离心机训练对大鼠脑及其它组织IL-6和TNFα基因表达水平的影响

为了解离心机训练前后大鼠脑及心、肺、肾和小肠组织中IL 6和TNFα基因表达水平的变化 ,对雄性SD大鼠进行动物离心机训练 ,刺激值从 + 7Gz～ + 12Gz ,每天增加 + 0 5Gz ,第 12d重复 + 12Gz刺激 ,第 13d离心机训练后 ,断头处死 ,取心、脑、肺、肾和小肠组织 ,分别提取mRNA并定量 .用地高辛标记IL 6和TNFαcDNA作为探针 ,进行狭缝杂交 ,杂交结果通过光密度扫描定量后 ,进行统计学处理 .离心机训练不同时间 ,比较大鼠各组织IL 6和TNFα基因表达水平的变化 .结果显示随着训练时间的延长 ,表达水平均有所差异 .提示训练对大鼠脑及其它主要组织IL 6和TNFα基因表达水平有影响 。

PLNCX-TNFα基因转染对人胆管癌细胞生长的影响

目的 研究 L NCX- TNFα基因过表达对人胆管癌细胞的作用。方法 构建 L NCX- TNFα复合体 ,培养人胆管癌细胞 ,L NCX- TNFα转染人胆管癌细胞 ,得到稳定表达 ,通过聚合酶链式反应 (PCR)、流式细胞仪 (FCM)、免疫组织化学等方法检测基因表达、细胞生长增殖和细胞凋亡等情况。结果 重组体 L NCX- TNFα基因转染人胆管癌细胞后 ,能抑制细胞的生长和集落形成 ;流式细胞技术证实 ,L NCX- TNFα能诱导细胞发生凋亡并导致其发生 G1 期阻滞 ,G2 - M期和 S期比例明显下降 ,凋亡细胞数也明显增加。结论 TNFα基因通过诱导肿瘤细胞发生凋亡并导致其发生 G1 期阻滞在肿瘤基因治疗方面发挥作用。

变应性鼻炎与肿瘤坏死因子水平及肿瘤坏死因子TNFα-238G/A基因多态性的关系

目的探讨肿瘤坏死因子TNFα-238G/A基因多态性与变应性鼻炎的关系。方法用酶免法测定TNF水平,运用多聚酶链反应技术检测52例变应性鼻炎及89例正常人肿瘤坏死因子TNFα-238G/A基因多态性。结果变应性鼻炎组TNFα-238G/A、G/G、A/A表型频率分别为:0.7885、0.2115、0,对照组分别为0.9551、0.0449、0;变应性鼻炎组TNFα-238G、TNFα-238A基因频率分别为0.8679、0.1321。对照组分别为0.8679、0.0225,肿瘤坏死因子TNFα-238G/A各种基因型频率在患者组与正常对照组之间的差异有显著性(p<0.05),而血浆中TNF水平,变应性鼻炎组明显高于对照组,两组之间比较差异有显著性意义(p<0.05)。结论血清TNF水平显著升高,提示炎性反应在变应性鼻炎病程中有重要作用,肿瘤坏死因子TNFα-238G/A基因多态性与变应性鼻炎有明显相关。

人PSP94与TNFα衍生物联合治疗人前列腺癌的实验研究

构建了表达人 PSP94、TNFα衍生物 ( TNFα D1 1 a)及 PSP94与 TNFα D1 1 a( PSP94- TNFαD1 1 a)双功能蛋白真核表达质粒 pc DNA- TNFα D1 1 a、pc DNA- PSP94和 pc DNA- PSP94- TNFαD1 1 a,与 rh PSP94和 rh TNFα D1 1 a蛋白分别在人前列腺癌裸鼠移植瘤动物模型上进行了 PSP94与 TNFαD1 1 a联合治疗人前列腺癌的实验研究 .当动物肿瘤直径长至约 1 0 mm时 ,将以上 3种真核表达质粒分别以 50 μg/只的量给相应组动物的左右四头肌内注射一次 ,同时设 pc DNA3.0空载体对照组 ;rh PSP9450μg/kg、rh TNFαD1 1 a 1 0 0万单位 /kg、rh PSP94和 rh TNFαD1 1 a以同样剂量联合给药 ,肌肉注射 ,每 d一次 ,连续 1 0 d,同时设环磷酰胺阳性对照组和生理盐水阴性对照组 .基因治疗动物给药后第 1 5d处死 ,蛋白治疗组停药后第 2 d处死 ,观察疗效 ,计算抑瘤率 .结果显示 ,以上述方式给药 ,无论是基因治疗组还是重组蛋白组 ,给 PSP94的动物肿瘤虽然未见明显缩小 ,但肿瘤组织均出现不同程度的坏死和液化现象 ;给 TNFαD1 1 a的未见明显的抑瘤效果 ;PSP94-TNFαD1 1 a融合基因或 rh PSP94+ rh TNFαD1 1 a联合给药 ,不仅肿瘤有所缩小 ,而且也有不同程度的坏死和液化现象出现 .初步认为 :( 1 )

TNFα-308G/A位点基因多态性与糖尿病性牙周炎易感性的相关性研究

目的:探讨肿瘤坏死因子-α(TNFα)基因多态性与糖尿病性牙周炎(DP)易感性的相关性。方法:电子检索MEDLINE、Web of Science、CNKI、万方以及中国生物医学文摘数据库自建库至2016-04收录的所有文献,从中收集TNFα-(308G/A)位点基因多态性与DP易感性的相关研究并进行meta分析。同时采用病例对照研究进行验证:分别收集慢性牙周炎(CP)患者(60例)、健康对照者(N)(56例)、2型糖尿病(T2DM)患者(58例)、DP患者(60例)的血液样本并采用DNA测序法检测其TNFα-(308G/A)位点的基因型。随后采用χ~2检验分析基因型和等位基因频率在各组间分布的差异,并应用非条件Logistic回归分析计算风险比(OR)及95%可信区间(95%CI),以评估各基因型与DP发病风险的相关性。结果:meta分析结果显示,TNFα-(308G/A)位点多态性可能是汉族人群DP易感性的相关因素。病例对照研究结果显示,TNFα-(308G/A)位点的3种基因型(GG、GA、AA)及等位基因(G、A)频率在各组间的分布均有统计学差异(P<0.05);携带A等位基因的人群患DP的风险明显增加(OR=5.074,95%CI:1.857~13.868,P=0.002),而且携带GA基因型的人群患DP的风险显著高于携带GG基因型的人群(OR=5.637,95%CI:1.949~16.301,P=0.001)。结论:汉族人群中TNFα-(308G/A)位点基因多态性可能是DP易感性的相关因素。

肿瘤坏死因子α基因(TNFα)-G308A多态性与精神分裂症的关联

目的 :探讨肿瘤坏死因子α基因 (TNFα) -G3 0 8A多态性与精神分裂症的关系。方法 :收集14 1个核心家系 ,每家有 1名符合ICD -10精神分裂症诊断标准的患者 ,患者的生物学父母均健在 ;用聚合酶链式反应 -限制性片段长度多态性 (PCR -basedRFLP)分析方法检测所有研究对象的TNFα -G3 0 8A基因型。结果 :传递不平衡检验 (TDT)显示等位基因的传递具有统计学显著性差异 ( χ2TDT=7 70 44 ,P =0 0 0 5 )。结论 :肿瘤坏死因子α基因 (TNFα) -G3 0 8A多态性与精神分裂症相关联 ,支持肿瘤坏死因子α基因(TNFα)是精神分裂症的候选基因。

受体介导TNFα基因转移的实验研究

目的检测受体介导基因转移人肿瘤坏死因子α基因的靶向性和表达效率。方法人转铁蛋白同多聚赖氨酸共价交联，盐键合成交联蛋白和外源基因质粒的超分子复合物，对表达转铁蛋白受体的肿瘤细胞株进行β－半乳糖苷酶和人肿瘤环死因子α基因转移。结果检测到外源基因表达；转染人肿瘤坏死因子α基因后细胞上清液检测到一过性人肿瘤坏死因子α活性升高。结论受体介导基因转移具有良好的靶向性，但表达效率低。

幽门螺杆菌感染患者血清IL-8和TNFα的水平变化及临床意义探讨

目的 监测幽门螺杆菌 (Helicobacterpylori,HP)感染患者血清白细胞介素 8(IL 8)和肿瘤坏死因子α(TNFα)的变化规律 ,探讨HP的致病机制。方法 用胃镜检查尿素酶试验、蛋白印迹法对HP进行定性分析、分组 ,酶联免疫吸附试验 (ELISA)检测IL 8、TNFα的表达水平。结果 高毒力型HP感染组患者血清IL 8、TNFα水平与低毒力型HP感染组、HP阴性组相比差异有显著性 (P <0 .0 1) ,HP感染者血液IL 8和TNFα呈正相关。结论 高毒力型HP的感染是IL 8和TNFα升高的主要因素 ,表明IL 8和TNFα在胃。

葡萄膜炎与肿瘤坏死因子TNFα-238G/A基因多态性的关系初步探讨

目的探讨肿瘤坏死因子(TNF)α-238G/A基因多态性与葡萄膜炎的关系。方法运用多聚酶链反应技术检测33例葡萄膜炎及103例正常人TNFα-238G/A基因多态性。结果葡萄膜炎组TNFα-238G/G、G/A、A/A表型频率分别为:0.9394、0.0606、0,对照组分别为:0.9515、0.0485、0;葡萄膜炎组TNFα-238G、TNFα-238A基因频率分别为:0.9697、0.0303,对照组分别为:0.9757、0.243;TNFα-238G/A各种基因型频率在患者组与正常对照组之间的差异无统计学意义(P>0.05)。结论 TNFα-238G/A基因多态性与葡萄膜炎无明显相关。

葡萄膜炎与肿瘤坏死因子TNFα-1031 T/C基因多态性的关系

目的探讨肿瘤坏死因子TNFα-1031基因多态性与葡萄膜炎的关系。方法运用多聚酶链反应技术检测33例葡萄膜炎及119例正常人肿瘤坏死因子TNFα-1031G/A基因多态性。结果葡萄膜炎组肿瘤坏死因子TNFα-1031 T/T、T/C、C/C表型频率分别为:0.5455、0.4545、0,对照组分别为0.5799、0.4117、0.0084;葡萄膜炎组TNFα-1031 T、TNFα-1031 C基因频率分别为:0.7727、0.2273,对照组分别为0.7857、0.2143,肿瘤坏死因子TNFα-1031G/A各种基因型频率在葡萄膜炎组与正常对照组之间的差异无显著性(P>0.05)。结论肿瘤坏死因子TNFα-1031G/A基因多态性与葡萄膜炎无明显相关。

IL-2-TNFα融合基因与B7.1基因联合修饰的肿瘤的疫苗作用

目的 改进基因修饰的肿瘤细胞疫苗的效力。方法 在小鼠乳腺癌细胞系EMF6 和一个已被含有IL - 2和TNFα融合基因的逆转录病毒载体XdF转染的EMF6 亚系 (T2 -EMF6)中表达B7 1基因。结果 免疫 /侵袭实验表明 ,与单基因转导的肿瘤细胞相比 ,IL - 2-TNFα/B7 1共同修饰的肿瘤细胞具有较低的致瘤性和较优的疫苗效力 (P <0 0 5)。在各种肿瘤细胞的免疫接种后三周 ,进行混合淋巴细胞培养实验和51 Cr释放实验来检测动物的细胞免疫活性 ,IL - 2 -TNFα和B7 1共同作用诱导了比其中的任意一个单独作用更强的抗肿瘤应答 (比IL - 2 -TNFα高 2 5% ,比B7 1高 2 0 % )。结论 IL - 2 -TNFα和B7 1协同作用可提高他们所修饰的肿瘤细胞的疫苗效力。

变应性鼻炎与肿瘤坏死因子水平及TNFα-850 C/T基因多态性的关系

目的探讨肿瘤坏死因子水平及TNFα-850C/T基因多态性与变应性鼻炎的关系。方法用放免法测定TNF水平,运用多聚酶链反应技术检测90名无亲缘关系的尘螨变应性鼻炎患者和107名无血缘关系的健康汉族人肿瘤坏死因子TNFα-850C/T基因多态性。结果变应性鼻炎组肿瘤坏死因子TNFα-850 C/C、T/C、T/T表型频率分别为:0.7445、0.2333、0.0222,对照组分别为0.7850、0.1963、0.0187;变应性鼻炎组TNFα-850 C、TNFα-850T基因频率分别为:0.8611、0.1389,对照组分别为:0.8832、0.1168;TNFα-850C/T各种基因型频率在变应性鼻炎组与正常对照组之间差异无统计学意义(P>0.05)。而血浆中TNF水平,变应性鼻炎组明显高于对照组,两组之间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论血清TNF水平显著升高,提示炎性反应在变应性鼻炎病程中有重要作用,肿瘤坏死因子TNFα-850C/T基因多态性与变应性鼻炎无明显相关。

动脉硬化性脑梗塞与TNFα-238G/A基因多态性的关系的初步探讨

目的初步探讨肿瘤坏死因子(TNFα)-238G/A基因多态性与动脉硬化性脑梗塞的关系。方法运用多聚酶链反应技术检测57例动脉硬化性脑梗塞及103例正常人TNFα-238G/A基因多态性。结果动脉硬化性脑梗塞组TNFα-238G/G、G/A、A/A表型频率分别为0.8596、0.1404、0,对照组分别为0.9612、0.0388、0;动脉硬化性脑梗塞组TNFα-238G、TNFα-238A基因频率分别为0.9298、0.0702,对照组分别为0.9806、0.0194,TNFα-238G/A各种基因型频率在患者组与正常对照组之间的差异有统计学意义(P<0.05)。结论TNFα-238G/A基因多态性与动脉硬化性脑梗塞可能相关。

TNFα-850C/T基因多态性与儿童哮喘相关性的初步探讨

目的探讨肿瘤坏死因子TNFα-850C/T基因多态性与儿童哮喘的关系。方法运用多聚酶链反应技术检测100例儿童哮喘及100例正常人肿瘤坏死因子TNFα-850C/T基因多态性。结果儿童哮喘组肿瘤坏死因子TNFα-850C/C、T/C、T/T表型频率分别为:0.7100、0.2700、0.02,对照组分别为0.7900、0.1900、0.020;儿童哮喘组TNFα-850T、TNFα-863C基因频率分别为:0.8450、0.1550,对照组分别为:0.8850、0.1150;TNFα-850C/T各种基因型频率在儿童哮喘组与正常对照组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论肿瘤坏死因子TNFα-850C/T基因多态性与儿童哮喘无明显相关。

变应性鼻炎与肿瘤坏死因子TNFα-308G/A基因多态性的关系

目的探讨肿瘤坏死因子TNFα-308G/A基因多态性与变应性鼻炎的关系。方法运用多聚酶链反应技术检测66例变应性鼻炎及103例正常人(对照组)肿瘤坏死因子TNFα-308G/A基因多态性。结果变应性鼻炎组肿瘤坏死因子TNFα-308G/G、G/A、A/A表型频率分别为0.7424、0.1970、0.0606;对照组分别为0.7961、0.1650、0.0388。变应性鼻炎组TNFα-308G、TNFα-308A基因频率分别为0.8485、0.1515;对照组分别为0.8786、0.1214。肿瘤坏死因子TNFα-308G/A各种基因型频率在患者组与正常对照组之间的差异无统计学意义(P>0.05)。结论肿瘤坏死因子TNFα-308G/A基因多态性与变应性鼻炎无明显相关。

原发性肝癌基因治疗研究—含人TNF基因重组逆转录病毒转移系统的构建与表达

将人ＴＮＦα基因克隆到重组逆转录病毒载体ｐＲＵＦｎｅｏ，构建了含人ＴＮＦ基因重组逆转录病毒载体ＲＵＦ－ＴＮＦ。将ＲＵＦ－ＴＮＦ转染包装细胞ＦｌｙＡ１３，经药物筛选获得稳定分泌含人ＴＮＦ基因重组逆转录病毒的细胞株ＦｌｙＲＵＦＮ１４。ＦｌｙＲＵＦＮ１４产生的病毒上清液能直接转染靶细胞Ｓａｏｓ－２。本研究建立的逆转录病毒介导的ＴＮＦ基因转移系统为肝癌及其他恶性肿瘤的基因治疗提供了条件。

TNFα对NIH／3T3细胞、肝贮脂细胞增殖及前胶原表达的影响

ＴＮＦα系单核－巨噬细胞产生的细胞因子，具有明确促进纤维母细胞增殖的作用，但对胶原产生的影响文献报道不尽相同。本文研究并比较了重组ＴＮＦα对ＮＩＨ／３Ｔ３细胞及大鼠肝贮脂细胞增殖，Ⅰ、Ⅲ型前胶原基因表达的影响，结果发现ＴＮＦα具有促进上述两种细胞增殖作用，且具剂量依赖性。原位杂交显示，在单个细胞水平，ＴＮＦα可抑制或降低Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ水平的表达。本研究提示肝贮脂细胞与纤维母细胞类似，接受ＴＮＦα调控，ＴＮＦα在肝纤维化始动激活及调控中具重要作用。

IL-6表达增高及TNFα下调参与bcl-2反义寡脱氧核苷酸诱导的细胞凋亡的调控

目的 探讨 bcl- 2反义硫代磷酸寡脱氧核苷酸 (antisense phosphorothioateoligodeoxynucleotide,AS- PS- ODN)诱导细胞凋亡的调控机理。方法 合成 bcl- 2 AS- PS- ODN作用于小细胞肺癌细胞株 NCI- H44 6 ,流式细胞仪 DNA倍体分析和脱氧核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法检测细胞凋亡 ;多重半定量逆转录 -聚合酶链反应检测 bcl- 2 AS- PS- ODN处理前后 bcl- 2、c- myc、survivin、bax、s10 0 A2 、TNFα、TGFβ1及 IL- 6等基因 m RNA表达的变化。结果 bcl- 2 AS- PS- ODN能够诱导 NCI-H44 6细胞凋亡 ,随着 bcl- 2 m RNA水平的下降 ,IL- 6表达增高 72 .71% (P<0 .0 5 ) ,TNFα表达下调6 5 .90 % (P<0 .0 5 ) ,而 c- myc、survivin、bax、s10 0 A2 、TGFβ1等基因的表达无明显变化。结论 IL- 6表达增高及 TNFα下调参与 bcl- 2反义寡脱氧核苷酸所诱导的细胞凋亡的调控。

卵巢癌中CD44nm23基因及细胞因子TGFαTNFα表达的研究

目的 探讨细胞表面粘附分子CD44基因、肿瘤转移抑制基因nm2 3、转化生长因子α(TGFα)、肿瘤坏死因子α(TNFα)与卵巢癌发生、转移和预后的关系。方法 利用PCR半定量、免疫组化及放免法分别测定 36例卵巢癌及 32例卵巢良性肿瘤的CD44基因内含子 9、肿瘤转移抑制基因nm2 3、转化生长因子α和肿瘤坏死因子α的表达情况。结果 CD44基因内含子 9、nm2 3、TGFα、TNFα在 36例卵巢癌中均出现高表达 ,nm2 3和TGFα在癌症早期阶段即出现高表达。结论 多相关因素分析卵巢癌的生物学行为 ,可为卵巢早期诊断。

pEgr-TNFα质粒的构建及基因-放射治疗小鼠黑色素瘤的实验研究

目的 研究pEgr TNFα重组质粒的构建及其联合放射治疗抑制小鼠黑色素瘤的效果和对免疫系统的影响。方法 将TNFαcDNA插入pcDNA3.1质粒的多克隆位点 ,用Egr 1的启动子替代pcDNA3.1质粒的CMV启动子 ,构建成pEgr TNFα重组质粒 ;建立小鼠B16黑色素瘤动物模型 ,肿瘤局部注射脂质体包裹的质粒 ,在不同时间测量肿瘤体积 ,并检测照后 15d部分免疫学指标。结果 pEgr TNFα基因 放射联合治疗后第 3～ 15天 ,肿瘤生长速率明显低于单纯照射组、单纯基因治疗组和空质粒对照组。小鼠脾脏NK细胞毒活性、IL 2分泌活性、腹腔巨噬细胞TNFα和IL 1β活性均明显高于单纯放疗组。结论 pEgr TNFα基因 放射联合治疗抗肿瘤作用明显优于单纯放疗组和单纯基因治疗组 ,同时可以减轻放疗对机体免疫功能的损伤。