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Ⅰ型牛疱疹病毒TK^-/gE^-基因双缺失突变株生物学特性
1
作者
定明
范强
+5 位作者
时彦胜
张小飞
张广州
李春
白杰英
刘正飞
《中国比较医学杂志》
CAS
2012年第7期5-8,共4页
目的构建Ⅰ型牛疱疹病毒(BHV-1)的TK-/gE-双缺失突变株,检测其生物学功能,为治疗牛传染性鼻气管炎提供参考。方法构建了带有EGFP表达盒的BHV-1 TK-/gE-双缺失突变株。通过southern杂交、蛋白质斑点印迹、空斑试验、MDBK细胞增殖实验等...
目的构建Ⅰ型牛疱疹病毒(BHV-1)的TK-/gE-双缺失突变株,检测其生物学功能,为治疗牛传染性鼻气管炎提供参考。方法构建了带有EGFP表达盒的BHV-1 TK-/gE-双缺失突变株。通过southern杂交、蛋白质斑点印迹、空斑试验、MDBK细胞增殖实验等技术方法,对重组基因所构成病毒突变株的生物学特性进行鉴定。结果 Southern杂交及蛋白斑点印迹表明,课题组成功构建了带有EGFP表达盒的双缺失突变株;该突变株具有与野生株相当的繁殖力,但TK-/gE-成功缺失,毒力大幅减弱;BHV-1 TK-/gE-遗传稳定,不会返强。结论本项目组成功构建了Ⅰ型牛疱疹病毒(BHV-1)的TK-/gE-双缺失突变株,该缺失株具有良好的安全性和稳定性,为该突变株进一步作为生物安全疫苗和多价病毒载体提供了依据,为预防和治疗牛传染性鼻气管炎提供了技术支持。
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关键词
牛疱疹病毒
tk-/ge-突变株
生物学特性
下载PDF
职称材料
伪狂犬病病毒鄂A株TK^-/LacZ^+突变株的构建
被引量:
8
2
作者
方六荣
周复春
+2 位作者
陈焕春
吴斌
何启盖
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2001年第3期244-248,共5页
本研究以地高辛标记的含TK基因的BamHI/KpnI片段为探针 ,通过Southern杂交确定伪狂犬病病毒鄂A株基因组中一大小约 5 9kb的KpnI片段中含有TK基因 ,回收该片段并克隆于pUC18的KpnI位点。然后进一步克隆其中含TK基因的PstI/KpnI片段 ,并将...
本研究以地高辛标记的含TK基因的BamHI/KpnI片段为探针 ,通过Southern杂交确定伪狂犬病病毒鄂A株基因组中一大小约 5 9kb的KpnI片段中含有TK基因 ,回收该片段并克隆于pUC18的KpnI位点。然后进一步克隆其中含TK基因的PstI/KpnI片段 ,并将LacZ表达盒插入到该片段中的BamHI位点 ,构建转移质粒 pUEKPZ。将该质粒与伪狂犬病病毒鄂A株基因组共转染PK 15细胞 ,待完全病变后在X gal存在下筛选蓝斑 ,蓝斑纯化 3次后 ,经PCR扩增、Southern杂交证实获得的病毒为伪狂犬病病毒鄂A株TK- /LacZ+ 突变株。
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关键词
伪狂犬病病毒
鄂A
株
tk-/
LacZ
突变
株
基因缺失标志疫苗
株
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职称材料
题名
Ⅰ型牛疱疹病毒TK^-/gE^-基因双缺失突变株生物学特性
1
作者
定明
范强
时彦胜
张小飞
张广州
李春
白杰英
刘正飞
机构
军事医学科学院实验动物中心
华中农业大学
解放军第
出处
《中国比较医学杂志》
CAS
2012年第7期5-8,共4页
基金
农业公益性行业科研专项资助项目(200803018)
文摘
目的构建Ⅰ型牛疱疹病毒(BHV-1)的TK-/gE-双缺失突变株,检测其生物学功能,为治疗牛传染性鼻气管炎提供参考。方法构建了带有EGFP表达盒的BHV-1 TK-/gE-双缺失突变株。通过southern杂交、蛋白质斑点印迹、空斑试验、MDBK细胞增殖实验等技术方法,对重组基因所构成病毒突变株的生物学特性进行鉴定。结果 Southern杂交及蛋白斑点印迹表明,课题组成功构建了带有EGFP表达盒的双缺失突变株;该突变株具有与野生株相当的繁殖力,但TK-/gE-成功缺失,毒力大幅减弱;BHV-1 TK-/gE-遗传稳定,不会返强。结论本项目组成功构建了Ⅰ型牛疱疹病毒(BHV-1)的TK-/gE-双缺失突变株,该缺失株具有良好的安全性和稳定性,为该突变株进一步作为生物安全疫苗和多价病毒载体提供了依据,为预防和治疗牛传染性鼻气管炎提供了技术支持。
关键词
牛疱疹病毒
tk-/ge-突变株
生物学特性
Keywords
Bovine hebetes virus;
tk-/
ge-
gene-deleted mutant virus strain; Biological characteristic
分类号
R332 [医药卫生—人体生理学]
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职称材料
题名
伪狂犬病病毒鄂A株TK^-/LacZ^+突变株的构建
被引量:
8
2
作者
方六荣
周复春
陈焕春
吴斌
何启盖
机构
华中农业大学畜牧兽医学院
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2001年第3期244-248,共5页
基金
"九五"国家科技攻关计划生物技术项目资助!(项目编号 96 -C0 1- 0 4- 0 3)
文摘
本研究以地高辛标记的含TK基因的BamHI/KpnI片段为探针 ,通过Southern杂交确定伪狂犬病病毒鄂A株基因组中一大小约 5 9kb的KpnI片段中含有TK基因 ,回收该片段并克隆于pUC18的KpnI位点。然后进一步克隆其中含TK基因的PstI/KpnI片段 ,并将LacZ表达盒插入到该片段中的BamHI位点 ,构建转移质粒 pUEKPZ。将该质粒与伪狂犬病病毒鄂A株基因组共转染PK 15细胞 ,待完全病变后在X gal存在下筛选蓝斑 ,蓝斑纯化 3次后 ,经PCR扩增、Southern杂交证实获得的病毒为伪狂犬病病毒鄂A株TK- /LacZ+ 突变株。
关键词
伪狂犬病病毒
鄂A
株
tk-/
LacZ
突变
株
基因缺失标志疫苗
株
Keywords
Pseudorabies virus
Ea strain
TK -/LacZ + mutant
分类号
S852.659.1 [农业科学—基础兽医学]
S855.3 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
Ⅰ型牛疱疹病毒TK^-/gE^-基因双缺失突变株生物学特性
定明
范强
时彦胜
张小飞
张广州
李春
白杰英
刘正飞
《中国比较医学杂志》
CAS
2012
0
下载PDF
职称材料
2
伪狂犬病病毒鄂A株TK^-/LacZ^+突变株的构建
方六荣
周复春
陈焕春
吴斌
何启盖
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2001
8
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职称材料
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参考文献
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