TLR9 mRNA在巨细胞病毒感染儿童外周血中的表达

目的 探讨HCMV感染患儿外周血中TLR9 mRNA的表达。方法 选择2019年1月-2019年12月江西省儿童医院收治HCMV感染88例为研究对象,其中未给予更昔洛韦治疗23例为治疗前组,给予更昔洛韦治疗27例为治疗后组;同期未感染HCMV健康儿童38例为正常组。采用RT-PCR检测TLR9 mRNA表达,以2^(-△△Ct)方法对mRNA表达进行相对定量,对比分析各组指标的变化。结果 HCMV感染组和正常组外周血中TLR9 mRNA表达量平均值分别为1.986±0.306和3.001±0.543,2组间差异无统计学意义(t=1.724,P=0.088)。HCMV感染治疗前组和治疗后组外周血中TLR9 mRNA表达量平均值分别为1.778±0.312和2.163±0.504,2组间差异无统计学意义(t=0.624,P=0.536)。结论 TLR9 mRNA在HCMV感染儿童外周血中的表达降低,但其表达水平与不同治疗时期无相关性。

TLR9 mRNA表达水平与SLE患者病情及疾病进展的相关性

目的探讨Toll样受体9(TLR9)mRNA表达水平与系统性红斑狼疮(SLE)患者病情及疾病进展的相关性。方法纳入2016年6月至2018年3月在本院诊断及治疗的SLE患者129例,测定所有受试者TLR9 mRNA表达水平,以TLR9 m RNA表达水平中位数为界值,分为TLR9低表达组(n=62)和TLR9高表达组(n=62),记录所有患者临床参数。随访2年后,记录两组患者进展情况,应用Logistic回归分析影响SLE疾病进展的危险因素。结果 129例患者共5例因不同原因失访,共124例患者完成随访的患者中共60例患者发生疾病进展,将其作为进展组,余64例未发生疾病进展的患者作为非进展组;K-M生存分析曲线显示,TLR9高表达组SLE患者2年疾病进展风险高于TLR9低表达组(x2=5.971,P=0.015);Logistic多因素显示持续性蛋白尿(OR=0.083)、高C反应蛋白水平(OR=0.054)、TLR9 mRNA高表达(OR=0.090;)是SLE疾病进展危险因素,ROC曲线分析显示,TLR9 mRNA高表达预测SLE患者疾病进展风险的AUC为0.716,特异度为86.56%,敏感度为78.35%高于持续性蛋白尿、C反应蛋白水平(P<0.05)。结论持续性蛋白尿、C反应蛋白水平、TLR9 mRNA高表达是SLE患者疾病进展的危险因数,其中TLR9 mRNA高表达可作为预测SLE患者疾病进展风险的重要指标。

浆细胞样树突状细胞和TLR9及其mRNA在银屑病患者皮损中的表达

目的:探讨浆细胞样树突状细胞(Plasmacytoid dendritic cells,PDCs)和toll样受体9(TLR9)在银屑病发病中的表达状态。方法:采用免疫组织化学SP法和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测了22例银屑病患者皮肤损害中PDCs和TLR9及其mRNA的表达。15例整形外科患者的皮肤作为正常对照。结果:免疫组化结果显示银屑病组皮损中PDCs、TLR9的表达明显增多,而在正常对照组没有表达;RT-PCR检测显示银屑病皮损中TLR9mRNA的表达明显高于正常对照组(P<0.01)。结论:银屑病患者皮损中有PDCs浸润,TLR9及其mRNA的表达水平上调,可能与银屑病的发病相关。

针刺对脑缺血再灌注大鼠梗死灶边缘区顶叶皮质TLR9、TNF-α、IRF7和IFN-β的mRNA表达的影响

[目的]检测脑缺血再灌注模型早期梗死灶边缘区Toll样受体9(TLR9)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素调节因子7(IRF7)、干扰素-β(IFN-β)的m RNA表达,阐明针刺对脑梗死的TLR9通路作用机制。[方法]使用线栓法制作大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)脑缺血模型,缺血90 min后行再灌注,治疗组予针刺干预,于再灌注6h、5d后将大鼠取材,进行荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)法检测,观察局灶性脑缺血模型大鼠脑组织TLR9、TNF-α、IRF7、IFN-β的m RNA表达及针刺的干预作用。[结果]针刺能明显增强神经保护因子IFN-βm RNA的表达(P<0.05)。TLR9信号通路m RNA的表达对比均无统计学差异(P>0.05)。[结论]本针刺法治疗脑梗死通过增强神经保护因子IFN-βm RNA的表达,改善脑缺血再灌注造成的神经功能活动障碍。本研究尚不能表明该针刺法能抑制TLR9信号通路m RNA的表达。

TLR9-mRNA的表达与急性胰腺炎病人炎性因子变化的相关性研究

目的探讨单核巨噬细胞TLR9-mTLR9-mRNA的表达与急性胰腺炎(AP)病人炎性因子变化的相关性。方法 24小时内被诊断为AP的病人40例,分别于第1,3,5天采集病人的EDTAK2抗凝静脉血,并检测胰弹性蛋白酶、促炎细胞因子和抗炎细胞因子。分离外周血单个核细胞,采用逆转录聚合酶链式反应对TLR9-mRNA进行检测,分析其5天内表达变化规律。结果所有AP病人在第1天、第3天、5天时单核巨噬细胞TLR9-mRNA对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。AP病人外周血单核巨噬细胞TLR9-mRNA的改变与胰弹性蛋白酶、促炎细胞因子呈明显正相关,差异有统计学意义(P<0.05)。结论外周血单核巨噬细胞TLR9-mRNA的表达改变与AP病人炎性因子(胰弹性蛋白酶、促炎细胞因子)表达上调有相关性,TLR9可能介导AP的发生与发展。

Expression of TLR9 and Its mRNA in the Lesions of Lichen Planus

To investigate the role of toll-like receptor 9 （TLR9） in the pathogenesis of lichen planus, the expressions of TLR9 and its mRNA in the lesional skin of lichen planus were detected by immunohistochemical technique （SP） and RT-PCR. As control, normal skin of healthy volunteers was also tested. The immunohistochemical study showed that the expression of TLR9 in the lesional skin of lichen planus was significantly higher than that in the normal controls. The results of RT-PCR showed that both skin lesions and normal controls had TLR9 expression. In skin lesions, the expression level of TLR9 mRNA was 1.6075±0.0930, which was significantly higher than that in normal controls （P〈0.001）. These findings indicated that up-regulated expression of TLR9 and its mRNA might be involved in the pathogenesis of lichen planus.

TLR9/MyD88/IRF7信号通路mRNA在尖锐湿疣皮损微环境中的表达变化研究

目的探究Toll样受体9(TLR9)/髓样分化因子88(MyD88)/干扰素调节因子7(IRF7)信号通路在尖锐湿疣(CA)发病及转归中的可能免疫调控作用。方法采用反转录实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测TLR9、MyD88、IRF7 mRNA在正常包皮组织、CA初发及复发患者皮损(即分为对照组、初发组和复发组)中的表达,应用快速分子导流杂交聚合酶链式反应检测CA皮损人乳头瘤病毒(HPV)基因亚型,根据HPV基因型别数分为单一HPV感染组和多重HPV感染组。结合HPV分型,分析三者信使核糖核酸(mRNA)在上述各组标本中的表达变化。结果TLR9 mRNA在对照组、初发组、复发组、单一HPV感染组和多重HPV感染组各组中表达的2-△△Ct值分别为(0.75±0.45)、(1.34±0.51)、(1.21±0.63)、(1.35±0.66)、(1.19±0.45);MyD88分别为(0.63±0.20)、(1.23±0.64)、(1.14±0.74)、(1.35±0.73)、(1.00±0.60);IRF7分别为(0.62±0.41)、(1.21±0.49)、(1.02±0.57)、(1.21±0.56)、(1.00±0.48)。三者mRNA在对照组、初发组、复发组中的表达均有显著差异(P<0.05);在初发组和复发组的表达均高于对照组(P<0.05);但在初发组与复发组,以及在单一HPV感染组和多重HPV感染组的表达均无统计学差异(P>0.05)。Pearson相关系数分析显示:TLR9与MyD88、TLR9与IRF7、MyD88与IRF7均成正相关关系(r分别为0.868、0.872、0.781)。结论CA皮损微环境中TLR9、MyD88、IRF7 mRNA表达上调,单一和多重HPV感染CA皮损中三者mRNA表达相当,TLR9/MyD88/IRF7信号通路可能参与机体局部抗HPV免疫反应,但随着病程延长和皮损复发,该信号通路进一步激活可能被抑制。

Tau、TLR9mRNA表达与胎盘病理改变及早产儿脑损伤的关系

目的探讨Tau、TLR9mRNA表达与胎盘病理改变及早产儿脑损伤的关系。方法收集2017年12月~2018年12月我院产科出生的早产儿脑损伤患儿共184例,根据脑损伤的严重程度分为三组:A组(轻度组)、B组(中度组)、C组(重度组),同时选择同期正常足月生产的健康新生儿68例作为对照组。采用ELISA法检测各组血清Tau蛋白的表达,采用real-time PCR法检测各组胎盘TLR9 mRNA的表达。对比各组新生儿Tau、TLR9mRNA水平的差异以及胎盘病变发生率的差异。结果早产儿脑损伤组中Tau蛋白和胎盘组织中TLR9蛋白表达量高于对照组,P<0.05;总的Tau蛋白含量和TLR9 mRNA相对表达量均与新生儿神经行为评分呈负相关,P<0.05;252例胎盘组织中共有199例发生病理改变,其中早产儿脑损伤组中共有184例发生病理改变,发生率为100%,对照组中共有12例发生病理改变,发生率为22.06%,两组差异具有显著性,P<0.05。结论早产脑损伤患儿中,血清tau蛋白浓度及胎盘中TLR9mRNA相对表达量明显升高,与新生儿神经行为评分呈负相关,早产脑损伤患儿的胎盘组织均发生病理改变。