MMP-2/9活性与TIMP-1/2蛋白表达在大鼠肺纤维化形成中的变化特点

目的：观察大鼠肺纤维化形成过程中基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase，MMP）-2／9的活性及其活性抑制物——基质金属蛋白酶组织抑制因子（tissue inhibitor of matrix metalloproteinase，TIMP）-1／2蛋白表达的动态变化，探讨肺纤维化形成过程中细胞外基质（extracellular matrix，ECM）降解的调控规律。方法：SD大鼠48只，随机分为模型组（30只）与正常对照组（18只）。模型组大鼠予以1次性气管内注射博来霉素诱导肺纤维化模型，正常对照组大鼠于气管内注入等量生理盐水。每组再各设1d、3d和1、2、3、4周共6个时间观察点，动态观察大鼠肺系数的变化。HE染色观察大鼠肺组织病理学的改变；Masson染色观察大鼠肺组织胶原沉积情况；Jamall氏法测定肺组织羟脯氨酸（hydroxyproline，Hyp）的含量；Western印迹法分析肺组织MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2蛋白的表达变化；明胶酶图法检测肺组织MMP-2与MMP-9的活性。结果：与正常对照组大鼠比较，模型组大鼠染毒后2周其肺组织发生局灶性病变，肺泡壁与间隔增厚，肺泡腔与间质内有大量炎细胞浸润，伴有少量成纤维细胞；肺系数明显增高；肺组织内Hyp含量稍升高；MMP-2／9蛋白的表达与活性增加，以活化型MMP-2增加更为明显；TIMP-1／2蛋白的表达则逐渐增加。模型组大鼠染毒后3～4周时，肺泡结构遭到破坏，部分肺泡腔塌陷消失，由胶原纤维和成纤维细胞占据，肺泡壁与间隔进一步增厚，形成严重的肺纤维化；肺系数较2周时有所下降，肺组织Hyp含量和TIMP-1／2蛋白的表达明显增加，至染毒后4周时最为明显；MMP-2／9活性较2周时有所下降，尤以活化型MMP-2的活性下降较为明显。结论：博来霉素诱导肺纤维化形成过程中，早期肺组织的病理学变化以肺泡炎症为主，肺组织内MMP-2／9活性增高；后期以纤维化为主，肺组织TIMP-1／2表达明显增加，MMP-2／9活性则有所下降。

口服普萘洛尔对婴幼儿血管瘤MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2表达水平的影响

目的研究口服普萘洛尔前后婴幼儿血管瘤病灶内MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2表达水平的影响。方法选择2010年5月至2011年12月来我院就诊、年龄≤3个月、血管瘤病灶位于肢体或隐蔽部位、家属要求手术治疗却具备单独口服普萘洛尔治疗条件、排除口服普萘洛尔禁忌证、先前未接受过其他任何相关治疗的病例作为研究对象,共39例。经过与家属沟通并征得其书面同意,先按口服普萘洛尔诊疗常规,口服用药前在局麻下夹取血管瘤体组织活检,后口服8周普萘洛尔[剂量:2 mg/(kg.d),分2次,每12小时用药],继而手术切除瘤体。采用免疫组化、实时荧光定量RT-PCR的方法,检测口服用药前后病灶组织内MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2表达水平的变化,计算口服用药前后病灶微血管密度(MVD)。结果免疫组化与实时荧光定量RT-PCR结果均提示,口服普萘洛尔后血管瘤病灶内MVD值明显减低且具有统计学意义(t=18.458,P<0.01),MMP-2、MMP-9表达水平较用药前明显减少(P<0.01),TIMP-1、TIMP-2表达水平明显增高(P<0.01)。且口服用药后上述4个因子免疫组化平均积分光密度、mRNA相对表达量变化与MVD值变化密切相关。结论普萘洛尔可下调血管瘤病灶内MMP-2、MMP-9的表达,上调TIMP-1、TIMP-2的表达,从而抑制新生血管的形成。

桃红四物汤对光老化小鼠皮肤组织中Smad-3、TIMP-1、TIMP-2、AP-1蛋白表达水平的影响

目的:研究桃红四物汤对光老化小鼠皮肤组织中Smad-3、TIMP-1、TIMP-2、AP-1蛋白含量的影响。方法:将30只小鼠随机分为6组,分别为中药低、中、高剂量组、空白对照组、模型对照组、阳性对照组(VE组)。对模型对照组、阳性对照组(VE组)和中药低、中、高剂量组小鼠进行皮肤光老化模型制备,空白对照组小鼠正常饲养。在造模前30 min,给空白对照组和模型对照组小鼠灌胃生理盐水,高、中、低剂量组小鼠灌胃相应剂量药液,阳性对照组(VE组)灌胃维生素E滴剂。造模完成后,采用Western-blot方法检测皮肤组织中MMP-1、MMP-3、MMP-12、Smad-2蛋白含量的表达水平。结果:与空白对照组比较,模型对照组小鼠皮肤组织中Smad-3、TIMP-1、TIMP-2蛋白含量的表达水平显著下降,差异具有统计学意义(P<0.05),AP-1蛋白表达水平显著上升(P<0.05);与模型对照组相比,中药低、中、高剂量组小鼠皮肤组织中Smad-3、TIMP-1、TIMP-2蛋白的表达水平显著上升(P<0.05),AP-1蛋白表达水平显著下降(P<0.05)。结论:桃红四物汤对皮肤光老化具有一定的保护作用。

MMP-9,2,7及其抑制剂TIMP-1,2,3在卵巢肿瘤组织中的表达及临床意义

背景与目的:基质金属蛋白酶(matrixmetalloproteinases,MMPs)通过降解细胞外基质在肿瘤的侵袭与转移中起着重要作用,MMPs活性又受到其抑制剂(tissueinhibitorofmatrixmetalloproteinase,TIMPs)的调节。本研究通过检测MMP-9、MMP-2、MMP-7及TIMP-1、TIMP-2、TIMP-3mRNA在卵巢肿瘤组织中的表达,探讨其与卵巢癌临床病理特征和预后的关系。方法:应用RT-PCR方法检测48例卵巢癌、21例良性肿瘤及22例正常卵巢组织中MMP-9、MMP-2、MMP-7及TIMP-1、TIMP-2、TIMP-3mRNA的表达。结果:MMP-9阳性率和MMP-9、MMP-2半定量值在卵巢癌组织中明显高于正常卵巢组织(P<0.05)。TIMP-2、MMP-7、TIMP-3在卵巢恶性及良性肿瘤组织中的阳性率及半定量值明显高于正常卵巢组织。MMP-9/TIMP-1在卵巢癌组织中的比值(0.91±0.67)明显高于正常卵巢组织(0.15±0.34)。MMP-9表达水平与卵巢癌的手术病理分期及预后有关,在Ⅲ～Ⅳ期患者中的表达(1.13±0.66)显著高于Ⅰ～Ⅱ期患者(0.60±0.54)(P<0.05);MMP-9其阳性患者平均生存时间为(43.00±17.12)个月,累积生存率为47.37%,明显低于MMP-9阴性者(100%)。结论:MMP-9、MMP-2、MMP-7、TIMP-2、TIMP-3基因在卵巢恶性肿瘤组织中的表达增加。

MMP-9、MMP-2、TIMP-1及TIMP-2水平对颅脑损伤患者预后评价的临床意义

目的探讨基质金属蛋白酶9(MMP-9)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)及基质金属蛋白酶抑制剂2(TIMP-2)水平对创伤性颅脑损伤(TBI)患者预后评价的临床意义。方法选取神经外科收治且经CT检查确诊的45例TBI患者作为TBI组,并依据Glasgow分级标准为轻、重两组。以同期来我院进行相关检查的12例正常健康者作为对照组。比较不同时间点(24 h、72 h以及120 h)TBI组与对照组脑脊液中的MMP-9、MMP-2、TIMP-1及TIMP-2表达水平。结果 1在24 h、72 h、120 h 3个时间点,TBI组患者脑脊液中的MMP-9、MMP-2、TIMP-1及TIMP-2的表达水平均显著高于对照组,差异具有显著(P<0.01)。2随着时间的进展,TBI组患者脑脊液中的MMP-9水平逐渐升高,TIMP-1水平逐渐降低,差异均有显著性(P<0.05),而MMP-2、TIMP-2的表达水平无显著变化(P>0.05)。3120 h范围内重度TBI患者组脑脊液中的MMP-2、TIMP-2的表达水平与轻度TBI患者组比较无显著差异(P>0.05);24 h时间点重度TBI患者组脑脊液中的MMP-9的表达水平显著高于轻度TBI患者组(P<0.05);120 h时间点重度TBI患者组脑脊液中的TIMP-1的表达水平显著高于轻度TBI患者组(P<0.05)。结论 TBI患者脑脊液中的MMP-9、TIMP-1短期内表达水平变化显著,且与患者的病情紧密相关,因此可作为观察患者临床预后的评价指标。

MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2在乳腺癌中的表达及临床意义

目的 研究MMP 2、MMP 9、TIMP 1和TIMP 2在乳腺癌中的表达及与临床病理特征的关系。方法 免疫组化SP法检测 66例原发性乳腺癌、1 3例乳腺纤维腺瘤和 1 5例乳腺纤维腺病中的蛋白表达。结果 ①乳腺癌中MMP 2、MMP 9的阳性表达显著高于乳腺纤维腺瘤和纤维腺病 (P <0 0 5) ;②MMP 9的阳性表达与乳腺癌肿瘤大小、临床分期呈正相关 (P <0 0 5) ,伴腋窝淋巴结转移的乳腺癌中MMP 9、MMP 2呈高表达 ,但TIMP 1显著低表达 ;乳腺癌中MMP 9与TIMP 1的表达呈负相关 (P <0 0 5) ;③MMP 2、MMP 9表达的乳腺癌患者预后差。结论 乳腺癌中MMP 2、MMP 9表达显著高于乳腺良性病变 ;

地龙2号对大鼠肝纤维化α-SMA、TGF-β1、MMP-13及TIMP-1蛋白表达的影响

目的研究地龙2号对肝纤维化大鼠肝组织α_SMA、TGF_β1、MMP_13及TIMP_1蛋白表达的影响。方法采用四氯化碳皮下注射诱导大鼠肝纤维化模型,5 2只雄性Wistar大鼠随机分成6组正常组、阴性对照组、模型组、阳性对照组、地龙2号大剂量组和地龙2号小剂量组,8周末用免疫组织化学染色法检测肝组织中α_SMA、TGF_β1、MMP_13及TIMP_1蛋白表达情况。结果与模型组相比,地龙2号组肝纤维化程度明显减轻,α_SMA、TGF_β1、及TIMP_1蛋白表达均显著降低,MMP_13表达显著升高。结论地龙2号抑制大鼠肝脏纤维组织的形成可能与其降低α_SMA、TGF_β1、TIMP_1蛋白表达并促进MMP_13蛋白表达有关。

通幽汤对食管鳞癌细胞MMP-2、MMP-9及TIMP-1表达的影响

目的:探讨通幽汤对食管鳞癌细胞基质金属蛋白酶2、9(MMP-2、MMP-9)及基质金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP-1)的影响。方法:体外培养食管鳞癌KYSE150细胞,通幽汤全方作用于细胞,CCK-8实验检测细胞增殖变化,细胞划痕实验观察细胞迁移情况,Transwell法观察细胞侵袭情况,荧光显微镜观察细胞凋亡情况,ELISA法测定食管鳞癌细胞培养上清液中MMP-2、MMP-9、TIMP-1含量,Western-blot法检测细胞MMP-2、MMP-9、N-钙黏联蛋白(N-cadherin)、TIMP-1、E-钙黏联蛋白(E-cadherin)表达量变化。结果:与对照组比较,研究组食管鳞癌细胞迁移速率和侵袭能力下降,MMP-2、MMP-9、N-cadherin蛋白水平降低,TIMP-1、Ecadherin蛋白水平升高。结论:通幽汤可能通过调控食管鳞癌细胞侵袭和转移中的关键分子MMP-2、MMP-9、TIMP-1及钙黏联蛋白的表达,抑制癌细胞的侵袭和转移。

肝癌组织中TIMP-1和TIMP-2的表达意义

目的 了解 TIMP- 1和 TIMP- 2在肝癌组织中的表达状态 ,探讨 TIMP- 1和 TIMP- 2在肝癌组织生长、侵润及转移中所起的作用 .方法 以抗 TIMP- 1和 TIMP- 2单克隆抗体 (m Ab)为试剂 ,采用免疫组织化学法检测原发性肝癌、肝高分化腺癌的肝组织中 TIMP- 1和 TIMP- 2的表达 ,并与 10例正常肝组织做对照 .结果 10例原发性肝癌患者的肝组织中TIMP- 1和 TIMP- 2蛋白表达的阳性率为 10 0 % ,在癌组织及非癌组织中均有表达 .癌组织中的 TIMP- 1和 TIMP- 2蛋白表达的强度比较为 6例高于、4例低于周围的非癌组织 (慢性肝炎及肝硬化组织 ) ,癌组织中 TIMP- 1和 TIMP- 2蛋白的表达呈散在性分布 ,但 TIMP- 1比 TIMP- 2表达强 .9例肝高分化腺癌的腺癌组织中无 TIMP- 1和 TIMP- 2相关抗原的表达 ,但癌周组织的肝细胞有 3例 TIMP- 1和 TIMP- 2蛋白表达为阳性 .10例正常肝组织中 TIMP- 1和 TIMP- 2蛋白表达均为阴性 .结论 TIMP- 1和 TIMP- 2存在于原发性肝癌的癌组织中 ,其表达的部位与强度可能与癌的生长、浸润及转移有关 .

地龙2号对大鼠肝纤维化TGF-β1,MMP-13及TIMP-1 mRNA和蛋白表达的影响

目的:研究蚯蚓提取物地龙2号对实验性肝纤维化大鼠转化生长因子-β1(TGF-β1),基质金属蛋白酶-13(MMP-13)及基质金属蛋白酶组织抑制物-1(TIMP-1)mRNA和蛋白表达的影响.方法:采用四氯化碳皮下注射诱导大鼠肝纤维化模型.古Wistar大鼠52只随机分成6组:正常组、阴性对照组、模型组、阳性对照组、地龙2号大剂量组和小剂量组;8wk末,用免疫组织化学染色法及RT-PCR检测肝组织中TGF-β1,MMP-13,TIMP-1mRNA和蛋白的表达.结果:地龙2号大、小剂量组肝组织内TGF-β1及TIMP-1mRNA(TGF-β1:0.68±0.16vs0.90±0.29.0.66±0.14vs0.90±0.29,后者P<0.05;TIMP-1:1.01±0.22vs2,48±1.18,1.21±0.38vs2.48±1.18,P<0.01)及蛋白表达均显著低于模型组(TGF-β1:3.14±2.67vs8.22±2.99.3.60±1.90vs8.22±2.99,P<0.01;TIMP-1:3.57±2.23vs7.56±3.40,3.30±2.67vs7.56±3.40,P<0.01),而MMP-13mRNA(1.69±0.75vs0.62±0.21,1.82±0.71vs0.62±0.21,P<0.01)及蛋白表达则明显高于模型组(7.71±1.25vs4.67±2.45,P<0.01,8.50±2.88vs4.67±2.45.P<0.01).结论:地龙2号可下调TGF-β1,TIMP-1mRNA及蛋白的表达,并上调MMP-13mRNA及蛋白的表达,从而抑制或减轻肝纤维化的形成.

桃红四物汤对光老化小鼠皮肤组织中MMP-12、Smad-2mRNA、Smad-3、TIMP-1 mRNA表达的实验研究

目的:研究桃红四物汤对光老化小鼠皮肤组织中基质金属蛋白酶-12(MMP-12)、Smad-2、Smad-3及金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)mRNA含量的影响。方法:将60只小鼠分为6组,每组10只,空白对照组、模型对照组、阳性对照组(VE组)和中药低、中、高剂量组,对模型对照组、阳性对照组(VE组)和中药低、中、高剂量组制备光老化模型,空白对照组正常饲养。空白对照组和模型对照组给生理盐水,高、中、低剂量组给相应剂量药液,阳性对照组(VE组)给予维生素E滴剂,于造模前30 min灌胃。造模完成后,采用RT-PCR法检测皮肤组织中MMP-12、Smad-2、Smad-3、TIMP-1 mRNA的含量。结果:空白对照组皮肤组织中MMP-12mRNA的表达处于低水平;与空白对照组比较,模型对照组的MMP-12 mRNA表达水平显著上调,Smad-2 mRNA、Smad-3 mRNA和TIMP-1 mRNA表达水平显著下调(P<0.01);与模型对照组比较,中药高、中、低剂量组MMP-12 mRNA表达水平均出现不同程度的下调(P<0.01),Smad-2 mRNA表达水平显著上调(P<0.01),中药中高剂量组Smad-3 mRNA表达水平显著上调(P<0.05),而中药低剂量组差异不具有统计学意义,中药各剂量组TIMP-1 mRNA表达水平显著上调,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:桃红四物汤在皮肤光老化过程中具有保护作用。

MMP-2,MMP-9,TIMP-1和TIMP-2在肝癌中原位表达

目的 :探讨肝癌中基质金属蛋白酶MMP 2 ,MMP 9和组织金属蛋白酶抑制剂TIMP 1 ,TIMP 2的mRNA和蛋白质表达与临床病理特征和预后的关系。方法 :在 5 6例有完整随访资料的原发性肝癌标本中原位杂交检测MMP 2mRNA ,TIMP 2mRNA ;免疫组化检测MMP 2 ,MMP 9,TIMP 1 ,TIMP 2蛋白质的表达。结果 :MMP 2mRNA ,TIMP 2mRNA ,MMP 2 ,MMP 9,TIMP 1和TIMP 2蛋白质在肝癌中的阳性表达分别为 4 8(85 .7% )例 ,35 (6 2 .5 % )例 ,4 4 (78.6 % )例 ,4 1 (73.2 % )例 ,30 (5 3.6 % )例 ,38(6 8% )例。MMP 2mRNA ,MMP 2 ,MMP 9在肝癌中呈高表达 ,而TIMP 1蛋白呈低表达 (P <0 .0 1 ,P <0 .0 5 )。TIMP 2mRNA与TIMP 2蛋白 ;MMP 2mRNA与MMP 2蛋白在肝癌中的表达呈正相关 (分别为r=0 .31 6 ,P <0 .0 5 ;r=0 .35 6 ,P <0 .0 5 )。MMP 2mRNA的表达与肝癌肿瘤大小和临床分期呈正相关 (分别为r =0 .4 4 1 ,P <0 .0 1 ;r=0 .340 ,P <0 .0 5 ) ;MMP 9蛋白表达阳性的肝癌患者术后生存时间缩短 (P <0 .0 5 )。Kaplan Meier单因素分析发现MMP 2 ,MMP 9表达阳性患者的预后差 (P <0 .0 1 ,P <0 .0 5 )。多因素Cox回归分析显示MMP 2 ,MMP 9的蛋白表达可作为肝癌估测预后的指标。结论 :基质金属蛋白酶MMP 2 ,MMP 9的过表达以及其与TIMP 2 。

肝硬化患者肝组织中TIMP-1,TIMP-2的表达

目的 了解 TIMP- 1和 TIMP- 2在肝硬化患者肝组织中的表达状态 ,探讨 TIMP- 1和 TIMP- 2在肝硬化发病机制中的作用 .方法 以抗 TIMP- 1和 TIMP- 2单克隆抗体(Mc Ab)为试剂 ,采用免疫组织化学法检测肝硬化患者肝组织中 TIMP- 1,TIMP- 2相关抗原的表达 .结果 30例肝硬化患者肝组织中 TIMP- 1和 TIMP- 2相关抗原表达的阳性率为10 0 % ,,TIMP- 1阳性的肝组织中 TIMP- 2亦为阳性 ,且TIMP- 1强度高于 TIMP- 2 ,而正常肝组织无 1例表达阳性 .TIMP- 1和 TIMP- 2抗原表达阳性信号主要位于肝细胞胞质中 ,未见细胞核表达 .结论 肝硬化患者肝组织中的肝细胞中存在 TIMP- 1和 TIMP- 2相关抗原表达 ,TIMP- 1和 TIMP-2与肝病的进展相关 ,它通过抑制 MMPs的活性 ,使得 ECM降解减少而导致肝纤维化 ,以至肝硬化 .

MMP-2、MMP-9和TIMP-1的表达与胃癌淋巴结转移及生存时间的关系

目的研究胃癌细胞MMP2、MMP9和TIMP1的表达与淋巴结转移及生存时间的关系。方法用免疫组织化学方法检测136例胃腺癌组织微阵列中MMP2、MMP9和TIMP1的表达。结果MMP9在淋巴结有转移病例中阳性率为76%,与淋巴结转移程度相关(P=0.0228);N分期和胃癌病人术后生存时间相关(P<0.0001)。结论胃癌细胞中MMP9阳性可作为预测胃癌淋巴结转移程度的分子标志物,N分期是预测胃癌病人术后生存时间的病理学指标。

TIMP-1和TIMP-2在原发性肝癌生长、浸润及转移中的作用

目的 了解基质金属蛋白酶组织抑制因子 1(tissueinhibitorofmetalloproteinase -1,TIMP 1)和基质金属蛋白酶组织抑制因子 2 (TIMP 2 )mRNA及相关抗原在肝癌组织中的定位和表达状态 ,探讨TIMP l和TIMP 2在肝癌组织生长、浸润及转移中所起的作用。方法 以TIMP l和TIMP 2探针及单克隆抗体 (McAb)为试剂 ,采用原位杂交技术及免疫组织化学法检测原发性肝癌、肝高分化腺癌的肝组织中TIMP l和TIMP 2mRNA及相关抗原的表达 ,并与 10例正常肝组织做对照。结果 2 0例原发性肝癌患者的肝组织中TIMP l和TIMP 2mRNA及相关抗原表达的阳性率为 90 %;9例肝高分化腺癌的腺癌组织中无TIMP 1和TIMP 2mRNA及相关抗原的表达 :10例正常肝组织中TIMP l和TIMP 2mRNA及相关抗原表达均为阴性 ;TIMP l和TIMP 2mRNA及相关抗原阳性信号呈现为棕黄色颗粒状 ,分布在肝细胞浆内 ,未见细胞核着色 ;无论是原发性肝癌癌组织还是癌周组织中 ,TIMP l的表达强于TIMP 2的表达 ,癌周组织中TIMP 1和TIMP 2mRNA和相关抗原的表达与肝组织病理改变相关 ,即肝硬化者表达强 ,慢性肝炎者表达弱 ,正常肝组织无表达。结论 原发性肝癌的癌组织中存在TIMP l和TIMP 2mRNA及相关抗原的表达 ,其表达强度可能与原发性肝癌的分型有关 ,它可能通过抑制MMP的?

慢性异体肾移植病人肾纤维化组织中MMP-2、TIMP-1、Vimentin、Keratin免疫组化定量分析

目的:探讨慢性异体肾移植病人肾纤维化组织中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、金属蛋白酶抑制物(TIMP-1)、波形蛋白(Vimentin)和角蛋白(Keratin)的表达与肾纤维化间的关系。方法:收集我院18例肾移植后不同程度肾纤维化病人及10例正常肾组织,进行MMP-2、TIMP-1、Vimentin及Keratin的免疫组化定量检测分析。结果:肾纤维化早期,与正常肾组织对比,抗MMP-2和Keratin呈显较强免疫阳性反应,且量增加;随肾纤维化程度增加,抗MMP-2和Keratin免疫染色阳性反应减弱,量减少,甚至出现阴性;抗TIMP-1和Vimentin免疫染色阳性增强,并随着纤维化进展而量增加。结论:由肾纤维化组织局部Vimentin阳性与相关细胞产生并分泌的细胞因子以诱导MMP-2、TIMP-1的活性改变在慢性肾移植肾病患者的肾纤维化过程中具有关键性作用。

通心络对自发性2型糖尿病KK-Ay小鼠肾功能及肾组织MMP-9、TIMP-1表达的影响

目的:观察通心络对自发性2型糖尿病KK-Ay小鼠肾功能及肾组织降解酶系MMP-9、TIMP-1及细胞外基质成分FN、ColⅣ表达的影响,探讨通心络防治DN的作用机制。方法:采用自发性2型糖尿病KK-Ay小鼠建立糖尿病肾病模型、随机分为模型组、通心络组、西药组各16只,设立C57BL/6J小鼠16只为空白组,予通心络及缬沙坦干预12周后,测定空腹血糖(FPG)、24h尿微量白蛋白排泄率(UAER),糖化血红蛋白(HbA1c)、血清尿素氮(BUN)、血清肌酐(SCr)含量,采用WesternBlot及Realtime-PCR方法检测基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)蛋白及基因表达水平,采用免疫荧光方法检测纤维连接蛋白(FN)、Ⅳ胶原(Col-Ⅳ)蛋白表达水平。结果:与空白组比较,模型组小鼠24hUAER、BUN、SCr、FPG、HbA1c均明显升高(P<0.05),肾组织TIMP-1、FN、ColⅣ表达明显升高、MMP-9表达明显降低(P<0.05);与模型组比较,经通心络及缬沙坦干预后FPG及HbA1c无明显变化(P>0.05),24hUAER、BUN、SCr显著降低,肾组织TIMP-1、FN、ColⅣ表达降低、MMP-9表达升高(P<0.05)。结论:通心络可降低自发性2型糖尿病KK-Ay小鼠尿白蛋白、保护肾功能,调控降解酶系MMP-9/TIMP-1表达抑制细胞外基质沉积是其作用机制之一。

胎膜中MMP-9、TIMP-1、TIMP-2、TGF-β_1表达与胎膜早破的关系

目的探讨胎膜中MMP-9、TIMP-1、TIMP-2和TGF-β1的表达与胎膜早破的关系。方法用免疫组化法检测30例足月胎膜早破(胎膜早破组)、30例足月未临产择期剖宫(剖宫产组)和30例足月自然分娩(阴道分娩组)患者分娩后胎膜中MMP-9、TIMP-1、TIMP-2、TGF-β1的表达水平。结果 MMP-9、TIMP-1、TIMP-2主要在胎膜中的羊膜上皮细胞、绒毛膜细胞胞浆及间质细胞中表达,TGF-β1主要分布于细胞滋养层与合体滋养细胞。MMP-9在胎膜中表达的阳性率在胎膜早破组最高,阴道分娩组次之,剖宫产组最低,差异均有统计学意义(P<0.05);而TIMP-1、TIMP-2和TGF-β1在剖宫产组胎膜表达的阳性率最高,阴道分娩组次之,胎膜早破组最低,差异有统计学意义(P<0.05)。胎膜上TGF-β1的表达与MMP-9呈显著负相关,而与TIMP-1、TIMP-2呈显著正相关。结论胎膜早破的发生可能与TGF-β1对MMP-9/TIMP-1和MMP-9/TIMP-2的负性调控作用有关。

益气补肾方对SGC-7901细胞MMP-2和TIMP-2基因表达的影响

目的:探究益气补肾方抗胃癌转移作用的可能机理。方法:采用RT-PCR检测法测定益气补肾方水煎液对SGC-7901细胞基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶抑制酶-2(TIMP-2)基因表达水平的变化。结果:益气补肾方能下调MMP-2 mRNA的表达。结论:益气补肾方抗胃癌转移作用的机制可能与下调MMP-2 mRNA表达有关。

点阵CO_2激光和Nd:YAG激光对自然老化小鼠皮肤MMP-1与TIMP-1表达的影响

目的探讨点阵CO2激光和Nd:YAG激光(准长脉宽1064nm波长)照射对自然老化小鼠皮肤基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、基质金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)表达的影响,并进一步探讨其嫩肤机制。方法用点阵CO2激光和Nd:YAG激光照射小鼠背部脱毛皮肤每间隔10天1次,连续4次,分别在照射后2周、1个月及3个月取材,用免疫组化法检测MMP-1和TIMP-1的表达并观察其动态变化。结果点阵CO2激光和Nd:YAG激光照射区MMP-1和TIMP-1阳性表达,以2周时最明显:点阵CO2激光照射区MMP-1灰度值(115.14±5.23)与TIMP-1灰度值(104.01±3.15)均低于Nd:YAG激光照射区MMP-1灰度值(121.75±4.39)与TIMP-1灰度值(109.26±3.88),即点阵CO2激光照射区阳性表达较高,差异有统计学意义(P<0.05)。TIMP-1从总体水平上强于MMP-1的表达。结论点阵CO2激光和Nd:YAG激光照射促进MMP-1和TIMP-1表达增加,提示其直接参与了真皮重塑,点阵CO2激光组较Nd:YAG激光组效果明显。