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Ⅰ型牛疱疹病毒TK^-/gE^-基因双缺失突变株生物学特性
1
作者
定明
范强
+5 位作者
时彦胜
张小飞
张广州
李春
白杰英
刘正飞
《中国比较医学杂志》
CAS
2012年第7期5-8,共4页
目的构建Ⅰ型牛疱疹病毒(BHV-1)的TK-/gE-双缺失突变株,检测其生物学功能,为治疗牛传染性鼻气管炎提供参考。方法构建了带有EGFP表达盒的BHV-1 TK-/gE-双缺失突变株。通过southern杂交、蛋白质斑点印迹、空斑试验、MDBK细胞增殖实验等...
目的构建Ⅰ型牛疱疹病毒(BHV-1)的TK-/gE-双缺失突变株,检测其生物学功能,为治疗牛传染性鼻气管炎提供参考。方法构建了带有EGFP表达盒的BHV-1 TK-/gE-双缺失突变株。通过southern杂交、蛋白质斑点印迹、空斑试验、MDBK细胞增殖实验等技术方法,对重组基因所构成病毒突变株的生物学特性进行鉴定。结果 Southern杂交及蛋白斑点印迹表明,课题组成功构建了带有EGFP表达盒的双缺失突变株;该突变株具有与野生株相当的繁殖力,但TK-/gE-成功缺失,毒力大幅减弱;BHV-1 TK-/gE-遗传稳定,不会返强。结论本项目组成功构建了Ⅰ型牛疱疹病毒(BHV-1)的TK-/gE-双缺失突变株,该缺失株具有良好的安全性和稳定性,为该突变株进一步作为生物安全疫苗和多价病毒载体提供了依据,为预防和治疗牛传染性鼻气管炎提供了技术支持。
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关键词
牛疱疹病毒
tk
-
/ge
-突变株
生物学特性
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职称材料
应用荧光定量PCR方法检测伪狂犬病病毒弱毒株在猪体组织中的分布
2
作者
许梦微
朱来旭
+7 位作者
陈赛赛
张传健
王志胜
郑亚婷
刘娅梅
童玲
曹瑞兵
王继春
《畜牧与兽医》
CAS
北大核心
2023年第1期83-87,共5页
为了解伪狂犬病病毒(PRV)TK/PK/gE三基因缺失弱毒株在猪体组织中的分布情况,针对PRV gB基因保守区设计并合成1对特异性引物,建立并优化了一种可快速、定量检测PRV的SYBR-GreenⅠ荧光定量PCR方法。该检测方法特异性强且敏感度高,最低检...
为了解伪狂犬病病毒(PRV)TK/PK/gE三基因缺失弱毒株在猪体组织中的分布情况,针对PRV gB基因保守区设计并合成1对特异性引物,建立并优化了一种可快速、定量检测PRV的SYBR-GreenⅠ荧光定量PCR方法。该检测方法特异性强且敏感度高,最低检测浓度为10^(1)拷贝/μL。PRV TK/PK/gE三基因缺失弱毒株免疫仔猪后可少量存在于大脑、小脑、肝脏、脾脏、肺脏、扁桃体和颌下淋巴结中,部分仔猪鼻甲骨病毒含量较高。应用本研究建立的荧光定量PCR方法阳性检出率为79.2%,而常规PCR方法阳性检出率仅为45.8%。结果表明,本研究建立的荧光定量PCR方法为了解弱毒株在猪体的分布提供了快速、敏感的检测手段。PRV TK/PK/gE三基因缺失弱毒株在猪组织中的分布情况为进一步揭示其组织嗜性、安全性和免疫机制提供了数据。
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关键词
伪狂犬病病毒
tk/
pk/
ge
三基因缺失弱毒株
荧光定量PCR
组织分布
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职称材料
题名
Ⅰ型牛疱疹病毒TK^-/gE^-基因双缺失突变株生物学特性
1
作者
定明
范强
时彦胜
张小飞
张广州
李春
白杰英
刘正飞
机构
军事医学科学院实验动物中心
华中农业大学
解放军第
出处
《中国比较医学杂志》
CAS
2012年第7期5-8,共4页
基金
农业公益性行业科研专项资助项目(200803018)
文摘
目的构建Ⅰ型牛疱疹病毒(BHV-1)的TK-/gE-双缺失突变株,检测其生物学功能,为治疗牛传染性鼻气管炎提供参考。方法构建了带有EGFP表达盒的BHV-1 TK-/gE-双缺失突变株。通过southern杂交、蛋白质斑点印迹、空斑试验、MDBK细胞增殖实验等技术方法,对重组基因所构成病毒突变株的生物学特性进行鉴定。结果 Southern杂交及蛋白斑点印迹表明,课题组成功构建了带有EGFP表达盒的双缺失突变株;该突变株具有与野生株相当的繁殖力,但TK-/gE-成功缺失,毒力大幅减弱;BHV-1 TK-/gE-遗传稳定,不会返强。结论本项目组成功构建了Ⅰ型牛疱疹病毒(BHV-1)的TK-/gE-双缺失突变株,该缺失株具有良好的安全性和稳定性,为该突变株进一步作为生物安全疫苗和多价病毒载体提供了依据,为预防和治疗牛传染性鼻气管炎提供了技术支持。
关键词
牛疱疹病毒
tk
-
/ge
-突变株
生物学特性
Keywords
Bovine hebetes virus;
tk
-
/ge
-
ge
ne-
delet
ed mutant virus
strain
; Biological characteristic
分类号
R332 [医药卫生—人体生理学]
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职称材料
题名
应用荧光定量PCR方法检测伪狂犬病病毒弱毒株在猪体组织中的分布
2
作者
许梦微
朱来旭
陈赛赛
张传健
王志胜
郑亚婷
刘娅梅
童玲
曹瑞兵
王继春
机构
南京农业大学动物医学院
江苏省农业科学院动物免疫工程研究所
国家兽用生物制品工程技术研究中心
出处
《畜牧与兽医》
CAS
北大核心
2023年第1期83-87,共5页
基金
江苏省农业科技自主创新基金项目[CX(21)3130]。
文摘
为了解伪狂犬病病毒(PRV)TK/PK/gE三基因缺失弱毒株在猪体组织中的分布情况,针对PRV gB基因保守区设计并合成1对特异性引物,建立并优化了一种可快速、定量检测PRV的SYBR-GreenⅠ荧光定量PCR方法。该检测方法特异性强且敏感度高,最低检测浓度为10^(1)拷贝/μL。PRV TK/PK/gE三基因缺失弱毒株免疫仔猪后可少量存在于大脑、小脑、肝脏、脾脏、肺脏、扁桃体和颌下淋巴结中,部分仔猪鼻甲骨病毒含量较高。应用本研究建立的荧光定量PCR方法阳性检出率为79.2%,而常规PCR方法阳性检出率仅为45.8%。结果表明,本研究建立的荧光定量PCR方法为了解弱毒株在猪体的分布提供了快速、敏感的检测手段。PRV TK/PK/gE三基因缺失弱毒株在猪组织中的分布情况为进一步揭示其组织嗜性、安全性和免疫机制提供了数据。
关键词
伪狂犬病病毒
tk/
pk/
ge
三基因缺失弱毒株
荧光定量PCR
组织分布
Keywords
pseudorabies virus
tk/pk/ge deletion strain
real-time quantitative PCR
tissue distribution
分类号
S855.3 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
Ⅰ型牛疱疹病毒TK^-/gE^-基因双缺失突变株生物学特性
定明
范强
时彦胜
张小飞
张广州
李春
白杰英
刘正飞
《中国比较医学杂志》
CAS
2012
0
下载PDF
职称材料
2
应用荧光定量PCR方法检测伪狂犬病病毒弱毒株在猪体组织中的分布
许梦微
朱来旭
陈赛赛
张传健
王志胜
郑亚婷
刘娅梅
童玲
曹瑞兵
王继春
《畜牧与兽医》
CAS
北大核心
2023
0
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职称材料
已选择
0
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