TLE1在单相梭形细胞型及低分化型滑膜肉瘤中的诊断价值

目的观察TLE1蛋白在滑膜肉瘤等恶性梭形细胞肿瘤及低分化肉瘤中的表达,探讨TLE1作为单相梭形细胞型滑膜肉瘤及低分化型滑膜肉瘤标记物的诊断价值。方法采用免疫组化法检测TLE1、bcl-2和CD99在14例单相梭形细胞型及低分化型滑膜肉瘤、5例Ewing肉瘤、4例孤立性纤维性肿瘤、5例恶性外周神经鞘瘤、2例纤维肉瘤、5例隆突性皮肤纤维肉瘤、8例未分化/未分类肉瘤中的表达。其中7例滑膜肉瘤采用FISH方法检测t(X;18)(p11.2;q11.2)染色体易位。结果 TLE1在滑膜肉瘤中阳性率为92.9%,在Ewing肉瘤、孤立性纤维性肿瘤、恶性外周神经鞘瘤、纤维肉瘤、隆突性皮肤纤维肉瘤以及未分化/未分类肉瘤中阳性率分别为20%、25%、40%、0%、20%、37.5%。强阳性率在滑膜肉瘤中为92.9%,未分化/未分类肉瘤中为12.5%,其余几类软组织肉瘤中均为0%。结论 TLE1对于单相梭形细胞型滑膜肉瘤及低分化型滑膜肉瘤具有较高的敏感性和特异性,特别是弥漫强阳性表达特征更有意义,有助于滑膜肉瘤与其他梭形细胞肉瘤及低分化肉瘤的鉴别诊断。

人肺腺癌TLE1N端Q结构域片段在原核系统表达纯化及其多克隆抗体的制备

背景与目的 TLE1是参与Wnt、Notch以及EGFR信号通路调控的一种重要蛋白。TLE1N端Q结构域片段通过介导自身寡聚化及与LEF1结合发挥调控作用。本实验旨在构建人TLE1N端Q区基因在大肠杆菌的融合表达载体,制备并纯化人TLE1N端Q结构域蛋白片段,制备TLE1Q结构域多克隆抗体。方法以人肺腺癌cDNA库为模板聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)特异性扩增TLE1-Q(1-136)基因序列,与pGEX-4T-1质粒连接后转化感受态大肠杆菌E.coli。以异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl-β-D thiogalactoside,IPTG)诱导表达产生融合蛋白GST-TLE1-Q(1-136)。经亲和层析,rombin酶切,FPLC纯化,SDS-PAGE鉴定目的蛋白TLE1-Q(1-136)。免疫家兔,制备多克隆抗体。结果测序证实重组表达质粒中的人TLE1N端Q结构域基因序列正确,成功构建表达型重组质粒pGEX-4T1-TLE1-Q。重组质粒转化大肠杆菌C+后,经诱导,重组蛋白GST-TLE1-Q(1-136)得到表达。SDS-PAGE鉴定示纯化蛋白为目的蛋白人TLE1N端Q结构域片段TLE1-Q(1-136)。免疫家兔后收获抗血清,ELISA显示抗体效价为1:20000,具有高度特异性。免疫印迹结果显示,制备的多抗可与TLE1-Q(1-136)蛋白特异性结合。结论成功构建了人TLE1N端Q结构域重组融合蛋白表达质粒pGEX-4T1-TLE1-Q,表达纯化了稳定可溶TLE1N端Q结构域蛋白TLE1-Q(1-136),制备了人TLE1N端Q结构域蛋白片段多克隆抗体,为进一步研究TLE1在肺癌生成中的作用奠定了基础。

TLE1在滑膜肉瘤中的表达研究

目的:本研究旨在研究滑膜肉瘤组织中TLE1的表达,探讨其在临床病理诊断中的适用性。方法:运用免疫组织化学以及统计学方法对本院2001年至2011年期间手术切除的81例滑膜肉瘤患者进行研究和统计分析。结果:TLE1在滑膜肉瘤中的阳性率为80.2%,在双相型、单相型、差分化型中的阳性率分别为88.8%、78.9%以及68.7%;TLE1在恶性外周神经鞘膜瘤和孤立性纤维性肿瘤中的阳性率分别为12.5%和8.3%。结论:TLE1对于滑膜肉瘤的敏感性和特异性,有助于在滑膜肉瘤与其他类型肿瘤的鉴别诊断中发挥作用。

嗜水气单胞菌Ⅵ型分泌系统假定效应蛋白基因tle1^AH的生物学功能

[目的]本文旨在鉴定和研究嗜水气单胞菌中国流行株NJ-35的Ⅵ型分泌系统(T6SS)新型效应蛋白及其功能,进一步阐明其致病机制。[方法]基于已报道的保守结构域DUF4123,对NJ-35株全基因组序列进行潜在的T6SS效应蛋白基因预测,采用同源重组技术构建基因缺失株和相应互补株。对野生株、缺失株和互补株分别进行细菌竞争试验,并测定细菌生长曲线、运动性、生物被膜形成能力、抗巨噬细胞吞噬能力及其对斑马鱼的半数致死量(LD50)等。[结果]成功预测到假定的效应蛋白基因tle1^AH(U876-17550),并构建tle1^AH基因缺失株(Δtle1^AH)和相应互补株(CΔtle1^AH)。特性分析发现,与野生株比较,缺失株抑制大肠杆菌生长和抗小鼠巨噬细胞吞噬的能力明显降低,生物被膜形成能力增强,对斑马鱼的LD50增加10余倍(P<0.01),互补株各项指标均恢复到野生株水平。[结论]鉴定到嗜水气单胞菌T6SS的一个假定效应蛋白基因(tle1^AH),并对其功能进行初步研究,为进一步探讨T6SS在该菌致病过程中的作用奠定基础。

荧光原位杂交及TLE1免疫组织化学在小细胞低分化型滑膜肉瘤诊断中的应用

滑膜肉瘤（synovial sarcoma）占软组织肉瘤的5％～10％，以青壮年多见，主要发生于四肢大关节附近，多数生长缓慢。根据组织学形态及分化程度，滑膜肉瘤分可为5种类型：单相纤维型、单相上皮型、双相型、低分化梭形细胞型和小细胞低分化型（small cell variant of poorly differentiated synovial sarcoma）.

人gp130结合分子与TLE1分子通过同源的Q结构域相互作用

目的 确定人gp130结合分子 (GAM)与transducinlikeenhancerofsplit 1(TLE1)分子间是否存在相互作用及相互作用的结构基础 ,以深入研究这两种分子的功能。方法 扩增编码GAM与TLE1分子不同结构域的cDNA ,构建含有这些不同结构域的酵母双杂交载体 ,通过酵母双杂交系统分析和免疫共沉淀试验 ,研究这两种分子间的相互作用。结果 DNA序列测定证实成功构建了含GAM与TLE1分子不同结构域的酵母双杂交载体 ,酵母双杂交分析表明GAM与TLE1分子通过氨基端的Q结构域相互结合 ,免疫共沉淀试验证实了这一发现。

儿童滑膜肉瘤临床病理分析

目的探讨儿童滑膜肉瘤的临床病理特点和鉴别诊断。方法回顾性分析26例儿童滑膜肉瘤患者的临床资料,统计分析其临床特点、病理学、免疫组织化学及分子遗传学特征。结果 26例儿童滑膜肉瘤,男15例,女11例,男女之比为1.36∶1,年龄4~15岁,平均(12.8±0.3)岁;发生部位:上肢5例,下肢19例,腹壁2例,其中3例出现肺转移;组织学表现:单相纤维型滑膜肉瘤,肿瘤细胞呈梭形,排列成束状,形成大小不等的旋涡状,部分呈弧形,相互交叉,间质可见较多分枝状、裂隙状壁薄血管。双相型滑膜肉瘤,肿瘤组织由梭形细胞及上皮样细胞组成,梭形细胞区及上皮样细胞区相互移行。梭形细胞区结构同单项纤维型SS相似,上皮样细胞区可形成腺样结构,部分可见乳头状结构;低分化型滑膜肉瘤均为小细胞型,肿瘤细胞较小,圆形或多边形,类似外周原始神经外胚层瘤的肿瘤细胞,肿瘤细胞呈小巢状或弥漫片状分布。所有病例均表达波形蛋白、TLE1、上皮角蛋白和(或)上皮膜抗原,均检测到SS18-SSX融合基因。结论儿童滑膜肉瘤组织形态及免疫表型变化多样,几乎可发生在任何部位,导致其与形态学类似的几种软组织肿瘤进行鉴别诊断相对困难,相对特异的TLE1具有较好的鉴别诊断作用,金标准SS18-SSX基因检测可明确诊断,对其分子机制的进一步研究和新一代靶向药物的开发,能显著改善患者的生存质量和预后。

TLE4941-1C：率先用于ABS系统的边缘检测主动轮速传感器

第三代TLE4941-1C是英飞凌成功开发的ABS传感器产品家族中的一员。为使系统快速启动，TLE4941-1C在单片上集成了一个差分霍耳(hall)传感器和全信号处理模块，并进行前沿检测。按照人体模型，集成电容提高了系统的EMC性能并实现了在12KV下很高的ESD性能。传感器在启动时和车辆工作时周期性地进行自校准，校正信号质量以确保高的读取精度。