腹腔内注射TNF基因转染的LAK细胞对于腹水型肝癌小鼠的疗效

在逆转录病毒介导下将TNF基因转染入鼠LAK细胞中,结果发现,转染TNF基因的LAK细胞比正常LAK细胞和转染对照基因的LAK细胞分泌更高水平的TNF,其体外生长能力和杀伤活性均显著升高,抗TNF单抗可显著抑制其体外杀伤活性,表明其杀伤活性升高是由基因转染后所表达的TNF介导的.将较低数量的TNF基因转染的LAK细胞与IL～2联合腹腔内注射后,对腹水型肝癌小鼠有显著的治疗效果.

静脉输注转TNF基因的舌癌DNL细胞在动物体内的分布

目的 :探讨静脉输注TNF α基因修饰的舌癌DNL在舌癌动物模型体内的分布规律。方法 :用氚标胸腺嘧啶核苷 (3 HTdR)标记TNF α基因修饰的舌癌DNL ,经尾静脉输入人舌癌 (Tca8113细胞 )原位移植模型体内 ,分别检测注射后 5min、6、12、2 4、48、168h肿瘤组织及各脏器单位质量的放射活性 (衰变率 ,DPM )。结果 :输注后 5minDNL细胞大部分见于肺 ,6h单位质量DPM值脾最高 ,其次是肝、肺 ;2 4h由高到低依次是 :脾、肺、肝 ;12h瘤体单位质量DPM值是外周血的 3～ 4倍。结论 :人舌癌DNL可能对人舌癌病灶有一定的靶向聚集作用 ,是基因治疗较为理想的效应细胞。

湖北地区汉族人群TNF基因多态性分布研究

目的 :了解TNF α和TNF β基因多态性在湖北地区汉族人群中的分布特点。方法 :应用聚合酶链反应限制性片段长度多态性法(PCR RFLP)检测 2 1 5例正常汉族人TNF α和TNF β基因型并与其它种族和地区的分布进行比较。结果 :TNF α基因型以TNF α1 /1型最为多见(8 7.0 % ) ,而TNF β基因型以TNF β1 / 2型出现频率最高 ( 5 0 .7% )。二种基因多态性分布在男女间均无显著差异 (P >0 .0 5 )。与其它种族和地区比较 ,发现不同种族和不同地区间TNF α和TNF β基因型分布及等位基因频率均存在显著差异 (P <0 .0 5 )。结论 :在湖北地区汉族人群中存在TNF基因多态性 ,但在不同种族和不同地区间分布有明显的差异 ,这种差异可能是导致一些疾病在不同种族、不同地区间的发生、转归和预后不同的遗传因素之一。

肿瘤的放射线诱导性TNF基因疗法的实验研究

目前多数肿瘤患者在病程的不同时期因不同的目的需要接受放射治疗，但当放射剂量达到可使肿瘤细胞全部死亡的剂量值时，往往已大大超过正常组织细胞的耐受量，可见寻找降低放射剂量，提高放疗效果的方法是很有实际应用价值的。考虑到①TNF本身(尤其是瘤体内局部注射后)有比较显著的抗肿瘤作用；

重组腺病毒介导的TNF基因转染对巨噬细胞功能影响

肿瘤坏死因子(TNF)是迄今为止所发现的抗肿瘤作用最强的一种生物活性因子。它除了直接的杀伤或抑制肿瘤细胞外还介导单核／巨噬细胞发挥强有力的细胞毒效应。但TNF的半衰期短且毒负作用严重。已有学者研究了逆转录病毒介导的TNF基因转染TIL的抗肿瘤作用。

原发性肝癌基因治疗研究—含人TNF基因重组逆转录病毒转移系统的构建与表达

将人ＴＮＦα基因克隆到重组逆转录病毒载体ｐＲＵＦｎｅｏ，构建了含人ＴＮＦ基因重组逆转录病毒载体ＲＵＦ－ＴＮＦ。将ＲＵＦ－ＴＮＦ转染包装细胞ＦｌｙＡ１３，经药物筛选获得稳定分泌含人ＴＮＦ基因重组逆转录病毒的细胞株ＦｌｙＲＵＦＮ１４。ＦｌｙＲＵＦＮ１４产生的病毒上清液能直接转染靶细胞Ｓａｏｓ－２。本研究建立的逆转录病毒介导的ＴＮＦ基因转移系统为肝癌及其他恶性肿瘤的基因治疗提供了条件。

TNF基因转染增强人胶质瘤细胞对LAK细胞杀伤敏感性及其细胞表面ICAM—1分子的持续表达

脑胶质瘤因其发生部位——中枢神经系统缺乏淋巴组织，且可分泌免疫抑制因子如TGF-β使其免疫治疗显得十分困难。为了探索脑胶质瘤有效的免疫治疗途径．本文研究了经脂质体途径将TNF-α基因转染入胶质瘤细胞U251-SP后其表面粘附分子表达的变化及其对免疫效应细胞LAK细胞杀伤敏感性的影响。

系统性红斑狼疮患者中TNF基因多态性与其肺炎易感性相关

美国加利福尼亚大学的Lindsey A CrisweI及其同事在Arthritis Rheum上报告，在系统性红斑狼疮（SLE）患者中，肿瘤坏死因子（TNF）基因的某些多态性在肺炎商风险的患者似乎更常见。 研究者认为，SI点的一个明显特征是感染并发症的高发生率和严重性。该研究强调了TNF基因以及可能的其他基凶对确定哪些狼疮患：蕾对这种严重并发症特别易感的可能作用。

应用TNF基因转染细胞进行的肿瘤实验性免疫疗法(英文)

基因修饰的肿瘤细胞所分泌的TNF(肿瘤坏死因子)能够主要通过诱导机体的抗肿瘤免疫反应而使机体产生强大的抗肿瘤免疫功能,这一效应的发挥需要肿瘤局部TNF的持续的存在并具有剂量依赖性,同时不应伴有全身性毒副作用.在体内,分泌TNF的肿瘤细胞局部浸润的细胞主要是巨噬细胞及CD4^+和CD8^+T淋巴细胞,由于在有效的抗肿瘤免疫反应中必需巨噬细胞及CD8^+T细胞的参与,CD4^+T细胞似为无辜旁观者细胞.肿瘤细胞所分泌的TNF在T细胞缺陷鼠中也有一定作用,但大多数资料表明T细胞对于肿瘤细胞的完全清除是必需的.根据所选择的肿瘤细胞类型及转染细胞所分泌的TNF水平,TNF所引起的实验动物全身性毒副作用包括恶液质及消瘦、部分体内实验结果表明,TNF基因转染的肿瘤细胞不仅不能抑制肿瘤细胞的生长,反而会促进肿瘤的转移.将TNF基因转染的肿瘤细胞制备的瘤苗也不能使机体对亲本肿瘤的侵袭产生保护性免疫反应.

TNF基因多态性与SLE患者对肺炎的易感性相关

加利福尼亚大学的Lindsey A．Criswell博士及其同事在8月的《关节炎和风湿病》（Arthritis Rheum，2007，56：2679—2686）杂志上报道，在系统性红斑狼疮（SLE）患者中，肿瘤坏死因子（TNF）基因的某些多态性在有肺炎高风险的患者似乎更加常见。

类风湿性关节炎患者TNF基因多态性表达及意义的初步探讨

目的 探讨肿瘤坏死因子 (TNF) -α基因多态性与类风湿性关节炎 (RA)的相关性。方法 采用等位基因特异引物多聚酶链反应 (PCR)方法对 3 4例RA患者与 3 5例对照组的TNFα -3 0 8位基因进行TNF1 和TNF2 基因型检测 ,并采用ELISA法检测其血清中TNFα的含量。结果 RA患者TNF2 的基因型分布以TNF2 为主 ( 5 2 9%) ,正常对照组的基因型分布以TNF1 为主 ( 68 6%) ,两者有显著性差异 ( χ2 =2 7 71,P <0 0 1)。RA患者血清中TNFα含量明显高于正常对照组 (P <0 0 1) ,不同TNF基因表型的RA患者血清中TNFα含量有显著性差异 (F =3 2 60 ,P <0 0 1) ,TNF2 及杂合型基因表型RA患者血清中TNFα含量明显高于TNF1 者。结论 TNFα -3 0 8的基因多态性直接影响着TNF分泌 。

TNF基因多态性对多器官功能障碍综合征发病及血必净治疗的影响

多器官功能障碍综合征（MODS）是严重损伤、感染和病理产科等原发病发生24h后，同时或序贯地发生两个或两个以上器官功能失常以致衰竭的临床综合征。它具有发病急、进展快、病死率高的特点，和机体炎介质过度表达、分泌、宿主抗炎介质或内源性抑制因子产生异常以及不同人群遗传因素有关。对MODS治疗的关键在于早期干预，应当针对促炎、抗炎介质平衡失调开展工作。

转基因人肝癌细胞株(BEL 7404/TNF)的建立及其生物活性的初步研究

目的 :研究转基因肝癌细胞和其来源肝癌细胞株的生物学特性的差异。方法 :构建含人肿瘤坏死因子α基因 ( TNFα基因 )的重组逆转录病毒载体 ,将其导入人肝癌细胞株 BEL 74 0 4。通过 MTT比色法测定比较转基因肝癌细胞株及未转基因肝癌细胞株的生物活性。结果 :成功建立转基因肝癌细胞株。MTT比色法测定结果表明转基因的肝癌细胞株生长速度显著减慢。结论 :TNF基因转入肝癌细胞后 。

造血干细胞移植供者TNF-α基因多态性在GVHD中的频率分析

探讨供者肿瘤坏死因子α(TNF α)基因多态性在重度急性移植物抗宿主病 (aGVHD)和广泛型慢性移植物抗宿主病 (cGVHD)中的作用。本研究应用变性高效液相色谱结合DNA测序检测了TNF α 30 8和TNF α 2 38基因在重度aGVHD和广泛型cGVHD的分布。结果表明 ,2 1例Ⅲ度 /Ⅳ度aGVHD病人中有 8例呈现TNF α 30 8(G/A)阳性 ,而2 8例 0度 /Ⅰ度aGVHD病人中仅 1例呈现TNF α 30 8(G/A)阳性 ,提示TNF α 30 8(G/A)在Ⅲ度 /Ⅳ度aGVHD中的频率明显高于 0度 /Ⅰ度aGVHD的病人 (P <0 .0 1)。在 2 3例广泛性cGVHD病人中有 7例呈现TNF α 30 8(G/A)阳性 ,而17例未发生cGVHD的病人中仅 1例呈现TNF α 30 8(G/A)阳性 ,提示TNF α 30 8(G/A)在广泛性cGVHD中的频率高于未发生cGVHD的病人 (P <0 .0 5 )。在 2 1例Ⅲ度 /Ⅳ度aGVHD和 2 8例 0度 /Ⅰ度aGVHD及 2 3例广泛性cGVHD及17例未发生cGVHD的病人中均有 1例呈现TNF α 2 38(G/A)阳性 ,提示TNF α 2 38(G/A)在上述各组病人间的频率无明显差异。结论 :TNF α 30 8(G/A)阳性与Ⅲ度

PLNCX-TNFα基因转染对人胆管癌细胞生长的影响

目的 研究 L NCX- TNFα基因过表达对人胆管癌细胞的作用。方法 构建 L NCX- TNFα复合体 ,培养人胆管癌细胞 ,L NCX- TNFα转染人胆管癌细胞 ,得到稳定表达 ,通过聚合酶链式反应 (PCR)、流式细胞仪 (FCM)、免疫组织化学等方法检测基因表达、细胞生长增殖和细胞凋亡等情况。结果 重组体 L NCX- TNFα基因转染人胆管癌细胞后 ,能抑制细胞的生长和集落形成 ;流式细胞技术证实 ,L NCX- TNFα能诱导细胞发生凋亡并导致其发生 G1 期阻滞 ,G2 - M期和 S期比例明显下降 ,凋亡细胞数也明显增加。结论 TNFα基因通过诱导肿瘤细胞发生凋亡并导致其发生 G1 期阻滞在肿瘤基因治疗方面发挥作用。

局灶性脑缺血预处理对大鼠NF-κB表达及其靶基因TNFαmRNA转录的影响

目的 观察局灶脑缺血预处理对核因子 -κB(NF-κB)及其靶基因肿瘤坏死因子α(TNFα) m RNA表达的影响 ,并初步探讨二者在诱导脑缺血耐受中的意义。方法 SD大鼠随机分为 3组 ,对照组给予两次相隔 3 d的假手术 ,其余两组分别在 2 h大脑中动脉缺血 (MCAO)及 2 2 h再灌注前 3 d给予 10 min的缺血预处理 (PC)或假手术 ,采用免疫组织化学和逆转录 -多聚酶联反应 (RT-PCR)技术比较各组 NF-κB及 TNFα的表达。结果 预缺血组NF-κB的表达和 TNFα的 m RNA转录水平均低于假手术组 (P<0 .0 1)。结论 10 m in MCAO预处理可有效抑制NF-κB的激活和 TNFα的基因转录 ,NF-κB活化减少以及由此所致的 TNFα表达下调可能是局灶性脑缺血发生耐受的分子机制之一。

实时荧光定量RT-PCR法检测TNF-α mRNA基因表达

目的建立实时荧光定量反转录聚合酶链反应(reverse transcription po lym erase cha in reaction,RT-PCR)法检测TNF-α基因mRNA表达。方法用T-A克隆技术构建含TNF基因的载体作为标准模板,采用荧光T aqm an方法及探针标记技术,建立实时荧光定量RT-PCR方法,制备标准曲线,检测肿瘤患者与正常人外周血单个核细胞的TNF-αmRNA表达水平变化,并与半定量RT-PCR检测结果进行比较。结果实时荧光定量RT-PCR检测肿瘤患者外周血单个核细胞TNF-αmRNA表达明显高于正常人,且半定量RT-PCR结果显示TNF-α出现类似的变化趋势。结论所建立的实时荧光定量RT-PCR用于检测TNF-αmRNA表达,结果用拷贝数表示,比半定量RT-PCR更灵敏、准确。

TNFα基因转染的肿瘤细胞抗肿瘤转移作用的探讨

肿瘤瘤苗进行的主动性免疫治疗是一条较为理想的治疗途径，近几年发展起来的细胞因子基因转染的肿瘤细胞瘤苗，开创了肿瘤主动免疫治疗的新时代。肿瘤细胞靶向的TNFα基因治疗开展得较早，TNFα基因转染的肿瘤细胞的体内致瘤性显著下降，但是对于此肿瘤细胞制备成瘤苗对已发生的肿瘤能否具有抗肿瘤转移作用尚未见报道。