Tju103和CTLA4-Ig诱导MHC半相合小鼠骨髓移植耐受比较

目的:观察Tju103和CTLA4-Ig各自对MHC半相合小鼠骨髓移植免疫耐受的诱导。方法:半相合供鼠T细胞与受鼠抗原、Tju103(或CTLA4-Ig)共育后与骨髓细胞混合移植,观测移植后受情况。结果:A.单纯照射组:全部小鼠于照射后11d内死于造血衰竭;B.白血病CTX治疗组:全部小鼠于接种白血病细胞后16～23d死于白血病;C.单纯移植组:全部小鼠于移植后21d内死于移植物抗宿主病(GVHD);D.CsA预防组:5只小鼠于移植后8～22d死亡,1只死于白血病,各有2只死于GVHD和感染,5只活过30d;E.Tju103处理组:4只小鼠于移植后9～26d死亡,2只死于GVHD,各有1只死于白血病和感染,6只活过30d;F.CTLA4-Ig处理组:2只小鼠于移植后17～26d死亡GVHD,8只活过30d。结论:Tju103和CT-LA4-Ig均明显延长生存期,降低GVHD发生和严重程度,CTLA4-Ig保留有抗感染和移植抗白血病(GVL)作用,而Tju103没有。

Tju103和CTLA4-Ig诱导T淋巴细胞免疫耐受的比较(英文)

目的观察比较Tju103和CTLA4-Ig分别调节、诱导T淋巴细胞免疫耐受的作用。方法用经丝裂霉素处理的异基因正常BALB/c(H-2d)小鼠巨噬细胞做耐受诱导原,分别用Tju103和CTLA4-Ig体外训导、调节C57BL/6(H-2d)小鼠T淋巴细胞,通过增殖效应(单向混合淋巴细胞反应,MLR)和杀伤效应(MTT法),考察经训导的C57BL/6小鼠T淋巴细胞分别对BALB/c小鼠和CBA(H-2k)小鼠脾细胞以及EL9611(H-2d)红白血病细胞的增殖效应和杀伤效应的改变。结果经Tju103调节后,C57BL/6小鼠T淋巴细胞对BALB/c和CBA小鼠脾细胞以及EL9611红白病细胞的增殖反应和杀伤效应抑制作用明显,未能诱导对已接触抗原(BALB/c小鼠)产生特异性免疫耐受。经CTLA4-Ig孵育后,C57BL/6小鼠T淋巴细胞对这三种细胞的增殖反应和杀伤效应抑制作用明显;对已接触抗原呈现免疫耐受,而对第三种抗原(CBA小鼠)和EL9611白血病细胞保持反应性。结论在特异抗原存在下,Tju103和CTLA4-Ig均能明显抑制异基因小鼠T淋巴细胞增殖反应性和杀伤效应,但Tju103诱导非特异免疫抑制,而CTLA4-Ig诱导特异免疫耐受,更适合于诱导移植免耐受。

TJU103对小鼠同种异基因造血干细胞移植模型GVHD的预防作用

目的探讨TJU103对小鼠同种异基因造血干细胞移植模型移植物抗宿主病(GVHD)是否起预防作用。方法(1)用单向混合淋巴细胞培养方法检测TJU103对T淋巴细胞增殖的影响;(2)以BALB/c(H-2d)、CB6F1(H-2d/b)分别作为完全异基因移植和半相合基因移植的受鼠,给予9.0Gy全身照射后4h,单纯照射组经尾静脉注射0.3mlD-Hank's液,不进行细胞移植;对照组经尾静脉注射C57BL/6小鼠混合细胞悬液(4.5×106骨髓细胞+3.0×107脾细胞),但不进行其他治疗处理;实验组经尾静脉注射C57BL/6小鼠混合细胞悬液(4.5×106骨髓细胞+3.0×107脾细胞)+TJU103(终浓度25μg/ml),此后腹腔注射TJU10350μg/d,共7d,然后观察其造血恢复、植入及GVHD的情况。结果(1)TJU103可以显著抑制T细胞活化增殖,其抑制作用呈剂量依赖性,在25μg/ml浓度时,可以抑制83%细胞增殖。(2)由于没有给予GVHD防治措施,对照组受鼠GVHD的发生率和死亡率分别为10/10和10/10;而完全异基因移植实验组小鼠GVHD发生率仅为2/10,30d生存率增加至8/10(P<0.01),中位生存期延长至30d以上(P<0.01);半相合基因移植实验组小鼠GVHD发生率为1/10,30d生存率增加至9/10(P<0.01),中位生存期延长至30d以上(P<0.01)。结论TJU103不仅可以显著抑制体外T淋巴细胞增殖效应,而且可显著降低小鼠同种异基因造血干细胞移植模型GVHD的发生率。

TJU103联合CTLA4-Ig对T细胞表型和分泌细胞因子的影响

本研究应用HLA半相合供、受者间单向混合淋巴细胞培养 (MLC )体系 ,体外检测了联合应用TJU10 3和CTLA4 Ig对供者T细胞增殖以及表型和分泌细胞因子的影响。结果显示 ,单独应用TJU10 3和CTLA4 Ig均能够降低T细胞的增殖活性 ,二者联合应用具有明显的协同抑制增殖效应 ,并能够使CD4 + CD6 9+ /CD8+ CD6 9+ 比值降低 ,Th1型细胞因子 (TNF α ,IFN γ )分泌减少 ,Th2型细胞因子 (IL 4 )分泌增加。提示TJU10 3和CTLA4 Ig联合应用能够阻断供者T细胞激活的抗原和共刺激双信号通路 ,抑制T细胞的增殖活性 ,使CD4 + CD6 9+ /CD8+ CD6 9+ 比值降低 ,并能够调节Th细胞分化 ,诱导Th细胞免疫偏离 ,使辅助性T细胞更多地向Th2细胞方向分化 ,可以作为一条预防临床HLA半相合造血干细胞移植重度移植物抗宿主病 (GVHD )

TJU103体外诱导造血干细胞移植的免疫耐受

目的:前期研究表明,吲哚亚甲基异烟腙(简称TJU103)可以明显降低异基因造血干细胞移植小鼠移植物抗宿主病的发生率和程度,明显延长小鼠移植后的生存期。实验拟观察TJU103诱导造血干细胞移植免疫耐受和对移植物抗白血病的影响,探索一条既能降低移植物抗宿主病又能保留移植物抗白血病的移植途径。方法:实验于2007-07/10在南方医科大学珠江医院血液科实验室完成。①实验材料:人急性髓系白血病细胞株KG1a由中国医学科学院血液学研究所宋增璇教授惠赠。10份自愿捐献的健康人外周血白细胞由广州市中心血站提供,等分为供者与受者。②实验方法:采用梯度密度沉淀法常规分离人外周血单个核细胞。以供者外周血单个核细胞作为反应细胞,受者正常外周血单个核细胞作为刺激细胞,体外建立异基因造血干细胞移植中供、受者间的单向混合淋巴细胞反应体系,应用TJU103阻断CD4+T细胞激活的抗原信号通路,设单独刺激细胞和反应细胞对照以及1640完全培养基空白对照。③实验评估:于培养第1、3、5天应用MTT检测TJU103对供者淋巴细胞的增殖活性的影响,于第5天用乳酸脱氢酶释放法分别检测10∶1,20∶1,40∶1效靶比时供者淋巴细胞对受者单个核细胞和急性髓系白血病细胞KG1a的细胞毒活性影响,同时采用流式细胞仪检测CD4+CD25+T细胞的百分比。结果:第3天和第5天实验组A值低于对照组(P<0.05)。单向混合淋巴细胞5d后实验组各效靶比供者T细胞杀伤受者外周血单个核细胞的活性明显低于对照孔(P<0.05);二者对KG1a细胞的杀伤活性差异不显著(P>0.05)。TJU103对供者CD4+CD25+T细胞无影响。结论:TJU103降低T淋巴细胞增殖反应的同时并不影响其抗白血病效应,有望用于临床异基因造血干细胞移植中移植物抗宿主病和移植物抗白血病的免疫调节。

异烟腙类衍生物TJU103对人T细胞增殖和细胞因子分泌的影响

目的 :探讨异烟腙类衍生物TJU10 3体外对同种异体抗原刺激的T淋巴细胞增殖和细胞因子分泌的影响。方法 :采用MTT法和酶联免疫吸附实验 (ELISA)分别观察了TJU10 3对T细胞增殖和分泌细胞因子的影响。结果 :TJU10 3在 5 0mg/L浓度时 ,能够明显降低HLA半相合供、受者间混合淋巴细胞反应 (MLR)以及肿瘤坏死因子α(TNF α)和γ干扰素 (IFN γ)等细胞因子的分泌 (P <0 0 1)。结论 :TJU10 3能够特异性地与CD4 + T细胞结合 ,降低CD4 + T细胞的增殖和细胞因子分泌。

异烟腙类衍生物TJU103体外对人T细胞增殖和细胞毒活性的影响

目的 :探讨异烟腙类衍生物TJU 10 3体外对人T淋巴细胞增殖和细胞毒活性的影响。方法 :体外建立HLA半相合供、受者间单向混合淋巴细胞反应 (MLR)体系 ,利用MTT法检测TJU 10 3应用前后对淋巴细胞增殖和细胞毒活性的影响。结果 :不同浓度的TJU 10 3均能够不同程度地降低HLA半相合供、受者间混合淋巴细胞增殖反应 ,5 0mg/L为最佳反应浓度 ,增殖抑制率达 60 % ,且不影响供者淋巴细胞对原代白血病细胞的杀伤活性 (P >0 0 5 )。结论 :TJU 10 3能够特异性地与CD4+ T淋巴细胞结合 ,阻断CD4+ T淋巴细胞激活的抗原信号通路 ,在明显降低T淋巴细胞增殖反应的同时 ,不影响其细胞毒作用的发挥 ,有望用于临床HLA半相合移植过程移植物抗宿主病 (GVHD)和移植物抗白血病 (GVL)效应的免疫调节。

异烟腙类衍生物TJU103体外对人T淋巴细胞活化功能的影响

目的 探讨异烟腙类衍生物 TJU10 3体外对人 T淋巴细胞活化功能的影响。方法 体外建立 HL A半相合供、受者间单向混合淋巴细胞培养 (ML C)体系 ,应用 TJU10 3阻断 CD4 T细胞激活的抗原信号通路 ,利用MTT法检测 T淋巴细胞的增殖和细胞毒活性 ,酶联免疫吸附法 (EL ISA)检测对 T淋巴细胞分泌细胞因子的影响。结果 TJU10 3能明显降低 HL A半相合供、受者间混合淋巴细胞增殖反应 ,以及肿瘤坏死因子 α(TNF- α)和 γ干扰素 (IFN-γ)等炎性细胞因子的分泌 (P <0 .0 1) ,但不影响供者 T细胞对原代白血病细胞的杀伤效应 (P >0 .0 5 )。结论 TJU10 3能特异性地与 CD4 T淋巴细胞结合 ,阻断 CD4 T淋巴细胞激活的抗原信号通路 ,在明显降低 T淋巴细胞增殖反应和炎性细胞因子分泌的同时 ,不影响其细胞毒作用发挥 。

Tju103和CTLA4-Ig联合诱导主要组织相容复合物半相合小鼠骨髓移植耐受

目的 观察吲哚亚甲基异烟腙 (Tju1 0 3)和细胞毒性T淋巴细胞相关性抗原 4免疫球蛋白 (CTLA4 Ig)联合应用 ,对主要组织相容复合物 (MHC)半相合小鼠骨髓移植的植入以及移植后移植物抗宿主病 (GVHD)、移植物抗白血病 (GVL)和抗感染的影响 ;探索一条既能降低GVHD又能保留GVL和抗感染能力的移植途径。方法 体外以受者 (正常CB6F1鼠 ,H 2 bd)抗原为特异性免疫耐受诱导原 ,MHC半相合的供者 (C5 7BL/ 6鼠 ,H 2 b)T淋巴细胞经和Tju1 0 3、CTLA4 Ig共育后 ,与供者骨髓细胞混合输入经预处理的受者体内。观察Tju1 0 3和CTLA4 Ig联合作用对移植后造血重建、GVHD、GVL和抗感染的影响。结果 单纯照射组 (A组 ) :全部 (1 0只 )白血病小鼠于照射后 1 1d内死于造血功能衰竭 ,大部分 (8只 )死于照射后 4～ 7d。环磷酰胺 (CTX)治疗组 (B组 ) :全部 (1 0只 )小鼠于接种白血病细胞后 1 6～ 2 3d(移植后 1 1～ 1 8d)死于白血病 ,但CTX治疗延长了白血病小鼠存活期。单纯移植组 (C组 ) :全部 (1 0只 )小鼠于移植后 2 1d内死亡 ,均死于GVHD。CsA预防组 (D组 ) :4只小鼠于移植后 8～ 2 2d内死亡 ,其中 1只死于白血病 ,2只死于感染 ,1只死于GVHD ;6只存活超过30d。Tju1 0 3处理组 (E组 ) :4只小鼠于移植后 9～ 2 6d内死亡 ,?

阻断CD4^+T细胞活化的双信号可预防小鼠慢性GVHD

目的:探讨联合应用TJU103和CTLA4-Ig阻断T细胞活化的TCR-CD3及B7-CD28通路对小鼠慢性GVHD的影响。方法:参照前期构建的慢性GVHD动物模型,受鼠经输注6×10~7个供鼠脾细胞后按干预方式的不同分5组:空白对照、c GVHD、TJU103干预、CTLA4-Ig干预和TJU103+CTLA4-Ig干预组。观察各干预因素对嵌合体形成及慢性GVHD大体表现评分和病理评分的影响。结果:TJU103和CTLA4-Ig不影响小鼠嵌合体的形成,分析慢性GVHD小鼠的Kaplan生存曲线显示,CTLA4-Ig和TJU103+CTLA4-Ig干预降低了慢性GVHD的发病率,TJU103可推迟慢性GVHD的发生时间,但均不能改变慢性GVHD的严重程度。结论:TJU103可推迟小鼠慢性GVHD的发病时间,CTLA4-Ig可减少小鼠慢性GVHD的发生率;二者联合应用可明显减少小鼠慢性GVHD的发病率,但不能改变慢性GVHD的严重程度。