性表达,并且乳腺组织学分级越高,患者的THRSP蛋白阳性表达越高。

HPK1 GROβ及THRSP蛋白在乳腺癌患者中的表达及与预后的相关性分析

目的 分析造血祖细胞激酶1(HPK1)、生长调节蛋白-β(GROβ)及THRSP蛋白在乳腺癌患者中的表达及与预后的相关性。方法 选取2016年1月—2019年12月温州市中医院收治的乳腺癌患者100例,取所有患者手术切除的癌组织及癌旁组织标本,采用免疫组化染色法检测GROβ水平,Western blot法检测HPK1、THRSP表达量。结果 癌旁组织中HPK1、GROβ及THRSP蛋白表达量分别为(1.62±0.35)、(47.23±6.56)pg/ml、(1.13±0.16);癌组织中HPK1、GROβ及THRSP蛋白表达量分别为(1.16±0.19)、(116.35±25.59)pg/ml、(1.57±0.31)。与癌旁组织相比,癌组织中HPK1表达量较低,GROβ、 THRSP蛋白表达量较高(均P<0.05)。淋巴结转移、Ⅲ期、Ⅳ期、低分化患者中HPK1表达量较低,GROβ、 THRSP蛋白表达量较高(均P<0.05)。乳腺癌癌组织中HPK1与GROβ表达量呈负相关(r=-0.292,P<0.05),GROβ与THRSP表达量呈正相关(r=0.277,P<0.05),HPK1与THRSP表达量呈负相关(r=-0.348,P<0.05)。多因素logistic回归分析结果显示:HPK1、 GROβ、 THRSP蛋白是乳腺癌患者预后的危险因素(均P<0.05)。结论 HPK1、GROβ及THRSP蛋白在乳腺癌组织中表达异常,与TNM分期、分化程度、有无淋巴结转移相关,三者表达和乳腺癌患者预后有一定相关性。

苓桂术甘汤通过Thrsp-Srebp1通路改善高脂饮食诱导的大鼠脂肪变性

目的:探讨苓桂术甘汤对高脂饮食诱导的脂肪肝大鼠脂质代谢相关基因表达的影响,阐释苓桂术甘汤改善高脂饮食诱导的脂肪变性的作用机制。方法:24只大鼠随机分成3组,每组8只。正常组予正常饮食喂养8周;模型组高脂饮食饲养8周;苓桂术甘汤组高脂饮食饲养8周,第5周起同时予苓桂术甘汤(3.6g·kg^(-1)·d^(-1))灌胃。8周后,取各组大鼠肝脏组织标本,通过RNA测序筛选差异表达基因,并用RT-PCR及Western Blot对差异基因进行验证。结果:模型组Srebp1、Thrsp、Socs2蛋白水平较正常组显著增加(P<0.01,P<0.05),而苓桂术甘汤可以显著降低Srebp1、Thrsp、Socs2的蛋白水平(P<0.01,P<0.05)。结论:苓桂术甘汤可以通过Thrsp-Srebp1通路改善高脂饮食诱导的脂肪变性,而Socs2也是苓桂术甘汤的作用靶点之一。