有氧运动加螺旋藻补充对2型糖尿病大鼠肾脏TLR4/NF-κB-p65的表达及炎性因子的影响

本文旨在研究有氧运动加螺旋藻补充对2型糖尿病大鼠肾脏TLR4/NF-κB-p65的表达及炎性因子的影响,以TLR4/NF-κB-p65炎症信号通路为靶点探讨运动加螺旋藻补充改善2型糖尿病大鼠肾脏损伤的可能机制。采用4周高脂饲料喂养和低剂量STZ腹腔注射的方法建立2型糖尿病大鼠实验模型,成模后将大鼠随机分为糖尿病安静对照组(DM)、糖尿病运动组(DE)、糖尿病+螺旋藻组(DS)、糖尿病运动+螺旋藻组(DES),另设正常安静对照组(NC)。运动方式采用8周的无负重游泳训练。实验末,测随机血糖、微量白蛋白、肾脏测TNF-α、TLR4和NF-κB-p65蛋白表达,并采用光镜观察肾脏微细结构的改变。结果表明:(1)光镜下可见DE组、DS组和DES组大鼠肾小球毛细血管袢面积增加;肾小管扩张、上皮细胞空洞变性、细胞聚集增加和炎症细胞稍浸润等病理变化均较DM组有所改善。(2)DE组、DS组和DES组大鼠的血糖浓度、尿微量白蛋白含量均较DM组降低(P<0.05或P<0.01);与DES组比较,DE组和DS组的血糖浓度、尿微量白蛋白含量均升高明显(P<0.05或P<0.01)。(3)DE组、DS组和DES组大鼠肾脏TNF-α、TLR4和NF-κB-p65蛋白表达均明显降低,与DM组比较,差异均呈显著性(P<0.01);与DES组比较,DE组和DS组的肾脏TNF-α、TLR4和NF-κB-p65蛋白表达明显增加(P<0.05或P<0.01)。因此,有氧运动、螺旋藻及两者联合使用有降低2型糖尿病大鼠血糖,改善肾功能,减轻肾脏损害的功效,但两者联合使用效果要好于单独使用,其机制可能与有氧运动联合螺旋藻降低TLR4/NF-κB-p65信号蛋白表达发挥抗炎作用的效果要好于单纯的有氧运动或螺旋藻使用。

Liu-Jun-Zi decoction alleviates chemotherapy-induced anorexia by regulating gut microbiota and TLR4/MyD88/NF-κB p65 signaling pathway

Background:Liu-Jun-Zi decoction(LJZD),a classical nourishing formula in China,has been proven to be effective in treating chemotherapy-induced anorexia.In this study,the mechanism of LJZD in alleviating chemotherapy-induced anorexia was discussed from the aspects of regulating gut microbiota,repairing intestinal barrier injury and inhibiting inflammatory pathways.Methods:A rat model of chemotherapy-induced anorexia was established using cisplatin.The study evaluated the therapeutic effects of LJZD by observing the weight,food intake,and intestinal pathology of rats.The impact of LJZD on gut microbiota and metabolites,specifically short-chain fatty acids,was investigated through gut microbiota analysis and targeted metabolomics.The anti-inflammatory and intestinal protective effects of LJZD were assessed by examining the expression of intestinal tight junction proteins associated with the inflammatory pathway.Results:LJZD alleviated cisplatin-induced inflammation and intestinal barrier disruption,as evidenced by upregulated expression of tight junction protein 1(TJ-1)and occludin,along with reduced serum levels of interleukin 6(IL-6),interleukin-1β(IL-1β),tumor necrosis factor-α(TNF-α),and lipopolysaccharide.Additionally,LJZD alleviated microbiota imbalance and regulated the levels of short-chain fatty acids,especially increased the relative abundance of Coriobacteriales Incertae Sedis,Lactabacillus johnsonii F19785,Parasutterella,and reduced the Tyzzerella.In the hypothalamus,LJZD exerts suppressive effects on the toll-like receptor 4(TLR4)/myeloid differentiation factor 88(MyD88)/nuclear factor-κB(NF-κB)p65 signaling pathway,leading to a downregulation in the transcriptional activity of IL-6 and IL-1β,as well as Interleukin 6 receptors(IL-6R)and Interleukin-1βreceptors(IL-1R1)mRNA expression levels.Conclusion:In summary,LJZD alleviate chemotherapy-induced anorexia by modulating the gut microbiota,repairing the intestinal mechanical barriers,and suppressing the TLR4/MyD88/NF-κB p65 signaling pathway.

苍附导痰汤对肥胖型PCOS-IR模型大鼠卵巢TLR4/NF-κB p65信号通路的影响

目的 探讨苍附导痰汤对肥胖型PCOS-IR (polycystic ovarian syndrome-insulin resistance, PCOS-IR)模型大鼠卵巢Toll受体4(TLR4)/核转录因子κB p65(NF-κB p65)信号通路的调控作用。方法 48只♀大鼠随机分为正常组8只和模型组40只。来曲唑(1 mg·kg^(-1))联合高脂饮食建立肥胖型PCOS-IR大鼠模型,快速革兰染色法观察动情周期,挑选24只模型大鼠随机分为:模型组、阳性药(二甲双胍135 mg·kg^(-1))组、苍附导痰汤高、低剂量(57.96、14.49 g·kg^(-1))组,每组各6只,药物干预21 d。观察动情周期、卵巢和子宫指数变化;血液生化仪测定空腹血糖(FBG)和血脂(甘油三酯TG和总胆固醇TC)变化;酶联免疫吸附(ELISA)法测定空腹胰岛素(FINS)水平;免疫组化法和荧光定量PCR法检测卵巢中TLR4和NF-κB p65蛋白及基因的表达。结果 与正常组比较,模型组大鼠动情周期紊乱,卵巢多囊性改变明显,FBG、TG、TC含量和FINS、HOMA-IR水平上调,卵巢中TLR4和NF-κB p65蛋白及mRNA表达均增加(P<0.05);与模型组比较,苍附导痰汤高剂量组大鼠排卵周期得到改善,卵巢多囊性改变减轻,上述指标出现明显逆转(P<0.05)。结论 苍附导痰汤能有效改善肥胖型PCOS-IR大鼠卵巢排卵和糖脂代谢功能,作用机制可能与调控卵巢TLR4/NF-κB p65信号通路有关。

人参皂苷Rg1通过TLR4/MyD88/NF-κB p65通路调控小鼠急性肾损伤诱导的急性肝损伤的机制研究

目的:探讨人参皂苷Rg1(GRg1)对小鼠急性肾损伤所诱导的急性肝损伤的保护作用及其调控机制。方法:昆明小鼠随机分为假手术(sham)组、模型(model)组、GRg1组和necrostatin-1 (Nec-1)组,每组10只。制备急性肾损伤模型,24 h后收集血液。采用生化试剂盒检测小鼠血清肌酐(SCr)、血尿素氮(BUN)、天冬氨酸转氨酶(AST)、谷氨酸转氨酶(ALT)、丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)水平。采用ELISA法检测炎症因子白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、IL-8和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达。HE染色观察组织病理学改变,采用免疫组织化学和Western blot法检测TLR4、MyD88和NF-κB p65蛋白的表达水平。结果:与假手术组比较,model组小鼠出现明显的肝细胞坏死、肝肾功能减退,血清中SCr、BUN、AST和ALT均显著升高(P<0.01),MDA含量显著上升,SOD活性显著降低(P<0.01),且血清中炎症因子IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α含量显著升高(P<0.01),TLR4、MyD88和NF-κB p65蛋白表达显著增高(P<0.01);与model组相比,GRg1和Nec-1组处理后小鼠肝细胞坏死减轻,肝肾功能显著改善(P<0.01),血清中SCr、BUN、AST和ALT水平显著降低(P<0.01),MDA含量显著降低,SOD活性显著增高(P<0.01),血清中炎症因子IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α含量显著降低(P<0.01),TLR4、MyD88和NF-κB p65蛋白表达显著降低(P<0.01);GRg1组和Nec-1组小鼠上述指标比较差异无统计学意义。结论:GRg1可以改善小鼠急性肾损伤所致急性肝损伤的肝肾功能,其机制可能与抑制TLR4/MyD88/NF-κB p65信号通路有关。

大黄牡丹汤对炎症相关性结直肠癌的治疗作用及对TLR4/My D88/NF-κB-p65信号通路的影响

目的:探讨大黄牡丹汤(DHMD)对炎症相关性结直肠癌(CAC)的治疗作用,以及对TLR4/MyD88/NF-κB-p65通路的影响。方法:构建小鼠CAC模型,给予DHMD处理,对小鼠一般状况进行观察和评估;ELISA检测小鼠IL-1β、IL-6、IL-10和TNF-α表达,Western blot和免疫组化染色法检测小鼠结直肠组织TLR4、MyD88和NF-κB-p65表达。结果:与模型组相比,DHMD干预后,小鼠血清中IL-1β、IL-6、TNF-α水平降低,而IL-10水平升高,且小鼠结直肠中TLR4、MyD88、NF-κB-p65表达降低。结论:DHMD可改善炎症反应、减轻CAC症状,抑制结肠癌发生,且对TLR4/MyD88/NF-κB-p65信号通路激活具有调节作用。

久泻灵颗粒对脾肾阳虚型溃疡性结肠炎大鼠TLR4及NF-κB p65表达的影响

目的探讨久泻灵颗粒对脾肾阳虚型溃疡性结肠炎模型大鼠结肠组织中TLR4、NF-κB p65蛋白基因的表达的影响。方法通过灌服大黄水煎液,肌肉注射氢化可的松并结合TNBS(2,4,6-三硝基苯磺酸)混合乙醇灌肠建立动物模型。将90只大鼠随机分为空白组、模型组、久泻灵颗粒治疗7、14、21 d组及阳性对照(SASP)组,用药治疗后采用免疫组化SP法和RT-q PCR法分别检测大鼠结肠组织中TLR4、NF-κB p65蛋白和基因的表达。结果结肠黏膜形态学评分结果显示,各治疗组评分均有降低,差异有显著性(P<0.01);免疫组化SP法结果显示:TLR4、NF-κB p65在模型组大鼠中表达均显著增强(P<0.01);药物干预后各治疗组大鼠TLR4、NF-κB p65表达均减弱(P<0.05);RT-q PCR法结果显示:与空白组比较,模型组大鼠TLR4、NF-κB p65表达增强(P<0.01);与模型组比较,治疗后各组大鼠TLR4、NF-κB p65表达减弱(P<0.05)。结论久泻灵颗粒可减轻结肠黏膜炎症反应,起到修复黏膜的作用,其原因与降低脾肾阳虚型UC模型大鼠结肠组织中TLR4、NF-κB p65基因的转录和蛋白的表达有关。

电针对功能性消化不良肝郁脾虚模型大鼠十二指肠TLR4、NF-κB p65的影响

目的:探讨治疗功能性消化不良(FD)的作用机制。方法:将30只SD大鼠按随机数字表法分为空白对照组、模型组、电针组各10只。模型组及电针组采用多因素干预法造模20 d,空白对照组不给予任何处置。造模成功后电针组针刺足三里穴、太冲穴后接电针治疗14 d,余组不采用任何干预措施。采用ELISA(酶联免疫吸附剂测定)检测各组血清IL-6(白介素-6)、TNF-α(肿瘤坏死因子α)水平,WB(免疫印迹法)检测大鼠十二指肠TLR4(Toll样受体4)、NF-κB p65(核转录因子κB p65)表达。结果:与空白对照组比较,模型组大鼠十二指肠TLR4、NF-κB p65表达显著增高,血清IL-6、TNF-α水平显著升高;与模型组比较,电针组大鼠十二指肠TLR4、NF-κB p65及血清IL-6、TNF-α水平显著降低。结论:电针可能通过下调十二指肠TLR4、NF-κB p65表达,降低血清IL-6、TNF-α等炎性因子水平抑制炎症反应,发挥治疗FD作用。

TLR4、NF-κB p65、IL-8在溃疡性结肠炎中的表达

目的探讨溃疡性结肠炎(UC)患者肠黏膜活检组织中Toll样受体4(TLR4)、核转录因子-κB(NF-κBp65)、白介素-8(IL-8)的表达及三者在UC发病机制中的作用。方法 内镜活检UC活动期结肠黏膜标本68份(UC组)及30例正常人结肠黏膜标本(健康对照组),采用免疫组化SP方法检测TLR4、NF-κB p65、IL-8的表达水平,并做统计学处理。结果 UC组结肠黏膜表面上皮细胞和固有层TLR4、NF-κB p65、IL-8呈阳性表达,染色为深棕黄色,较健康对照组表达均显著增强,且不同病理分级间比较,Ⅲ级>Ⅱ级>Ⅰ级,差异均有统计学意义(p<0.05)。结论 UC肠黏膜中TLR4、NF-κB p65、IL-8的表达均高度上调,并随UC病理分级的升高而升高。

GPR120对脂多糖诱导的胰岛β细胞炎症损伤及TLR4/MyD88/NF-κB p65信号通路的影响

目的:探讨过表达G蛋白偶联受体120(GPR120)对脂多糖(LPS)诱导的胰岛β细胞炎症损伤及Toll样受体4(TLR4)/髓样分化因子(MyD88)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路的影响。方法:将MIN6细胞分为control组(细胞用无血清培养液进行培养)、LPS组(细胞用含10μg·ml^(-1) LPS的培养液进行培养)、LPS+control组(感染阴性对照慢病毒的细胞用10μg·ml^(-1) LPS培养液处理)、LPS+GPR120组(感染pcDNA3.1-GPR120慢病毒的细胞用10μg·ml^(-1) LPS培养液处理)4组。CCK-8法检测细胞增殖;Annexin-V-FITC/PI流式细胞术检测细胞凋亡;ELISA检测IL-6、IL-1β和TNF-α水平;蛋白质印迹法检测GPR120、TLR4、MyD88、NF-κB p65蛋白的表达。结果:LPS组GPR120蛋白相对表达量明显低于control组(P<0.05);LPS+GPR120组GPR120蛋白相对表达量明显高于LPS+control组(P<0.05)。LPS组细胞增殖活力明显低于control组(P<0.001);LPS+GPR120组细胞增殖活力明显高于LPS+control组(P<0.001)。LPS组细胞凋亡率明显高于control组(P<0.001);LPS+GPR120组细胞凋亡率明显低于LPS+control组(P<0.001)。LPS组细胞上清液中IL-6、IL-1β和TNF-α水平均高于control组(均P<0.001);LPS+GPR120组IL-6、IL-1β和TNF-α水平均低于LPS+control组(均P<0.001)。LPS组细胞TLR4、MyD88、NF-κB p65蛋白相对表达量均高于control组(均P<0.001),LPS+GPR120组TLR4、MyD88、NF-κB p65相对表达量均低于LPS+control组(均P<0.001)。结论:GPR120可能通过抑制TLR4/MyD88/NF-κB p65信号通路在LPS诱导的胰岛β细胞炎症损伤中发挥保护作用。

双表法对流感病毒感染小鼠肺组织TLR4-MyD88-NF-κBP65蛋白表达的影响

目的观察双表法对流感病毒感染小鼠肺组织TLR4-MyD88-NF-κB P65蛋白表达的影响,探讨双表法对流感病毒的防治机制。方法以流感病毒FM1鼠肺适应株滴鼻感染昆明种小鼠,并用解表法(银翘散)、固表法(玉屏风散)、双表法(玉屏风+银翘散)、阳性对照药(利巴韦林)干预相应组别小鼠。在感染病毒后5d采用SABC免疫组织化学染色法检测肺组织TLR4-MyD88-NF-κB P65蛋白表达情况。结果正常组和模型组肺组织中均可检测到TLR4-MyD88-NF-κB P65蛋白表达,但模型组明显高于正常组(P<0.05)。双表法组TLR4-MyD88-NF-κB P65蛋白表达最低,与解表法组、固表法组、利巴韦林组比较有显著性差异(P<0.05)。结论流感病毒感染小鼠时激活了TLR4-MyD88-NF-κB P65信号通路,双表法能较好的抑制TLR4-MyD88-NF-κB P65蛋白表达,且优于解表法、固表法及利巴韦林。

TLR2/4、MYD88和NF-κB P65在支原体肺炎小鼠中的表达及其相关性

目的对支原体肺炎小鼠中TLR2/4、MYD88和NF-κB P65的表达水平以及相关性进行研究分析。方法选取温州医科大学实验动物中心供给的健康成年雄性清洁级小鼠64只,按随机数字法进行分组,其中采用支原体菌液滴鼻建立的32只支原体肺炎小鼠作为观察组,采用生理盐水建立的32只正常小鼠作为对照组,对两组实验小鼠的肺组织病理变化情况、肺指数变化情况以及TLR2、TLR4、MYD88、NF-κB P65相关指标的密度值进行比较分析。结果观察组支原体肺炎感染小鼠肺指数、TLR2、TLR4表达水平明显高于对照组正常小鼠,差异有统计学意义(P<0.05);观察组感染小鼠MYD88、NF-KBP65、MYD88、NF-KBP65的表达水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组小鼠中MYD88与TLR2均为阳性的18例,均为阴性的11例,与TLR4均为阳性的18例,均为阴性的10例,观察组支原体肺炎感染小鼠的MYD88的表达水平与TLR2、TLR4表达水平呈正相关关系,差异有统计学意义(P<0.05),小鼠MYD88的表达水平与NF-KBP65表达水平呈正相关关系,差异有统计学意义(P<0.05)。结论TLR2、TLR4、MYD88、NF-κB P65表达水平在支原体肺炎小鼠中升高,且参与到支原体感染的免疫损伤中。

人参丹参对萎缩性胃炎鼠模型胃黏膜保护及对Bcl-xL、Bax、TLR4和NF-κB p65表达影响随机平行对照研究

[目的]观察人参丹参对萎缩性胃炎鼠模型胃黏膜保护及对Bcl-xL、Bax、TLR4和NF-κBp 65表达影响。[方法]通过乙醇+去氧胆酸钠+氨水+吲哚美辛+饥饱失常综合法复制萎缩性胃炎鼠模型,连续4周使用人参、丹参不同配比平行对照干预,鼠灌胃量均为2mL∕100g。免疫组织化学法检测胃黏膜组织Bcl-xL、Bax、TLR4和NF-κBp 65表达。[结果]不同配比对Bcl-xL、Bax、TLR4和NF-κB p65表达均有不同改善作用,其中1∶1配比效果最显著(P<0.01)。[结论]人参和丹参可调节萎缩性胃炎鼠模型胃黏膜细胞凋亡因子Bcl-XL和Bax间的失衡,同时也可调节TLR4→NF-κB信号通路的失常。

湿热证大鼠模型TLR4mRNA、NF-κBp65表达的对比研究

目的:通过多因素复合造模方法,观察模型大鼠内毒素特异性受体TLR4mRNA及NF-κBp65表达变化,探讨湿热致病机制。方法:将大鼠分为正常组、湿热模型组(高脂+高温高湿+大肠杆菌)、模型对照组(高脂+高温高湿)3组,每组8只;采用逆转录-聚合酶链反应技术(RT-PCR)检测肝巨噬细胞TLR4mRNA,免疫组化技术检测肝巨噬细胞NF-κBp65活化。结果:在感染6h、12h、24h等不同时相点,湿热模型组TLR4mRNA、NF-κBp65表达与模型对照组、正常组比较均有非常显著增强(P<0.01);湿热模型组在6h、12h、24h等不同时相点,TLR4mRNA、NF-κBp65表达逐渐增强,且不同时相点之间比较均有显著性差异(P<0.05)。结论:靶细胞TLR4mRNA适量表达及NF-kB激活既是湿热病证的主要致病机理,又是湿热病证的相关性指标。

小青龙汤对哮喘小鼠肺组织炎症和TLR4/NF-κB信号通路的影响

目的:探讨小青龙汤对哮喘小鼠肺组织炎症和TLR4/NF-κB信号通路的影响。方法:60只BALB/c小鼠随机分为正常对照组、模型组及小青龙汤低(3.5 g/kg)、中(7.0 g/kg)、高(14.0 g/kg)剂量组。采用ELISA检测肺泡灌洗液中IL-4、IL-5、IL-13水平;采用血细胞分析仪检测肺泡灌洗液中炎性细胞数;HE和PAS染色观察肺组织病理学;采用微量法检测肺组织中一氧化氮(NO)水平;免疫组化染色检测肺组织中TLR4、NF-κBp65蛋白表达;Westem Blotting检测肺组织中iNOS、TRL4、NF-κBp65蛋白表达。结果:与正常对照组比较,模型组小鼠肺泡灌洗液中IL-4、IL-5、IL-13及炎症细胞数和肺组织中NO水平及iNOS、TRL4、NF-κBp65蛋白表达显著升高(P<0.001);与模型组比较,各给药组小鼠肺泡灌洗液中IL-4、IL-5、IL-13及炎症细胞数和肺组织中NO水平及iNOS、TRL4、NF-κBp65蛋白表达显著降低(P<0.05~P<0.01)。HE和PAS染色结果显示,模型组小鼠肺组织出现明显炎性浸润且杯状细胞数明显增多,与模型组比较,各给药组小鼠肺组织炎性浸润程度减轻,杯状细胞数明显减少。结论:小青龙汤通过调控TLR4/NF-κBp65信号通路抑制哮喘小鼠肺组织炎症。

TLR4/NF-κBp65在口腔鳞癌组织中的表达水平与颈淋巴结转移关系的研究

目的:通过检测口腔鳞癌组织中TLR4及NF-κBp65的表达情况,分析探讨两者与口腔鳞癌不同临床病理因素以及颈淋巴结转移的关系。方法:采用免疫组化的方法分别检测TLR4以及NF-κBp65在28例口腔正常黏膜组织和57例口腔鳞癌组织中的表达情况。采用SPSS21.0软件进行统计学分析,以P<0.05为具有统计学意义。结果:口腔鳞癌组织肿瘤细胞中TLR4/NF-κBp65的高表达率显著高于它们在口腔正常黏膜组织上皮细胞中的高表达率(P<0.05);对影响口腔鳞癌淋巴结转移相关因素的单因素分析表明,口腔鳞癌细胞中TLR4/NF-κBp65的表达水平、临床分期、浸润深度以及分化程度与口腔鳞癌的颈淋巴结转移有关(P均<0.05),进一步的Logistic多因素回归分析表明,口腔鳞癌细胞中TLR4/NF-κBp65的表达水平、临床分期以及浸润深度是影响口腔鳞癌颈淋巴结转移的独立危险因素(P均<0.05)。结论:本次研究表明TLR4/NF-κBp65对口腔鳞癌的发生发展有重要意义,通过检测口腔鳞癌细胞中TLR4/NF-κBp65的表达水平,对预测口腔鳞癌是否有颈部淋巴结的转移以及转移程度有一定的参考价值。

阿托伐他汀对大鼠肾缺血再灌注损伤中TLR4及NF-κB p65的影响

目的:探讨阿托伐他汀对大鼠肾缺血再灌注损伤(ischemia-reperfusion injury,IRI)中Toll样受体4(toll like receptor4,TLR4)及细胞核因子κB p65(nuclear factor kappa Bp65,NF-κB p65)表达的影响。方法:雄性wistar大鼠54只随机分为假手术组、手术组和干预组,每组又分为(6h、24h、48h)3个时相组。用动脉夹夹闭大鼠双侧肾动脉制成肾IRI模型;干预组:术前灌胃阿托伐他汀10mg·kg-1.d-1,1周,其余处理同手术组。再灌注达相应时间点时,检测Scr,进行肾组织病理学观察并采用免疫组织化学法测定TLR4和NF-κB p65蛋白的表达水平。结果:较手术组,干预组中肾组织损伤明显缓解,Scr水平、TLR4、NF-κB p65阳性表达在相应时间点明显下降。结论:阿托伐他汀预处理可减轻IRI,其机制可能是通过抑制TLR4及NF-κB p65的表达,发挥其肾脏保护作用。

凉血通瘀方对脑出血大鼠脑组织TLR4和NF-κB p65的影响

目的:探讨凉血通瘀方对脑出血大鼠脑组织TLR4和NF-κB p65的影响。方法:24只SD健康雄性大鼠随机分成正常组、假手术组、模型组和凉血通瘀组,每组6只。模型组和凉血通瘀组采用注射泵控制器注血/二次退针法制作脑出血模型。造模成功后,凉血通瘀组给予凉血通瘀方水剂(1.0 mL/100 g)灌胃,每日1次;假手术组、模型组每日给予等剂量蒸馏水灌胃。各组灌胃3 d后进行大鼠行为学评分;Western Blot法测定Toll样受体4(TLR4)、核因子κB(NF-κB p65)蛋白表达变化;RT-PCR法检测脑组织TLR4 mRNA的表达。结果:与正常组比较,模型组、凉血通瘀组大鼠神经学评分升高(P<0.01);与模型组比较,凉血通瘀组大鼠神经学评分降低(P<0.01)。与正常组和假手术组比较,模型组大鼠脑组织TLR4、NF-κB p65蛋白表达皆明显升高(P<0.01),凉血通瘀组NF-κB p65蛋白表达升高(P<0.05);与模型组比较,凉血通瘀组大鼠脑组织TLR4蛋白表达明显下降(P<0.01),NF-κB p65蛋白表达下降(P<0.05)。模型组大鼠脑组织TLR4 mRNA的表达明显高于正常组、假手术组及凉血通瘀组(P<0.01);凉血通瘀组与正常组、假手术组未见明显差异。结论:凉血通瘀方可改善脑出血大鼠神经功能损伤,抑制脑组织TLR4和NF-κB p65蛋白表达,凉血通瘀方的作用机制可能与调节TLR4/NF-κB p65信号通路,减轻脑炎性损伤有关。

清肠汤对大肠湿热型溃疡性结肠炎大鼠组织NF-κBp65及TLR4的影响

目的观察清肠汤对大肠湿热型UC大鼠肠组织NF-κB p65及TLR4的表达的影响。方法采用葡聚糖硫酸钠加乙酸配合饮食加环境复合法,复制大肠湿热型UC大鼠模型。采用免疫组化染色法检测各组大鼠结肠组织NF-κB p65和TLR4的表达。结果与正常组相比,模型组大鼠结肠组织中NF-κB p65、TLR4的表达显著增高(P<0.01),清肠汤各剂量组和SASP组NF-κB p65、TLR4的表达较模型组明显降低(P<0.01)。结论NF-κB p65、TLR4表达降低。很可能是清肠汤治疗大肠湿热型UC大鼠的机理。

Effect of atorvastatin on expression of TLR4 and NF-κB p65 in atherosclerotic rabbits

Objective:To study the effect of atorvastatin on atherosclerotic rabbits.Methods:A total of 60 Now Zealand male rabbits were randomly divided into the normal group,model group and atorvastatin group.The replication rabbit atherosclerotic model with immune injury combined with a high fat diet feeding was used.All rabbits were sacrificed after 3 months.TLR4 and NF-κB p65 were observed by HE staining,immunohistochemistry and western blotting.Results: The expression of TLR4,NF- k B p65 were significantly increased in the model group compared widi the normal group.The expression of TI.R4 and NK- k B p65 decreased significantly in the atorvastatin group,and there was no difference compared with the normal group.Conclusions: The effect of atorvastatin on adierosclerosis may be achieved by the inhibition of the expression of TLK4 and NF-κB p65.

补肾填精法对肾精亏虚孕鼠脾脏及TLR4/MyD88/NF-κBp65免疫通路的影响

目的探讨补肾填精法对肾精亏虚孕鼠的脾脏及其相关免疫通路的影响。方法选用复合应激法建立肾精亏虚孕鼠模型,并给予左归丸混悬液(0.58 g/100 g·d^-1)灌胃处理以观察补肾填精法对模型孕鼠脾脏显微和超微结构变化及其相关免疫通路中的Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)、髓样分化因子88(Myeloid differentiation factor 88,MyD88)和核转录因子κBp65(Nuclear factor-kappa beta p65,NF-κBp65)的表达水平的影响。结果正常组脾脏结构完整,无明显的细胞凋亡和坏死现象,细胞内结构正常。模型组脾脏结构稀疏,淋巴小结缩小且界限模糊,淋巴细胞数目减少,有明显的细胞凋亡和坏死现象;细胞内核膜不规则,染色质有固缩现象,部分细胞器崩解。补肾组脾脏结构明显改善,细胞凋亡和坏死现象减少,细胞内各结构的形态显著恢复。此外,与正常组比较,模型组孕鼠脾脏内TLR4、MyD88和NF-κBp65的mRNA和蛋白质表达水平下降。与模型组比较,补肾组中上述三个因子的mRNA和蛋白质表达水平明显回升。结论补肾填精法可以通过改善脾脏结构和上调TLR4/MyD88/NF-κBp65免疫通路的表达水平来有效地调节孕鼠的免疫失衡状态,有利于治疗肾精亏虚引起的胎漏、胎动欲坠等症。