伴放线放线杆菌对新西兰兔肾脏组织结构、肾功能及TLR-2/TLR-4/NF-κBp65通路的影响

研究伴放线放线杆菌对新西兰兔肾脏组织结构、肾功能及TLR-2/TLR-4/NF-κBp65通路的影响。方法 建立高脂血症的新西兰兔模型,将新西兰兔模型随机分为数量均等的两组,每组新西兰兔的数量均为8只。观察组接种伴放线放线杆菌,形成牙周病感染。对照组常规饲养。血糖仪检测不同时段血糖值,HE染色观察肾脏组织形态,免疫组化法检测肾组织中TLR2、TLR4、NF-κB-p-p65的表达。结果 观察组新西兰兔早期肾脏损害相对严重,其血糖水平相对较高,其TLR-2和TLR-4的mRNA表达量、TLR2、NF-kB-p-p65蛋白表达量表达相对增多。结论:伴放线放线杆菌对新西兰兔肾脏组织结构、肾功能都有一定的损害,其作用机制可能是激活TLR-2/TLR-4/NF-κBp65通路。

清肠化湿方对溃疡性结肠炎模型大鼠结肠TLR-4、NF-κBp65蛋白表达的影响

目的观察三硝基苯磺酸(TNBS)法溃疡性结肠炎大鼠结肠黏膜TLR-4、NF-κBp65的变化特点及清肠化湿方对TLR-4、NF-κBp65蛋白表达的影响。方法采用TNBS诱导大鼠溃疡性结肠炎模型。将大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、清肠化湿方组、巴柳氮组,治疗10d后处死大鼠取新鲜结肠标本,观察黏膜大体形态及组织学改变,并采用Westernblot法检测TLR-4、NF-κBp65蛋白表达水平。结果模型对照组TLR-4、NF-κBp65蛋白表达均高于正常对照组,清肠化湿方组TLR-4、NF-κBp65的表达低于模型对照组,同时清肠化湿方组大鼠结肠形态及组织学损伤评分均有降低。结论清肠化湿方对溃疡性结肠炎模型大鼠具有治疗作用,抑制TLR-4、NF-κBp65的表达可能是其作用机制之一。

龙胆苦苷对非酒精性脂肪肝TLR-4/NF-κB和AMPK/Nrf2通路的影响

探讨龙胆苦苷(GPS)对非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠的保护作用及TLR-4/NF-κB和AMPK/Nrf2通路的影响。将60只SD大鼠随机分为正常组、模型组、二甲双胍组(200 mg/kg)和GPS高、中、低剂量组(120、60、30 mg/kg)。正常组给予标准饲料,其余各组给予高脂饲料饲养14周,建立大鼠NAFLD模型。生化法检测肝功能、氧化应激和脂质积累情况,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测胰岛素抵抗和炎症因子水平,蛋白免疫印迹实验(Western blot)检测大鼠肝组织中TLR-4/NF-κB和AMPK/Nrf2通路蛋白表达情况;油红O染色观察肝脏组织病理学变化。结果表明,GPS可降低NAFLD大鼠血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、丙二醛(MDA)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)、空腹血糖(FBG)和空腹胰岛素(FINS)的活性或含量,增强血清中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和高密度脂蛋白(HDL-C)含量,改善胰岛素抵抗情况,降低肝脏中白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、NF-κBp-p65和TLR-4的表达水平,提高p-AMPK与Nrf2蛋白表达水平。由此可见,GPS改善NAFLD的作用机制可能与抑制氧化应激、炎症反应和调控TLR-4/NF-κB、AMPK/Nrf2信号通路有关。

TLR-2、NF-κBp65基因在兔膝关节软骨细胞损伤后不同时间点的表达变化

目的 检测TLR-2、NF-κBp65基因在兔膝关节软骨细胞损伤后不同时间点的表达变化。方法 将4周龄兔膝关节软骨分离并消化,进行软骨细胞培养,将软骨细胞传代、划伤,在显微镜下观察记录损伤后不同时间点的细胞形态变化。通过荧光定量PCR检测关节软骨细胞TLR-2与NF-κBp65在损伤前及损伤后1、3、7天3个时间点的表达。结果 分离关节软骨细胞,通过原代培养后成功建立细胞损伤模型。TLR-2与NF-κBp65表达水平在损伤后1、3、7天后表达量均逐步降低(P<0.01)。结论 TLR-2与NF-κBp65在软骨细胞损伤前后的不同时间点表达不同,为探讨二者在预防及治疗骨关节炎方面提供新的思路。

栀子苷对缺氧/复氧小胶质细胞TLR4通路的影响

目的研究缺氧/复氧对原代培养的小胶质细胞TLR4受体及其通路中MyD88、NF-κBp65、p-ERK1/2、p-IκBα和p38的影响和不同浓度栀子苷的干预作用,以揭示栀子苷治疗脑缺血的分子生物学机制。方法原代培养小胶质细胞,采用缺氧/复氧的方式制备模型,用栀子苷125、250和500μmol.L-1 3个浓度梯度进行干预,用逆转录聚合酶链反应检测小胶质细胞TLR4 mRNA的表达,Western blot检测TLR4、p-IκBα、p38、p-ERK1/2蛋白,免疫荧光双染观察MyD88和NF-κB;结果缺氧/复氧激活了TLR4通路,并通过MyD88依赖途径激活了下游蛋白MyD88、NF-κBp65、p-ERK1/2、p-IκBα和p38;栀子苷250和500μmol.L-1组抑制了通路蛋白的活性;结论缺氧/复氧使TLR4通路蛋白磷酸化激活。栀子苷通过对TLR4通路蛋白的抑制发挥抗炎效应,促进脑缺血的恢复。

血清Sirt1、Sestrin2与2型糖尿病并发糖尿病周围神经病变患者的关系研究

目的 探究血清沉默信息调节因子1(Sirt1)、Sestrin2与2型糖尿病(T2DM)并发周围神经病变(DPN)的关系。方法 选取2020年3月至2022年3月新疆医科大学第一附属医院收治的T2DM患者142例,根据DPN发生情况分为非DPN组(85例)和DPN组(57例),另选取同期体检健康者为健康对照组(50例),对比健康对照组、非DPN组、DPN组血清Sirt1、Sestrin2水平,对比非DPN组与DPN组氧化应激指标[丙二醛(MDA)、总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)]及外周血单核细胞Toll样受体4(TLR-4)、核转录因子(NF)-κB信使核糖核酸(mRNA)表达水平,分析血清Sirt1、Sestrin2与DPN患者氧化应激指标、外周血单核细胞TLR-4和NF-κB mRNA表达水平的相关性,采用单因素和多因素分析T2DM发生DPN的影响因素。结果 与健康对照组比较,非DPN组和DPN组血清Sirt1水平降低(P<0.05),血清Sestrin2水平升高(P<0.05);与非DPN组比较,DPN组血清Sirt1、Sestrin2水平降低(P<0.05)。与非DPN组比较,DPN组血清MDA及外周血单核细胞TLR-4、NF-κB mRNA表达水平升高(P<0.05),血清SOD水平降低(P<0.05),血清T-AOC水平差异无统计学意义(P>0.05)。Pearson检验结果显示,DPN患者血清Sirt1、Sestrin2与SOD呈正相关(P<0.05),与MDA、TLR-4、NF-κB呈负相关(P<0.05)。多因素分析显示,年龄增大(≥63岁)、T2DM病程偏长(≥8年)、糖化血红蛋白(HbA1c)水平升高(≥9%)、糖尿病视网膜病变(DR)、高密度脂蛋白(HDL)水平降低(<1 mmol/L)、Sirt1降低(<8 ng/mL)、Sestrin2降低(<14 ng/mL)是DPN的危险因素(P<0.05)。结论 DPN患者血清Sirt1、Sestrin2水平下降,可能与氧化应激、炎症反应过度激活有关,有望成为预测DPN风险的分子标志物。