期刊文献+
共找到5篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
TMV载体上发生的前体mRNA基因剪接效应研究
1
作者 叶新福 Quinn Li 《中国农学通报》 CSCD 2005年第2期31-33,共3页
根据以往的报道,TMV基因只存在于细胞质中且不发生基因剪接,前体mRNA(Pre-mR鄄NA)的剪接只能发生在细胞核中。本研究应用RT-PCR,DNA序列测定及GUS+INTRON的点突变和荧光检测等研究手段,首次发现TMV载体中GUS基因的表达和前体mRNA的剪接... 根据以往的报道,TMV基因只存在于细胞质中且不发生基因剪接,前体mRNA(Pre-mR鄄NA)的剪接只能发生在细胞核中。本研究应用RT-PCR,DNA序列测定及GUS+INTRON的点突变和荧光检测等研究手段,首次发现TMV载体中GUS基因的表达和前体mRNA的剪接同时发生,证明了GUS基因在TMV载体上的剪接效应。 展开更多
关键词 tmv GUS基因 发生 细胞质 研究应用 载体 RT-PCR 前体MRNA 剪接 DNA序列
下载PDF
TMV、CMV双价抗性RNA沉默表达载体的构建 被引量:2
2
作者 陈瑜欣 高玉龙 +1 位作者 丁灿 徐照丽 《中国农学通报》 CSCD 北大核心 2011年第5期317-321,共5页
本研究以在植物体内转录出RNA沉默的高效诱导因子双链RNA(dsRNA)为目标,根据已报道的TMVΔMP和CMVΔRep的核苷酸序列设计特异性引物,分别从质粒pBIN-TMVΔMP(i/r)、pBIN-CMVΔRep(i/r)扩增MP基因、Rep基因,并在pGEM-TEasy载体上将2片段... 本研究以在植物体内转录出RNA沉默的高效诱导因子双链RNA(dsRNA)为目标,根据已报道的TMVΔMP和CMVΔRep的核苷酸序列设计特异性引物,分别从质粒pBIN-TMVΔMP(i/r)、pBIN-CMVΔRep(i/r)扩增MP基因、Rep基因,并在pGEM-TEasy载体上将2片段串联起来,再用PCR扩增串联好的正反向MP-Rep基因。正向MP-Rep基因用BamHI和KpnI切下,将所得基因片段与用同样酶切开的含内含子的pKAN-In相连,取名+pKAN;用同样的方法,将反向MP-Rep基因用XbaI切下,将所得基因片段与用同样酶切开的+pKAN相连,取名pKAN-In-MP-Rep,再用NotI将包括Intron和正反向MP-Rep基因在内的片段切下,将其定向插入同样酶切开的pART27上,获得重组质粒pART27-In-MP-Rep。获得的载体可以应用于植物转基因抗病毒育种工程中。 展开更多
关键词 RNA沉默载体 烟草花叶病毒 黄瓜花叶病毒
下载PDF
烟草花叶病毒siRNA设计及其植物表达载体构建(英文) 被引量:2
3
作者 马欣荣 谈心 +1 位作者 刘华玲 张义正 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期151-154,共4页
RNA干扰技术已广泛应用于沉默基因表达的研究.本文分析烟草花叶病毒(TMV)基因序列,选择设计编码小分子发卡结构RNA(hpRNA)的cDNA;并根据农杆菌双元载体质粒p2355多克隆位点区限制性酶切位点,两端分别加入XbaI和BamHI酶切位点;分别合成单... RNA干扰技术已广泛应用于沉默基因表达的研究.本文分析烟草花叶病毒(TMV)基因序列,选择设计编码小分子发卡结构RNA(hpRNA)的cDNA;并根据农杆菌双元载体质粒p2355多克隆位点区限制性酶切位点,两端分别加入XbaI和BamHI酶切位点;分别合成单链DNA复性后插入到p2355上,经PCR、测序验证,表明已成功构建了具有潜在表达烟草花叶病毒siRNA的植物表达载体. 展开更多
关键词 RNA干扰(RNAI) 发卡RNA(hpRNA) 小分子干扰RNA(siRNA) 烟草花叶病毒(tmv) 植物表达载体
下载PDF
烟草花叶病毒装配起始位点反义RNA表达型中间载体的构建
4
作者 彭海 沈学仁 +1 位作者 吴建华 龚祖埙 《中国病毒学》 CSCD 1992年第4期426-431,共6页
利用基因工程方法培育抗病毒植物新品种的途径之一,是在植株中建立一个产生病毒基因组功能片段的反义RNA的系统。本工作设计并合成了一段烟草花叶病毒(TMV)装配起始位点反义RNA的基因,再以pBR 325为基本质粒,构建了包含带有花椰菜花叶病... 利用基因工程方法培育抗病毒植物新品种的途径之一,是在植株中建立一个产生病毒基因组功能片段的反义RNA的系统。本工作设计并合成了一段烟草花叶病毒(TMV)装配起始位点反义RNA的基因,再以pBR 325为基本质粒,构建了包含带有花椰菜花叶病毒(CaMV)35S启动子和PolyA信号的反义RNA表达单元,以及为筛选转基因植株所必须的NPT-Ⅱ表达单元的中间载体,为以后经土壤农杆菌而获得转基因烟草植株打下了基础。 展开更多
关键词 烟草花叶病毒 反义RNA 中间载体
下载PDF
Expression of human hepatitis C virus core antigen in tobacco plants by tobacco mosaic virus-based vector system
5
作者 HAN Aidong LIU Yule +4 位作者 XIAO Li KANG Liangyi ZHANG Yuman LI Dongtian TIAN Bo 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 2000年第1期44-48,共5页
Tobacco mosaic virus (TMV) has the potential to highly express foreign gene. A novel TMV-based in trans expression system was constructed. A TMV mutant TSHc had its coat protein replaced with hepatitis C vir黶 (HCV) c... Tobacco mosaic virus (TMV) has the potential to highly express foreign gene. A novel TMV-based in trans expression system was constructed. A TMV mutant TSHc had its coat protein replaced with hepatitis C vir黶 (HCV) core antigen gene. Anotherr TMV mutant TSBD was repli-case-defective. Coinfection of the two mutants could cause systemic infection in tobacco plants by in trans complementation of their functions. TSHc could effectively replicate and assemble to viral particles, which were a little longer than that of wild-type TMV. HCV core antigen was expressed in whole tobacco plants. A similar expression level of HCV core antigen was detected on serial passages, which suggested that this viral expression system be stable. 展开更多
关键词 tmv vector COMPLEMENTATION SYSTEMIC INFECTION HCV core antigen.
原文传递
上一页 1 下一页 到第
使用帮助 返回顶部