2型糖尿病人外周血TIM4蛋白水平增高且与IL-1β负相关

目的探讨2型糖尿病人(T2DM)中TIM4的蛋白表达水平及与炎性小体活化指标IL-1β的相关性。方法选取新诊断T2DM患者作为病例组,正常体检者为对照,利用流式细胞术检测病人外周血单核细胞上TIM4的蛋白表达水平,同时用ELISA检测血清中可溶性TIM4的水平,同时分析TIM4与IL-1β的相关性。结果与正常对照组相比,T2DM病人血清中可溶性TIM4明显升高(P<0.001),单核细胞上TIM4表达上调(P=0.01),TIM4与IL-1β亦呈负相关性趋势(P=0.003 6,r=-0.404 5);与T2DM病人治疗前相比,治疗后外周血单核细胞上TIM4表达下降(P=0.002)。结论 T2DM病人血液中TIM4蛋白水平增高,且与IL-1β呈负相关性,提示TIM4作为负性调控分子参与T2DM的疾病进程。

香菇多糖对卵白蛋白诱导小鼠哮喘模型树突细胞TIM4表达及炎症影响

目的:研究香菇多糖治疗卵白蛋白(OVA)诱导小鼠哮喘模型后树突状细胞TIM4表达情况及炎症影响。方法:将Balbc雌性小鼠随机分为三组:正常对照组、哮喘模型组、香菇多糖治疗组。OVA诱导激发小鼠哮喘模型,治疗组于第7天起每天进行香菇多糖腹腔注射治疗,哮喘模型组用生理盐水替代香菇多糖进行腹腔注射。分离脾脏单个核细胞,流式细胞学术检测树突细胞TIM4表达; ELISA检测血清IL-4和MCP-1浓度; QPCR检测肺组织中TIM4表达;肺组织HE染色。结果:治疗后,治疗组能下调脾脏树突细胞TIM4表达(P <0. 05),降低血清中MCP-1、IL-4浓度(P<0. 05,P <0. 01)。肺组织中TIM4的RNA表达量下降(P <0. 05)。HE染色显示治疗组肺组织炎症浸润明显减轻。结论:香菇多糖能通过下调树突细胞TIM4表达,降低炎症因子IL-4、MCP-1等浓度,抑制OVA哮喘模型的炎症反应。

TIM4在过敏性哮喘患者单核细胞和哮喘小鼠模型肺组织表达增高

目的探讨T细胞免疫球蛋白粘蛋白域4(T cell immunoglobulin domain and mucindomain 4,TIM4)在过敏性哮喘中的表达及与疾病之间的关系。方法随机选取了30例过敏性哮喘患者和30例健康对照的全血标本,流式细胞术检测了TIM4在单核细胞的表达水平,库尔特计数法检测了嗜酸性粒细胞、单核细胞、淋巴细胞占白细胞的比例。免疫组织化学法检测了哮喘小鼠模型和对照小鼠肺组织TIM4的表达水平。结果哮喘患者组TIM4阳性细胞占外周血单核细胞的2.51%,显著高于健康对照组的0.68%;哮喘患者组的嗜酸性粒细胞比例(3.88%)显著高于健康对照组(1.23%);但TIM4表达水平与嗜酸性粒细胞,单核细胞与淋巴细胞之间未见相关性。哮喘小鼠模型气道上皮细胞TIM4的表达水平高于小鼠对照组。结论TIM4在过敏哮喘中的表达水平升高,可能参与了过敏性哮喘的免疫失衡机制。

糖尿病足患者外周血TIM4蛋白水平的变化及临床意义

目的探讨TIM4蛋白水平在糖尿病足患者外周血中的变化及临床意义。方法以2016年1月至2019年6月于该院就诊的单纯糖尿病(对照组,160例)和糖尿病合并糖尿病足(观察组,160例)患者为研究对象。根据Wagner评分标准,将观察组患者按病情严重程度分为0~1级(50例)、2~3级(54例)、4~5级(56例);依据是否合并感染分为糖尿病足感染组(65例)和糖尿病足非感染组(95例)。采用流式细胞仪检测各组外周血单核细胞TIM4蛋白阳性率;酶联免疫吸附试验法检测TIM4蛋白及降钙素原(PCT)水平,免疫散射法检测C反应蛋白(CRP)水平,分别比较各组外周血TIM4蛋白、PCT、CRP的差异,受试者工作特征(ROC)曲线评价外周血TIM4蛋白对糖尿病足患者病情严重程度的预测价值。结果与对照组比较,观察组外周血TIM4蛋白阳性率和TIM4蛋白水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.001);不同Wagner分级组间外周血TIM4蛋白水平比较,差异有统计学意义(P<0.001)。其中4~5级患者外周血TIM4蛋白水平最高,2~3级次之,0~1级最低。糖尿病足感染组外周血TIM4蛋白、PCT及CRP水平明显高于糖尿病足非感染组,差异有统计学意义(P<0.001)。糖尿病足患者外周血TIM4蛋白水平与Wagner分级、PCT及CRP水平呈显著正相关(r=0.784,P=<0.001;r=0.601,P=0.005;r=0.568,P=0.008)。ROC曲线分析显示,外周血TIM4蛋白的曲线下面积为0.875(95%CI为0.814~0.936),其最佳工作点为2.70 ng/mL,此时预测糖尿病足患者病情严重程度的灵敏度和特异度分别为77.97%和87.04%,均明显优于PCT和CRP。结论外周血TIM4蛋白水平与糖尿病足患者的发生、发展密切相关,对于糖尿病足患者病情严重程度的预测具有一定的应用价值。

类风湿关节炎患者外周血单个核细胞诱导成熟树突状细胞TIM4表达

目的探讨类风湿关节炎(RA)患者外周血单个核细胞体外诱导成树突状细胞(DC)TIM4表达。方法分离15例RA患者和10例正常对照外周血单核细胞,加入重组人巨噬集落形成因子(rhMCSF)、重组人白介素-4(rh IL-4)培养6 d,再加入肿瘤坏死因子-α(TNF-α)培养1 d。采用流式细胞仪检测DC诱导分化情况,实时荧光定量PCR和Western blot检测TIM4表达。结果 RA患者外周血单核细胞诱导分化成DC数量多于对照组(P<0.01),DC表达TIM4明显增加(P<0.01)。结论 DC表达TIM4上调可能参与RA发病。

靶向RNA干扰TIM4表达对T细胞的影响

目的构建靶向RNA干扰T细胞免疫球蛋白及粘蛋白域蛋白4(TIM4)基因的慢病毒重组表达载体,分析TIM4基因对T细胞的影响。方法根据Gene Bank报道的TIM4 mRNA序列(NM_178759.4)设计干扰片段,通过基因工程方法构建靶向RNA干扰TIM4基因的慢病毒载体,体外转染DCs后与T淋巴细胞共培养,检测细胞增殖情况及细胞因子分泌水平。结果成功构建基因干扰的慢病毒载体并转染DCs。MTT实验表明TIM4-DC组T细胞的增殖受到抑制;ELISA检测显示:TIM4-DC组IL-12和IFN-γ的分泌均明显高于对照组(P<0.05)。结论 RNA干扰TIM4基因在DCs表达后,可抑制T细胞增殖的作用以及T细胞向Th2细胞分化。

支气管哮喘患者外周血TIM4,IgG4及EOS水平表达与其肺功能、哮喘发病严重程度及预后的相关性研究

目的研究外周血T细胞免疫球蛋白域及黏蛋白域蛋白4(T cells immunoglobulin domain and mucin domain protein 4,TIM4)、血清免疫球蛋白G4(IgG4)及嗜酸性粒细胞(EOS)在支气管哮喘患者中的表达水平及其与患者预后的关系。方法选取上海交通大学医学院附属第九人民医院2019.01~2020.06间收治的103例支气管哮喘患者纳为研究对象,分为急性组(急性发作期,n=66)和缓解组(哮喘缓解期,n=37),同时将30例健康志愿者纳为对照组。根据急性发作严重程度,将66例急性发作患者分为重度组、中度组及轻度组。分别比较急性组、缓解组、对照组及急性发作不同严重程度患者外周血TIM4,血清IgG4及EOS水平。分析外周血TIM4,血清IgG4及EOS水平与患者肺功能指标间的相关性。急性发作期患者出院后随访1年,统计急性组哮喘再次疾病发作情况,绘制ROC曲线,分析外周血TIM4,血清IgG4及EOS在预测哮喘急性发作患者预后中的价值。结果对照组、缓解组及急性组外周血TIM4,血清IgG4及EOS水平呈依次升高趋势,且组间差异有统计学意义(F=309.753,149.528和155.106,均P<0.001);相关性分析提示,哮喘患者外周血TIM4,EOS与肺功能指标FEV1%pred间均呈负相关(r=-0.36,-0.33,均P<0.05),IgG4与FEV1%pred及FEV1/FVC呈负相关(r=0.41,0.46,均P<0.05);急性哮喘发作轻度组、中度组及重度组患者外周血TIM4及血清IgG4,EOS水平均呈依次上升趋势,组间差异均有显著统计学意义(F=39.175,73.200,25.564,P<0.001);66例哮喘急性发作者中11例1年内再次急性复发,将其纳为预后不良组,统计发现,预后不良组外周血TIM4及血清IgG4,EOS水平分别为1.49±0.26 ng/ml,1.33±0.35 g/L和(0.55±0.16)×109/L,均显著高于预后良好组[1.02±0.37 ng/ml,0.86±0.22 g/L和(0.38±0.17)×109/L],差异均有统计学意义(t=4.008,5.810和3.055,均P<0.05)。绘制ROC曲线发现,外周血TIM4,IgG4及EOS在预测哮喘急性发作者预后中均具有一定价值,各指标单独应用时,TIM4预测效能最高(AUC=0.802,95%CI:0.635~0.975),预测灵敏度及特异度分别为72.7%,85.5%。联合预测因子预测效能最高(AUC=0.944,95%CI:0.890~0.998),预测灵敏度及特异度分别为90.9%和89.1%。结论哮喘患者外周血TIM4,IgG4及EOS浓度异常升高,外周血TIM4,IgG4及EOS浓度不仅可有效反映哮喘患者病情,还可预测患者后期急性复发风险。

外周血TIM4和sIgE联合检测预测儿童过敏性哮喘病情严重程度的价值研究

目的探讨过敏性哮喘患儿外周血T细胞免疫球蛋白及黏蛋白域4(TIM4)及过敏原特异性IgE(sIgE)水平检测对预测病情严重程度的临床价值。方法将45例过敏性哮喘患儿分为轻、中、重度哮喘组3组,随机选取30例同期健康儿童体检者作为对照组,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测治疗前后外周血TIM4阳性细胞占单核细胞百分率及sIgE水平;采用受试者操作特征曲线(ROC曲线)评价TIM4阳性细胞百分率及sIgE对过敏性哮喘严重程度的预测效能。结果重度哮喘组外周血TIM4阳性细胞百分率和血清sIgE水平均明显高于其他3组,差异有统计学意义(P<0.05);中度哮喘组患儿外周血TIM4阳性细胞百分率和血清sIgE水平均较轻度哮喘组和对照组明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。经治疗1个月后,中、重度哮喘组患儿外周血TIM4阳性细胞百分率和血清sIgE水平均有明显的下降,差异有统计学意义(P<0.05)。当外周血TIM4阳性细胞百分率在1.935时,其约登指数最大,为0.777 8,其对中、重度过敏性哮喘诊断的灵敏度为77.78%,特异度为84.78%,对中、重度过敏性哮喘的阳性预测值为0.750 0,阴性预测值为0.866 7;血清sIgE水平在158.5U/L时,其约登指数值最大,为0.781 5,其对中、重度过敏性哮喘诊断的灵敏度为81.48%,特异度为82.61%,对中、重度过敏性哮喘的阳性预测值为0.733 3,阴性预测值为0.883 7。两个指标联合检测对中、重度过敏性哮喘诊断的灵敏度为92.59%,特异度为95.65%,对中、重度过敏性哮喘的阳性预测值为0.925 9,阴性预测值为0.956 5,提示二者联合检测对预测中、重度过敏性哮喘的价值最高。结论动态监测过敏性哮喘患儿外周血中TIM4阳性细胞百分率及sIgE水平有助于判断过敏性哮喘病情严重程度及治疗效果;二者联合检测对中、重度过敏性哮喘的预测价值更高。

传染性囊病病毒对IgM^(+)TIM4^(+)B细胞分化的影响

以佛波酯(PMA)于体外培养中刺激原代法氏囊细胞(PBCs)诱导产生的IgM^(+)TIM4^(+)B细胞为模型,分析传染性囊病病毒(IBDV)感染对IgM^(+)TIM4^(+)B细胞分化形成及IBDV在IgM^(+)TIM4^(+)B和IgM^(+)TIM4^(-)B细胞中的复制动态。结果显示,PMA刺激后第24~48小时PBCs中IgM^(+)TIM4^(+)B细胞比例相对稳定;而以IBDV感染经PMA刺激24 h的PBCs后,IgM^(+)TIM4^(+)B细胞比例显著减少且与IBDV感染剂量成负相关,IgM^(+)TIM4^(+)B细胞的IBDV-VP1 RNA水平也显著低于IgM^(+)TIM4^(-)B细胞。结果提示,IBDV在IgM+TIM4+B细胞和IgM^(+)TIM4^(-)B细胞中的复制过程存在差异。

血清S1P、SFRP1、TIM4、SFRP5与成人支气管哮喘急性发作期患者肺功能、气道炎症和治疗后再次急性复发的关系

目的:观察血清分泌型卷曲相关蛋白1(SFRP1)、分泌型卷曲相关蛋白5(SFRP5)、1-磷酸鞘氨醇(S1P)、T细胞免疫球蛋白域及黏蛋白域蛋白4(TIM4)与成人支气管哮喘急性发作期患者肺功能、气道炎症和治疗后再次急性复发的关系。方法:选择火箭军特色医学中心2016年7月~2020年8月期间收治的120例成人支气管哮喘患者,其中47例缓解期患者纳为缓解组,73例急性发作期患者纳为发作组。对比发作组、缓解组血清S1P、SFRP1、TIM4、SFRP5水平、肺功能[第1秒用力呼气容积(FEV_(1))、用力肺活量(FVC)、FEV_(1)/FVC]、气道炎症[血清总免疫球蛋白E(Ig E)、痰嗜酸粒细胞、呼出气一氧化氮(FeNO)、血嗜酸粒细胞],治疗结束后以门诊复查或电话的形式进行随访1年,根据1年内是否再次急性复发分组,分为复发组和未复发组,对比复发组和未复发组的血清S1P、SFRP1、TIM4、SFRP5水平。结果:发作组的S1P、SFRP1、TIM4高于缓解组,SFRP5低于缓解组(P<0.05)。发作组的FEV_(1)、FVC、FEV_(1)/FVC低于缓解组(P<0.05)。发作组的血清总Ig E、嗜酸粒细胞、FeNO、血嗜酸粒细胞高于缓解组(P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示,S1P、SFRP1、TIM4与FEV_(1)、FVC、FEV_(1)/FVC呈负相关(P<0.05),而与血清总Ig E、嗜酸粒细胞、FeNO、血嗜酸粒细胞均呈正相关(P<0.05)。SFRP5与FEV_(1)、FVC、FEV_(1)/FVC呈正相关(P<0.05),而与血清总Ig E、嗜酸粒细胞、FeNO、血嗜酸粒细胞均呈负相关(P<0.05)。复发组的S1P、SFRP1、TIM4高于未复发组,SFRP5低于未复发组(P<0.05)。结论:成人支气管哮喘急性发作期患者S1P、SFRP1、TIM4水平异常升高,SFRP5异常降低,且与肺功能、气道炎症、再次急性复发均有一定关系。

TIM4在湿疹和RA患者外周血单核细胞的表达水平研究

目的:研究TIM4在湿疹和类风湿性关节炎(RA)患者外周血单核细胞的表达水平。方法:采用流式细胞技术分别检测30例健康体检者、30例湿疹患者、30例RA患者及30例IgE升高患者TIM4阳性细胞占外周血单核细胞的比例,检测各组嗜酸性粒细胞、单核细胞、淋巴细胞占白细胞的比例并对其与TIM4水平的相关性进行分析。结果:与对照组相比,湿疹患者组,RA患者组的TIM4阳性细胞占外周血单核细胞比例均显著升高,差异有统计学意义(P<0.05),而IgE升高组差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组相比,湿疹患者组的嗜酸性粒细胞比例显著升高,差异有统计学意义(P<0.05),而RA患者组、IgE升高患者组差异均无统计学意义(均P>0.05)。各组TIM4比例与嗜酸性粒细胞比例相关性分析中,只有对照组差异有统计学意义(P<0.05),其他各组差异均无统计学意义(均P>0.05)。各组TIM4与单核细胞、TIM4与淋巴细胞差异均无统计学意义(均P>0.05)。另RA组的TIM4比例与患者年龄相关(P<0.05),其他各组均无相关性。结论:TIM4在湿疹、RA患者外周血单核细胞表达水平较正常升高,提示TIM4与这类疾病存在相关性。

基于单片机的三相AC-DC变换系统

针对传统电源稳定性差、输出效率低,以TIM4C123G单片机为控制核心,结合双闭环PFC算法,制作了三相AC-DC变换系统。电压、电流检测模块将采集到的信息送入TIM4C123G单片机。TIM4C123G单片机控制三相六开关整流桥的通断,将28V三相电压由交流转为直流,通过DC-DC升降压模块调整直流输出电压为36V。经测试,系统稳定性更强,输出效率更高,运行效果良好。

Tim-4对kupffer细胞分泌Th1/Th2类细胞因子及抗原呈递功能的影响

目的探讨T细胞免疫球蛋白黏蛋白(Tim)-4对肝脏巨噬细胞kupffer细胞(KCs)分泌Th1/Th2类细胞因子及抗原呈递功能的影响。方法以非连续梯度离心法体外分离培养BALB/c小鼠KCs,随机分为对照组、过表达Tim-4组、Tim-4-shRNAs组、Tim-4单克隆抗体组,以过表达Tim-4、Tim-4-shRNAs质粒及Tim-4单克隆抗体处理KCs,以100 ng/ml脂多糖(LPS)活化后,实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)及Western印迹检测各组细胞Tim-4表达;免疫组化鉴定KCs,台盼蓝染色判断活率;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组细胞培养液中Th1类细胞因子肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β、干扰素(IFN)-γ及Th2类细胞因子IL-10水平;流式细胞仪检测KCs表面共刺激分子(MHC)-Ⅱ、CD80、CD86、CD40表达水平;分离BALB/c小鼠脾细胞悬液,制备纯化T细胞,与上述各组KCs共培养,噻唑蓝(MTT)法检测T细胞增殖情况;膜联蛋白异硫氰酸荧光素Ⅴ/碘化丙啶(AnnexinV-FITC/PI)法观察T淋巴细胞凋亡情况,进而检测KCs抗原呈递功能。结果免疫组化结果显示KCs表面特异性分子CD68表达强阳性,台盼蓝染色结果显示KCs拒染蓝染,其活性良好。与对照组相比,过表达Tim-4组细胞Tim-4表达、IL-10水平、T细胞凋亡率明显升高,TNF-α、IL-1β、IFN-γ水平明显降低,MHC-Ⅱ、CD80、CD86、CD40表达水平明显降低,T细胞相对增殖率明显降低(均P<0.05);Tim-4-shRNAs组细胞Tim-4表达、IL-10水平、T细胞凋亡率明显降低,TNF-α、IL-1β、IFN-γ水平明显升高,MHC-Ⅱ、CD80、CD86、CD40表达水平明显升高,T细胞相对增殖率明显升高(均P<0.05);Tim-4单克隆抗体组细胞Tim-4表达无明显变化(P>0.05),其他指标变化趋势与Tim-4-shRNAs组相同。结论上调Tim-4可促进KCS分泌Th2类细胞因子,抑制其分泌Th1类细胞因子,降低其抗原呈递功能。

TiO_2纳米薄膜的制备与氧敏性能的研究

本文通过 Sol- gel法在 Al2 O3基片上制得了 Ti O2 纳米薄膜 ,经 XRD分析 ,薄膜具有多晶结构 ,其主晶相为金红石 .本实验还对 Ti O2 薄膜的氧敏特性进行了研究 ,实验结果表明 ,Ti O2 纳米薄膜在 80 0℃下具有良好的氧敏特性和重复性 。