猪源大肠杆菌高致病性毒力岛结构基因进化分析及其对TNF/NF-κB通路的影响

旨在研究猪源大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)高致病性毒力岛(high pathogenicity island, HPI)结构基因的进化趋势及其对TNF/NF-κB通路的影响。本研究运用MEGA等软件分析HPI结构基因的遗传进化,使用R语言功能包挖掘E.coli感染细胞的基因表达综合数据库(gene expression omnibus, GEO),并进行差异基因富集分析;使用分子对接预测HPI-Ybt与TNF/NF-κB通路相关蛋白的结合;将E.coli及前期构建的HPI缺陷株E.coliΔHPI感染IPEC-J2细胞,运用qPCR、ELISA和Western blot对TNF/NF-κB通路中的关键调控点进行检测。系统进化树分析显示,分离株YUNNAN001的intb基因与GQ891729.1亲缘关系最近,而与CQ903045.1亲缘关系较远。KEGG富集发现TNF和NF-κB通路均参与了E.coli感染,且共同基因有10个;火山图及热图富集显示,E.coli感染显著促进了TNF/NF-κB通路中PTGS2、NF-κB、TRAF6等的表达(P<0.05),分子对接显示,HPI-Ybt能与同属于TNF/NF-κB通路的10个蛋白相结合,其中与MAP3K14、TNFAIP3的结合最强;感染E.coli组的NF-κB、PTGS2、TNF-α、TRAF6、TRIF、ATF4、cxcl2和IL-6 mRNA水平显著高于E.coliΔHPI组(P<0.01),且相对于E.coliΔHPI组,E.coli组显著激活了TNF/NF-κB通路蛋白的表达;此外,与E.coliΔHPI组相比,E.coli感染显著升高了NF-κB和IL-6的水平(P<0.01)。结果提示,E.coli-HPI通过合成Ybt结合TNF/NF-κB通路中的关键蛋白,进而激活TNF/NF-κB通路。

老年脑梗死后继发癫痫与脑电图NSE及TNF-α水平的关系研究

目的:研究老年脑梗死后继发癫痫与EEG、NSE及TNF-α水平的关系。方法:对2020年7月至2023年7月于我院收治的脑梗死患者102例行回顾性数据收集。依据患者有无继发癫痫分为脑梗死癫痫组61例、单纯脑梗死组41例。另选取同时期体检各项正常者、且近期未使用纤溶活性药物者56例为对照组。比较脑梗死癫痫组、单纯脑梗死组EEG异常情况、比较对照组、脑梗死癫痫组、单纯脑梗死组EEG异常情况NSE及TNF-α水平。比较脑梗死癫痫组不同发作形式及发作类型EEG异常情况、NSE及TNF-α水平。分析NSE及TNF-α水平与脑梗死癫痫组EEG严重程度的关系。结果:脑梗死癫痫组EEG总异常率、NSE及TNF-α水平高于单纯脑梗死组(P<0.05)。脑梗死癫痫组中癫痫持续状态EEG异常率、NSE及TNF-α水平均高于一次发作(P<0.05)。脑梗死癫痫组中复杂部分性发作EEG异常率、NSE及TNF-α水平均高于单纯部分性发作、全身强直阵挛性发作(P<0.05)。随着EEG严重程度增高,NSE及TNF-α水平也逐渐升高(P<0.05)。结论:EEG可成为诊断老年脑梗死后继发癫痫及辅助确定癫痫类型的重要工具;老年脑梗死后继发癫痫发展过程与NSE、TNF-α存在一定关系,对预测、预防该疾病具有潜在的临床意义,为理解该疾病发病机制、治疗提供了新的思路。

关节镜半月板治疗膝骨关节炎对治疗有效率、VAS评分、HSS评分及TNF-α指标水平的应用研究

目的分析关节镜半月板治疗膝骨关节炎对治疗有效率、VAS评分、HSS评分及TNF-α指标水平的影响。方法选择2019年6月—2020年5月在我院进行治疗的86例因半月板损伤引起膝骨关节炎的患者作为研究对象,根据患者的意愿选择治疗方式,其中43例选择常规保守治疗的患者纳入对照组,另外43例选择关节镜半月板治疗的患者纳入研究组。对两组患者的治疗有效率、视觉模拟评分法(VAS)评分、HSS膝关节评分及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)指标水平进行比较。结果研究组的治疗有效率显著高于对照组(P<0.05);研究组与对照组在治疗前的VAS评分、HSS评分、TNF-α水平进行比较均无显著差异(P>0.05),两组经治疗后的VAS评分、HSS评分及TNF-α水平均得到了改善,研究组在治疗后的VAS评分、TNF-α指标水平均低于对照组(P<0.05),HSS评分高于对照组(P<0.05)。结论对膝骨关节炎患者采取关节镜半月板治疗,具有显著效果,可有效减轻患者的疼痛程度与炎症反应,提升膝关节功能。

血清IL⁃6、TNF⁃α及NO在非体外循环搭桥大隐静脉桥血管顺行序贯中的水平变化及与通畅率的关系

目的探讨血清白介素⁃6(IL⁃6)、肿瘤坏死因子⁃α(TNF⁃α)及一氧化氮(NO)在非体外循环搭桥(OPCAB)大隐静脉桥血管顺行序贯中的水平变化及与通畅率的关系。方法选取2019年1月至2022年6月郑州市第七人民医院收治的行OPCAB术患者262例为研究对象。比较OPCAB术患者不同时间点的IL⁃6、TNF⁃α、NO水平;根据Fitzgibbon标准统计患者术后桥血管通畅情况;分析影响患者术后桥血管通畅的单因素以及危险因素;评估IL⁃6、TNF⁃α、NO单独及联合检测预测术后桥血管通畅情况的效果。结果IL⁃6、TNF⁃α、NO水平由低到高为:术前<术后6 h<术后即刻,差异有统计学意义(P<0.05)。262例患者中,172例(65.65%)患者OPCAB术后桥血管通畅,90例(34.35%)患者桥血管不通畅。通畅组旁路血管数量、术后再发心绞痛及术前陈旧性心梗例数少于不通畅组,IL⁃6、TNF⁃α、NO水平低于不通畅组,差异有统计学意义(P<0.05)。经二元Logistic回归分析显示:旁路血管数量增多、IL⁃6、TNF⁃α水平升高以及NO水平降低是影响OPCAB术后桥血管通畅的危险因素(P<0.05)。IL⁃6、TNF⁃α、NO联合检测预测OPCAB术后桥血管通畅情况的AUC为0.865,高于三指标单独检测(P<0.05)。结论非体外循环搭桥大隐静脉桥血管顺行序贯中,IL⁃6、TNF⁃α、NO表达水平存在异常改变,三指标联合检测能有效预测OPCAB术后桥血管通畅情况,可为临床评估患者预后提供有力支持。

糖尿病视网膜病变患者SDF-1、HO-1及MDA水平变化及与IL-6、TNF-α、CRP的相关性

目的 分析糖尿病视网膜病变(DR)患者基质细胞衍生因子(SDF-1)、血红素加氧酶-1(HO-1)及丙二醛(MDA)水平变化及与白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、C反应蛋白(CRP)的相关性。方法 选取2020年5月至2023年1月解放军总医院收治的131例DR患者为DR组,另选取同期在本院住院的2型糖尿病患者100例为非DR组。比较两组SDF-1、HO-1、MDA水平;比较两组IL-6、TNF-α、CRP水平;比较不同分期DR患者SDF-1、HO-1、MDA水平;采用Logistic回归分析影响DR发生的相关因素,分析DR组患者SDF-1、HO-1、MDA水平与IL-6、TNF-α、CRP的相关性。结果 DR组SDF-1、HO-1水平比非DR组低,MDA水平比非DR组高,差异有统计学意义(P<0.05);DR组IL-6、TNF-α、CRP水平均比非DR组高,差异有统计学意义(P<0.05);SDF-1、HO-1水平:Ⅰ~Ⅱ期>Ⅲ~Ⅳ期>Ⅴ~Ⅵ期,MDA水平:Ⅰ~Ⅱ期<Ⅲ~Ⅳ期<Ⅴ~Ⅵ期,差异有统计学意义(P<0.05);经Logistic多因素分析显示,性别为女、BMI≥24 km/m2、合并患有高血压、高血脂、IL-6>1.17 mg/mL、TNF-α>30 ng/L、CRP>10 ng/mL、SDF-1>2 ng/mL、HO-1<125 ng/mL、MDA>4.06μmol/mL均是影响DR发生的独立危险因素(P<0.05);血清炎性因子IL-6、TNF-α、CRP与SDF-1、HO-1呈负相关,与MDA呈正相关,且均为中度相关(P<0.05)。结论 SDF-1、HO-1、MDA、IL-6、CRP、TNF-α水平与DR的发生、发展有一定关系,通过检测上述指标水平可为进一步探讨DR的发病机制和治疗方法提供新的思路。

血清IL-6、PCT、TNF-α与GBS感染孕妇不良妊娠结局的关系

目的分析血清白介素-6(IL-6)、降钙素原(PCT)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)与B族链球菌(GBS)感染孕妇不良妊娠结局的关系。方法选取2020年5月至2022年3月于首都医科大学附属北京天坛医院进行产检以及生产的125例GBS感染孕妇为研究对象(GBS组),另选取同期收治的健康产妇100名为对照组。对比GBS组、对照组血清IL-6、PCT、TNF-α水平;比较两组妊娠结局;分析影响GBS感染孕妇不良妊娠结局的单因素;采用多元Logistic回归分析影响GBS感染孕妇不良妊娠结局的危险因素。结果对照组IL-6、PCT、TNF-α水平均低于GBS组,差异有统计学意义(P<0.05);对照组早产、胎膜早破、胎儿窘迫、新生儿GBS感染以及新生儿病理性黄疸的发生率均低于GBS组,差异有统计学意义(P<0.05);经检查、追踪发现,GBS组有37例产妇有不良妊娠结局,88例产妇为正常妊娠结局;不良妊娠结局组与正常妊娠结局组孕周、是否为初产妇等指标比较,差异无统计学意义(P>0.05);两组年龄、GBS感染分级、血清IL-6、PCT、TNF-α水平比较,差异有统计学意义(P<0.05);经多元Logistic回归分析显示:年龄≥35岁、GBS感染分级为GBS带菌或GBS性绒毛膜羊膜炎、IL-6>0.463 ng/L、PCT≥0.5 ng/mL、TNF-α≥30 fmol/mL均是影响GBS感染孕妇不良妊娠结局的危险因素(P<0.05)。结论血清IL-6、PCT、TNF-α水平在GBS感染产妇不良妊娠结局患者中呈升高状态,三指标可作为监测、预防GBS感染产妇不良妊娠结局的重要指标。

黄芩苷对干酵母致热大鼠的解热作用及血清TNF-α、IL-1β、IL-6、PGE_(2)、cAMP和脑组织NF-κB表达的影响

目的:观察黄芩苷对干酵母致热大鼠的解热作用并探讨其作用机制。方法:采用背部皮下注射干酵母构建大鼠发热模型,SD雄性大鼠随机分为正常对照,模型组,阳性组(阿司匹林,0.1 g/kg),黄芩苷高、中、低剂量组(160、80、40 mg/kg),连续给药3 d,测定各组大鼠肛温的变化;酶联免疫法(ELISA)检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、前列腺素E_(2)(PGE_(2))与环磷酸腺苷(cAMP)水平;Western Blot检测各组大鼠脑组织NF-κB p65(核转录因子-κB p65)蛋白表达。结果:黄芩苷高剂量组有显著解热效果(P<0.01),黄芩苷各剂量组均可不同程度降低大鼠血清TNF-α、IL-1β、IL-6、PGE 2和cAMP含量;与正常组比较,模型组脑组织NF-κB p65蛋白表达增多,黄芩苷高剂量组可明显降低大鼠脑组织NF-κB p65表达(P<0.05)。结论:黄芩苷可显著性降低干酵母引起的体温升高,解热机制可能与抑制TNF-α、IL-1β、IL-6、PGE_(2)与cAMP的分泌和减少脑组织NF-κB p65蛋白表达有关。

芪黄疽愈方对ASO大鼠血液流变学和血脂指标及miR-133a、TNF-α表达的影响

目的探讨芪黄疽愈方改善肢体动脉硬化闭塞症(ASO)大鼠血液流变学和血脂指标及miR-133a、TNF-α表达的影响。方法雄性SD大鼠96只饲养1 w,随机选择18只作为空白组,剩余78只采用高脂饮食喂饲联合隐动脉内膜损伤的方法建立大鼠ASO模型,造模成功后随机分为模型组18只,西药组、芪黄疽愈方(中药高、中、低浓度组)各15只,分别给予生理盐水(1 ml/100 g大鼠)、西洛他唑片灌胃治疗(18 mg/kg,1次/d)、芪黄疽愈方相应浓度中药灌胃(1.0、0.5、0.1 ml/100 g体质量),观察一般情况并检测血脂、血流变、miR-133a、炎症细胞因子指标,并进行病理分析。结果空白组毛色光泽,饮食、饮水量正常;与中药组比较,模型组精神萎靡,饮食、饮水量相对减少。中药组随着用药剂量的增加,大鼠恢复正常越显著。空白组内皮细胞层完整,平滑肌层以平滑肌细胞和弹力纤维为主;模型组纤维母细胞大量代替内皮细胞,内膜增厚、部分管腔闭塞,空泡细胞、脂质沉积。中药各浓度组纤维母细胞大量代替内皮细胞,内膜增厚、部分管腔闭塞,空泡细胞、脂质沉积随着中药浓度增加而减少。西药组纤维母细胞大量代替内皮细胞,内膜增厚、部分管腔闭塞,有少量空泡细胞、脂质沉积较少。治疗后,与空白组比较,模型组血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、红细胞聚集指数、低切指数、高切指数显著升高,HDL显著降低(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,高浓度组血清TC、TG、红细胞聚集指数、低切指数、高切指数显著下降(P<0.05,P<0.01)。治疗后模型组TNF-α含量、miR-133a、TNF-αmRNA及蛋白表达水平明显高于空白组(P<0.05,P<0.01),中药高浓度组以上指标显著低于模型组(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,miR-133a与血脂指标(TC、TG、LDL-C),血流变学指标(红细胞聚集指数、低切指数、高切指数及动脉脂肪沉积量)呈正相关(r=0.633、0.732、0.573、0.749、0.764、0.832、0.583;P=0.016、0.002、0.025、0.011、0.003、0.001、0.020)。结论芪黄疽愈方在大鼠ASO模型中具有调节脂质代谢与降低血液黏稠度的作用,从而抑制炎症细胞因子TNF-α表达,也能抑制miR-133a mRNA及蛋白表达,从而起到保护动脉内皮、干预ASO发展进程的作用。

姜黄素对LPS诱导体外巨噬细胞分泌TNF-α影响的meta分析

目的:探讨姜黄素对脂多糖(LPS)诱导巨噬细胞产生细胞因子TNF-α的影响。方法:检索国内外全文数据库有关姜黄素与细胞因子TNF-α浓度关系的文献,检索起止时间均从建库至2023年11月,采用RevMan 5.3分析软件对文献资料进行定量综合。结果:根据文献纳入和排除标准,共纳入8篇相关文献;荟萃分析表明,姜黄素+LPS组与LPS组相比,巨噬细胞产生的TNF-α浓度差异有统计学意义(P<0.05),合并后总体MD值为-506.336,95%CI为(-770.06~-242.66);各研究之间存在较强的异质性,亚组分析发现巨噬细胞种类是异质性重要来源。结论:姜黄素能够抑制激活的巨噬细胞产生炎症因子TNF-α,这可能是姜黄素的抗炎机制之一。

TNF-α通过CXCL10/CXCR3信号通路促进结肠癌细胞上皮间质化的相关分子机制

目的 探讨TNF-α通过调控结肠癌SW480细胞CXCL10/CXCR3轴的表达影响上皮间质化(EMT)及其分子机制。方法 培养人结肠癌SW480细胞,分别通过TNF-α、siRNA-CXCR3处理细胞,将细胞分为对照组(NC组)、TNF-α刺激组(TNF-α组)及TNF-α刺激+siRNA-CXCR3沉默组(TNF-α+si-CXCR3组)。通过Real-time PCR检测各组细胞CXCL10、CXCR3及上皮间质化相关基因的mRNA表达量;Western Blot检测各组细胞CXCL10/CXCR3通路蛋白及上皮间质化相关蛋白表达量的影响;免疫组化检测细胞中上EMT上皮标志物上皮细胞钙粘蛋白(E-cad)与EMT间质标志物波形蛋白(Vimentin)的变化情况;划痕实验检测各组细胞的迁移能力;Transwell实验检测各组细胞的侵袭能力。结果 TNF-ɑ组细胞中通路基因CXCL10、CXCR3的m RNA水平高于NC组,差异有统计学意义(P<0.05),TNF-α+si-CXCR3组细胞中CXCR3水平低于TNF-α组,差异有统计学意义(P<0.05);TNF-ɑ组细胞中CXCL10、CXCR3、Vimentin与Fibronectin的蛋白表达量高于NC组,E-cad的蛋白表达量低于NC组,差异有统计学意义;TNF-α+si-CXCR3组细胞CXCR3、Vimentin与Fibronectin的蛋白表达量低于TNF-ɑ组,E-cad的蛋白水平高于TNF-ɑ组;TNF-ɑ组中Vimentin的表达量高于NC组,E-cad的表达量低于NC组,差异有统计学意义(P<0.05),TNF-α+siCXCR3组中Vimentin的表达量低于TNF-ɑ组,差异有统计学意义(P<0.05),E-cad的表达量高于TNF-ɑ组;TNF-ɑ组迁移能力高于NC组,差异有统计学意义(P<0.05),TNF-α+si-CXCR3组细胞迁移能力低于TNF-ɑ组,差异有统计学意义(P<0.05)。TNF-ɑ组细胞的侵袭能力高于NC组,差异有统计学意义(P<0.05),TNF-α+si-CXCR3组细胞侵袭能力低于TNF-ɑ组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 TNF-α能够诱导结肠癌SW480细胞发生上皮间质化,并促进其迁移、侵袭水平,这一过程可能与激活CXCL10/CXCR3信号通路有关。

帕金森病患者粪便钙卫蛋白和乳铁蛋白水平及其与血清IL-6和TNF-α水平的相关性分析

目的:探讨帕金森病(Parkinson′s disease, PD)患者粪便中钙卫蛋白(calprotectin, CPT)和乳铁蛋白(lactoferrin, LF)的水平,并分析二者与PD临床症状及血清炎性因子的相关性。方法:选择2019年1月至2022年1月于江苏大学第四附属医院神经内科初次就诊的PD患者55例(PD组),另选择同期健康受试者48例(对照组)。收集两组一般资料,检测两组粪便CPT和LF水平以及PD组血清肿瘤细胞坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)水平,对PD组行帕金森病统一评分量表(Unified Parkinson′s Disease Rating Scale, UPDRS)评分。治疗2个月后,再次检测PD组粪便CPT和LF水平,行UPDRS评分。采用Pearson相关系数法分析PD组治疗前后粪便CPT、LF水平和UPDRS评分的相关性。采用受试者工作特征(ROC)曲线评价粪便CPT、LF水平对PD的诊断价值。结果:PD组和对照组一般资料比较差异无统计学意义(P均>0.05)。治疗前,PD组粪便CPT和LF水平显著高于对照组(P均<0.01);治疗后,PD组粪便CPT和LF水平以及UPDRS评分均较治疗前显著降低(P均<0.01)。UPDRS评分与粪便CPT、LF呈正相关(r=0.605,0.619,P均<0.01);ΔUPDRS评分与ΔCPT、ΔLF呈正相关(r=0.735,0.760,P均<0.01)。治疗前PD组粪便CPT、LF水平分别与血清TNF-α、IL-6呈正相关(CPT:r_(TNF-α)=0.689,r_(IL-6)=0.591;LF:r_(TNF-α)=0.673,r_(IL-6)=0.616;P均<0.01)。粪便CPT、LF的ROC曲线下面积分别为0.892,0.874,敏感度分别为89.58%,88.32%,特异度分别为83.29%、74.55%。结论:PD患者粪便中CPT和LF水平升高,其与患者症状评分以及血清TNF-α、IL-6呈一定的相关性。

IL-1β、TNF-α、IL-10在PHN高电压脉冲射频治疗前后变化及预后价值

目的探讨血清白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-10(IL-10)在带状疱疹后遗神经痛(PHN)高电压脉冲射频(PRF)治疗前后变化及预后评估价值。方法选取2020年6月至2023年6月三门峡市中心医院疼痛科收治的142例PHN患者为研究对象,均予以PRF治疗;比较PHN患者治疗前后的血清IL-1β、TNF-α、IL-10水平。对出院后的PHN患者行为期6个月的随访,并根据随访情况分为预后良好组(n=98)和预后不良组(n=44);比较两组的基本资料及实验室指标,以单、多因素Logistic分析治疗前后血清IL-1β、TNF-α、IL-10差值与PHN患者预后的相关性,绘制受试者工作特性曲线(ROC)评估三者联合检测对PHN患者预后的预测价值。结果PHN患者经PRF治疗后的IL-1β、TNF-α水平均低于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05),而PHN患者经PRF治疗后的IL-10水平高于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05)。两组的病程、皮损面积、是否合并糖尿病、是否使用间补救镇痛药物、治疗前后血清IL-1β、TNF-α以及IL-10差值比较差异有统计学意义(P<0.05);多因素分析结果显示合并糖尿病、治疗前后IL-1β、TNF-α以及IL-10差值减少均是影响PHN患者预后的独立危险因素(P<0.05);ROC曲线显示,IL-1β、TNF-α、IL-10三者联合检测曲线下面积0.881,优于单一检测(P<0.05)。结论PHN患者经PRF治疗后,血清中的IL-1β、TNF-α、IL-10水平改善明显,且治疗前后三者的差值对于PHN患者预后风险评估具备较高价值。

“脾肾相赞”理论探讨不同治法对大鼠骨髓间充质干细胞成肌分化中TNF-α、JNK含量影响

目的在“脾肾相赞”理论指导下,比较不同中医治法对大鼠BMSCs成肌分化及过程中TNF-α、JNK蛋白表达的影响,分析中医治疗骨质疏松症的机制。方法将大鼠分为正常组、诱导组、补肾组、健脾组、补肾健脾组(随机数字表法),制备含药血清,选取第4代BMSCs进行实验,运用免疫荧光法分析各组成肌分化情况,酶联免疫吸附法检测TNF-α、JNK蛋白表达量。结果①BMSCs经诱导15d后,通过免疫荧光化学染色法检测MyoG荧光平均强度,结果显示:各组均显著高于正常组(P<0.01),补肾健脾组最高。②TNF-α蛋白检测:补肾组、补肾健脾组显著低于正常组(P<0.01)。③JNK蛋白检测:各组显著低于正常组(P<0.01)。结论①各治法中,补肾健脾法对大鼠BMSCs成肌分化的促进效果最佳,为通过脾肾、肌骨双方向治疗OP提供可能。②各中医治法均对大鼠BMSCs的成肌分化存在促进作用,这可能与降低TNF-α、JNK水平有关。

豪洛捷乳腺结节真空旋切术对乳腺结节患者5-HT MDA及TNF-α的影响

目的:探讨豪洛捷乳腺结节真空旋切术对乳腺结节患者神经递质5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)、丙二醛(Malondialdehyde,MDA)及肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)的影响。方法:回顾性分析择取2020年4月至2023年5月期间,本院收治的乳腺结节患者148例,经纳入、排除标准剔除46例病例,最终纳入102例病例,依据手术方式不同分为对照组(n=50,传统小切口术治疗)及实验组(n=52,豪洛捷乳腺结节真空旋切术治疗)。对比两组手术观察指标、治疗前后5-HT、MDA及TNF-α水平变化、术后恢复良好率、并发症发生率及结节复发率。结果:与对照组相比较,实验组切口长度更短,术后住院天数、失血量更少,手术总时长更短(P<0.05)。治疗前至治疗后3d的5-HT、MDA及TNF-α水平均上升,治疗后3d至治疗后7d的5-HT、MDA及TNF-α水平均下降(P<0.05),且在治疗后1d、3d、7d时,实验组5-HT、MDA及TNF-α水平比对照组低(P<0.05)。对照组、实验组恢复良好率分别为78.00%、92.31%,实验组恢复良好率更高(P<0.05)。两组结节复发率比较,差异无统计学意义(P>0.05),实验组并发症发生率(5.76%)比对照组(20.00%)低(P<0.05)。结论:豪洛捷乳腺结节真空旋切术对乳腺结节患者5-HT、MDA及TNF-α水平影响相对较小,且并发症发生率低,在促进患者术后早期康复中有积极作用。

眠安方对抑郁症睡眠障碍大鼠血清IL-6、IL-1β、TNF-α及海马组织BDNF蛋白表达的影响

目的观察眠安方对抑郁症睡眠障碍大鼠血清白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)、白介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor alpha,TNF-α)及海马脑源性神经营养因子(Brain-derived neurotrophic factor,BDNF)蛋白表达的影响。方法将清洁级雌性大鼠48只按随机数字表法分为模型组、眠安方组、黛力新组、空白组,每组各12只。除空白组外,其他组采用孤养结合慢性温和不可预知应激加快速动眼相睡眠剥夺方法,建立大鼠抑郁症睡眠障碍(Sleep deprivation depression,SDD)模型。采用体质量观察、糖水偏爱实验、旷场实验检测各组大鼠行为学变化指标。酶联免疫吸附测定法(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)测定各组大鼠血清IL-6、IL-1β及TNF-α的含量;蛋白质免疫印迹(Western blot,WB)法检测大鼠海马BDNF蛋白表达。结果行为学测定:造模前各组大鼠体质量、糖水偏爱率、旷场实验得分均无差异(P>0.05);造模及给药后,与空白组比较,模型组、眠安方组、黛力新组大鼠体质量、糖水偏爱率、旷场实验得分均明显下降(P<0.05);与模型组比较,眠安方组、黛力新组大鼠体质量、糖水偏爱率、旷场实验得分均升高(P<0.05)。ELISA法检测结果:大鼠血清IL-6、IL-1β及TNF-α含量与空白组比较,模型组显著升高(P<0.01);与模型组比较,眠安方组、黛力新组均显著降低(P<0.01);与眠安方组比较,黛力新组大鼠血清IL-6、IL-1β的含量组间无差异、TNF-α的含量降低(P<0.05)。WB法检测结果:与空白组比较,模型组大鼠海马BDNF蛋白表达水平降低(P<0.05);与模型组比较,眠安方组、黛力新组海马BDNF蛋白表达水平升高(P<0.05);与眠安方组比较,黛力新组大鼠海马BDNF蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论眠安方可改善SDD模型大鼠的抑郁行为和睡眠障碍,其作用机制可能与降低血清IL-6、IL-1β及TNF-α的含量,上调海马组织BDNF蛋白的含量有关。

槲皮素联合山柰酚抑制TNF信号通路保护大鼠背根神经节细胞免受高糖损伤

目的 探究槲皮素(Quercetin, Que)联合山柰酚(Kaempferol, Kae)对高糖(high glucose, HG)引起大鼠背根神经节(dorsal root ganglion, DRG)细胞氧化损伤及凋亡的保护作用。方法 通过体外培养DRG细胞,CCK-8检测细胞活力,确定糖尿病周围神经病变(diabetic peripheral neuropathy, DPN)体外模型建设条件、Que、Kae和二者组合的最佳给药浓度。DRG细胞分为5组(Con、HG、HG+Que、HG+Kae、HG+Que+Kae),ROS Assay Kit试剂盒和细胞凋亡荧光Hoechst 33342/PI双染试剂盒检测单药或组合药对HG诱导细胞产生ROS的影响和细胞过量凋亡的抑制作用;蛋白印迹法检测细胞死亡受体通路关键蛋白TNFR1、FADD、Caspase-8和Caspase-3的表达水平。结果 HG浓度达到85μM,作用时间24 h,细胞活力降至62%左右,低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);与HG组相比,20μM的Que、5μM的Kae和10μM的Que加5μM的Kae对HG环境中DRG细胞保护性最好,细胞活力最高,差异均有统计学意义(P<0.05);单药或组合药均能降低细胞内ROS水平和抑制DRG细胞过量凋亡,具有抗氧化和抗凋亡作用,组合药优于单药;单药组或组合药组TNFR1、FADD、Caspase-8和Caspase-3的表达水平均低于HG组,其中组合组蛋白水平表达最低,差异有统计学意义(P<0.05),虽然HG+Que组有降低趋势,但是无统计学意义(P>0.05)。结论 Que联合Kae通过抗氧化和抑制细胞死亡受体通路,降低DRG细胞凋亡量,延缓DPN的进展。

基于VEGFA/TNF/IL-6信号通路探讨灵泽片对良性前列腺增生大鼠的治疗作用

目的:基于VEGFA/TNF/IL-6通路探讨灵泽片对良性前列腺增生大鼠的干预机制。方法:将30只SPF级SD大鼠随机等分为空白对照组、模型对照组、灵泽片低剂量组、灵泽片中剂量组、灵泽片高剂量组。除空白对照组外,余各组大鼠采用非去势丙酸睾酮诱导法建立前列腺增生大鼠模型。造模结束后,空白对照组及模型对照组选用生理盐水,灵泽片低、中、高剂量组分别选用相应药物,连续灌胃给药28 d。灌胃结束后处死大鼠,取前列腺组织,观察各组大鼠前列腺指数、组织结构及VEGFA/TNF/IL-6信号通路相关蛋白的变化。结果:与空白对照组比较,模型对照组大鼠前列腺组织增生明显;前列腺指数明显上升(0.84±0.01,P<0.05),组织学观察形态可见前列腺上皮组织厚度扩大和管腔区浸润现象,VEGFA(0.60±0.02,P<0.05)、TNF(0.76±0.02,P<0.05)、IL-6(0.64±0.02,P<0.05)蛋白表达水平显著上升,差异具有统计学意义。与模型对照组比较,灵泽片低剂量组(0.76±0.02,P<0.05)、中剂量组(0.58±0.02,P<0.05)、高剂量组(0.52±0.01,P<0.05)大鼠前列腺指数均有所下降,差异有统计学意义;组织形态可见显著改善,WB结果显示灵泽片干预各组的VEGFA蛋白(低剂量组:0.45±0.01,中剂量组:0.35±0.01,高剂量组:0.31±0.02,各组P均<0.05)、TNF蛋白(低剂量组:0.45±0.01,中剂量组:0.33±0.01,高剂量组:0.27±0.01,各组P均<0.01)、IL-6蛋白(低剂量组:0.44±0.01,中剂量组:0.36±0.01,高剂量组:0.30±0.01,各组P均<0.01)表达水平均有所下降,差异有统计学意义,且改善情况与灵泽片剂量呈正比。结论:灵泽片可能通过负向调控VEGFA/TNF/IL-6信号通路,下调VEGFA/TNF/IL-6蛋白表达水平,调控细胞增殖与凋亡,调节炎症反应,从而发挥对BPH的治疗作用。

SPAG6通过NF-κB/TNF-α途径促进B-ALL细胞增殖和耐药

目的探究精子相关抗原6(sperm-associated antigen 6,SPAG6)对急性B淋巴细胞白血病(B-cell acute lymphoblastic leukemia,B-ALL)细胞增殖及耐药的相关作用机制。方法纳入2019年1月至2023年12月重庆医科大学附属第一医院血液内科收治的56例B-ALL患者和15例缺铁性贫血(iron-deficiency anemia,IDA)患者,将B-ALL患者作为实验组,IDA患者作为对照组。收集B-ALL患者骨髓组织并提取其骨髓单个核细胞,RT-qPCR检测SPAG6的mRNA表达情况并对B-ALL患者进行分层分析,分为新诊断病例组(New-diag)、完全缓解组(complete remission,CR)、微小残留病(minimal residual disease,MRD)阳性组(MRD+)和复发组(Relapse);使用慢病毒感染构建SPAG6基因过表达(SPAG6-OE)和敲低(SPAG6-KD)的B-ALL细胞系,CCK-8和基于甲基纤维素的集落形成实验检测各组细胞的存活、增殖和成集落潜能;CCK-8检测化疗药物柔红霉素(daunorubicin,DNR)和甲氨蝶呤(methotrexate,MTX)处理后细胞存活率(可反映其药物敏感性和IC50);从TARGET数据库获取B-ALL患者的mRNA-seq图谱,通过基因集富集分析(gene set enrichment analysis,GSEA)探索与SPAG6相关的信号通路并进行实验验证;NF-κB激活剂PMA和抑制剂BAY-11-7082作用后,通过CCK-8检测细胞存活率以及对化疗药物的敏感性,Western blot检测通路相关蛋白NF-κB P65、p-NF-κB P65、TNF-α等的表达情况;构建小鼠异种移植瘤模型,-/+敲低SPAG6组腹腔注射生理盐水作为对照组,-/+敲低SPAG6组腹腔注射DNR作为实验组,免疫组化检测NF-κB信号通路在组织中的表达情况。结果B-ALL患者SPAG6 mRNA表达明显高于IDA组(P<0.05),同时与CR组比较,SPAG6高表达于MRD+组(P=0.001)和复发组(P=0.003)。对比不同SPAG6表达水平细胞对化疗药物的反应,CCK-8实验证实SPAG6促进B-ALL细胞增殖(P<0.05),并降低其对DNR和MTX的敏感性(P均<0.05);机制上,GSEA结果提示NF-κB通路在B-ALL富集,实验证实SPAG6通过激活NF-κB/TNF-α通路增强B-ALL细胞对化疗药物的耐药。在体内,敲低SPAG6明显减小小鼠移植瘤体积(P<0.05),并在联合DNR治疗组观察到肿瘤体积额外减小(P<0.05)。此外,免疫组化结果提示联合DNR治疗组NF-κB P65和p-IKBα水平降低。结论SPAG6通过NF-κB/TNF-α通路促进B-ALL细胞增殖,降低其化疗敏感性,提示SPAG6与B-ALL患者的治疗效果和预后密切相关。

D-二聚体、NT-proBNP、TNF-α水平在COPD合并肺心病中的表达及诊断价值

目的分析D-二聚体、B型利钠肽原(NT-proBNP)、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平在COPD合并肺心病患者中的表达及诊断价值。方法选取COPD患者80例,其中42例合并肺心病者为COPD合并肺心病(合并)组,38例未合并肺心病者为单纯COPD组,选择30例健康志愿者为对照组,按照纽约心脏病协会(NYHA)心功能分级标准将患者分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级,对比各组D-二聚体、NT-proBNP、TNF-α表达水平,采用受试者工作特征(ROC)曲线预测D-二聚体、NT-proBNP、TNF-α水平联合对COPD合并肺心病患者的预测价值。结果合并组D-二聚体、NT-proBNP、TNF-α水平均高于对照组、单纯COPD组,且单纯COPD组高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。Ⅳ级组D-二聚体、NT-proBNP、TNF-α水平均高于Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级;Ⅲ级组均高于Ⅰ、Ⅱ级;Ⅱ级组均高于Ⅰ级,差异有统计学意义(P<0.05);经Pearson相关性分析,D-二聚体、NT-proBNP、TNF-α之间呈正相关;D-二聚体、NT-proBNP、TNF-α联合预测的曲线下面积(AUC)显著高于单独预测(P<0.05)。结论COPD合并肺心病患者应用D-二聚体、NT-proBNP、TNF-α检测的临床价值明显,有利于评估患者心功能和肺动脉高压的严重程度,随着心功能恶化和肺动脉高压程度的加重,D-二聚体、NT-proBNP、TNF-α水平均升高。且三者检测方便,对COPD合并肺心病的诊断和病情评估及指导治疗、判断预后都有帮助。

基于生/醋大黄的大承气汤对实热壅滞证胎粪性腹膜炎小鼠血清ET、NO和TNF-α的影响

目的:研究基于生/醋大黄的大承气汤对胎粪性腹膜炎(faecal peritonitis with excessive heat stagnation,ABP)小鼠血清内毒素(endotoxin,ET)、一氧化氮(nitric oxide,NO)和肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor α,TNF-α)的影响。方法:将105只昆明种小鼠按随机数字表法分为生/醋大黄炮制品的大承气汤组(6、10 g/kg)、阳性对照组、空白对照组及模型组,按容积20 mL/kg剂量给药后测定各组小鼠血清ET、NO和TNF-α含量。结果:生/醋大黄炮制品的大承气汤组均能增加实热壅滞证ABP小鼠血清NO含量,降低小鼠血清ET和TNF-α含量。结论:生/醋大黄炮制品的大承气汤对ABP小鼠血清ET、NO和TNF-α含量的影响可能与生/醋大黄炮制方法以及其配伍的厚朴、枳实和芒硝有关。