TIPE3干扰质粒对SW480结肠癌细胞生长的作用及相关机制探讨

目的:通过TIPE3干扰质粒转染SW480结肠癌细胞,验证干扰TIPE3表达对SW480结肠癌细胞生长的影响并探讨相关机制。方法:构建TIPE3-shRNA-p SIREN-Retro Q干扰质粒,通过脂质体转染法成功将干扰质粒导入SW480细胞,通过RT-PCR、Western blot检测重组质粒的干扰效率。应用CCK-8方法检测SW480细胞生存率。Annexin V-FITC/PI流式细胞法检测细胞凋亡。使用Western blot检测细胞增殖、凋亡相关分子的表达情况。结果:成功设计、构建和筛选具有生物活性且干扰效率最佳的TIPE3-shRNA-p SIREN-Retro Q干扰质粒。CCK-8检测证实干扰SW480结肠癌细胞TIPE3表达可以抑制细胞生长。流式结果显示,TIPE3-shRNA3干扰组的凋亡率为(27.99±1.087)%,显著高于正常细胞组(12.10±2.213)%及转染空载质粒组(11.44±0.277 0)%。证实了降低TIPE3表达可以增加SW480对a DR5Sc Fv所诱导的细胞凋亡敏感性。Western blot结果显示干扰TIPE3表达可以活化caspase3蛋白,降低p-AKT、p-PDK1、PCNA等分子的表达。结论:干扰TIPE3的表达对SW480结肠癌细胞具有促进凋亡,抑制增殖的作用。