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TIF3转基因CHO和COS7细胞株的构建与鉴定
被引量:
1
1
作者
雷毅雄
Pius Joseph
+1 位作者
刘玉清
Tong-manOng
《四川大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第1期55-57,共3页
目的 构建 TIF3转基因 CHO和 COS7细胞株并对其构建的细胞株进行鉴定。方法 采用磷酸钙介导转染技术和 G4 18细胞筛选法 ,以 pc DNA3.1/ V5 - His- TOPO为表达载体 ,构建 TIF3转基因 CHO和 COS7细胞株 ;并应用 Western Blot技术对转...
目的 构建 TIF3转基因 CHO和 COS7细胞株并对其构建的细胞株进行鉴定。方法 采用磷酸钙介导转染技术和 G4 18细胞筛选法 ,以 pc DNA3.1/ V5 - His- TOPO为表达载体 ,构建 TIF3转基因 CHO和 COS7细胞株 ;并应用 Western Blot技术对转基因表达产物进行分析与鉴定。实验设计分无转染组、载体转染组和目的基因转染组。结果 在 7株转染的 CHO细胞株中 ,有 3株具有高效稳定表达的 TIF3编码蛋白质 ;在 4株转染的 COS7细胞株中有 2株同样具有高效稳定的 TIF3编码蛋白质表达。结论 本研究成功地构建了 3株 TIF3转基因 CHO细胞株和 2株 TIF3转基因 COS7细胞株 。
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关键词
tif3cdna
稳定转染
CHO细胞
COS7细胞
WESTERN
BLOT
下载PDF
职称材料
TIF3转基因CHO和COS7细胞株的构建与鉴定
2
作者
雷毅雄
刘玉清
+2 位作者
徐培渝
Pius Joseph
Tong-man Ong
《环境与职业医学》
CAS
北大核心
2002年第3期183-183,共1页
[目的 ]TIF3(MouseTranslationInitiationFacfor 3)是从镉转化BALB/c 3T3细胞中克隆出来的新基因 ,其在基因文库 (Gen Bank)的新添编号为AF2 710 72。为了对该基因的生物学功能进行研究 ,构建了TIF3转基因CHO和COS7细胞株并作了鉴定。[...
[目的 ]TIF3(MouseTranslationInitiationFacfor 3)是从镉转化BALB/c 3T3细胞中克隆出来的新基因 ,其在基因文库 (Gen Bank)的新添编号为AF2 710 72。为了对该基因的生物学功能进行研究 ,构建了TIF3转基因CHO和COS7细胞株并作了鉴定。[方法 ]采用磷酸钙介导转染技术和G418细胞筛选法 ,以pcD NA3 1/V5 His TOPO为表达载体 ,构建TIF3转基因CHO和COS7细胞株 ;应用WesternBlot技术对转基因表达产物进行分析与鉴定。实验设计分无转染组 (空白对照 )、载体转染组 (载体对照 )和目的基因转染组 (载体 +TIF3cDNA )。 [结果 ]结果显示 ,无论在CHO细胞还是COS7细胞 ,经转染和G418筛选后 ,无转染组的细胞 10 0 %死亡 ,而载体转染组和TIF3cDNA转染组的细胞形成较多的细胞集落。提示克隆化基因的细胞转染及G418筛选效果良好。经WesternBlot分析与鉴定 ,在 7株转染和经G418反复筛选的CHO细胞株中 ,有 3株具有高效稳定表达约 36kDa的TIF3编码蛋白质 ;在 4株转染和经G418反复筛选的COS7细胞株中有 2株也具有高效稳定的TIF3编码蛋白质表达 ,而无转染组和载体对照组的CHO和COS7细胞均缺乏此蛋白质表达。 [结论 ]本研究成功地构建了 3株TIF3转基因CHO细胞株和 2株TIF3转基因COS7细胞株。这两类TIF3转基因哺乳动物细胞稳定?
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关键词
tif3cdna
转染
CHO细胞
COS7细胞
WESTERN
BLOT
编码蛋白质表述
下载PDF
职称材料
题名
TIF3转基因CHO和COS7细胞株的构建与鉴定
被引量:
1
1
作者
雷毅雄
Pius Joseph
刘玉清
Tong-manOng
机构
广州医学院预防医学教研室
MolecularEpidemiologyLaboratory
四川大学华西公共卫生学院卫生毒理学教研室
出处
《四川大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第1期55-57,共3页
文摘
目的 构建 TIF3转基因 CHO和 COS7细胞株并对其构建的细胞株进行鉴定。方法 采用磷酸钙介导转染技术和 G4 18细胞筛选法 ,以 pc DNA3.1/ V5 - His- TOPO为表达载体 ,构建 TIF3转基因 CHO和 COS7细胞株 ;并应用 Western Blot技术对转基因表达产物进行分析与鉴定。实验设计分无转染组、载体转染组和目的基因转染组。结果 在 7株转染的 CHO细胞株中 ,有 3株具有高效稳定表达的 TIF3编码蛋白质 ;在 4株转染的 COS7细胞株中有 2株同样具有高效稳定的 TIF3编码蛋白质表达。结论 本研究成功地构建了 3株 TIF3转基因 CHO细胞株和 2株 TIF3转基因 COS7细胞株 。
关键词
tif3cdna
稳定转染
CHO细胞
COS7细胞
WESTERN
BLOT
Keywords
tif3cdna
Stable transfection CHO cells COS7 cells Western Blot
分类号
Q782 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
TIF3转基因CHO和COS7细胞株的构建与鉴定
2
作者
雷毅雄
刘玉清
徐培渝
Pius Joseph
Tong-man Ong
机构
广州医学院预防医学教研室
Molecular Epidemiology Laboratory
华西医科大学公共卫生学院卫生毒理学教研室
出处
《环境与职业医学》
CAS
北大核心
2002年第3期183-183,共1页
文摘
[目的 ]TIF3(MouseTranslationInitiationFacfor 3)是从镉转化BALB/c 3T3细胞中克隆出来的新基因 ,其在基因文库 (Gen Bank)的新添编号为AF2 710 72。为了对该基因的生物学功能进行研究 ,构建了TIF3转基因CHO和COS7细胞株并作了鉴定。[方法 ]采用磷酸钙介导转染技术和G418细胞筛选法 ,以pcD NA3 1/V5 His TOPO为表达载体 ,构建TIF3转基因CHO和COS7细胞株 ;应用WesternBlot技术对转基因表达产物进行分析与鉴定。实验设计分无转染组 (空白对照 )、载体转染组 (载体对照 )和目的基因转染组 (载体 +TIF3cDNA )。 [结果 ]结果显示 ,无论在CHO细胞还是COS7细胞 ,经转染和G418筛选后 ,无转染组的细胞 10 0 %死亡 ,而载体转染组和TIF3cDNA转染组的细胞形成较多的细胞集落。提示克隆化基因的细胞转染及G418筛选效果良好。经WesternBlot分析与鉴定 ,在 7株转染和经G418反复筛选的CHO细胞株中 ,有 3株具有高效稳定表达约 36kDa的TIF3编码蛋白质 ;在 4株转染和经G418反复筛选的COS7细胞株中有 2株也具有高效稳定的TIF3编码蛋白质表达 ,而无转染组和载体对照组的CHO和COS7细胞均缺乏此蛋白质表达。 [结论 ]本研究成功地构建了 3株TIF3转基因CHO细胞株和 2株TIF3转基因COS7细胞株。这两类TIF3转基因哺乳动物细胞稳定?
关键词
tif3cdna
转染
CHO细胞
COS7细胞
WESTERN
BLOT
编码蛋白质表述
分类号
R361.3 [医药卫生—病理学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
TIF3转基因CHO和COS7细胞株的构建与鉴定
雷毅雄
Pius Joseph
刘玉清
Tong-manOng
《四川大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2003
1
下载PDF
职称材料
2
TIF3转基因CHO和COS7细胞株的构建与鉴定
雷毅雄
刘玉清
徐培渝
Pius Joseph
Tong-man Ong
《环境与职业医学》
CAS
北大核心
2002
0
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职称材料
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