TMPRSS4在胃癌中的表达及其临床意义

目的探讨TMPRSS4在胃癌中的表达及其临床意义。方法采用实时PCR方法检测30例相对正常胃黏膜和30例胃癌组织的TMPRSS4表达,同时采用免疫组织化学方法检测30例相对正常胃黏膜、18例胃腺瘤、122例原发胃癌及22例远处转移灶组织中TMPRSS4的表达,并结合临床病理因素进行相关性统计分析。结果实时PCR检测结果显示,TMPRSS4表达在胃癌组织中显著高于相对正常胃黏膜,差异有统计学意义(P=0.035)。免疫组织化学检测结果,TMPRSS4表达在原发胃癌及远处转移组织中显著高于非癌组织,随着临床分期的增长其表达呈逐渐升高趋势,差异有统计学意义(P <0.01)。TMPRSS4高表达与肿瘤大小、淋巴脉管浸润、肿瘤浸润深度、淋巴结转移、远处转移及TNM分期密切相关(P <0.05)。多变量Cox回归分析显示,TMPRSS4高表达是影响胃癌患者预后的独立因素(HR=2.72,P=0.005)。线性回归分析显示,原发肿瘤的TMPRSS4表达与远处转移灶的TMPRSS4表达呈正相关(β=0.307,R2=0.143,P=0.025)。结论 TMPRSS4高表达可作为评估胃癌进展的新型生物学指标,具有肿瘤生物学特性的TMPRSS4可能参与肿瘤转移的调控。

DLL4和TMPRSS4在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的探讨Delta样配体4(delta-like ligand4,DLL4)和Ⅱ型跨膜丝氨酸蛋白酶4(typeⅡteansmembrane serine 4,TMPRSS4)在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达及其临床意义。方法选取手术前未行放化疗的NSCLC患者72例癌组织标本作为观察组,另选取距离原发肿瘤5 cm以上、经病理证实无肿瘤浸润的肺组织标本作为正常对照组。通过免疫组织化学染色法,检测两组DLL4和TMPRSS4表达情况,分析观察组DLL4和TMPRSS4表达与患者临床病理特征的关系以及二者表达的相关性。结果观察组DLL4阳性表达率为65.3%,TMPRSS4阳性表达率为79.2%,均高于正常对照组的25.0%和26.4%,差异均有统计学意义(P均<0.01)。观察组DLL4和TMPRSS4的表达与患者肿瘤临床分期、分化程度、淋巴结转移情况相关(P<0.05或P<0.01)。Spearman相关性分析显示,观察组DLL4与TMPRSS4表达呈正相关(r=0.344,P=0.003)。结论 DLL4和TMPRSS4在NSCLC的发生、发展和转移中可能起协同作用,DLL4联合TMPRSS4检测对判断NSCLC预后有一定价值。

CA199、TMPRSS4在早期非小细胞肺癌组织的表达及在肿瘤血管形成中的作用

目的分析CA199、TMPRSS4在早期非小细胞肺癌(NSCLC)组织及癌旁组织的表达及在肿瘤血管形成中的作用。方法选取原发性早期NSCLC患者85例,手术取患者癌组织及癌旁组织制成切片并染色,采用免疫组化法对所有患者行CA199、CD34及TMPRSS4蛋白表达水平检测,采用Real-time PCR检测癌组织与癌旁组织中TMPRSS4 mRNA的表达。结果 CA199在癌组织中的阳性率明显高于癌旁组织,在Ⅱ期中的阳性率明显高于Ⅰ期,差异均有统计学意义(均P<0. 05)。TMPRSS4 mRNA在癌组织中的表达量为1. 827±0. 451,显著高于癌旁组织(0. 915±0. 316); TMPRSS4蛋白在癌组织中的检出率为82. 35%,显著大于癌旁组织(16. 47%),差异均有统计学意义(均P<0. 05); TNM分期Ⅱ期患者高微血管密度(MVD)的比例显著高于Ⅰ期,差异有统计学意义(P<0. 05)。结论 TMPRSS4及CA199在NSCLC组织中为高表达,CA199对早期诊断NSCLC的具有重要意义,TMPRSS4会促进肿瘤的发展与肿瘤血管的形成。

TMPRSS4亚型的新发现及其对转染结肠癌细胞的生物学特性研究

目的探讨新发现的跨膜丝氨酸蛋白酶4(TMPRSS4)亚型对转染结肠癌(CC)细胞生物学特性的影响。方法采用RT-PCR和Western blot法鉴定转染到人CC细胞(DLD-1)中的命名为T4-1A和T4-1B的TMPRSS4亚型。采用划痕实验和侵袭实验方法阐明稳定型转染细胞的迁移和侵袭能力。结果成功构建T4-1A和T4-1B重组载体,并获得T4-1A和T4-1B转染细胞株,且其T4-1A和T4-1B高表达于稳定型DLD-1。T4-1A与转染真核细胞表达空白载体(pc DNA6)相比,显著促进转染T4-1A的DLD-1迁移和侵袭,差异有统计学意义(P <0. 05),但T4-1B与pc DNA6相比差异无统计学意义。T4-1A和TMPRSS4生物学特性非常相似。结论 T4-1A和T4-1B是新的TMPRSS4亚型,包含激活功能区的T4-1A可促使CC细胞的迁移和侵袭能力,为进一步研究TMPRSS4的分子生物学特性提供理论基础。

TMPRSS4在裸鼠结肠癌肝转移模型的促癌机制研究

目的检测TMPRSS4在裸鼠结肠癌肝转移模型中的表达,并探究其促癌机制。方法采用转染基因重组质粒pcDNA3.1(-)/TMPRSS4和pcDNA3.1(-)/Scramble的HT29结肠癌细胞株建立20只裸鼠肝转移模型,并按随机数表法分成TMPRSS4组(研究组,10只)和Scramble组(对照组,10只)。制模6周后处死观察两组裸鼠肝脏的组织形态学和组织病理学改变情况,并将其标本采用RT-PCR和Western blot检测裸鼠结肠癌肝转移模型中的TMPRSS4表达情况。结果成功构建稳定型表达TMPRSS4和Scramble重组载体的HT29细胞株,并100%(20/20)成功完成两组裸鼠结肠癌肝转移模型;从组织标本的形态学和病理学角度分析,与对照组相比,研究组裸鼠结肠癌肝转移评分[(2.400±0.516)分vs(3.700±0.483)分]显著增高,差异有统计学意义(P<0.05);从组织标本的分子生物学角度分析,与对照组相比,研究组裸鼠的mRNA[(1.060±0.207)vs(2.280±0.712)]和蛋白质[(0.740±0.114)vs(2.580±0.719)]表达显著增高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论TMPRSS4可有效促进裸鼠结肠癌肝转移的进程,至于具体的促转移机制则有待于进一步的研究揭示。

Real-Time PCR法检测TMPRSS4在肺癌中的表达及临床意义

目的检测TMPRSS4(Ⅱ型跨膜丝氨酸蛋白酶4)在临床非小细胞肺癌(NSCLC)患者的癌组织及癌旁组织的表达及其与临床病理特征的关系。方法采用实时荧光定量PCR法检测60例NSCLC患者的癌组织、癌旁组织TMPRSS4 mRNA的表达,取21例患者正常肺组织做对照。分析TMPRSS4与NSCLC临床病理特征的相关性。结果 NSCLC患者的癌组织中TMPRSS4 mRNA的表达为正常组织的17.33倍;在NSCLC患者中,其癌组织TMPRSS4 mRNA的表达明显高于相应癌旁组织TMPRSS4 mRNA表达(P<0.05)。NSCLC患者中TMPRSS4 mRNA表达与患者年龄、性别及组织学类型无关(P>0.05),与肿瘤的临床分期、分化程度相关(P<0.05)。结论 NSCLC患者的癌组织中高表达TMPRSS4 mRNA与肺癌的发生、发展密切相关,且其高表达TMPRSS4 mRNA与肿瘤的恶性程度相关。

GST-TMPRSS4融合蛋白表达载体的构建及其在原核细胞中的表达

目的构建带有谷胱甘肽S-转移酶标签的TMPRSS4载体(GST-TMPRSS4)原核表达载体,并诱导表达。方法以T7-TMPRSS4真核表达载体为模版,用聚合酶链反应(PCR)方法扩增TMPRSS4编码序列,定向插入pGEX-5X-1载体中。构建原核表达质粒进行酶切鉴定并命名为GST-TMPRSS4。融合载体转化BL-21感受态细菌中,经异丙基硫代β-D半乳糖苷(IPTG)大量诱导表达,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白印迹法。结果成功构建了原核表达质粒GST-TMPRSS4,并用Western blot方法证实了GST-TMPRSS4融合蛋白的表达。结论成功构建了GST-TMPRSS4原核表达载体,并证实了融合蛋白表达,为纯化TMPRSS4及研究其结构与功能提供了研究基础。

TMPRSS4在胃癌中的表达及其与患者预后相关性:基于Oncomie和Kaplan-Meier Plotter数据库分析

背景胃癌(gastric cancer,GC)是癌症相关死亡的重要原因,也是消化系统最为常见的肿瘤.然而,GC预后相关因素并不完全清楚.本文从生物信息角度探讨GC预后的分子标志物.目的探讨应用Oncomie和Kaplan-Meier Plotter数据平台分析跨膜丝氨酸蛋白酶4(transmembrane protease serines4,TMPRSS4)在GC组织与正常胃组织中的差异表达及其与患者生存期的关系.方法深入挖掘Oncomie和Kaplan-Meier Plotter数据平台中TMPRSS4基因表达与GC相关性数据集,并应用在线分析软件比较癌组织和正常胃组织TMPRSS4基因mRNA表达水平是否存在差异.绘制生存曲线比较TMPRSS4高低表达患者生存期是否存在差异,探讨TMPRSS4作为GC患者预后分子标记物的可行性.同时,回顾性分析手术治疗的50例GC患者的临床资料,采用免疫组织化学法检测50例患者癌组织中TMPRSS4蛋白的表达情况,并分析TMPRSS4表达与患者临床特征是否存在相关性.结果Oncomine数据库中共收录了GC、乳腺癌等常见肿瘤组织与对应正常组织中TMPRSS4基因差别表达的相关数据集共185项,其中存在差异表达10项,有9项在肿瘤组织中高表达,有1项在肿瘤组织中低表达.通过聚类层次聚类分析显示,TMPRSS4基因在GC中呈现共表达的基因有LAMB3,LAD1,ANXA4等.TMPRSS4与LAMB3,LAD1,ANXA4的共表达相关系数分别为0.57,0.51和0.43.Oncomine数据库中,有2项基因表达芯片数据关于TMPRSS4基因在GC组织与正常组织中差异表达的研究,2项基因表达芯片结果均提示在GC组织中,TMPRSS4表达水平高于正常胃组织(P<0.05).Kaplan-Meier Plotter分析显示TMPRSS4高低表达组总中位生存时间分别为22.0 mo和32.6 mo,高表达组显著低于低表达组(HR=1.31,95%CI:1.09-1.57,P<0.05).高低表达组中位无疾病进展生存时间分别为22.40 mo和13.87mo,高表达组显著低于低表达组(HR=1.27,95%CI:1.03-1.58,P<0.05).免疫组化显示TMPRSS4阳性表达与患者肿瘤是否侵犯血管存现相关性,TMPRSS4阳性患者肿瘤侵犯血管比显著高于阴性者(P<0.05).结论与正常胃组织比较,GC组织中TMPRSS4基因mRNA表达水平明显上调,其高表达与患者的预后不良相关,且高表达者肿瘤侵犯血管比例较高.

TMPRSS4基因沉默对甲状腺滤泡状癌细胞侵袭能力的影响

目的观察TMPRSS4基因沉默在甲状腺癌WRO细胞体外侵袭能力的影响。方法构建慢病毒载体转染甲状腺癌WRO细胞，分为三组：空白对照组（正常WRO细胞），NC-ShRNA阴性对照组，TMPRSS4-ShRNA组。使用WesternBlot方法检测转染后细胞的TMPRSS4表达，确定转染效果。采用Transwell法观察细胞体外侵袭力的改变。结果WesternBlot结果显示转染组TMPRSS4蛋白表达显著低于阴性转染组及空白对照组。侵袭实验结果提示TMPRSS4基因沉默组相比于空白对照组和阴性对照组侵袭穿膜细胞数显著减少（P＜0.05）。结论下调TMPRSS4表达可有效减少甲状腺癌WRO细胞的侵袭能力。

TMPRSS4和onfFN在甲状腺细针吸标本中的定量表达

目的探讨跨膜丝氨酸蛋白酶4(transmembrane protease serine 4,TMPRSS4)和癌胚纤维连接蛋白(oncofe-tal fibronectin,onfFN)在细针吸细胞学检查(fine-needle aspiration biopsies,FNAB)标本中的定量表达。方法采用荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR),检测细针吸组织中TMPRSS4和onfFN mRNA的表达量,比较良恶性组织中2种分子标记物的表达差异。结果甲状腺癌和甲状腺良性病变组织中TMPRSS4和onfFN mRNA的平均表达量分别为:15.236±9.6850、.569±0.374及25.318±15.642、0.865±0.219,恶性组织与良性组织中两者表达差异具有统计学意义(P均=0.000),甲状腺癌组织中2种分子标志物的表达呈正相关(γ=0.374,P=0.026)。2种分子标记物表达与患者性别、年龄、肿瘤大小无相关性。TMPRSS4 mRNA和onfFN mRNA表达与肿瘤TNM分期和淋巴结转移密切相关(P=0.009、P=0.015,P=0.024、P=0.08)。结论 TMPRSS4 mRNA和onfFN mRNA在甲状腺癌组织中表达水平上调,两者与细针吸细胞学检查联合,对甲状腺病变的诊断和鉴别诊断具有很高的应用价值。同时,两者与甲状腺癌的发展密切相关,而且两者可能具有协同作用。

TMPRSS4及Smac在胃癌侵袭和转移中的机制及临床意义的研究

目的:通过检测胃癌组织中TMPRSS4与Smac的表达情况,分析其在胃癌侵袭与转移中的机制,并探讨其在胃癌发生、发展过程中的作用与意义。方法:采用Western blot、RT-PCR及免疫组化的方法检测胃癌组织与正常胃组织的TMPRSS4与Smac的表达。用脂质体转染过表达TMPRSS4胃癌细胞,构建特异性TMPRSS4siRNA表达载体,通过Transwell侵袭实验与划痕愈合实验研究TM-PRSS4表达的胃癌细胞侵袭转移机制;采用脂质体介导转染胃癌细胞MKN-45,用丝裂霉素处理转染前后的胃癌细胞株MKN-45,观察MKN-45的凋亡情况。结果:TMPRSS4mRNA与蛋白在胃癌组织中的表达明显高于正常组织,且以中、高表达占多数,差异有统计学意义(P<0.01);TMPRSS4mRNA与蛋白的表达水平与TNM分期、淋巴结转移个数、肿瘤直径大小、浸润深度有关,差异均有统计学意义(P<0.05～0.01)。在正常胃组织中的Smac表达率明显高于胃癌组织,差异有统计学意义(P<0.01);胃癌细胞的浸润深度、淋巴结转移个数与Samc的表达相关,差异有统计学意义(P<0.05);肿瘤直径大小与TNM分期与Samc表达无明显相关,差异无统计学意义(P>0.05)。转染后的MKN-45对化疗药物的敏感性比转染前明显增强,差异有统计学意义(P<0.05)。随访后发现TMPRSS4与Samc和患者的预后及生存时间相关。结论:TMPRSS4与患者的预后相关,可为患者的预后判断提供一定的依据;Samc的过表达能提高化疗药物的敏感性,为判断临床药物治疗的疗效提供一定的依据。

TMPRSS4在结肠直肠癌中高表达并影响结肠癌细胞的增殖及迁移能力

目的:探讨TMPRSS4基因对结肠癌细胞增殖及迁移的影响。方法 :采用免疫组化方法检测结肠直肠癌组织和正常肠上皮中TMPRSS4的表达,并应用RT-PCR和Western印迹法检测结肠癌细胞株中TMPRSS4的表达,通过RNAi方法下调结肠癌细胞SW480中TMPRSS4的表达后,进一步采用CCK-8法、细胞划痕和transwell迁移试验检测细胞增殖、运动及迁移能力的改变。通过流式细胞仪检测TMPRSS4下调后对细胞凋亡的影响。结果:结肠直肠癌高表达TMPRSS4;肠癌细胞株SW480在mRNA及蛋白水平均高表达TMPRSS4。下调TMPRSS4能抑制SW480的增殖能力(P<0.05),并诱导细胞凋亡增加(P<0.05)。此外,下调TMPRSS4降低SW480细胞的迁移能力(P<0.05)。结论:在高表达细胞株中下调TMPRSS4有助于抑制肠癌细胞增殖,增加细胞凋亡并降低细胞的迁移能力。

Rab35、TMPRSS4及CIP2A蛋白在子宫内膜癌中的表达及与预后的关系

目的探讨Rab35、TMPRSS4及CIP2A蛋白在子宫内膜癌中的表达及与预后的关系。方法选取2005年1月-2017年1月福建省某医院收治的100例子宫内膜癌患者作为研究对象,收集患者的临床及随访资料,比较Rab35、TMPRSS4及CIP2A蛋白在不同组织中的表达情况;分析Rab35、TMPRSS4及CIP2A表达对子宫内膜癌患者预后的影响及影响患者预后的危险因素。结果子宫内膜癌组织中Rab35、TMPRSS4及CIP2A蛋白高表达率高于癌旁正常组织,差异有统计学意义(χ^(2)=62.947、122.120、42.762,均P<0.001)。浸润肌层深度≥1/2、肿瘤分期Ⅲ~Ⅳ期、分化程度G1、淋巴结转移的子宫内膜癌患者Rab35、CIP2A及TMPRSS4蛋白高表达率均高于浸润肌层深度<1/2、肿瘤分期Ⅰ~Ⅱ期、分化程度G2、G3及淋巴结未转移者,差异均有统计学意义(P<0.05)。Rab35、TMPRSS4及CIP2A蛋白表达阴性者中位生存时间长于表达阳性者,差异均有统计学意义(χ^(2)=12.733、13.400、12.127,均P<0.001)。COX回归分析结果显示,浸润肌层深度≥1/2、肿瘤分期Ⅲ~Ⅳ期、肿瘤分化程度G1、出现淋巴结转移和Rab35、CIP2A、TMPRSS4蛋白高表达是影响子宫内膜癌患者预后的危险因素(P<0.05)。结论Rab35、TMPRSS4及CIP2A蛋白在子宫内膜癌组织中呈高表达,且Rab35、TMPRSS4及CIP2A蛋白的表达及浸润肌层深度、肿瘤分、分化程度、淋巴结转移情况等均会影响子宫内膜癌患者预后,临床需加强这些指标的监测。

早期非小细胞肺癌组织中TMPRSS4的表达与肿瘤血管形成的关系

目的:检测穿膜丝氨酸蛋白酶4(transmembrane protease serine 4,TMPRSS4)在早期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织、癌旁组织以及正常肺组织中的表达,分析其在NSCLC肿瘤血管形成中的作用及其临床意义。方法:选取2009年1月至2010年1月在山东大学齐鲁医院胸外科行手术治疗的NSCLC患者87例,应用免疫组化方法检测NSCLC组织、癌旁组织和正常肺组织中TMPRSS4蛋白表达水平,通过计数CD34免疫染色阳性的内皮细胞测定肿瘤组织内微血管密度(microvessel density,MVD);另取2014年9月至2014年10月在山东大学齐鲁医院胸外科行手术治疗的原发性早期NSCLC患者14例,应用Real-time PCR检测TMPRSS4 mRNA在NSCLC组织及邻近正常肺组织内的表达。结果:NSCLC组织中TMPRSS4 mRNA表达水平显著高于邻近正常肺组织(1.826±0.453 vs 0.829±0.366,P<0.05);NSCLC组织、癌旁组织中TMPRSS4蛋白表达阳性率显著高于正常肺组织(60.9%、30.0%vs 16.7%,均P<0.05)。TMPRSS4蛋白高表达的癌组织中的MVD显著高于TMPRSS4蛋白低表达的癌组织(P<0.05)。T2癌组织中TMPRSS4蛋白表达及MVD均显著高于T1癌组织(P<0.05)。结论:早期NSCLC组织中TMPRSS4蛋白高表达与高MVD显著相关,并且TMPRSS4蛋白高表达、高MVD与NSCLC浸润深度密切相关,TMPRSS4可能成为早期NSCLC患者抗癌治疗的新靶点。

CLDN1与TMPRSS4在肝癌中的表达及其临床意义

目的:探讨细胞紧密连接蛋白1(CLDN1)和Ⅱ型跨膜丝氨酸蛋白酶4(TMPRSS4)在肝癌中的表达及其临床意义。方法:选取手术前未行放化疗的临床肝癌组织标本89例,并选取55例非肝癌组织标本作为对照组,通过免疫组化染色法检测CLDN1与TMPRSS4的表达水平,并且分析CLDN1和TMPRSS4表达与患者临床病理特征和预后的关系。结果:CLDN1在肝癌组织中的表达阳性率为65.2%,而在非肝癌组织中的表达阳性率为25.5%,差异具有统计学意义(P<0.001);TMPRSS4在肝癌组织中的表达阳性率为73.0%,而在非肝癌组织中的表达阳性率为30.9%,差异具有统计学意义(P<0.001)。CLDN1和TMPRSS4的表达与患者肿瘤分化程度、TNM分期相关。Spearman相关性分析提示TMPRSS4与CLDN1表达水平呈正相关。CLDN1和TMPRSS4高表达组生存率均低于CLDN1和TMPRSS4低表达组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:CLDN1与TMPRSS4在肝癌的发生、发展过程中可能起着协同作用,联合检测CLDN1与TMPRSS4可能对判断肝癌的预后具有一定指导意义。

TMPRSS4基因在非小细胞肺癌中的表达研究

目的研究TMPRSS4基因m RNA在非小细胞肺癌中的表达。方法选择我院收治的术后病理学检查确诊为非小细胞肺癌的患者60例,其中0期(研究1组)、Ⅰ期(研究2组)、Ⅱ期(研究3组)、Ⅲ期(研究4组)肺癌患者各15例,取患者的癌变组织(研究组)、癌旁组织(观察组)、正常非组织(对照组)。分别对TMPRSS4基因m RNA的表达水平进行测定,并对比各组测定结果和基因检测结果阳性率水平。结果研究组TMPRSS4基因m RNA水平明显高于观察组和对照组(P<0.05);观察组TMPRSS4基因m RNA水平明显高于对照组(P<0.05)。研究4组TMPRSS4基因m RNA水平明显高于研究3组、研究2组、研究1组(P<0.05);研究3组TMPRSS4基因m RNA水平明显高于研究2组、研究1组,组间差异显著(P<0.05);研究2组TMPRSS4基因m RNA水平明显高于研究1组(P<0.05)。研究组TMPRSS4基因m RNA水平阳性人数明显多于观察组和对照组,(P<0.05);观察组TMPRSS4基因m RNA水平阳性人数明显多于对照组,组间差异显著(P<0.05)。结论患有非小细胞肺癌疾病患者病变组织的TMPRSS4基因m RNA水平会呈现异常升高状态,且升高趋势会随着病情的不断加重而加剧。

RG108调控TFPI-2甲基化/TMPRSS4表达对NSCLC细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨RG108对人非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)A549和H1299细胞增殖、凋亡的影响及其可能的作用机制。方法:体外培养A549和H1299细胞,经不同浓度RG108处理后,采用MTT法、流式细胞术分别检测细胞增殖率、细胞周期和凋亡水平;qPCR和Western blotting(WB)法检测细胞内TFPI-2 mRNA和蛋白的表达及TMPRSS4的表达量,以甲基化特异性PCR和比色法检测细胞中TFPI-2启动子区域甲基化的状态和程度;分别采用siRNA-TFPI-2和pcDNA3.0-TMPRSS4质粒敲减TFPI-2或过表达TMPRSS4,然后检测细胞增殖率及凋亡率的变化。结果:RG108处理后,A549和H1299细胞的增殖率显著降低(均P<0.05)、细胞周期阻滞于G1/S期(均P<0.05)而凋亡率显著增加(均P<0.01),细胞中TFPI-2 mRNA及蛋白表达水平均显著升高(P<0.01和P<0.05),同时细胞中TFPI-2启动子区域甲基化程度显著降低(均P<0.05)、TMPRSS4的表达也明显减少(P<0.05)。沉默TFPI-2表达后,A549和H1299细胞的增殖水平显著增加(均P<0.05),而转染pcDNA3.0-TMPRSS4质粒则显著降低细胞的凋亡率(均P<0.05)。结论:RG108能够通过抑制TFPI-2甲基化负向调控TMPRSS4表达进而抑制A549和H1299细胞的增殖,并促进其凋亡。

miR-612通过调控TMPRSS4表达抑制IL-17对胃癌细胞增殖、迁移、侵袭的机制

目的探讨微小RNA-612(miR-612)对胃癌细胞增殖、迁移、侵袭的作用及其分子机制。方法qRT-PCR与Western印迹法检测白细胞介素(IL)-17对胃癌MKN-45细胞中miR-612、Ⅱ型跨膜丝氨酸蛋白酶(TMPRSS)4表达的影响;MTT与Transwell法检测IL-17对MKN-45细胞增殖、迁移及侵袭的影响。MKN-45细胞转染anti-miR-612或pcDNA-TMPRSS4后,分别检测细胞增殖、迁移及侵袭。Targetscan软件预测miR-612的靶基因,双荧光素酶报告基因验证靶基因。miR-612过表达验证MKN-45细胞增殖、迁移及侵袭。Western印迹法检测细胞内细胞周期蛋白(Cyclin)D1、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、p21蛋白的表达。结果IL-17可促进MKN-45细胞增殖、迁移及侵袭,促进TMPRSS4、CyclinD1、MMP-2、MMP-9表达,抑制miR-612、p21表达;转染anti-miR-612或pcDNA-TMPRSS4能够显著增加细胞的增殖、迁移及侵袭;miR-612可负性调控TMPRSS4;miR-612过表达可显著抑制由IL-17介导的胃癌细胞增殖、迁移及侵袭。结论miR-612通过抑制TMPRSS4表达而抑制IL-17对胃癌细胞增殖、迁移及侵袭的促进作用,其作用机制与CyclinD1、MMP-2、MMP-9表达下调及p21表达上调有关。

TMPRSS4在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的通过观察上皮细胞-间质转型(EMT)通路相关蛋白跨膜丝氨酸蛋白酶TMPRSS4(transmembrane protease serine 4,TMPRSS4)在非小细胞肺癌患者手术切除的肺癌组织、癌旁组织中的表达,探讨TMPRSS4蛋白水平表达与非小细胞肺癌的临床关系。方法应用免疫组织化学SP法检测45例非小细胞肺癌及其配对癌旁组织中TMPRSS4蛋白的表达情况。结果非小细胞肺癌组织中TMPRSS4蛋白阳性表达率为60.00%,癌旁组织中TMPRSS4阳性表达率为4.44%;癌组织中TMPRSS4蛋白阳性表达率明显高于癌旁正常肺组织(χ2=29.31,P<0.01)。TMPRSS4蛋白表达与非小细胞肺癌淋巴结转移、临床分期相关(P<0.05)。结论 TMPRSS4在非小细胞肺癌中的表达与肿瘤发生、转移密切相关,高表达的TMPRSS4蛋白提示肺癌有转移风险更高及预后更差的可能,TMPRSS4可能成为非小细胞肺癌中一个新的研究方向。

实时荧光定量PCR检测TMPRSS4 mRNA在41例肺腺癌中的表达及临床意义

目的探讨通过实时荧光定量PCR法检测临床切除的肺腺癌、癌旁组织及正常肺组织中的Ⅱ型跨膜丝氨酸蛋白酶(TMPRSS4)mRNA的表达与非小细胞肺腺癌患者关系。方法采用RQT-PCR法检测41例非小细胞肺腺癌及其配对癌旁组织和12例良性疾病肺组织中TMPRSS4 mRNA表达情况。结果非小细胞肺腺癌组织TMPRSS4 mRNA表达明显高于配对癌旁组织(P<0.01),TMPRSS4 mRNA在配对癌旁组织的相对表达量显著高于正常肺组织(P<0.01)。TMPRSS4 mRNA表达与非小细胞肺腺癌淋巴结转移、临床分期相关(P<0.05);与患者年龄、性别及病理分化程度无关。结论 TMPRSS4在非小细胞肺腺癌中的表达与肿瘤发生、转移密切相关,高表达的TMPRSS4 mRNA提示肺腺癌有转移风险更高及预后更差的可能,检测TMPRSS4 mRNA有助于提高非小细胞肺腺癌恶性程度的判断。