TIRF显微镜下GLUT4囊泡的三维运动分析

利用TIRF显微镜动态实时地观测了GLUT4囊泡在脂肪细胞内的运动,并针对TIRF显微镜消散场成像的特点,提出了一种新的三维单粒子跟踪算法。算法首先针对囊泡的荧光淬灭问题,对荧光强度作了校正;然后,应用自适应的背景减除算法,分割出了运动的囊泡;最后,在跟踪过程中引入了Kalman滤波,减小了搜索的范围,从而避免了背景噪声以及虚假目标的干扰。对囊泡在胞内的长距离运动作跟踪实验,结果表明算法不但在成像平面上取得了很好的跟踪效果,而且也有效地推算了囊泡在垂直于成像平面方向上的运动。