真菌DNA提取方法的建立和比较

目的:DNA的提取效率,尤其是DNA的纯度严重影响实验结果,同一标本采用不同方法或不同标本采用相同方法提取DNA,其纯度和提取率有很大差异。以丝状真菌为材料.进行DNA提取.对真菌DNA的提取方法进行优化,探讨其最佳DNA提取方法方法:实验于2004-06/2006-12在吉林大学基础医学院真菌实验室进行以临床常见致病真菌标本为材料,采用玻璃珠-盐析法、CTAB法、Gene TLE^(TM)法3种不同方法提取DNA,通过琼脂糖凝胶电泳比较不同方法提取DNA的效率。结果:同等菌体量下,A_(260)和A_(280)的比值采用Gene TLE^(TM)法获得的样品最高,表明其蛋白质含量相对最少.3种提取的基因组DNA琼脂糖凝胶电泳图都在相应的多重PCR体系中扩增出目的片段,Gene TLE^(TM)DNA抽提法带型最清楚、明亮。结论:Gene TLE^(TM)法提取DNA效率高、质量好,操作简单.适于DNA的提取。