rhBMP-2和FGF-2对成骨细胞矿化及ENPP1、ANK、TNAP表达的影响

目的:研究重组人骨形态发生蛋白(rhBMP-2)和重组人碱性成纤维细胞生长因子(FGF-2)对成骨细胞(MC3T3-E1 Subclone 14)矿化及焦磷酸合成酶(ENPP1)、跨膜蛋白(ANK)和组织非特异性碱性磷酸酶(TNAP)表达的影响,探讨生长因子影响细胞矿化的机制。方法:将MC3T3-E1 Subclone 14细胞分成3组:成骨细胞诱导液(OS)成骨诱导培养组(对照组),OS与rhBMP-2培养组(rhBMP-2组),OS与FGF-2培养组(FGF-2组)。培养12 d后进行ALP活性检测及茜素红染色,实时荧光定量PCR检测矿化相关基因ENPP1、ANK和TNAP表达的差异。结果:rhBMP-2组ALP活性以及钙化结节明显高于对照组,ENPP1、ANK和TNAP均高表达;FGF-2组ALP活性以及钙化结节明显低于对照组,ENPP1和ANK呈高表达,TNAP低表达。结论:rhBMP-2和FGF-2通过调节ENPP1、ANK和TNAP的表达变化来影响骨的矿化。

FGF2对成骨细胞矿化及矿化基因ENPP1，ANK和TNAP表达的影响

目的研究碱性成纤维细胞生长因子（FGF2）对分化不同阶段的成骨细胞（MC3T3．E1）矿化基因ENPP1，ANK和TNAP表达的影响，从细胞和分子水平上探讨FGF2对成骨细胞矿化的机制。方法构建不同分化阶段的MC3T3-E1细胞，诱导前为未分化阶段，矿化诱导后为分化阶段。50μg／LFGF2分别作用于未分化和分化阶段的MC313-E1细胞，测定细胞内碱性磷酸酶表达情况，用茜素红染色法观察MC3T3-E1细胞矿化结节的变化，实时荧光定量RT—PCR检测细胞矿化基因ENPP1，ANK和TNAP表达的差异并进行统计学分析。结果 茜素红染色显示FGF2抑制MC3T3-E1细胞的矿化。FGF2作用于未分化的MC3T3-E1细胞，ENPPl，ANK基因表达明显上调，TNAP基因表达明显下调；而FGF2作用于分化的MC3T3-E1细胞后基因表达变化不明显、结论体外细胞研究显示，FGF2可能是通过调节焦磷酸盐加工因子ENPPI，ANK，TNAP基因表达的变化来抑制MC3T3-E1细胞的矿化过程．

组织非特异性碱性磷酸酶活力的细胞原位红外检测

以富含组织非特异性碱性磷酸酶(TNAP)的人成骨肉瘤细胞株Saos-2为研究模型,利用β-甘油磷酸(β-GP)作为TNAP的生物底物,以红外(IR)光谱为监测工具,检测Saos-2细胞水解β-GP的反应过程,根据红外谱图特征吸收峰的变化,计算TNAP酶活力值。

原位检测组织非特异碱性磷酸酶活性的二维相关分析校正

在以人成骨肉瘤细胞株(Saos-2)为模型,利用α-D-葡萄糖-1-磷酸(α-G-1-P)为生理底物,原位检测组织非特异性碱性磷酸酶(TNAP)活力时,红外(IR)光谱峰位选取不准确和谱带严重重叠无法分辨/分离等都将给酶活力的测试结果带来偏差。二维相关分析与IR光谱的结合使用将在一定程度上改进上述问题,将在文中具体阐述。

关于三北防护林体系建设的思考与展望——基于40年建设综合评估结果

三北防护林体系建设工程(简称:三北工程)是同我国改革开放同步实施的世界最大生态工程,是生态文明建设的重要标志。三北工程规划建设期限历时73年,现已经过40年建设,为科学、准确把握三北工程40年建设来的成效、经验、问题等综合状况,国家林业和草原局(原国家林业局)于2017年委托中国科学院作为第三方评估机构,对三北工程建设40年进行了全面、系统评价与分析。本文在简要介绍三北工程建设40年的历程、取得的成效、积累的经验和存在问题的基础上,对三北工程未来建设与发展进行了思考与展望;提出了重大生态工程未来研究方向,以期为推动三北工程未来高质量发展,为美丽中国-生态文明建设提供重要证据和为全球生态安全建设提供经验与范式等提供参考。