TNF家族新成员TALL-1的研究进展

TALL 1是TNF家族中广泛参与了T、B淋巴细胞的增殖及功能调节的一个新成员。本文就TALL 1的结构及功能特点 ,TALL 1在相关疾病 (如免疫功能低下、某些自身免疫性疾病及某些肿瘤等 )发生中的作用 ,以及TALL

TNF家族成员TALL-1及其研究进展

TALL 1是TNF家族成员中最近发现的一个新型细胞因子 ,由单核细胞和巨噬细胞产生 .人TALL 1由2 85个氨基酸残基组成 ,而鼠TALL 1由 30 9个氨基酸残基构成 ,两者均为Ⅱ型穿膜蛋白质 .人sTALL 1是长为15 2个氨基酸残基的胞外区片段 ,对应于C端 134～ 2 85位氨基酸残基 .重组人sTALL 1具有刺激B细胞增殖、激活NF κB和JNK以及抑制肿瘤细胞生长等生物学活性 .另外 ,TALL 1在转基因鼠中的过量表达可引起严重的B细胞增生以及与狼疮有关的自身免疫性疾病 .因此 ,TALL

三种TNF家族细胞因子对I型糖尿病相关胰岛β细胞株CM的作用

目的：研究三种TNF细胞因子家族成员TRAIL、FasL、LIGHT对糖尿病相关胰岛β细胞株CM的作用。方法：利用Annexin V-FTTC法及流式细胞仪技术分析CM对3种能引起Apoptosis的TNF家族成员RTAIL、FasL、LIGHT的敏感性。结果：CM对TRAIL极为敏感，用5ng/ml TRAIL与CM细胞孵育4h就能引起CM细胞产生明显的凋亡，而对FasL、LIGHT不敏感。结论：CM对RTAIL十分敏感，TRAIL有可能在I型糖尿病致病中起作用，是否起到关键作用，有待进一步研究。

程序性死亡因子-1、程序性死亡配体-1、TNF家族B细胞活化因子-R在弥漫性大B细胞淋巴瘤组织中的表达

目的 分析程序性死亡因子-1(programmed death factor-1,PD-1)、程序性死亡配体-1(programmed death-ligand-1,PDL1)、TNF家族B细胞活化因子-R(B cell-activating factor-R belonging to the TNF family,BAFF-R)在弥漫大B细胞淋巴瘤组织中的差异性表达及临床意义。方法 以延安大学附属医院血液科2019年1月至2020年4月初诊的28例弥漫性大B细胞淋巴瘤组织及瘤旁组织样本作为研究对象,采用免疫组化法检测其PD-1、PD-L1及BAFF-R表达,然后统计分析PD-1、PD-L1及BAFF-R表达与病人临床病理特征的关系。结果 弥漫性大B细胞淋巴瘤组织PD-1、PD-L1及BAFF-R阳性表达积分分别为(5.44±0.79)、(5.58±0.86)及(4.49±0.65)分,瘤旁组织PD-1、PD-L1及BAFF-R阳性表达积分分别为(3.31±0.35)、(3.25±0.34)及(2.77±0.27)分,差异有统计意义(P<0.05);淋巴瘤组织PD-1表达差异与临床病理特征差异无统计学意义(P>0.05);淋巴瘤组织PD-L1表达与Ann Arbor/Costwards分期、病理分型及EBV是否阳性差异有统计意义(P<0.05);淋巴瘤组织BAFF-R表达与Ann Arbor/Costwards分期、病理分型、IPI评分及EBV是否阳性差异有统计意义(P<0.05)。结论 PD-L1及BAFF-R在弥漫性大B细胞淋巴瘤组织中呈高表达,且与弥漫性大B细胞淋巴瘤分期、病理分型及EBV感染密切相关,二者联合检测对病人预后评估可能具有较高价值;对难治性弥漫大B细胞淋巴瘤而言,以PD-L1及BAFF-R的信号通路为靶点,是潜在的免疫治疗方案。

鼠TNF家族的B细胞活化因子ORF基因的克隆及原核表达

目的克隆鼠TNF家族的B细胞活化因子(Bcell activating factor of TNF family,BAFF)ORF基因,并进行原核表达及纯化。方法提取鼠新鲜脾脏组织总RNA,经RT-PCR扩增BAFF ORF基因,测序后,克隆入载体pMAL-c2x,构建重组表达质粒pMAL-c2x/BAFF ORF,转化大肠杆菌Rosseta(DE3),IPTG诱导表达,表达产物经亲和层析纯化后,进行Western blot分析。结果 RT-PCR扩增得到约930bp的cDNA,其序列与GenBank中登录的鼠BAFF ORF cDNA序列的同源性达99.9%;重组表达质粒pMAL-c2x/BAFF ORF经酶切鉴定构建正确;表达的重组蛋白相对分子质量约为76500,IPTG终浓度为0.9mmol/L,诱导时间为4h,目的蛋白的表达量最高,破菌上清和沉淀中均可见目的蛋白条带,可溶性蛋白的表达量占全菌总蛋白的49%;纯化的重组蛋白纯度可达90%,含量为0.9mg/ml,且具有良好的反应原性。结论已成功克隆了鼠BAFF ORF基因,并进行了原核表达及纯化,为进一步研究其生物功能奠定了基础。

肿瘤坏死因子受体（TNFR）超家族三聚体

肿瘤坏死因子受体（TNFR）超家族的信号转导系统依赖于三聚配体复合物结构的形成，该复合物能激活受体，引起系列生化反应。复合物中几种TNF家族成员与其同源受体的结构表明，每种三聚配体与三种单体受体链相互作用。近期有文章分别报道了利用小分子激动剂和拮抗剂靶向作用于TNFR超家族成员的一种新方法。

TNF配体家族的新成员——RANKL的研究进展

RANKL是最近发现的TNF配体家族成员,它在破骨细胞的形成、分化、激活和存活等各个阶段中都发挥着重要作用,是影响破骨细胞性骨疾病的关键性因子。表达于口腔环境中的RANKL对牙萌出、牙槽骨吸收和牙周病等的发生发展具有调控作用。

胞内接头蛋白TRAFs家族

肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)受体相关因子(receptor-associated factor,TRAF)家族是一类胞内接头蛋白,能介导TNF受体和Toll-like/IL-1受体超家族成员与多种下游信号通路包括NF-κB (nuclear factorκB)和JNK(Jun N-terminal kinase)的信号传导。TRAF蛋白家族参与调控细胞增殖、分化乃至凋亡等生理过程。由于其在信号通路中的关键作用,TRAFs蛋白的失调与多种疾病的发生相关。本文结合最新的研究进展对TRAFs蛋白家族在信号传导通路中的地位进行介绍,并探讨了TRAFs及其相关蛋白在临床上可能的应用前景。

归脾汤对化疗肌无力大鼠抗炎机制的实验研究

目的:结合课题组前期网络药理学及生物信息学分析结果,探讨归脾汤改善化疗肌无力的抗炎机制。方法:选取40只SPF级雄性SD大鼠按随机数字表法分为空白组、模型组、归脾汤低、中、高剂量组,每组8只。腹腔注射5‑氟尿嘧啶(28 mg/kg)连续5 d,建立化疗肌无力模型,归脾汤低、中、高剂量组灌胃(0.5、1、2 g/mL),连续干预14 d。记录各组大鼠体质量及抓力,免疫荧光法检测腓肠肌组织中活性氧(ROS)表达水平;免疫组织化学法检测腓肠肌组织中缺氧诱导因子‑1α(HIF‑1α)蛋白表达;蛋白免疫印迹法检测腓肠肌组织中炎性因子IL‑1β、IL‑6、TNF‑α、趋化因子受体CCR1、CCR2、CCR7、CXCR‑4及TNF家族受体TNFR1、TRAF6蛋白表达情况。结果:与空白组相比,模型组大鼠体质量及抓力显著降低(均P<0.01);腓肠肌ROS产生显著增多(P<0.01);组化结果显示HIF‑1α表达升高(P<0.01);IL‑1β、IL‑6、TNF‑α、CCR1、CCR2、CCR7、CXCR‑4、TNFR1、TRAF6蛋白表达显著升高(P<0.01);与模型组比较,归脾汤低、中、高剂量组腓肠肌ROS产生显著减少(P<0.01);HIF‑1α蛋白表达显著升高(P<0.01)。IL‑1β、IL‑6、TNF‑α、CCR1、CCR2、CCR7、CXCR‑4、TNFR1和TRAF6蛋白表达显著减少(P<0.05)。结论:归脾汤可能通过抑制肌肉内炎症水平,诱导HIF‑1α的激活以对抗炎症所致的氧化应激,从而达到缓解化疗肌无力的作用。

BAFF靶向治疗研究进展

B淋巴细胞刺激因子（BAFF）和增殖诱导配体（APRIL）均属于肿瘤坏死因子TNF家族成员，后者是前者的同源物。BAFF受体包括3种：BAFF受体（BAFF．R，BR3）、B细胞成熟抗原（BCMA）和转膜激活剂一钙调节剂一亲环素配体相互作用物（TACI）。

抗肿瘤药物临床应用进展——肿瘤治疗合理用药专家圆桌会议纪要

年年岁岁轮回,月华似锦,细雨如丝,一丝情结依旧。借取奥运福波,往事如烟、寄托期盼,锻造锦绣实践!2008年新春临近,由《中国医院用药评价与分析》杂志编辑部召开的肿瘤治疗合理用药专家圆桌会议于11月22日在京举行,在孙燕院士的主持下,与会的医药学专家有朱军、周正、孙忠实、冯威健、宋三泰、李静、张石革、杨平、刘丽影、张和平、石远凯、赵博、蔡猷伯、江泽飞、崔慧娟、崔恒、王燕、刘端祺等。会议围绕肿瘤治疗中的历史进程、药物进展、合理用药的话题促膝共谈,并对肿瘤坏死因子的应用、肿瘤的放射治疗、醋酸甲地孕酮在肿瘤治疗中的优势评价、肿瘤靶向药物的应用与进展等问题进行研讨,达成一定的共识意见。为此,我们将会议主要的精华提炼和整理后供读者赏析,期盼对实际工作中有所裨益。

人sΔBAFF的高效原核表达及纯化

目的克隆TNF家族B细胞激活因子（B cell activating factor to the TNF family,BAFF）胞外区134～285（sBAFF134-285）氨基酸残基段缺失突变体（s△BAFF）的cDNA,并进行表达及纯化.方法以构建的重组质粒pUC19/sBAFF为模板,采用一步反向PCR法,扩增缺失编码sBAFF的142～160位氨基酸的核苷酸序列.经测序证实后,克隆入原核表达载体pQE-80L.经IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Western blot检测表达产物,Ni2＋-NTA柱层析纯化目的蛋白.结果经一步反向PCR扩增后得到401 bp的DNA片段,该片段序列与GenBank报道的编码人△BAFF的胞外区（s△BAFF）cDNA序列一致.含s△BAFF的表达载体在大肠杆菌中可表达出相对分子质量为18 000的蛋白质并以包涵体的形式存在,经Ni2＋-NTA柱层析纯化后得到高纯度的目的蛋白.结论已成功地制备出人s△BAFF蛋白,为其功能的研究创造了条件.

甘氨酸/丝氨酸置换146位半胱氨酸对sBAFF功能的影响

目的探讨甘氨酸/丝氨酸置换146位半胱氨酸对sBAFF功能的影响,为深入探讨sBAFF的功能和机制奠定基础。方法采用一步反向PCR法,将编码sBAFF第146位半胱氨酸(Cys)的核苷酸序列置换为甘氨酸(G)和丝氨酸(S)的编码序列,测序正确后,亚克隆到高效原核表达载体pQE80L;以IPTG诱导表达,SDSPAGE和Westernblot检测表达产物,Ni2+NTA柱层析纯化目的蛋白;最后经MTT法检测其促B淋巴细胞增殖活性。结果经一步反向PCR扩增后均得到459bp的DNA片段,经测序分析表明分别为sBAFF第146位半胱氨酸残基点突变为甘氨酸和丝氨酸的序列,目的蛋白在大肠杆菌中得到高效表达。活性检测证实其能明显刺激B淋巴细胞系Raji细胞增殖,与正常sBAFF相比,置换为丝氨酸后活性升高,置换为甘氨酸后活性无明显改变。结论在原核表达时,通过置换146位半胱氨酸为丝氨酸可明显提高sBAFF的活性,为进一步探讨sBAFF的功能机制奠定了基础。

TRAIL及其受体DR4、DR5与肿瘤细胞凋亡

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体TRAIL（Tumor necrosis factor-Related Apoptosis InducingLigand）是最近发现的TNF家族的又一新成员，与Apo-1L（FasL）有较高的同源性。和TNF家族其他成员不同的是，TRAIL在体内仅以膜结合型存在。目前发现的TRAIL受体有两类，一类是死亡受体，包括TRAIL-R1（DR4）和TRAIL-R2（DR5），此类受体都含有死亡结构域并能向细胞内传递死亡信号，当TRAIL与DR结合时，诱导肿瘤细胞或转化细胞凋亡；

诱导活化的外周血单个核细胞THANK表达的初步研究

目的分析不同刺激下外周血单个核细胞(PBMC)中THANK基因的表达，并克隆全长的人THANK基因。方法采用将常规方法分离的外周血单个核细胞(PBMC)培养于含100ml/L FCS的RPMI 1640中，并以不同浓度的LPS、TNF-α、IL-2、IFN-γ、PHA及PMA刺激不同时间。以RT-PCR法，分析PMBC中THANK基因的转录表达，并克隆相应的全长人THANK基因。结果RT-PCR分析表明，当用IFN-γ刺激PMBC 72h后，可诱导THANK基因明显表达;而IL-2、LPS、TNF-α、PHA和PMA则不能诱导其表达。采用PCR产物克隆的方法，克隆了人THANK基因，并经DNA序列测定证实。结论克隆得到了人THANK基因，为进一步研究THANK的功能打下了基础。

肿瘤细胞对TRAIL耐受机制及克服策略研究进展

TNF相关凋亡诱导配体（TNF related apoptosis inducing ligand，TRAIL）是TNF超家族的新成员。TRAIL与死亡受体结合，通过多种信号传导通路，能够诱导多种肿瘤细胞发生快速、高效的凋亡反应，而对正常细胞无明显毒性，成为近年来人们研究抗肿瘤治疗的热点。然而越来越多的研究证实并不是所有的肿瘤细胞都对TRAIL敏感，特别是那些高度恶性的肿瘤细胞，为克服肿瘤细胞对TRAIL的耐药性，提高TRAIL诱导肿瘤细胞凋亡的效率，国内外学者均作了较多的研究。本文就此将近年来国内外的相关文献作一综述。

控制细胞生死的一把新钥匙TRAIL

TRAIL是最近克隆的 TNF家族中的一个新成员 ,其最显著的特异性是 :能迅速诱导肿瘤细胞凋亡而对正常细胞无影响 .其受体和竞争受体的多样性表明 TRAIL具有与 TNF不同的控制细胞死亡的独特机制 ,TRAIL通过与不同的细胞表面特异性受体结合来调控死亡信号的转导过程 .研究表明 ,TRAIL对肿瘤的杀伤效率高 ,特异性强 ,是一个很有潜力的抗肿瘤细胞因子 .