二亚硝基哌嗪对转基因小鼠TNF受体相关因子2和p16的表达

目的研究二亚硝基哌嗪(N,N′-dinitrosopi- perazine,DNP)对TgN(p53mt-LMP1)/HT小鼠鼻腔和鼻咽黏膜上皮细胞增殖与TNF受体相关因子2(TNF receptor-associated Factor 2,TRAF2)、p16基因表达的影响及两者关系。方法HE染色法观察转基因小鼠组(TC)、转基因小鼠DNP诱导组(T1)和野生小鼠组(CC)、野生小鼠DNP诱导组(CI)鼻腔和鼻咽黏膜上皮细胞增殖特征;免疫组织化学染色法检测小鼠鼻腔和鼻咽黏膜上皮组织中TRAF2、p16基因的表达水平。结果TI、TC、CI和CC组小鼠鼻腔或鼻咽黏膜上皮癌前病变率分别为90%、10%、0和0。与TC、CI和CC组相比,TI组TRAF2基因表达水平显著增高(P<0.01),而p16基因表达水平显著降低(P<0.01);TRAF2和p16基因表达水平在TC和CC组之间的差异亦有统计学意义(P<0.01)。结论TgN(p53mt-LMP1)/HT小鼠鼻腔和鼻咽黏膜上皮细胞增殖活性增加,DNP可提高其增殖活性,而细胞增殖活性增加与TRAF2基因表达水平上调和p16基因表达水平下调密切相关。

CD137-CD137L信号通路通过活化TNF受体相关因子6促进小鼠动脉粥样硬化斑块内血管新生

目的探讨CD137-CD137L信号通路是否通过活化TNF受体相关因子6(TRAF6)促进粥样硬化斑块内血管新生。方法将小鼠内皮细胞(bEnd.3)和小鼠主动脉环分别分为对照组(培养基中加入10μg/L TNF-α)、IgG同型对照组(培养基中加入10μg/L TNF-α+5 mg/L IgG2b)和CD137刺激组(培养基中加入10μg/L TNF-α+5 mg/L CD137抗体)。利用转染小干扰RNA(siRNA)技术抑制内皮细胞和主动脉环TRAF6基因表达,将内皮细胞和主动脉环分别分为对照siRNA组(转染对照siRNA)和TRAF6 siRNA组(转染TRAF6 siRNA)。分别采用Western blot和实时荧光定量PCR(qPCR)检测内皮细胞和主动脉环TRAF6、血管内皮生长因子(VEGF)、Smad1/5蛋白和mRNA的表达;采用Transwell迁移实验检测内皮细胞的迁移能力;内皮细胞管腔形成实验检测内皮细胞的管腔形成能力;主动脉环血管新生实验检测主动脉环新生微血管形成能力。结果CD137刺激组内皮细胞和主动脉环TRAF6、VEGF蛋白和mRNA表达水平均高于对照组和IgG同型对照组(均P<0.05)。与对照siRNA组比较,TRAF6 siRNA组内皮细胞和主动脉环TRAF6、Smad1/5蛋白和mRNA表达水平明显降低,内皮细胞迁移数量减少,内皮细胞小管长度和分支数量降低,主动脉环新生微血管数量减少(均P<0.05)。结论CD137-CD137L信号通路可能通过TRAF6促进小鼠动脉粥样硬化斑块内血管新生。

肿瘤坏死因子受体相关因子3调控STING/IFN-I信号通路改善狼疮肾炎足细胞损伤的机制研究

目的 探讨肿瘤坏死因子受体相关因子3(tumor necrosis factor receptor associated factor 3,TRAF3)对IgG诱导的人肾足细胞(human podocyte cell,HPC)凋亡和炎症的影响及机制。方法 体外培养HPC,用狼疮肾炎(lupus nephritis,LN)患者的纯化IgG诱导HPC细胞24 h营造炎症环境,将细胞分为对照组、IgG-LN组、IgG-LN联合siRNA组、IgG-LN联合si-TRAF3组、IgGLN联合STING抑制剂H-151(1μmol/L)组、 IgG-LN联合si-TRAF3和STING激活剂ADUS100(10μmol/L)组。CCK-8实验用于检测HPC细胞活力;流式细胞术检测HPC细胞凋亡;RTPCR用于检测各组HPC细胞中IFN-α mRNA水平;ELISA法检测各组HPC细胞中IFN-α、IL-6、IL-1β和TNF-α分泌水平;Western Blot法检测TRAF3和STING蛋白的表达;Co-IP实验验证TRAF3和STING的相互作用。结果 TRAF3沉默抑制IgG诱导的HPC细胞凋亡和炎症因子分泌(P<0.01)。TRAF3通过与STING结合抑制IgG诱导的HPC细胞中STING/IFN-I通路活化(P<0.01)。STING/IFN-I通路抑制改善IgG诱导的HPC细胞凋亡和炎症因子分泌(P<0.01)。STING/IFN-I通路活化可逆转TRAF3沉默对HPC细胞凋亡和炎症的缓解作用。结论 TRAF3沉默可抑制STING/IFN-I活化改善LN患者血清IgG诱导的HPC细胞凋亡和炎症反应。

氯喹通过阻断肿瘤坏死因子受体相关因子3自噬性降解抑制类风湿关节炎滑膜细胞活化

目的本研究探讨氯喹对类风湿关节炎滑膜细胞活化的抑制作用及其分子机制。方法TNF-α预刺激MH7A细胞建立类风湿关节炎滑膜细胞活化模型,检测氯喹对MH7A细胞增殖、促炎因子IL-6和CXCL10,以及对基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)MMP-2和MMP-9的影响。检测氯喹对MH7A细胞肿瘤坏死因子受体相关因子3(TNF receptor associated factor 3,TRAF3)表达和自噬的影响,采用siRNA干扰TRAF3表达,并采用自噬诱导剂雷帕霉素诱导细胞自噬,研究TRAF3在氯喹抑制滑膜细胞活化中的作用及其机制。结果氯喹有效抑制了MH7A滑膜细胞增殖,减少了IL-6和CXCL10分泌,并降低了MMP-2和MMP-9表达。氯喹不上调TRAF3表达,但可增加TRAF3蛋白含量,并介导了氯喹对滑膜细胞活化的抑制。氯喹可抑制细胞自噬,而雷帕霉素可降低TRAF3的蛋白水平,并拮抗氯喹对滑膜细胞活化的抑制。结论氯喹可通过抑制自噬性降解,增加细胞内TRAF3蛋白含量,并通过TRAF3抑制类风湿性关节炎滑膜细胞异常活化。

补体C1q肿瘤坏死因子相关蛋白1与代谢综合征

代谢综合征是心血管多种危险因素在个体内集聚的状态,多数标准中的代谢异常指标包括肥胖,尤其是腹型肥胖、2型糖尿病、胰岛素抵抗、血脂异常、高血压、冠心病、非酒精性脂肪肝、低度炎性反应等。既往研究发现,脂肪组织不但是机体能量的储存器官,还是重要的内分泌器官,可分泌一系列细胞因子,其中包括多种脂肪因子,且这些脂肪因子参与体内的物质代谢及免疫反应。补体C1q肿瘤坏死因子相关蛋白（CTRP1）是新近发现的脂肪因子,

MyD88通路关键因子IRAK1、IRAK4和TRAF6在尖锐湿疣组织中的表达

目的观察尖锐湿疣患者皮损组织中MyD88通路关键因子白介素-1受体相关激酶-1(IRAK1)、白介素-1受体相关激酶-4(IRAK4)和肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)的表达。方法选取60例尖锐湿疣患者作为观察组,60例正常包皮环切者作为对照组,免疫组化法检测皮损组织中MyD88通路关键因子IRAK1、IRAK4和TRAF6的表达水平,并进行临床分析。结果IRAK1、IRAK4和TRAF6在观察组中普遍呈高表达,所占比例分别为80%、83.3%和91.7%,对照组中无表达或呈低表达,所占比例分别为96.7%、98.3%和100%,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论尖锐湿疣患者皮损组织中MyD88通路关键因子IRAK1、IRAK4、TRAF6的表达显著高于正常对照组。

RNAi TRAF4表达对直肠癌细胞凋亡及Wnt信号通路相关蛋白表达影响

目的探讨RNA干扰(RNAi)肿瘤坏死因子受体相关因子4(TRAF4)表达对直肠癌细胞凋亡及Wnt信号通路相关蛋白表达的影响。方法将TRAF4的siRNA转染人直肠癌SW1463细胞(TRAF4-siRNA组),并设置阴性对照组(NC组)及空白组。收集转染48h的3组细胞,通过Western blotting方法检测3组细胞中TRAF4的蛋白表达,流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率及活性氧簇(ROS)含量,Western blotting检测凋亡蛋白survivin、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和Wnt信号通路相关蛋白β-连环蛋白(β-catenin)和细胞周期素D1(cyclin D1)的蛋白表达。结果 TRAF4-siRNA组TRAF4的蛋白表达显著低于空白组(t=7.926,P<0.05),NC组TRAF4蛋白表达与空白组差异无统计学意义(t=0.634,P>0.05);与空白组比较,TRAF4-siRNA组细胞凋亡率显著升高(t=14.992,P<0.05),ROS含量显著上升(t=5.717,P<0.05),survivin、β-catenin和cyclin D1的蛋白表达显著降低(t=5.437~9.344,P<0.05),Bax的蛋白表达显著升高(t=7.399,P<0.05)。结论抑制直肠癌细胞中TRAF4基因表达可诱导细胞凋亡及下调Wnt信号通路。

鼻型结外NK/T细胞淋巴瘤与EB病毒感染的相关性

目的检测鼻型结外NK/T细胞淋巴瘤(ENKTCL)组织EB病毒(EBV)感染情况,以及EBV基因型别和LMP1编码基因的变异情况,初步探讨ENKTCL的发生与EBV感染的相关性。方法采用原位杂交技术检测75例ENKTCL组织标本中EBER1的转录,筛选鉴定出EBV阳性标本;PCR技术检测EBV 1/2分型,PCR结合限制性片段长度多态性(RFLP)分析检测EBV C/D分型和F/f分型;PCR技术检测LMP1缺失型和野生型基因。结果 75例瘤组织中有67例ERER1阳性,阳性率为89.3%。56例EBV阳性标本的EBV基因分型结果:1型80.4%,2型19.6%;F型87.5%,f型12.5%;C型66.1%,D型33.9%。48例EBV阳性肿瘤组织标本中,野生型8例(16.7%),缺失型40例(83.3%)。结论本地区ENKTCL存在高水平EBV感染;肿瘤组织中感染的EBV的主要基因型别为1型、F型和C型;LMP1基因缺失型可能在ENKTCL的发生中发挥重要作用。

肿瘤坏死因子α诱导蛋白3相互作用蛋白1调控核因子κB信号通路在IDH野生型胶质瘤中的作用机制

目的探讨肿瘤坏死因子α诱导蛋白3相互作用蛋白1(TNIP1)调控核因子κB(NF-κB)信号通路在IDH野生型胶质瘤中的作用机制。方法使用CGGA和TCGA数据库确定TNIP1在IDH野生型胶质瘤中的表达和预后价值。用特定的siRNA敲低了N33细胞中的TNIP1表达,并分析细胞的增殖和迁移能力。通过免疫沉淀分析TNIP1与TNF受体相关因子6(TRAF6)相互作用及其对TRAF6的泛素化影响。分别将空载体、oe-TNIP1或si-TNIP1转染的U87细胞注射到裸鼠的大脑中,并通过BLI方法监测肿瘤生长情况。结果TNIP1表达与IDH野生型神经胶质瘤的较高恶性等级和较差的预后有关,但与IDH突变型神经胶质瘤无关。TNIP1敲低显著减弱了N33细胞的增殖和迁移(P<0.05)。TNIP1与TRAF6相互作用,并且可以诱导TRAF6蛋白的去泛素化以激活NF-κB。与空载体的异种移植物相比,oe-TNIP1的异种移植物显示出加速肿瘤进展,而si-TNIP1的异种移植物则相反。结论TNIP1可以诱导TRAF6蛋白的去泛素化以激活NF-κB,进而促进IDH野生型胶质瘤的恶性进展。

姜黄素对THP-1细胞Toll样受体4信号传导通路中相关因子mRNA水平的影响

目的 研究姜黄素对人单核细胞株THP-1 Toll样受体4（TLR4）信号传导通路中相关因子mRNA水平的影响.方法 用不同浓度姜黄素（50、25、12.5 mg/L）预处理THP-1细胞12 h,0.043 mg/L地塞米松处理组作为阳性对照,继而用1 mg/L脂多糖（LPS）刺激诱导细胞4 h,以不做处理的THP-1作为阴性对照,仅用1 mg/L LPS刺激的THP-1作为LPS刺激组.提取细胞总RNA,用RT-PCR方法检测TLR4信号传导通路中TNF受体相关因子（TRAF）6、IL-1受体相关激酶（IRAK1）、核因子κB（NF-κB）mRNA的表达情况.结果 未经处理的THP-1细胞经LPS刺激4 h,可以显著提高TRAF6、IRAK1、NFκB mRNA的表达,与阴性对照组比较,t值分别为38.69、39.13、23.99（P〈0.01）. 50、25 mg/L姜黄素可以明显抑制THP-1细胞经LPS诱导后TRAF6、IRAK1、NF-κB mRNA的表达（P值均〈0.01）,抑制率均在50%以上.结论 一定浓度的姜黄素可以抑制LPS诱导后THP-1细胞TRAF6、IRAK1、NF-κB mRNA的表达,表明姜黄素对TLR4信号传导通路中相关因子mRNA水平有调节作用.

阿霉素对心肌肌醇依赖酶l-JNK通路的影响

目的探讨肌醇依赖酶l(IRE1)-JNK通路是否参与阿霉素致心力衰竭(HF)效应的作用。方法阿霉素(adriamycin,Adr)致HF大鼠作为Adr组(n=15),同龄健康大鼠作为对照组(n=10);将乳鼠心肌细胞随机分为对照组和Adr组(1umol/L)。心脏超声后,流式细胞仪和蛋白印迹等分别检测细胞凋亡率(AR)、IRE 1、X盒结合蛋白1(XBP l)、TNF受体相关因子2(TRAF 2)、c-Jun凋亡信号调节激酶(ASK1)和JNK等的表达。结果 1.Adr在体成功构建HF模型,而体外干预显著增加心肌细胞AR(P<0.001);2.不管在体内抑或在体外,Adr组IRE1α和p-IRE1α水平均显著高于相应对照组(P<0.001);3.与相应对照组相比,Adr组XBP l蛋白均显著上调(P<0.001);4.体内和体外Adr组TRAF 2蛋白的表达显著高于相应对照组(P<0.001);5.Adr组ASK1、p-ASK1和磷酸化水平(即p-ASK1与总ASK1比值)显著高于相应对照组(P<0.001);6.不管在体内抑或在体外,Adr组JNK1/2、p-JNK1/2蛋白和其磷酸化水平(p-JNK1/2与总JNK1/2比值)均显著高于相应对照组(P<0.001)。结论 Adr通过肌醇依赖酶l(IRE1)-ASK-JNK内质网通路介导其致心肌毒性并进而促发HF。

心力衰竭发病机制研究新进展

心力衰竭（HF）是由于心脏收缩功能和（或）舒张功能发生障碍,不能将静脉回心血量充分排出心脏,导致静脉系统血液淤积,动脉系统血液灌注不足,从而引起心脏循环障碍症候群,此种障碍症候群集中表现为肺淤血、腔静脉淤血。HF发病机制较复杂,涉及不同的途径和病理过程。近年来一些基础的动物实验和临床研究对HF发病机制进行探讨。

银杏叶总黄酮对缺氧条件下大鼠星型胶质细胞活力、细胞凋亡率及IPS-1/TRAF6信号通路的影响

目的:探讨银杏叶总黄酮对缺氧条件下大鼠星型胶质细胞活力、细胞凋亡率及干扰素β启动子刺激因子1(IPS-1)/肿瘤坏死因子TNF受体相关因子6(TRAF6)信号通路的影响。方法:设立大鼠星型胶质细胞对照组(培养环境为20%O2、5%CO2、75%N2)、缺氧组(培养环境为1%O2、5%CO2、94%N2)、银杏叶总黄酮低、中、高剂量组(终浓度100,200,400μg·ml^-1)。培养结束后,测定各组细胞活力、凋亡水平、细胞周期、IPS-1、TRAF6 mRNA和蛋白水平。结果:与对照组比较,缺氧组光密度(OD)值、存活率水平显著降低(P<0.05),凋亡率、G1期水平、IPS-1、TRAF6 mRNA和蛋白水平显著升高(P<0.05);与缺氧组比较,银杏叶总黄酮各剂量组OD值、存活率水平显著升高(P<0.05),凋亡率、G1期水平、IPS-1、TRAF6 mRNA和蛋白水平显著降低(P<0.05);且各指标变化与银杏叶总黄酮浓度呈正相关(P<0.05)。结论:银杏叶总黄酮能提高缺氧条件下大鼠星型胶质细胞活力、抑制其凋亡;其机制与银杏叶总黄酮抑制星型胶质细胞IPS-1、TRAF6 mRNA和蛋白表达水平有关。

IRAK1/TRAF6通路在急性髓系白血病发生发展中的作用机制研究

目的探讨白细胞介素-1受体相关激酶(IRAK1)/肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)通路影响急性髓系白血病(AML)发生发展的作用机制。方法选取54例AML患者为研究对象(AML组),30例于本院治疗的缺铁性贫血患者作为对照组,分离所有受试者骨髓单核细胞;体外常规培养人AML细胞系HL-60、KG-1、U937和人正常单核细胞系THP-1;将HL-60细胞分为空白组(转染Lipofectamine 3000试剂)、阴性对照(NC)组(转染空质粒)、IRAK1短发夹RNA(IRAK1 shRNA)组(转染IRAK1 shRNA);实时荧光定量PCR(qPCR)法检测单核细胞及不同细胞系各组中IRAK1、TRAF6 mRNA表达水平;CCK-8法检测各组细胞增殖抑制率;流式细胞术检测各组细胞凋亡率;蛋白免疫印迹法检测各组细胞β-连环蛋白(β-catenin)、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)及IRAK1/TRAF6通路蛋白表达水平。结果与对照组比较,AML组单核细胞中IRAK1、TRAF6 mRNA表达水平显著升高(P<0.05)。与THP-1细胞比较,KG-1、U937、HL-60细胞中IRAK1、TRAF6 mRNA表达水平显著升高,且HL-60细胞最高(P<0.05)。与空白组和NC组比较,IRAK1 shRNA组细胞增殖抑制率、凋亡率及Bax蛋白表达显著升高,IRAK1 mRNA、TRAF6 mRNA、β-catenin、CyclinD1、Bcl-2、磷酸化-IRAK1(p-IRAK1)/IRAK1、TRAF6、核因子-кB(NF-кB)蛋白表达显著降低(P<0.05)。结论IRAK1/TRAF6通路与AML的发生发展有关,抑制IRAK1/TRAF6通路可抑制人AML细胞系HL-60增殖,促进其凋亡,IRAK1/TRAF6可能是AML治疗的潜在靶点。

MicroRNA-146在糖尿病心肌病中的调控作用

目的:探讨微小RNA-146 (miR-146)在糖尿病心肌病(DCM)发病机制中的作用,观察miR-146及其下游靶基因表达水平的变化。方法:60只雄性C57BL/6小鼠随机分为实验(DCM)组和对照(control)组,每组30只,实验组采用低剂量(50 mg/kg链脲佐菌素(STZ)腹腔注射诱导建立糖尿病心肌病模型,对照组给予等量枸橼酸钠缓冲液腹腔注射,建模12周后取心脏做HE和Masson染色观察心脏病理改变,RT-qPCR检测miR-146 a和miR-146b及其下游靶基因白细胞介素-1受体相关激酶1(IRAK1)和TNF受体相关因子6(TRAF6)的mRNA表达,Western blot检测IRAK1和TRAF6的蛋白表达。结果:12周末HE染色显示,DCM组心肌肥大,结构紊乱;Masson染色显示,DCM组心肌内胶原纤维增多;RT-qPCR检测结果显示,DCM组中miR-146a及miR-146b较control组表达明显减少(P <0. 01),IRAK1的mRNA水平明显增高(P <0. 01),而TRAF6的mRNA水平下降(P <0. 01);Western blot检测结果显示DCM组的IRAK1蛋白表达增加,TRAF6的蛋白表达降低(P <0. 01)。结论:miR-146可能通过调节IRAK1介导的炎症反应参与糖尿病心肌损伤的发生发展。

THA术后外周血TLR4、TRAF6、IL-1β表达与DVT的相关性分析

目的探讨全髋关节置换(THA)术后外周血Toll样受体4(TLR4)、TNF受体相关因子6(TRAF6)、白介素-1β(IL-1β)表达与下肢深静脉血栓形成(DVT)的相关性。方法纳入自2015-03—2017-04接受治疗的136例THA患者进行研究,术后进行彩色多普勒超声检查确诊是否发生血栓,分为血栓组与正常组。比较两组患者一般资料及外周血TLR4、TRAF6、IL-1β浓度。结果 THA术后共44例(32.4%)出现DVT,血栓组年龄>50岁、全身麻醉的比例高于正常组,差异有统计学意义(P<0.05)。血栓组外周血TLR4、TRAF6、IL-1β水平均高于正常组,且随着DVT严重程度增加而逐渐升高,差异有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性分析显示外周血TLR4、TRAF6、IL-1β与THA术后DVT严重程度呈正相关。多因素Logistic回归分析结果显示高龄、全身麻醉、外周血TLR4、TRAF6、IL-1β水平升高是THA术后发生DVT的独立危险因素。结论 THA术后TLR4、TRAF6、IL-1β水平升高与DVT相关。对于年龄>50岁、全身麻醉下THA手术且术后外周血TLR4、TRAF6、IL-1β水平明显升高者应提前做好预防措施,降低DVT发生的风险。

Toll样受体信号传导通路下游分子单核苷酸多态性与类风湿关节炎易感基因的关联

目的观察Toll样受体（TLRs）信号传导通路下游分子单核苷酸多态性与类风湿关节炎（RA）易感性的关联。方法对350例中国北方汉族人群髓样分化因子88（Myd88）的rs7744位点，肿瘤坏死因子受体相关因子（TRAF）6的rs5030445位点，白细胞介素（IL）一6R的rsll265618、rs4845626位点进行基因分型，其中RA组162例，健康对照组188名，并对2组间各位点基因型频率及等位基因频率进行r检验。结果TRAF6rs5030045、IL．6Rrsll265618等位基因频率在2组之间的差异有统计学意义坼值分别为5．716、5．700，P〈0．05），基因型频率差异均无统计学意义（P〉O．05）。Myd88rs7744、IL．6Rrs4845626基因型频率、等位基因频率在2组之间的差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论TRAF6、IL一6R单核苷酸多态性与RA易感性相关，TRAF6rs5030045位点G等位基因可能为RA的保护性基因，IL-6Rrsll265618位点T等位基因可能为RA易感基因。

去势抵抗性前列腺癌患者血清TRAF6、CGRP水平与骨转移及预后的关系

目的:探讨TNF受体相关因子6(TNF receptor-associated factor 6,TRAF6)、神经元降钙素基因相关肽(neuronal calcitonin gene-related peptide,CGRP)与老年去势抵抗性前列腺癌患者骨转移以及预后的关系分析。方法:选择2020年01月至2023年01月我院收治的157例老年去势抵抗性前列腺癌患者(前列腺癌组)和101例健康志愿者(对照组),根据是否发生骨转移分为骨转移(84例)和非骨转移组(73例)。检测血清TRAF6、CGRP水平,出院后随访去势抵抗性前列腺癌患者生存情况。结果:前列腺癌组血清TRAF6、CGRP水平高于对照组(P<0.01)。Gleason评分≥8分、TNM分期Ⅲc-Ⅳb期去势抵抗性前列腺癌患者血清TRAF6、CGRP水平高于Gleason评分<8分、TNM分期Ⅲa-Ⅲb期期患者(P<0.05)。骨转移组血清TRAF6、CGRP水平高于非骨转移组(P<0.01)。Kaplan-Meier生存分析显示高TRAF6水平组、高CGRP水平组OS生存率低于低RAF6水平组、低CGRP水平组(P<0.05)。多因素COX回归分析结果显示TNM分期Ⅲc-Ⅳb期、骨转移、高水平TRAF6、高水平CGRP是去势抵抗性前列腺癌患者预后的危险因素(P<0.05)。结论:老年前列腺癌患者血清TRAF6、CGRP水平增高与前列腺癌恶性临床病理特征、骨转移和不良预后有关,可作为骨转移和预后评估的标志物。

颅底脊索瘤原发和局部复发阶段的病理学变化特点及其预后意义

目的探讨颅底脊索瘤在原发和局部复发阶段的临床病理学特点及变化趋势,进而分析其与患者预后的关系。方法采用自身前后对照的方法,回顾性收集2005年2月至2014年12月首都医科大学附属北京天坛医院神经外科收治并经病理学确诊的38例(89例次)颅底脊索瘤原发及局部复发肿瘤的组织样本。苏木素-伊红染色后分析核异型性、核分裂、基质比例、坏死、骨质侵袭以及病理亚型等病理学特点;采用免疫组织化学染色检测p53、Ki-67、EGFR、VEGFR、TRAF6的表达水平,比较原发及局部复发颅底脊索瘤不同阶段病理指标的变化;采用单因素和多因素Cox回归分析原发肿瘤中各病理指标的特点对患者无进展生存期的影响;单因素Cox回归分析复发肿瘤中各病理指标的变化对患者总生存期的影响。结果38例患者中,28例经典型脊索瘤复发后,其中有10例(35.7%)病理亚型转变为去分化型,而6例软骨型脊索瘤复发后均未转化为去分化型。有31.6%(12/38)的肿瘤复发后出现坏死;在73.5%(25/34)的原发肿瘤中TRAF6呈高表达;50.0%(19/38)的肿瘤复发后TRAF6表达强度下调;p53、EGFR在肿瘤复发过程中分别有42.1%(16/38)和39.5%(15/38)表达上调。单因素和多因素Cox回归分析结果显示,原发肿瘤中存在坏死(HR=7.1,95%CI:1.4~37.1,P=0.006)、去分化型(HR=3.9,95%CI:1.2~7.2,P=0.040)及TRAF6≥3级(HR=0.2,95%CI:0.1~0.5,P<0.001)可影响患者的无进展生存期,其中TRAF6≥3级(HR=0.2,95%CI:0.1~0.5,P<0.010)是患者无进展生存期的独立保护因素。上述病理指标的变化趋势对肿瘤复发患者总生存期的影响差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论经典型脊索瘤局部复发后可向恶性程度更高的去分化型发生恶性转化,未发现软骨型脊索瘤复发后发生恶性转化的情况。TRAF6随着肿瘤复发其表达强度逐渐减低,其在原发肿瘤中的高表达是患者无进展生存期的独立保护因素。

TRAF1在霍奇金淋巴瘤细胞中的表达和作用机制的探讨

目的探讨肿瘤坏死因子受体相关因子（TRAF）1以及CD30-TRAF1信号通路在B细胞性霍奇金淋巴瘤细胞中的作用。方法分别采用荧光定量RT—PCR和Westernblot法检测B细胞性霍奇金淋巴瘤细胞株TRAF1mRNA和蛋白质表达水平，并进一步研究CD30信号活化对TRAF1表达的作用。采用RNA干扰技术研究TRAF1沉默对霍奇金淋巴瘤细胞存活的影响，并通过TransAM方法定量分析核转录因子（NF）-κB的DNA结合活性的变化。通过Westernblot法测定NAPK／ERK信号通路中JunB蛋白的表达。结果B细胞性霍奇金淋巴瘤细胞株IA28和KM—H2细胞中TRAF1在mRNA和蛋白质水平均表达。CD30配体作用后IA28细胞中TRAF1mRNA相对表达水平自3．50±0．20上调至7．26±0．23；蛋白相对表达水平自2．31±0．35上升至4．53±0．55。TRAF1沉默后凋亡细胞百分率由（5．7±1．2）％上升至（27．7±5．8）％，并伴随p50和RelA活力的下降。JunB的表达在TRAF1沉默细胞中未发生明显变化。结论TRAF1在B细胞系来源的霍奇金淋巴瘤细胞中表达增加，并受到CD30信号通路活化的调控。TRAF1为介导经典性NF—κB活性的关键性调节分子，参与霍奇金淋巴瘤细胞的抗凋亡活性。