小鼠乳腺癌TM40D细胞株移植模型建立及其C-erbB-2的测定

目的 建立乳腺癌TM 4 0D细胞BALB/c小鼠移植模型 ,并检查其癌基因C erbB 2状况。方法 采用来源于BALB/c小鼠的乳腺癌TM4 0D细胞接种于BALB/c小鼠胸壁第 5～ 6肋间皮下 ,细胞数为 1× 10 6/只 ,观察成瘤情况。切除肿块作病理、C erbB 2免疫组织化学检查。结果 接种后 14d在接种部位可见肿块 ,直径 3～ 5mm ,肿瘤移植成功率为 93 33% (2 8/30 )。病理检查为乳腺癌 ,免疫组织化学C erbB 2阳性。结论 该方法建立的小鼠乳腺癌移植模型成瘤率高 ,为乳腺癌研究、尤其是以C erbB

脂质体介导C-erbB-2反义寡核苷酸转染小鼠乳腺癌TM40D细胞的效率及毒性

目的探讨阳离子脂质体为载体的反义寡核苷酸(ODNs)转染小鼠乳腺癌TM40D细胞的最佳转染效率及对细胞的毒性作用。方法分别将有/无脂质体介导的反义ODNs转染小鼠乳腺癌TM40D细胞,应用流式细胞仪观察不同时间的反义ODNs的转染效率,荧光显微镜观察反义ODNs在细胞内的分布,全自动生化分析仪检测转染培养上清液的乳酸脱氢酶(LDH)浓度。结果无脂质体介导的反义ODNs转染细胞效率随着时间的延长增加,6h达到63.00%。脂质体介导的反义ODNs转染细胞4h时转染效率达到高峰为72.23%。细胞内荧光强度与细胞转染效率相关。无脂质体介导的FAM标记的反义ODNs分布在细胞浆,脂质体介导的反义ODNs在细胞浆及细胞核内均有分布。各组LDH浓度无统计学差异。结论脂质体介导组反义ODNs转染效率高于无脂质体组,同时转染高峰提前出现。脂质体促进反义ODNs进入细胞核内。短时间内阳离子脂质体及反义ODNs对细胞的毒性不明显。

脂质体介导的c-erbB-2反义寡核苷酸转染小鼠乳腺癌TM40D细胞的效率及作用

目的 探讨阳离子脂质体介导的c erbB 2反义寡核苷酸 (ODNs)转染小鼠乳腺癌TM 4 0D细胞的效率及其对细胞增殖、凋亡的影响。方法 应用流式细胞仪及荧光显微镜观察反义ODNs在 1、2、4、6h的转染效率以及在细胞内的分布。应用四甲基偶氮唑蓝比色分析法 (MTT)检测反义ODNs对细胞增殖的影响 ;流式细胞仪检测对细胞凋亡的影响。结果 脂质体可促进反义ODNs进入细胞内 ,无脂质体介导的反义ODNs转染细胞的效率随转染时间延长逐步增加 ,而脂质体介导的反义ODNs转染细胞 4h效率达到高峰 72 2 3% ,6h维持在高水平。脂质体可使反义ODNs在细胞内有效分布 ,进入细胞核。MTT法检测结果表明c erbB 2反义ODNs抑制细胞增殖 ,抑制率为5 0 2 4 %。流式细胞仪检测结果表明c erbB 2反义ODNs促进细胞凋亡 ,正常细胞组凋亡率为 9 13% ,脂质体组为 9 2 9% ,脂质体 +反义ODNs组为 38 5 0 %。结论 脂质体可促进反义ODNs进入细胞及在细胞有效分布 ,c erbB 2反义ODNs可抑制乳腺癌TM4 0D细胞的增殖及促进癌细胞凋亡。