2型糖尿病合并菌阳肺结核患者外周血单个核细胞TLRs/NF-kB通路表达研究

目的:探讨分析2型糖尿病合并菌阳肺结核患者外周血单个核细胞TLRs/NF-kB通路表达情况。方法:选择我院收治的2型糖尿病合并菌阳肺结核患者96例作为合并组,单纯糖尿病患者60例作为糖尿病组,健康受试者60例作为对照组。合并肺结核患者给予肺结核标准化治疗方案,比较三组受试者外周血单个核细胞(PBMCs)TLR2、TLR4、NF-κB mRNA表达情况,并比较TLRs/NF-kB通路表达与患者临床治疗效果的关系。结果:三组受试者TLR2、TLR4、NF-κB mRNA表达差异具有统计学意义(P<0.05)。合并组患者治疗6个月后TLR2、TLR4以及NF-κB mRNA相对表达量均较治疗前降低(P<0.05)。治疗后痰菌阴性组患者TLR2、TLR4以及NF-κB mRNA相对表达量均低于痰菌阳性组患者(P<0.05)。结论:2型糖尿病合并菌阳肺结核患者机体处于TLRs/NF-kB通路激活状态,而经治疗后可降低TLRs/NF-kB通路表达,且TLRs/NF-kB通路的改善与患者抗结核治疗效果密切相关。

To investigate the effect of Shenqi Tiaoshen Formula on CSE induced inflammatory response of MH-S cells based on TLR4/NF-kB/NLRP3 pathway

Objective:To study the effects of Shenqi Tiaoshen Formula(SQTS)on the inflammatory response of MH-S cells induced by cigarette smoking extract(CSE)and its mechanism based on TLR4/NF-kB/NLRP3 pathway.Methods:MH-S cells were used as subjects to evaluate cell viability by CCK-8 method.The levels of TNF-α,IL-1βand IL-6 in the supernatant were detected by ELISA.ROS were detected by DCFH-DA fluorescence probe.Western blotting was used to detect the expression of TLR4/NF-kB/NLRP3 pathway protein,and TAK-242,a TLR4 inhibitor,was used to verify the role of SQTS in the TLR4/NF-kB/NLRP3 pathway.Results:Compared with blank group,the cell survival rate of CSE group was decreased,and the contents of inflammatory cytokines TNF-α,IL-1βand IL-6 were increased(P<0.05),ROS fluorescence expression level was significantly increased(P<0.01),TLR4/NF-kB/NLRP3 pathway protein expression was significantly increased(P<0.05);Compared with CSE group,the survival rate of cells in SQTS groups was increased,and the expression levels of the above indexes were decreased(P<0.05),and TLR4/NF-kB/NLRP3 pathway protein decreased in TAK-242 groups(P<0.05).Conclusion:SQTS can reduce the inflammatory response of MH-S cells induced by CSE by inhibiting TLR4/NF-kB/NLRP3 pathway.

支气管肺泡灌洗液及血清NF-κB、TLR-2、TLR-4、TNF-α在肺炎诊断中的应用价值

目的探讨支气管肺泡灌洗液(BALF)及血清核转录因子-κB(NF-κB)、Toll样受体2(TLR-2)、Toll样受体4(TLR-4)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)在肺炎诊断中的应用价值。方法选取2023年1月—2024年3月于吉林大学第二医院就诊的57例肺炎患者纳入研究组,另取同期体检的健康者57例纳入对照组,均采集外周静脉血与肺泡灌洗液,检测NF-κB、TLR-2、TLR-4、TNF-α水平,采用Pearson相关性分析患者血清及BALF中NF-κB、TLR-2、TLR-4、TNF-α的相关性。结果研究组患者血清NF-κB(41.74±4.75)μg/L、TLR-2(5.32±1.12)ng/L、TLR-4(6.44±1.61)ng/L、TNF-α(4.36±1.03)ng/L水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。研究组患者BALF中NF-κB(8.19±2.62)μg/L、TLR-2(2.97±0.79)ng/L、TLR-4(4.24±1.18)ng/L、TNF-α(2.04±0.59)ng/L水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,患者血清及BALF中NF-κB、TLR-2、TLR-4、TNF-α水平呈正相关性(P<0.05)。结论肺炎患者血清及BALF中NF-κB、TLR-2、TLR-4、TNF-α均呈高表达,联合检测有助于早期诊断及评估病情。

基于“TLR4/NF-kB”信号通路研究“加味四妙丸”治疗急性痛风性关节炎大鼠的作用机制

[目的]观察"加味四妙丸"治疗急性痛风性关节炎(acute gouty arthritis,AGA)大鼠的疗效,并基于"TLR4/NF-kB"信号通路探讨"加味四妙丸"作用机制。[方法]108只SD雄性大鼠,随机分为正常组、模型组、秋水仙碱组、"加味四妙丸"低、中、高剂量组,每组18只。除正常组外,其余大鼠参照Coderre造模方法膝关节腔注射尿酸钠悬浊液制作AGA模型,治疗4d后,计算各时间点受试关节肿胀指数,光学显微镜观察受试关节滑膜组织病理学变化,采用ELISA法检测关节腔冲洗液IL-1β、TNF-α的含量,免疫组化法检测关节滑膜组织TLR4、NF-kB、p-NF-kB蛋白表达,RT-PCR法检测滑膜组织TLR4m RNA表达。[结果]与正常组比较,模型组大鼠膝关节肿胀指数显著升高(P<0.01),关节滑膜组织炎性改变明显,滑膜组织中TLR4、NF-kB、p-NF-kB蛋白表达量和TLR4m RNA表达量显著上调(P<0.01),关节腔冲洗液中IL-1β、TNF-α含量显著升高(P<0.01);与模型组比较,"加味四妙丸"中、高剂量组大鼠治疗后关节肿胀指数显著下降(P<0.01),关节滑膜组织炎性改变明显减轻,滑膜组织中TLR4、NF-kB、p-NFkB蛋白表达量和TLR4m RNA表达量均显著下调(P<0.01),关节腔冲洗液中IL-1β、TNF-α含量显著下降(P<0.01)。[结论]"加味四妙丸"可能通过抑制"TLR4/NF-kB"信号通路,从而抑制IL-1β、TNF-α的产生,起到治疗AGA的作用,且其疗效与药物剂量有一定相关性。

基于TLR4/MyD88/NF-KB通路探讨中医超声药透电疗改善脑缺血大鼠炎症反应的实验研究

目的探讨中医超声药透电疗仪对脑缺血大鼠炎症反应的影响。方法建立大脑中动脉闭塞(Middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,将大鼠随机分为假手术组、模型组、中药片组、空白片+电疗组、中药片+电疗组、丁苯酞组,造模24 h后连续给予相应治疗1周。治疗后,评估大鼠的神经功能评分,TTC计算脑梗死体积百分比;ELISA法检测血清肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白细胞介素—1β(Interleukin-1β,IL-1β)水平;免疫组化和Western blotting法检测大鼠梗死侧皮质TLR4、MyD88、NF-KBp65的表达。结果与模型组比较,中医超声药透电疗可改善MCAO大鼠神经功能缺损症状,减轻脑梗死体积百分比,差异有统计学意义(P<0.05),降低皮质区TLR4、MyD88、NF-KBp65的表达及血清炎症因子TNF-α、IL-1β的释放,差异有统计学意义(P<0.05)。结论中医超声药透电疗能够改善脑缺血大鼠的炎症反应,其机制可能与TLR4/MyD88/NF-KB通路有关。

白藜芦醇抑制血管紧张素Ⅱ/TLR4/NF-KB调控鼠血管平滑肌细胞炎症和氧化应激损伤作用

目的探讨白藜芦醇(RES)抑制血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)/TLR4/NF-KB调控大鼠血管平滑肌细胞炎症和氧化应激损伤的作用。方法采用大鼠胸主动脉平滑肌A7r5细胞株为主要受试物,分为对照组、RES组(30μmol/L)、AngⅡ组(10^-4μmol/L)和实验组(30μmol/L RES预处理2 h+10-4μmol/L AngⅡ)。CCK-8法检测A7r5细胞的存活率;ELISA法检测细胞上清液中TNF-α和IL-6表达;采用试剂盒检测ROS和iNOS活性;Western blot法检测A7r5细胞AngⅡ、TLR4、P-P65,P-IKB蛋白表达水平。结果与对照组相比,AngⅡ组A7r5细胞株存活率显著升高,RES组和实验组A7r5细胞株存活率显著降低(P<0.05);AngⅡ组A7r5细胞株TNF-α和IL-6表达显著升高,ROS和iNOS活性显著升高,AngⅡ、TLR4、P-P65,P-IKB蛋白含量显著升高,RES组和实验组TNF-α和IL-6表达显著降低,ROS和iNOS活性显著降低,AngⅡ、TLR4、P-P65,P-IKB蛋白含量显著升高(P<0.05)。与AngⅡ组相比,RES组和实验组A7r5细胞株存活率显著降低,实验组A7r5细胞株存活率下降更为明显(P<0.05);AngⅡ组A7r5细胞株TNF-α和IL-6表达显著降低,ROS和iNOS活性显著降低,AngⅡ、TLR4、P-P65,P-IKB蛋白含量显著降低,RES组和实验组TNF-α和IL-6表达显著降低,ROS和iNOS活性显著降低,AngⅡ、TLR4、P-P65,P-IKB蛋白含量显著降低(P<0.05)。结论白藜芦醇可有效缓解大鼠血管平滑肌细胞的炎症和氧化应激损伤,主要通过抑制血管紧张素Ⅱ/TLR4/NF-KB信号通路。

TLRs-NF-kB信号通路在重症手足口病发病中的作用机制研究

目的探讨Toll样受体-核转录因子-κB(TLRs-NF-κB)信号通路在重症手足口病发病机制中的作用。方法回顾性分析2014年1月至2019年6月苏州大学附属儿童医院感染科及重症医学科收治重症手足口病患儿96例(重症组),普通型手足口病患儿102例(普通组)以及健康对照组儿童20例(健康组),观察2组手足口病患儿的临床表现及病毒检测结果;酶联免疫吸附法(ELISA)检测3组血清细胞因子血清白细胞介素-6、-10(IL-6、IL-10),γ-干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及核转录因子-κB(NF-κB)水平,采用流式细胞术检测3组TLRs细胞限制存在型(TLR2、TLR4)阳性细胞百分比。结果重症组肠道病毒71型(EV71型)感染阳性率高于普通组(62.50%vs.25.49%,P<0.05);与健康组比较,重症组和普通组患儿血清IL-10、IL-6、IFN-γ、TNF-α、NF-κB水平以及TLR2、TLR4阳性细胞百分比均升高(P<0.05),且重症组高于普通组(P<0.05)。结论重症手足口病患儿机体免疫紊乱较为严重,血清IL-10、IL-6、IFN-γ、TNF-α、NF-κB以及TLR2、TLR4阳性细胞百分比均升高,TLRs-NF-kB信号通路在疾病的发病中的发挥了重要的作用。

蛛网膜下腔出血患者TLR4/NF-κB信号通路变化及意义

目的探究蛛网膜下腔出血患者Toll样受体4(Toll like receptor 4,TLR4)/核因子κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)信号通路变化及意义。方法选取作者医院2018-05/2021-06月收治的60例蛛网膜下腔出血患者作为观察组,另选取同期体检健康者60例作为对照组。比较两组TLR4/NF-κB信号通路相关因子表达,分析蛛网膜下腔出血患者TLR4/NF-κB信号通路相关因子与神经功能损害美国国立卫生院卒中量表(national institutes of health stroke scale,NIHSS)评分的关系。比较不同预后患者发病第1、3、7、14天外周血TLR4/NF-κB信号通路相关因子,绘制受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线,评价TLR4/NF-κB信号通路相关因子对蛛网膜下腔出血患者预后的预测价值,分析TLR4/NF-κB信号通路相关因子与蛛网膜下腔出血患者预后不良风险的关系。结果观察组TLR4 mRNA、NF-κB mRNA表达均高于对照组,组间比较差异有统计学意义(P均<0.05)。蛛网膜下腔出血患者入院当天NIHSS评分为(11.24±3.12)分,根据Pearson相关性模型分析可知,蛛网膜下腔出血患者TLR4 mRNA、NF-κB mRNA表达均与NIHSS评分呈正相关关系(P<0.05)。不同组别间患者TLR4 mRNA、NF-κB mRNA相对表达量差异有统计学意义(F组间=8.037、19.348,P均<0.001),不同时间点患者TLR4 mRNA相对表达量差异有统计学意义(F时间=5.128、16.207,P均<0.001),且时间与组间存在交互效应(F交互=6.497、18.032,P=0.015、<0.001)。预后不良组患者发病第1天TLR4 mRNA、NF-κB mRNA相对表达量较预后良好组患者差异无统计学意义(P>0.05)。预后不良组患者发病第3天、7天、14天TLR4 mRNA、NF-κB mRNA相对表达量均高于预后良好组患者(P均<0.05)。预后不良组患者、预后良好组患者发病第3天TLR4 mRNA、NF-κB mRNA相对表达量升至最高(P均<0.05);发病第7天、14天TLR4 mRNA、NF-κB mRNA相对表达量均较发病第3天明显下降,且发病第14天降至最低(P均<0.05)。以预后不良作为阳性样本,预后良好作为阴性样本,绘制ROC曲线,结果显示,发病第3、7、14天TLR4 mRNA、NF-κB mRNA联合预测蛛网膜下腔出血患者预后的AUC分别为0.854、0.894、0.915,较各指标单独诊断价值明显提高。Logistic回归分析显示,TLR4 mRNA、NF-κB mRNA仍与蛛网膜下腔出血患者预后不良有关(P均<0.05)。结论蛛网膜下腔出血后TLR4/NF-κB信号通路被激活,TLR4 mRNA、NF-κB mRNA表达明显上调,且TLR4/NF-κB信号通路与蛛网膜下腔出血患者早期脑损伤有关,为临床治疗提供了新思路,有助于改善患者预后。

艾灸对佐剂性关节炎大鼠滑膜组织TLR4/NF-kB信号通路影响

目的探讨艾灸对佐剂性关节炎大鼠滑膜组织TLR4/NF-kB信号通路的影响。方法30只SD大鼠随机分为正常组、模型组和艾灸组,每组10只。模型组和艾灸组大鼠于左后肢足趾皮下注射完全弗氏佐剂(CFA)制备佐剂性关节炎(AA)模型;造模成功后,艾灸组取左侧足三里施灸;正常组和模型组仅常规饲养,不做任何干预。3组均于15 d后用足趾容积测量仪测量大鼠左后肢足趾容积。用苏木精-伊红(HE)染色观察左后肢足趾关节滑膜组织形态,用酶联免疫吸附法(ELISA)测定各组大鼠左后肢足趾关节滑膜组织白细胞介素(IL)-1b和肿瘤坏死因子(TNF)-a的浓度。用荧光定量PCR法(RT-q PCR)检测左后肢足趾关节滑膜组织Toll样受体(TLR)4/核因子(NF)-kB信号通路中髓样分化因子(Myd)88、TLR4、NF-kB p65、NF-kB抑制因子a(IkBa)、IkB激酶复合物b(IkKb)的m RNA表达量。结果与正常组比较,模型组大鼠足趾容积显著升高(P<0.01),滑膜细胞出现增生,组织中可见大量炎细胞浸润,滑膜表面细胞排列不整齐,滑膜组织IL-1b和TNF-a浓度升高(P<0.01),而且Myd88、TLR4、NF-kB p65、IkBa、IkKb的m RNA表达均明显升高(P<0.01);与模型组比较,艾灸组大鼠足趾容积和滑膜组织上述各项指标水平均明显降低(P<0.01)。结论艾灸能够通过抑制TLR4/NF-kB信号通路降低AA模型大鼠滑膜炎症反应,缓解足趾肿胀。

健脾养血祛风方对树突状细胞TLRs/MyD88/NF-kB信号通路的干预机制

目的探究健脾养血祛风方对树突状细胞(DCs)Toll样受体(TLRs)经典MyD 88-NF-κB信号通路的影响。方法从小鼠骨髓分离单核细胞并诱导培养为树突状细胞。采用流式细胞术检测小鼠DCs表面分子CD80和CD86的表达情况;CCK8检测健脾养血祛风方对DCs细胞活力的影响;RT-q PCR检测TLR2、TLR3、TLR4和TLR9表达水平,同时检测下游信号相关蛋白IRAK-1、IRAK-4、TRAF6、p38、MyD 88、NF-κB表达;ELISA检测IL-4、IL-10、INF-γ、IL-12水平。结果在不影响细胞活力的前提下,50μg/mL健脾养血祛风方能明显增加TLR2、TLR3、TLR4和TLR9的表达(P<0.01),同时能促进DCs中IRAK-1、IRAK-4、TRAF6、p38、MyD 88、NF-κB水平(P<0.01)。此外,50μg/mL、75μg/mL健脾养血祛风方还可增加INF-γ、IL-12的释放(P<0.01),抑制IL-4、IL-10的生成(P<0.01)。结论健脾养血祛风方可促进DCs的TLRs/MyD 88/NF-κB信号通路激活,从而调控炎症因子表达,使Th1/Th2细胞因子网络平衡体系向Th1方向倾斜,缓解特应性皮炎(AD)。

左乙拉西坦对小儿癫痫的疗效及TLR4/NF-kB IL-6 TNF-αhs-CRP水平的影响

目的研究小儿癫痫给予左乙拉西坦治疗的效果及对炎症因子血清白介素6(interleukin-6,IL-6)、血清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、超敏C反应蛋白(hypersensitive C-reactive protein,hs-CRP)及Toll样受体4(TLR4)、核因子(NF-kB)水平的影响作用。方法以商丘市第三人民医院2015-04—2019-04收治的103例小儿癫痫为对象,按照随机数字表法分为2组,对照组51例接受卡马西平治疗,观察组52例患儿接受左乙拉西坦治疗,比较2组治疗总有效率、TLR4/NF-kB水平变化、炎症因子水平变化、认知功能。结果观察组治疗总有效率为94.23%高于对照组的78.43%(P<0.05);观察组治疗后TLR4、NF-kB水平均低于对照组(P<0.05);观察组治疗后炎症因子IL-6、TNF-α、hs-CRP水平均低于对照组(P<0.05)。结论左乙拉西坦治疗小儿癫痫具有良好临床疗效,能够更明显控制TLR4/NF-kB水平,减轻炎症反应,具有良好应用价值。

PPARs与TLR-NF-κB信号通路

过氧化物酶体增殖物激活受体（peroxisomepro．1iferator—activatedreceptors，PPARs）属于核受体超家族，它们通过调控靶基因转录参与体内多种生理病理过程。近年来，随着药理学及临床医学对PPARs的深入研究，其潜在的抗炎效应引起了人们的广泛关注。据报道，激活PPARs是他汀类药物产生抑炎效应的实现途径之一。他汀类能够激活PPARy并抑制LPS诱导的巨噬细胞的细胞因子表达[1]。Sug．amura等旧0的研究结论也支持该项发现，其数据显示他汀类通过激活PPARl稳定动脉粥样硬化斑块，并且联合应用辛伐他汀与PPARy激动剂，在抑制动脉粥样硬化斑块的治疗中显示出积极疗效。

口腔扁平苔藓中TLRs/NF-κB信号通路的表达及环孢菌素A对其调节作用

目的探索TLRs/NF-κB信号通路在口腔扁平苔藓(oral lichen planus,OLP)病理过程中的作用及环孢菌素A在OLP治疗中的抗炎机制。方法①LPS刺激HaCaT细胞建立体外OLP炎症模型,采用逆转录聚合酶链技术检测TLRs/NF-κB信号通路相关基因NF-κBP65、TLR4在该模型中的表达情况;②先以LPS刺激HaCaT细胞,再以环孢菌素A处理HaCaT细胞检测NF-κBP65、TLR4、TNFαmRNA表达情况。结果体外OLP炎症模型,NF-κBP65、TLR4 mRNA表达量上调,且表达量随着LPS作用浓度和时间的增加呈上升趋势,10μg/ml LPS组作用24 h表达量最高(P<0.05)。环孢菌素A能够下调TLR4、NF-κBP65、TNFα的表达,10μg/ml环孢菌素A作用24 h时mRNA表达量下调最大(P<0.05)。结论 TLR4/NF-κB信号通路可能调控OLP免疫病理过程;环孢菌素A可能通过抑制TLR4的激活,调控NF-κB的表达,最终抑制OLP炎症介质活化与黏膜损伤。

番茄红素调节TLR4/NF-κB对糖尿病大鼠肾损伤和内皮功能的保护作用

目的为了研究番茄红素(LP)调节TLR4/NF-κB对糖尿病大鼠(DM)肾脏损伤和内皮功能的保护机制研究。方法通过成年雄性Wistar大鼠(90只)给予高糖高脂喂养,并腹腔内注射链脲佐菌素建立糖尿病模型,随机分为对照组、模型组和实验组。实验组给予番茄红素。当模型构建8周之后将大鼠处死,肾称重计算肾体比,HE法检测各组肾脏病理改变;采用ELISA发检测患者血清氧化应激指标(MDA、SOD)、血管内皮功能指标(NO、ET)和炎症因子(TNF-α、IL-6)水平;检测大鼠肾脏组织中和Caspase 3、NF-κB和TLR4蛋白的表达。结果HE染色观察到,番茄红素可以有效缓解肾小管损伤、肾小球系膜和基底膜的增生情况,减轻肾小管上皮水肿。与模型组相比,实验组SOD活性显著升高,MDA水平降低;NO、ET、TNF-α和IL-6含量显著降低(P<0.05);实验组大鼠肾脏组织TLR4、NF-κB和Caspase 3蛋白表达显著降低(P<0.05)。结论番茄红素能够抑制TLR4/NF-κB信号通路,对糖尿病大鼠的肾脏损伤和内皮功能起到保护作用。

TLR-5在溃疡性结肠炎中的表达及相关性研究

目的探讨TLR-5在溃疡性结肠炎发病中的作用。方法收集50例溃疡性结肠炎患者肠黏膜标本,通过RT-PCR检测肠黏膜中TLR-5 mRNA的表达量,ELISA检测NF-κB转录活性。另外收集30名健康志愿者作为对照组。结果中度及重度溃疡性结肠炎患者TLR-5 mRNA的表达量明显高于对照组(1.22±0.32、2.15±0.15、0.6±0.12,P<0.05);溃疡性结肠炎患者肠黏膜中NF-κB转录活性明显增强,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);TLR-5 mRNA的表达量与溃疡性结肠炎的严重程度及炎症指标(ESR和CRP)呈正相关。结论 TLR-5可能通过活化NF-κB参与了溃疡性结肠炎的发病,且TLR-5可反映溃疡性结肠炎的疾病严重程度。

益生菌对实验性结肠炎大鼠肠黏膜TLR2、TLR4表达及NF-κB活性的影响

目的通过检测益生菌对实验性结肠炎大鼠肠黏膜上皮细胞(IECs)Toll样受体(Toll Like recefor,TLR)、TLR4表达及肠黏膜核因子,kappa B活化的影响,探讨益生菌预防与辅助治疗溃疡性结肠炎的作用机制。方法将30只雄性SD大鼠随机分为3组,即正常对照组(N)、模型组(M)、益生菌组(P)。正常对照组正常饲养,不予任何处理;模型组给予含5%葡聚糖硫酸钠dextransulfate sodium的饮用水10 d建立亚急性结肠炎模型,第11 d开始常规饲养观察2周;益生菌组则在建立模型后给予双歧三联活菌500 mg.kg-1.d-1灌胃,1次/d,共2周;2周后处死所有大鼠,观察疾病活动指数(DAI),进行组织学评分(HPS)和分离ICEs并提取ICE中的总RNA,用RT-PCR法检测TLR2、TLR4的表达;采用免疫组织化学方法检测NF-κB的活性情况。结果益生菌组的症状、组织损害程度均较模型组明显减轻;模型组和益生菌组TLR2和TLR4的表达均明显高于正常对照组(P<0.001);与模型组比较,益生菌组TLR2的表达增加(P<0.05),而TLR4的表达则明显下降(P<0.001);模型组NF-κB活性明显高于益生菌组和正常对照组(P<0.001),益生菌组与正常对照组NF-κB活性比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论益生菌通过促使TLR2表达进一步增加,并可抑制TLR4的表达,进而控制NF-κB的活性,并在缓解肠道炎症中发挥作用。

TLR4/NF-κB通路在Hp诱导胃癌发生中的作用

目的观察Hp感染在慢性萎缩性胃炎(CAG)癌前病变发生发展中对TLR4/NF-KB通路的影响及其在慢性萎缩性胃炎癌前病变发生发展中的作用机制。方法60只Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、Hp组,其中模型组、Hp组采用“MNNG+雷尼替丁+乙醇+饥饱失调”的综合方法复制Wistar大鼠CAG癌前病变模型,观察大鼠胃黏膜组织形态特征,并采用Western blot方法检测胃黏膜组织中TLR4、MyD88、细胞核因子kB(NF-кB)的表达水平,采用固相夹心法、酶联免疫吸附法检测白介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素-γ(IFN-γ)、白介素-1β(IL-1β)表达水平。结果较正常组的大致正常胃黏膜相比,Hp组的胃黏膜出现明显的肠上皮化生,模型组胃黏膜出现轻度萎缩伴肠上皮化生;模型组与Hp组IL-8、TNF-α、IFN-γ、IL-1β表达水平均明显高于正常组(P<0.01),且Hp组表达高于模型组(P<0.05)。结论Hp通过调节TLR4/NF-KB通路的表达水平促进胃黏膜的肠上皮化生及CAG的发展,进而可能促进胃癌的形成。

茯苓四逆汤调节TLR-4/NF-κB 通道对脓毒症大鼠心肌抑制的保护机制研究

目的:探讨茯苓四逆汤调节TLR-4/NF-κB通道对脓毒症大鼠心肌抑制的保护作用机制。方法:SPF级SD雄性大鼠120只,随机分成6组:正常组、假手术组、模型组,中药低、中、高剂量组。通过盲肠结扎穿孔法(CLP法)制作脓毒症模型。造模后6h开始给药,持续给药3d。正常组、假手术组、模型组予等量生理盐水,中药各剂量组予相应剂量茯苓四逆汤,均为灌胃给药。观察大鼠生存状态,于术前和术后24h、48h、72h各选5只大鼠处死,采用Western blotting法及QPCR检测心肌组织NF-κB、H-FABP的蛋白和TLR-4的基因表达,同时以ELISA法检测心肌细胞TNF-ɑ、IL-6含量。结果:与正常组比较,模型组及中药各剂量组TNF-ɑ、IL-6水平及NF-κB、H-FABP蛋白表达明显升高,TLR-4 基因表达亦增高;与模型组同时间点比较,中药各剂量组TNF-ɑ、IL-6水平明显下降,NF-κB 和H-FABP蛋白水平比较也有统计学差异;中药各剂量组同时间比较发现,剂量越高,其TNF-ɑ、IL-6水平下降越明显,下调NF-κB 和H-FABP蛋白表达水平越明显,TLR-4 mRNA 转录水平降低的越明显,差异均有统计学意义。结论:茯苓四逆汤能减轻脓毒症大鼠心肌抑制,通过抑制炎症反应,负反馈调节TLR-4/NF-κB信号通路,从而缓解心肌抑制。

基于TLR4/NF-κB信号通路探讨复方地黄颗粒治疗帕金森病阴虚动风证大鼠的作用机制

目的 基于复方地黄颗粒对右侧黑质中TLR4/NF-κB信号通路的影响,探讨治疗帕金森病阴虚动风证大鼠的可能作用机制。方法 100只SPF级雄性SD大鼠,随机选取20只作为正常对照组和假手术组(n=10),剩余80只采用6-羟基多巴胺(6-hydroxydopamine, 6-OHDA)注射右侧黑质二坐标法制备PD阴虚动风证动物模型,将成模的50只大鼠分为模型组、美多芭组和复方地黄颗粒低、中、高(n=10)。复方地黄颗粒低、中、高组每只大鼠每天复方地黄颗粒灌胃量依次为1.75g/kg、3.5g/kg、7g/kg,美多芭组为150mg/kg多巴丝肼,连续28d、1次/日,正常对照组和假手术组0.9%氯化钠溶液10ml/kg灌胃。在此期间观察各组大鼠情况和神经行为学变化,灌胃结束后脱臼处死大鼠采集右侧黑质。通过RT-qPCR、Western blot及免疫组化法检测TLR4/NF-κB信号通路中TOLL样受体4(TLR4)、核转录因子-kappa B p65(NF-κB p65)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)的表达水平。结果 模型组与正常对照组和假手术组比较,大鼠旋转圈数和右侧黑质TLR4、NF-κB p65、TNF-α、IL-6蛋白、mRNA表达上升,但悬挂时间和移动格数下降(P<0.01)。模型组与美多芭组和不同剂量的复方地黄颗粒组比较,大鼠旋转圈数和大鼠右侧黑质TLR4、NF-κB p65、TNF-α、IL-6蛋白、mRNA表达下降,但悬挂时间和移动格数增加(P<0.05,P<0.01),其中复方地黄颗粒高剂量组差异达到显著程度(P<0.01)。结论 复方地黄颗粒通过调控TLR4/NF-κB信号通路起到减少炎症反应、保护多巴胺(DA)能神经元的作用,其机制可能与调控蛋白表达相关。

黄芩汤调控miR-143/TLR2/NF-κB/NLRP3通路对湿热型溃疡性结肠炎大鼠细胞焦亡的影响

目的 探究黄芩汤调控miR-143/TLR2/NF-κB/NLRP3通路对湿热型溃疡性结肠炎大鼠细胞焦亡的影响。方法 采用“DSS+复合因素”对大鼠进行溃疡性结肠炎湿热证模型的构建,实验分为正常组、模型组、黄芩汤低剂量组、黄芩汤中剂量组、黄芩汤高剂量组。HE染色观察病理学改变,ELISA检测血清IL-1β和IL-18因子表达,Western blot检测TLR2、NF-κB(p-p65)、GSDMD蛋白表达水平,qPCR检测结肠组织miR-143、TLR2、NLRP3、NF-κB、Caspase-1和GSDMD mRNA水平。结果 与正常组相比,模型组结肠病理组织有所损伤,IL-1β、IL-18炎症因子水平及TLR2、p-p65、GSDMD蛋白表达量显著升高,NLRP3、GSDMD、TLR2、NF-κB、caspase-1 mRNA水平明显升高,miR-143明显降低;与模型相比,中高剂量黄芩汤组结肠病理组织损伤有所改善,其中低剂量组血清IL-1β水平、中高剂量组血清中IL-1β和IL-18水平明显降低。低剂量组p-p65蛋白表达量明显降低,中高剂量组TLR2、p-p65和GSDMD蛋白表达量明显下降。低剂量组NF-κB和NLRP3 mRNA表达量明显降低;中剂量组TLR2、NF-κB、caspase-1、GSDMD mRNA明显降低;高剂量组miR-143显著升高,TLR2、NF-κB、GSDMD、NLRP3 mRNA显著降低。结论 黄芩汤可能是通过调控miR-143/TLR2/NF-κB/NLRP3通路抑制湿热型溃疡性结肠炎大鼠细胞焦亡,从而发挥对湿热型UC作用。