MSCT特征及血清GPX3、TIMP-2、FGFR-4与甲状腺癌TNM分级的相关性

目的研究多层螺旋CT(MSCT)特征及血清谷胱甘肽过氧化物酶3(GPX3)、金属蛋白酶组织抑制剂-2(TIMP-2)、成纤维生长因子受体4(FGFR-4)与甲状腺癌TNM分级的相关性。方法回顾性选择2018年1月至2020年12月于马鞍山十七冶医院诊治的甲状腺癌患者46例纳入实验组,其中Ⅰ+Ⅱ期27例,Ⅲ+Ⅳ期19例,同期于本院就诊的良性甲状腺良性结节患者46例纳入对照组。两组均行MSCT及血清GPX3、TIMP-2、FGFR-4诊断。观察两组MSCT特征,血清GPX3、TIMP-2、FGFR-4水平。观察实验组不同TNM分级患者MSCT特征,血清GPX3、TIMP-2、FGFR-4水平。分析甲状腺癌患者MSCT特征及血清GPX3、TIMP-2、FGFR-4水平与不同TNM分级的相关性。结果实验组病灶形态不规则比例、边缘不清晰比例、实性及囊实性比例、不均匀强化比例、砂砾样钙化比例及病灶数目多发比例分别为73.91%、82.61%、39.13%、76.09%、56.52%、84.78%,均大于对照组(8.70%、15.22%、4.35%、36.96%、6.52%、17.39%),差异均有统计学意义(P<0.05);两组病灶直径≥5 mm比例比较,差异无统计学意义(P>0.05)。实验组血清GPX3、FGFR-4水平分别为(226.96±26.17)μg/L、(31.28±3.45)ng/mL,均高于对照组[(82.85±8.53)μg/L、(22.64±2.55)ng/mL],TIMP-2水平为0.43±0.06,低于对照组(0.75±0.08),差异均有统计学意义(P<0.05)。Ⅰ+Ⅱ期患者病灶形态不规则比例、边缘不清晰比例、实性及囊实性比例、不均匀强化比例、砂砾样钙化比例及病灶数目多发比例均大于Ⅰ+Ⅱ期患者,差异均有统计学意义(P<0.05);Ⅰ+Ⅱ期、Ⅲ+Ⅳ期患者病灶直径≥5 mm比例比较,差异无统计学意义(P>0.05)。Ⅲ+Ⅳ期患者血清GPX3、FGFR-4水平均高于Ⅰ+Ⅱ期患者,TIMP-2水平低于Ⅰ+Ⅱ期患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。经Pearson相关分析,病灶形态不规则、边缘不清晰、实性及囊实性、不均匀强化、砂砾样钙化、病灶数目及血清GPX3、FGFR-4水平与甲状腺癌患者TNM分级均呈正相关(P<0.05),血清TIMP-2水平与甲状腺癌患者TNM分级呈负相关(P<0.05);病灶直径≥5 mm与甲状腺癌患者TNM分级不相关(P>0.05)。结论甲状腺癌存在多种典型的MSCT特征及血清GPX3、TIMP-2、FGFR-4水平异常改变,且甲状腺癌病灶多种MSCT特征及血清GPX3、FGFR-4、TIMP-2水平与TNM分级显著相关。

前列腺突入膀胱程度及尿TIMP-2水平与前列腺增生患者膀胱出口梗阻严重程度的相关性分析

目的研究前列腺突入膀胱程度(Intravesical prostatic protrusion,IPP)及尿金属蛋白酶组织抑制剂-2(Tissue inhibitor of metalloproteinase-2,TIMP-2)与前列腺增生患者膀胱出口梗阻(Bladder outlet obstruction,BOO)严重程度的相关性。方法收集99例良性前列腺增生(Benign prostatic hyperplasia,BPH)患者纳入本研究,收集患者临床资料,检测患者IPP及尿TIMP-2,对患者进行尿动力学检测。根据国际前列腺症状评分(International prostate symptom score,IPSS)将患者分为3组,0~7评分为轻度组,共42例,8~19分为中度组,共25例,20~35分为重度组,共32例。采用Logistic回归分析3组患者的临床资料、IPP、尿TIMP-2、膀胱出口梗阻指数(Bladder outlet obstruction,BOOI)的相关性。采用受试者工作特征曲线(Receiver operating characteristic,ROC)分析IPP、TIMP-2检测预测BOO的敏感性。结果使用单因素方差分析法分析3组患者的临床指标,随着患病程度加重,年龄、TPV、IPSS、IPP、尿TIMP-2水平均有增加趋势,尿动力学指标中Qmax下降,Pdet.Qmax、BOOI、PVR均升高,且差异具有统计学意义(P均<0.05)。相关性分析结果显示,3组患者BOOI与年龄、BMI、TPV、PVR无显著相关性(P均>0.05)。轻度组、中度组和重度组患者BOOI与IPP、尿TIMP-2以及IPSS均呈正相关(P均<0.05)。ROC曲线分析显示IPP与尿TIMP-2单独预测BOO均具有较强敏感性,IPP联合尿TIMP-2检测敏感性更高(P均<0.05)。结论IPP、尿TIMP-2与前列腺增生患者BOO严重程度具有相关性,且IPP联合尿TIMP-2预测BOO具有较高敏感性。

针刀对肌性斜颈模型兔胸锁乳突肌中calpain-1、CD45、MMP-2、TIMP-2蛋白表达的影响

目的:应用肌性斜颈兔动物模型,探讨针刀治疗肌性斜颈的作用机制及意义。方法:无水酒精注射制备动物肌性斜颈兔子模型后,选取模型兔子48只,随机分为正常组、模型组、针刀组、按摩组,每组12只。分别给予各组对应治疗,治疗2个月后各组分别取部分胸锁乳突肌制作标本,免疫组化法观察钙蛋白酶1(calpain-1)、分化抗原决定簇45(CD45)、基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)、基质金属蛋白酶抑制因子2(tissue inhibitor of metalloproteinases-2,TIMP-2)在各组肌纤维中的表达情况。结果:与正常组比较,其余各组实验动物明显出现颈部活动受限、斜颈、头颈不对称症状,而治疗结束后,针刀组和按摩组实验动物颈部活动受限改善,无明显头颈不对称症状。calpain-1、CD45、TIMP-2的表达,与正常组比较,模型组、按摩组上调(P<0.01);与模型组比较,针刀组、按摩组下调(P<0.01);与针刀组比较,按摩组上调(P<0.01)。MMP-2表达,与正常组比较,模型组下调(P<0.01),与模型组比较,针刀组、按摩组上调(P<0.05)。结论:针刀治疗肌性斜颈效果显著,其作用机制可能与减少calpain-1、CD45、TIMP-2表达,增加MMP-2表达有关。

前列宁通过调控前列腺MMP-2、TIMP-2降解层粘连蛋白治疗良性前列腺增生的机制研究

目的探讨前列宁(QLN)通过调控前列腺MMP-2、TIMP-2降解层粘连蛋白(LN)治疗良性前列腺增生的机制。方法将50只SPF级6~7周龄雄性SD大鼠采用随机数字表法分为空白组,模型组和低、中、高剂量组,每组10只,除空白组外,其余组采用氯胺酮腹腔注射麻醉去势摘除双侧睾丸、1周后按5 mg/kg皮下注射丙酸睾酮造模,共28 d,造模期间,空白组、模型组按10 ml/(kg·d)灌胃生理盐水,低、中、高剂量组分别按3 g、6 g、12 g/(kg·d)灌胃QLN,1次/d,连续28 d。末次灌胃后禁食12 h,分离各组大鼠完整的前列腺组织并计算前列腺体积、前列腺湿重及前列腺指数(PI),免疫组化检测各组大鼠前列腺组织LN表达水平;取对数生长期的人前列腺增生细胞-1(BPH-1)分为空白组和低、中、高剂量组,分别按浓度为0、0.25、0.5、1.0 mg/mL QLN干预48 h,倒置显微镜观察各组细胞形态,CCK-8法检测各组细胞活性,Western blot分别检测各组细胞MMP-2、TIMP-2、LN蛋白表达量。结果与空白组比较,模型组大鼠前列腺体积、前列腺湿重及PI均明显增大(P<0.01),前列腺组织LN表达水平均明显增强(P<0.05);与模型组比较,低、中、高剂量组大鼠前列腺体积、前列腺湿重及PI均明显减小(P<0.05),低、中、高剂量组大鼠前列腺组织LN表达水平均不同程度降低(P<0.05)。与空白组比较,中、高剂量组BPH-1细胞随着浓度的增高,由菱形变成不规则,密度明显减少,生长速度缓慢,24、48 h BPH-1细胞活力均明显下降(P<0.05),MMP-2、LN蛋白表达量均明显降低,TIMP-2蛋白表达量明显增高(P均<0.05)。结论QLN能有效减小前列腺体积、前列腺湿重及PI,降低前列腺组织LN表达水平,其机制之一可能是通过调控前列腺组织及BPH-1中MMP-2、TIMP-2降解LN而得以实现。

基于对MMP-2/TIMP-2调控探索启明丸对形觉剥夺性近视豚鼠的影响

目的观察启明丸对形觉剥夺性近视豚鼠干预作用及对巩膜基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及其组织抑制物(TIMP-2)表达的影响,探讨其可能的作用机制。方法将40只2~3周龄雄性三色豚鼠,随机分为高剂量启明丸组(HQMG)、低剂量启明丸组(LQMG)、模型组(MG)及空白组(BG)4组,每组10只。用形觉剥夺法建立豚鼠的近视模型,4周确认造模成功后,HQMG和LQMG豚鼠分别给予启明丸药粉1.44 g/200 g、0.36 g/200 g溶于0.9%氯化钠注射液2 mL灌胃;MG与BG豚鼠给予0.9%氯化钠注射液2 mL灌胃。各组均每日1次,共4周。观察各组豚鼠屈光度、眼轴长度变化,巩膜组织病理学改变,并采用Western Blot检测巩膜组织中MMP-2、TIMP-2的表达。结果(1)近视模型:造模4周后,各造模组实验眼近视屈光度与自身对照眼相比均增加(t_(HQMG)=-5.204,t_(LQMG)=-5.626,t_(MG)=-4.283,均P=0.000);4组间实验眼近视屈光度变化两两比较,BG均低于各造模组,差异均有统计学意义(t_(HQMG)=-3.690,t_(LQMG)=-3.850,t_(MG)=-3.969,均P=0.001)。各造模组实验眼与自身对照眼相比眼轴长度明显增长(t_(HQMG)=2.440,P=0.025;t_(LQMG)=2.141,P=0.045;t_(MG)=2.341,P=0.025)。4组间实验眼眼轴长度变化两两比较,BG均低于各造模组(t_(HQMG)=3.881,P=0.001,t_(LQMG)=3.115,P=0.006,t_(MG)=2.600,P=0.019),差异均有统计学意义。(2)屈光度变化:造模8周后,3组间实验眼近视屈光度两两比较,MG较各治疗组增加(t_(HQMG)=2.883,P=0.010;t_(LQMG)=2.442,P=0.030),差异均有统计学意义。灌胃前后3组间近视屈光度差值两两比较,MG高于HQMG,差异有统计学意义(t=2.999,P=0.008)。(3)眼轴长度变化:3组间实验眼眼轴长度两两比较,MG较各治疗组增加(t_(HQMG)=-2.422,P=0.026;t_(LQMG)=-2.372,P=0.029),差异均有统计学意义。灌胃前后3组间眼轴增长幅度两两比较,MG高于各治疗组(t_(HQMG)=-3.029,P=0.007;t_(LQMG)=-2.846,P=0.011),差异均有统计学意义。(4)组织病理变化:HQMG、LQMG豚鼠巩膜各层间结构较模型组相对清晰,纤维相对致密,巩膜整体厚度增加。(5)巩膜MMP-2及TIMP-2蛋白表达:MG的MMP-2蛋白表达均高于各治疗组(t_(HQMG)=21.905,t_(LQMG)=21.844,均P=0.000),差异均有统计学意义。BG的TIMP-2蛋白表达均低于各造模组(t_(HQMG)=-9.352,t_(LQMG)=-10.414,t_(MG)=-11.108,均P=0.000),差异均有统计学意义。MG的MMP-2/TIMP-2均高于各治疗组,差异均有统计学意义(t_(HQMG)=21.180,t_(LQMG)=21.451,均P=0.000)。结论启明丸能够降低豚鼠近视屈光度,延缓眼轴增长,对形觉剥夺性豚鼠的近视进展有干预作用,其作用机制与调节MMP-2的表达,使MMP-2与TIMP-2趋于平衡有关。

重型颅脑损伤病人血清NF-L和TIMP-2水平变化及临床意义

目的探讨重型颅脑损伤(TBI)病人血清神经丝蛋白轻链多肽(NF-L)、组织基质金属蛋白酶抑制因子-2(TIMP-2的水平变化及临床意义。方法2019年8月~2021年8月前瞻性收集重型TBI共122例,采用酶联免疫吸附试验检查入院血清NF-1和TIMP-2水平;伤后6个月,应用GOS评分评估预后,其中4~5分为预后良好,1~3分为预后不良。结果伤后6个月,预后良好72例,预后不良50例。预后不良组血清NF-L以及TIMP-2水平明显高于预后良好组(P<0.05)。入院血清NF-L水平(r=-0.585)、TIMP-2水平(r=-0.542)与入院GCS评分呈明显负相关(P<0.05)。多因素Cox回归分析显示,血清NF-L、TIMP-2水平增高是重型TBI伤后6个月预后不良的独立危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析显示血清NF-L1≥54.60 pg/ml联合血清TIMP-2≥42.59 ng/ml预测重型TBI伤后6个月预后不良的曲线下面积为0.854(95%CI 0.789~0.919),灵敏度为82.0%,特异度为70.8。结论重型TBI病人血清NF-L、TIMP-2水平明显增高,是伤后6个月预后不良的危险因素;两者联合应用对病人预后具有较高的预测价值。

TIMP-2·IGFBP-7对成例肾病综合征急性肾损伤发生发展的预测价值

目的 明确[TIMP-2]×[IGFBP-7]对成例肾病综合征急性肾损伤发生的预测价值。方法 选取2020年12月—2022年12月济南市第八人民医院收治的102例肾病综合征患者为研究对象,根据急性肾损伤(acute kidney injury, AKI)的发生情况分为AKI组(n=29)及非AKI组(n=73)。对比两组患者的TIMP-2、IGFBP-7、[TIMP-2]×[IGFBP-7]水平,并评估其预测价值。结果 AKI组入院时的TIMP-2、IGFBP-7、[TIMP-2]×[IGFBP-7]水平分别为(3.34±0.57)ng/mL、(159.48±28.95)ng/mL、(543.54±168.17)(ng/mL)2均高于非AKI组,差异有统计学意义(t=11.507、9.184、12.132,P<0.001)。[TIMP-2]×[IGFBP-7]预测AKI的AUC、95%CI、P值、约登指数、敏感度及阴性预测值均高于单一TIMP-2预测和IGFBP-7预测,差异有统计学意义(P<0.001)。结论 [TIMP-2]×[IGFBP-7]对肾病综合征发生AKI有早期预测价值,可为临床提供诊断依据,改善患者预后。

养血散寒通脉方治疗血虚寒凝型子宫内膜异位症的临床研究

【目的】观察养血散寒通脉方(由当归四逆加吴茱萸生姜汤加减而成)治疗血虚寒凝型子宫内膜异位症(EMS)的临床疗效。【方法】将120例血虚寒凝型EMS患者随机分为研究组和对照组,每组各60例。研究组给予养血散寒通脉方治疗,对照组给予少腹逐瘀颗粒治疗,疗程为3个月,并于疗程结束后随访1年。观察2组患者治疗前后各种疼痛评分[包括经期腹痛视觉模拟量表(VAS)评分和痛经、非经期盆腔痛、性交痛、盆腔压痛、骶韧带结节触痛分级评分]、卵巢子宫内膜异位囊肿大小及血清糖类抗原125(CA125)、血管内皮生长因子(VEGF)、可溶性细胞间黏附分子1(SICAM-1)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、组织金属蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)水平的变化情况,并观察2组患者的临床疗效、安全性、复发情况及妊娠情况。【结果】(1)研究过程中,研究组脱落3例,对照组脱落5例,最终共112例患者纳入统计分析,其中研究组57例,对照组55例。(2)治疗3个月后,研究组的总有效率为92.98%(53/57),对照组为85.45%(47/55),组间比较,研究组的疗效明显优于对照组(P<0.05)。(3)治疗后,2组患者的各种疼痛评分(包括经期腹痛VAS评分和痛经、非经期盆腔痛、性交痛、盆腔压痛、骶韧带结节触痛分级评分)均较治疗前明显下降(P<0.05),且研究组的下降幅度均明显优于对照组(P<0.05)。(4)治疗后,2组患者的卵巢子宫内膜异位囊肿均略有缩小,但组内治疗前后及治疗后组间比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。(5)治疗后,2组患者血清CA125、VEGF、SICAM-1、MMP-9水平均较治疗前下降(P<0.05),血清TIMP-2水平均较治疗前升高(P<0.05),且研究组对血清CA125、VEGF、SICAM-1、MMP-9水平的下降幅度及对血清TIMP-2水平的升高幅度均明显优于对照组(P<0.05)。(6)随访1年,研究组的复发率为30.19%(16/53),明显低于对照组的68.09%(32/47),组间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。研究组21例有生育要求,其中14例妊娠,妊娠率为66.67%(14/21);对照组20例有生育要求,其中4例妊娠,妊娠率为20.00%(4/20);组间比较,研究组的妊娠率明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。(7)治疗期间,2组患者均无明显不良反应发生,且患者的血、尿、大便常规及心电图、肝肾功能等安全性指标均无异常变化。【结论】养血散寒通脉方治疗血虚寒凝型EMS患者疗效确切,能够显著缓解患者各种疼痛症状,改善妊娠结局,有效调节血清CA125、VEGF、SICAM-1、MMP-9、TIMP-2水平。

MMP-2/9活性与TIMP-1/2蛋白表达在大鼠肺纤维化形成中的变化特点

目的：观察大鼠肺纤维化形成过程中基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase，MMP）-2／9的活性及其活性抑制物——基质金属蛋白酶组织抑制因子（tissue inhibitor of matrix metalloproteinase，TIMP）-1／2蛋白表达的动态变化，探讨肺纤维化形成过程中细胞外基质（extracellular matrix，ECM）降解的调控规律。方法：SD大鼠48只，随机分为模型组（30只）与正常对照组（18只）。模型组大鼠予以1次性气管内注射博来霉素诱导肺纤维化模型，正常对照组大鼠于气管内注入等量生理盐水。每组再各设1d、3d和1、2、3、4周共6个时间观察点，动态观察大鼠肺系数的变化。HE染色观察大鼠肺组织病理学的改变；Masson染色观察大鼠肺组织胶原沉积情况；Jamall氏法测定肺组织羟脯氨酸（hydroxyproline，Hyp）的含量；Western印迹法分析肺组织MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2蛋白的表达变化；明胶酶图法检测肺组织MMP-2与MMP-9的活性。结果：与正常对照组大鼠比较，模型组大鼠染毒后2周其肺组织发生局灶性病变，肺泡壁与间隔增厚，肺泡腔与间质内有大量炎细胞浸润，伴有少量成纤维细胞；肺系数明显增高；肺组织内Hyp含量稍升高；MMP-2／9蛋白的表达与活性增加，以活化型MMP-2增加更为明显；TIMP-1／2蛋白的表达则逐渐增加。模型组大鼠染毒后3～4周时，肺泡结构遭到破坏，部分肺泡腔塌陷消失，由胶原纤维和成纤维细胞占据，肺泡壁与间隔进一步增厚，形成严重的肺纤维化；肺系数较2周时有所下降，肺组织Hyp含量和TIMP-1／2蛋白的表达明显增加，至染毒后4周时最为明显；MMP-2／9活性较2周时有所下降，尤以活化型MMP-2的活性下降较为明显。结论：博来霉素诱导肺纤维化形成过程中，早期肺组织的病理学变化以肺泡炎症为主，肺组织内MMP-2／9活性增高；后期以纤维化为主，肺组织TIMP-1／2表达明显增加，MMP-2／9活性则有所下降。

MMP-2和TIMP-2基因启动子区多态性与卵巢上皮性癌关系的研究

为探讨MMP-2和TIMP-2基因启动子区单核苷酸多态性（SNPs）与卵巢上皮性癌发病风险的关系,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）方法检测了246例卵巢上皮性癌患者和324例对照妇女的MMP-2C-1306T、C-735T和TIMP-2G-418C3个SNPs的基因型。结果显示,MMP-2C-1306TSNP的等位基因及基因型频率分布在卵巢癌与对照组间无显著差异（P=0.55和P=0.42）;但卵巢癌组MMP-2C-735TSNP的C等位基因和C/C基因型频率（80.7%和66.7%）明显高于对照组（75.5%和55.9%）,与T/T＋C/T基因型比较,携带C/C基因型可以显著增加卵巢癌的发病风险（OR=1.58,95%CI=1.12～2.23）,进一步分层分析显示,C/C基因型主要与宫内膜样癌和年龄≥50岁妇女的发病风险显著相关,OR值分别为1.69（95%CI=1.03～2.79）和1.71（95%CI=1.14～2.57）;对MMP-2C-1306T、C-735T2个SNPs的单体型分析显示,4种单体型频率（T-1306-T-735、T-1306-C-735、C-1306-T-735和C-1306-C-735）在两组间分布无显著差异（P=0.24）;虽然TIMP-2G-418CSNP的等位基因及基因型频率在卵巢癌组与对照组间分布无显著性差异（P=0.33和P=0.47）,但以病理类型分层分析显示,携带TIMP-2G-418G/G基因型有增加宫内膜样癌发病风险的趋势（OR=1.62,95%CI=0.94～2.78）。以上结果提示,MMP-2基因启动子区C-735TSNP的C/C基因型可能是卵巢上皮性癌发病的潜在危险因素,而C-1306TSNP可能与卵巢上皮性癌的发病风险无关;TIMP-2G-418CSNP可能与不同病理类型的卵巢上皮性癌发病风险有关。

红芪多糖对模型小鼠糖尿病心肌病心肌纤维化和基质金属蛋白酶2及其抑制剂表达的影响

目的观察红芪多糖(HPS)对模型小鼠心肌组织基质金属蛋白酶2(MMP-2)及其抑制剂(TIMP-2)表达的影响,探讨其防治糖尿病心肌病心肌纤维化的作用机制。方法将60只实验小鼠随机分为模型组、罗格列酮组和HPS高、中、低剂量组,正常组为12只同周龄同背景的非转基因雄性BKS.Cg-Dock7~m+/+Lepr^(d)b/JNju小鼠。各组给予相应药物灌胃,连续8周。给药前及给药2、4、6、8周末检测小鼠血糖;Masson染色观察心肌纤维化程度;蛋白印迹法检测心肌组织MMP-2、TIMP-2的蛋白表达。结果与模型组比较,HPS高、中剂量组和罗格列酮组小鼠血糖明显下降。Masson染色结果显示,模型组小鼠心肌间质中亮绿色纤维较正常组明显增多,HPS高剂量组、罗格列酮组较模型组有所减少。蛋白质印迹检测结果显示,与正常组比较,模型组小鼠MMP-2表达明显降低,TIMP-2表达明显升高,MMP-2/TIMP-2比值下降;与模型组比较,HPS高、中剂量组和罗格列酮组小鼠MMP-2表达明显升高,TIMP-2表达明显降低,MMP-2/TIMP-2比值上升。结论 HPS可减轻模型小鼠糖尿病心肌病心肌纤维化程度,其治疗作用可能是通过升高MMP-2/TIMP-2比值,从而使模型小鼠心肌纤维化有所减轻。

心脑血脉宁对家兔动脉粥样硬化易损斑块模型MMP-2、TIMP-2表达的影响

[目的]探讨心脑血脉宁对家兔动脉粥样硬化易损斑块模型基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶抑制因子-2(TIMP-2)表达的影响。[方法]通过喂养高脂饲料和主动脉球囊内皮拉伤术复制动脉粥样硬化易损斑块模型,实验分为模型组,假手术组,心脑血脉宁组,历时15周。处死后,取腹主动脉行苏木精-伊红(HE)染色,观察镜下病变,计数斑块破裂数,免疫组化方法检测MMP-2、TIMP-2蛋白含量。[结果]1)HE观察:假手术组镜下形态结构完整,模型组斑块中心可见大量脂核,斑块表面覆盖纤维帽,在斑块肩部可见残存泡沫细胞和大炎细胞浸润。心脑血脉宁组介于两者之间。2)免疫组化结果:与假手术组相比,模型组MMP-2、TIMP-2蛋白含量明显升高,差异有显著性(P<0.01);心脑血脉宁组MMP-2与模型组比较表达降低,差异有显著性(P<0.01),而TIMP-2含量与模型组相比有降低趋势,但无统计学差异(P>0.05);心脑血脉宁组能够有效降低两者比值,与模型组相比差异有显著性(P<0.01)。[结论]心脑血脉宁干预家兔动脉粥样硬化易损斑块模型,能减少斑块破裂,其机制可能与降低斑块MMP-2含量以及调节MMP-2与TIMP-2比值有关。

口服普萘洛尔对婴幼儿血管瘤MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2表达水平的影响

目的研究口服普萘洛尔前后婴幼儿血管瘤病灶内MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2表达水平的影响。方法选择2010年5月至2011年12月来我院就诊、年龄≤3个月、血管瘤病灶位于肢体或隐蔽部位、家属要求手术治疗却具备单独口服普萘洛尔治疗条件、排除口服普萘洛尔禁忌证、先前未接受过其他任何相关治疗的病例作为研究对象,共39例。经过与家属沟通并征得其书面同意,先按口服普萘洛尔诊疗常规,口服用药前在局麻下夹取血管瘤体组织活检,后口服8周普萘洛尔[剂量:2 mg/(kg.d),分2次,每12小时用药],继而手术切除瘤体。采用免疫组化、实时荧光定量RT-PCR的方法,检测口服用药前后病灶组织内MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2表达水平的变化,计算口服用药前后病灶微血管密度(MVD)。结果免疫组化与实时荧光定量RT-PCR结果均提示,口服普萘洛尔后血管瘤病灶内MVD值明显减低且具有统计学意义(t=18.458,P<0.01),MMP-2、MMP-9表达水平较用药前明显减少(P<0.01),TIMP-1、TIMP-2表达水平明显增高(P<0.01)。且口服用药后上述4个因子免疫组化平均积分光密度、mRNA相对表达量变化与MVD值变化密切相关。结论普萘洛尔可下调血管瘤病灶内MMP-2、MMP-9的表达,上调TIMP-1、TIMP-2的表达,从而抑制新生血管的形成。

肺纤方对博莱霉素大鼠肺纤维化模型基质金属蛋白酶1、2及组织金属蛋白酶抑制剂1、2的影响

目的:观察肺纤方抗大鼠肺纤维化肺基质重建的作用。方法:气管内注入博莱霉素制造大鼠肺纤维化模型,观察造模后14、28、45d模型组、假手术组、肺纤方组、泼尼松组血清基质金属蛋白酶1、2及其抑制物组织金属蛋白酶抑制剂1、2的变化。结果:肺纤方可以显著降低血清基质金属蛋白酶1、2及组织金属蛋白酶抑制剂1、2。结论:肺纤方具有抗大鼠肺纤维化基质重建作用。

柔肝化纤颗粒对CCl_4诱导的肝纤维化大鼠肝脏MMP-2、TIMP-2的影响

目的探讨柔肝化纤颗粒对CCI_4诱导的肝纤维化大鼠基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及基质金属蛋白酶-2抑制剂(TIMP-2)的影响。方法选取健康清洁SPF级大鼠78只,随机分为正常对照组(A组)、病理模型组(B组)、柔肝化纤颗粒组(C组)、大黄(?)虫丸组(D组)及秋水仙碱对照组(E组),后4组均建立CCI_4诱导的肝纤维化大鼠模型,而后分别给予生理盐水、柔肝化纤颗粒、大黄(?)虫丸、秋水仙碱灌胃,治疗5周、10周后分别取大鼠肝组织,采用免疫组织化学染色及计算机图像分析技术检测MMP-2及,TIM P-2。结果治疗5周、10周时与A组比较,B组肝组织炎性反应活动度计分、肝纤维化程度计分均明显升高(P<0.05),C、D、E组均较B组明显降低(P<0.05),其中C组下降较D、E组明显(P<0.05),而D、E组间差异无统计学意义(P>0.05);与A组比较,B组MMP-2、TIMP-2、MMP-2/TIMP-2均明显增高(P<0.05);与B组比较,C、D、E组MMP-2、TIMP-2表达、MMP-2/TIMP-2明显降低(P均<0.05),C组下降较D、E组更明显(P<0.05),而D、E组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论柔肝化纤颗粒能通过调节TIMP-2/MMP-2比例发挥对肝纤维化的防治作用。

肺金生方通过调控MMP-2/TIMP-2平衡抗肺癌侵袭转移研究

目的:探讨肺金生方对多种肺癌细胞株的体外抗肿瘤转移作用。方法:以肺金生方含药血清作用于肺癌A549、PG和PAa细胞,普通倒置显微镜观察各组细胞的生长特点及形态,MTT法检测细胞增殖情况,Boyden小室法观察细胞迁移,ELISA法检测25%肺金生方含药血清对MMP-2、TIMP-2表达的影响。结果:肺金生方含药血清作用于各细胞后,与正常细胞相比形态发生明显改变,明显梭形化,细胞数量减少;各浓度肺金生方组抑制率与空白组相比有差异,其中25%含药血清与空白组相比有显著性差异(P<0.01),25%肺金生方含药血清组能减弱A549、PG和PAa细胞迁移,同时,各细胞肺金生方组MMP-2、TIMP-2的表达与空白血清组相比有差异(P<0.05)。结论:肺金生方可以通过调控MMP-2/TIMP-2平衡达到抗肺癌转移作用。

慢性牙周炎基础治疗前后龈沟液中MMP-2,TIMP-2水平的变化

目的:观察慢性牙周炎患者在牙周基础治疗前后龈沟液(gingivalcrevicularfluid,GCF)中基质金属蛋白酶2(matrixmetalloprotein-ase -2,MMP -2)和基质金属蛋白酶抑制剂2(tissueinhibitorsofmatrixmetalloprotein ase -2,TIMP- 2)水平的变化。方法:采用滤纸条袋内取样法取42例患者42个牙位治疗前后的龈沟液(GCF)样本,同时取42例健康对照的42个牙位的GCF样本,用酶联吸附免疫法(enzyme linkedimmunosorbentas say, ELISA)检测其中的MMP- 2,TIMP- li2水平。结果:牙周基础治疗后MMP- 2,TIMP -2的总量均较治疗前显著下降(P<0. 01 ),治疗前后MMP -2,TIMP -2的总量均与对照组有显著差别(P<0. 01 ),治疗后MMP- 2与TIMP -2的比值较治疗前显著下降,同时高于对照组MMP -2与TIMP -2的比值。MMP -2的含量与TIM-P 2的含量呈显著正相关(P<0. 01)。结论:成功的牙周基础治疗后,MMP -2的总量相对明显下降, TIMP- 2的总量相对升高。

桃红四物汤对光老化小鼠皮肤组织中Smad-3、TIMP-1、TIMP-2、AP-1蛋白表达水平的影响

目的:研究桃红四物汤对光老化小鼠皮肤组织中Smad-3、TIMP-1、TIMP-2、AP-1蛋白含量的影响。方法:将30只小鼠随机分为6组,分别为中药低、中、高剂量组、空白对照组、模型对照组、阳性对照组(VE组)。对模型对照组、阳性对照组(VE组)和中药低、中、高剂量组小鼠进行皮肤光老化模型制备,空白对照组小鼠正常饲养。在造模前30 min,给空白对照组和模型对照组小鼠灌胃生理盐水,高、中、低剂量组小鼠灌胃相应剂量药液,阳性对照组(VE组)灌胃维生素E滴剂。造模完成后,采用Western-blot方法检测皮肤组织中MMP-1、MMP-3、MMP-12、Smad-2蛋白含量的表达水平。结果:与空白对照组比较,模型对照组小鼠皮肤组织中Smad-3、TIMP-1、TIMP-2蛋白含量的表达水平显著下降,差异具有统计学意义(P<0.05),AP-1蛋白表达水平显著上升(P<0.05);与模型对照组相比,中药低、中、高剂量组小鼠皮肤组织中Smad-3、TIMP-1、TIMP-2蛋白的表达水平显著上升(P<0.05),AP-1蛋白表达水平显著下降(P<0.05)。结论:桃红四物汤对皮肤光老化具有一定的保护作用。

多西环素对乳腺癌移植瘤小鼠MMP-2及TIMP-2 mRNA表达的影响

目的研究多西环素在小鼠乳腺癌肺转移模型中对基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及金属蛋白酶组织抑制因子-2(TIMP-2)mRNA表达的影响。方法30只TAⅡ近交系小鼠建立肺转移性乳腺癌BCML-TAⅡ99模型,随机分为对照组及给药组,每组15只,于可触及肿物后次日,给药组腹腔注射盐酸多西环素0.1 ml(10 mg/ml),对照组给予等量生理盐水。7 w后处死动物,剥离肿瘤称重,部分新鲜组织采用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)方法检测肿瘤组织MMP-2及TIMP-2 mRNA表达水平。结果多西环素给药组小鼠肿瘤生长大小及转移率分别为(2.718±0.337)g和13.3%均低于对照组〔(4.313±0.468)g,53.3%,P<0.01,P<0.05〕。与对照组比较,多西环素治疗组MMP-2 mRNA为0.637±0.088,明显低于对照组(1.035±0.097,P<0.05);TIMP-2 mRNA为0.778±0.148,明显高于对照组(0.484±0.125,P<0.05)。结论多西环素通过调节MMP-2及TIMP-2 mRNA的表达水平,对小鼠乳腺癌肺转移模型中肿瘤生长及转移发挥抑制作用。

基质金属蛋白酶在类似人类2型糖尿病大鼠肾病中的研究

目的 动态研究基质金属蛋白酶 - 2 (MMP- 2 )和其体内特异的抑制物 -金属蛋白酶组织抑制剂 - 2 (TIMP- 2 )在类似人类 2型糖尿病大鼠肾组织的改变。方法 利用免疫组织化学观察 型胶原在肾小球的表达 ,酶谱法测定肾皮质MMP- 2的活性 ,蛋白印迹法检测肾皮质 TIMP- 2的含量 ,Northern Blot观察肾皮质 MMP- 2和 TIMP- 2的基因表达。结果 类似人类 2型糖尿病大鼠肾小球 型胶原成分表达增强 ;肾皮质 MMP- 2基因表达减弱 (P <0 .0 1) ;其活性进行性减少 (P <0 .0 0 0 1) ,而 TIMP- 2基因表达 (P <0 .0 1)及其含量逐渐增加 (P <0 .0 1)。结论 类似人类 2型糖尿病大鼠肾组织 MMP- 2活性进行性降低、TIMP- 2含量增加 ,两者比例失衡为肾小球 ECM成份沉积的重要原因之一 ,基质降解减弱也参与了