微囊藻毒素Microcystin-LR体外遗传毒性

背景与目的:应用人类淋巴母细胞TK6研究微囊藻毒素(Microcystin_LR,MCLR)的体外遗传毒性。材料与方法:MCLR体外染毒TK6细胞4h或24h后检测细胞毒性、微核及tk位点突变频率。结果:4h染毒未引发明显细胞毒性,24hMCLR染毒导致TK6细胞相对存活率下降,细胞微核率及TK基因突变频率明显上升,并有剂量-反应关系。最高浓度组(80μg/ml)的细胞微核率及TK基因突变频率分别是对照组的4.8及5.1倍。MCLR诱发tk位点两种不同表型的突变细胞集落,即正常生长集落及缓慢生长集落,并以后者为主。结论:24h染毒MCLR可以诱发TK6细胞微核及基因突变,揭示MCLR可能是一种断裂剂。

非霍奇金淋巴瘤组织和氢醌诱变TK6淋巴母细胞及其裸鼠荷瘤组织Ki-67和Bcl-6基因表达及意义

目的 Ki-67是目前应用最广泛的细胞增殖标志之一,而B细胞淋巴瘤-6(B-cell lymphoma-6,Bcl-6)基因本身具有不稳定性,其在淋巴瘤预后中是否能作为判断标记还需进一步研究。本研究主要探讨B细胞非霍奇金淋巴瘤(B-non Hodgkin lymphoma,B-NHL)组织、氢醌诱变的TK6淋巴母细胞及其裸鼠荷瘤体中原癌基因Bcl-6和增殖细胞核抗原Ki-67的表达情况及两者间的相关性。方法采用免疫组化GTVisionTM二步法对东莞东华医院2014-01-01-2018-12-31收治的85例B-NHL组织切片、氢醌诱变的人TK6淋巴母细胞及其裸鼠荷瘤体中Ki-67和Bcl-6表达情况进行检测;运用Spearman相关性分析及χ2检验分析2个基因的表达相关性及在临床分型诊断中的意义;荧光定量聚合酶链反应法检测氢醌诱导的TK6细胞中Bcl-6和Ki-67基因的表达。结果 85例B-NHL组织中,Ki-67高表达率为82.35%(70/85),Bcl-6阳性率为84.71%(72/85)。Ki-67在弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B cell lymphoma,DLBCL)中高表达率为95.35%(41/43),有别于非DLBCL中的69.05%(29/42),χ^2=10.113,P=0.001;Ki-67表达和B-NHL的恶性程度差异有统计学意义的关联(χ^2=21.642,P<0.001),并与Bcl-6在B-NHL组织中的表达呈正相关,r=0.403,P<0.001;但与年龄、性别均无关联,P>0.05;≥45岁患者Bcl-6阳性率高于<45岁患者(χ^2=9.939,P<0.05),说明Bcl-6的表达与年龄有关,而与性别、病理类型和恶性程度均无关联(P>0.05),氢醌诱导恶变的TK6细胞中Ki-67的mRNA表达上升(t=3.853,P=0.031),且诱变细胞的裸鼠荷瘤实验瘤体经免疫组化检测可见Ki-67强阳性(均值为80%)和Bcl-6的阳性(均值为11.5%)。结论 Ki-67高表达是DLBCL的重要判别指标,且与B-NHL的恶性程度有关;氢醌暴露可能引起B-NHL疾病通路中相关癌基因Ki-67和Bcl-6的表达改变,且二者在蛋白水平具有潜在的相关性。