肾同种移植排斥患者血清可溶性TNF相关凋亡诱导配体及多种细胞因子水平变化的临床意义

目的:观察肾同种移植排斥患者血清可溶性TRAIL(sTRAIL)、sTNFR-I、sTNFR-II、sFas、sFasL的水平变化与临床意义。方法:采用酶联免疫双抗体夹心法测定。结果:受试组(n=29)与健康对照组(n=29)比较sTRAIL、sTNFR-I、sTNFR-II、sFas差异有显著性(P<0.01)。受试组与对照组(n=58)sFasL比较差异无显著性(P>0.05)。结论:肾同种移植排斥患者血清sTRAIL、sTNFR-I、sTNFR-II、sFas水平比对照组显著升高,提示血清这些细胞因子的含量变化在肾同种移植排斥病理过程中起着重要作用。

TNF相关凋亡诱导配体基因治疗小鼠肝细胞肿瘤

目的:探讨经化疗药物作用后的H22细胞对TRAIL诱导凋亡的敏感性,观察TRAIL、纤黏连蛋白及内皮抑素的真核表达质粒pTRAIL,pCH510,pES联合化疗抑制小鼠肿瘤生长的作用。方法:pTRAIL转染BHK细胞后,加入分别经MMC,ADM,5-FU处理的H22细胞,MTT法检测pTRAIL对H22细胞的生长抑制作用,流式细胞仪分析H22细胞凋亡。在小鼠种植瘤体内注射MMC与pTRAIL,pCH510,pES,观察其对肿瘤生长的抑制作用。结果:pTRAIL能抑制H22生长并诱导细胞凋亡,与MMC,ADM及5-FU联合,H22的凋亡百分数分别为28.1%(P<0.01),22.5%(P<0.01)及47%(P>0.05)。体内,MMC+pTRAIL+pES+pCH510联合能有效抑制肝细胞肿瘤生长,肿瘤生成率为37.5%。结论:MMC或ADM作用后的残存H22肿瘤细胞对pTRAIL敏感,MMC+pTRAIL+pES+pCH510具有协同抑瘤效应,能将小鼠肝细胞肿瘤抑制在组织学水平。

TNF相关凋亡诱导配体在卵巢癌基因治疗中的应用

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)是新近发现的肿瘤坏死因子(TNF)超家族成员,有2类受体,一类是死亡受体,能诱导多种肿瘤细胞凋亡;另一类是诱骗受体,没有胞内死亡区域,不传递凋亡信号。TRAIL有广谱的抗瘤作用,与传统的放疗、化疗有协同作用,且对正常组织细胞无毒性,因此有望应用于肿瘤基因治疗。可通过补充细胞因子或通过基因补充,为癌症治疗提供一个新的有希望的治疗方法。

TNF相关凋亡诱导配体联合阿糖胞苷诱导HL-60细胞凋亡及其机制的研究

本研究探讨人重组可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(hrsTRAIL)单用或联合阿糖胞苷(Ara-C)诱导HL-60细胞凋亡作用及其机制。在体外以人类急性白血病细胞株HL-60为研究对象,分5组进行细胞培养:对照组、Ara-C组、rsTRAIL组、同时给药组(Ara-C+rsTRAIL)、先后给药组(Ara-C→rsTRAIL)。采用MTT比色法测定细胞生长抑制率;应用Annexin V/PI染色和流式细胞术检测细胞凋亡率;使用流式细胞术检测不同浓度的Ara-C对细胞表面DR5表达水平的影响及rsTRAIL单药组、先后给药组细胞表面DR5表达水平和细胞内caspase-8活性。结果表明:rsTRAIL能抑制HL-60细胞生长并诱导HL-60细胞凋亡。先后给药组诱导HL-60细胞凋亡率大于同时给药组。先后给药组细胞表面DR5表达水平和细胞内caspase-8的活性高于rsTRAIL组。5mg/L、10mg/LAra-C作用于HL-60细胞24小时,其细胞表面DR5表达水平升高,大于对照组。结论:rsTRAIL抑制HL-60细胞生长,诱导HL-60细胞凋亡。Ara-C上调HL-60细胞表面DR5表达水平,增强rsTRAIL诱导HL-60细胞凋亡的作用。Ara-C和rsTRAIL联合用药时,在先加Ara-C、再加rsTRAIL组诱导HL-60细胞凋亡的效果比同时给药组效果好,其机制可能与Ara-C上调细胞表面DR5表达水平和(或)增强细胞内caspase-8的活性有关。

IFN-γ增强TNF相关凋亡诱导配体对骨巨细胞瘤细胞的抑制

目的:探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL)对人骨巨细胞瘤(giant cell tumor of bone,GCT)的作用及干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)对TRAIL抗瘤活性的影响,并探讨其影响机制。方法:选取2003年-2006年于301医院骨科手术切除的骨巨细胞瘤新鲜标本9例,将取自标本的骨巨细胞瘤细胞分为:对照组,TRAIL组,IFN-γ组,IFN-γ诱导后加入TRAIL组,应用CCK-8法检测TRAIL、IFN-γ单独及联合作用对骨巨细胞瘤细胞的增殖抑制作用,流式细胞仪、TUNEL法分析IFN-γ对TRAIL凋亡诱导作用的影响,RT-PCR法检测IFN-γ作用前后肿瘤细胞DR4、DR5、TRAIL的表达。结果:骨巨细胞瘤细胞对照组存活率为(98.64±0.31)%,TRAIL(100、500、1000μg/L)单独作用对肿瘤细胞增殖无明显抑制作用;IFN-γ(500、1000U/ml)单独作用后,细胞的存活率分别为(94.05±1.89)%、(90.47±2.66)%。IFN-γ(500U/ml)诱导24h后与TRAIL(100、200μg/L)联合作用,细胞的存活率分别为(84.65±2.46)%、(77.65±3.14)%。两者联合作用后流式细胞仪测得联合作用组凋亡率为(27.94±2.88)%、(38.65±2.46)%,对照组凋亡率为(1.77±0.49)%;TUNEL法测得联合作用组凋亡率分別为(19.63±3.51)%、(29.28±4.80)%,对照组的凋亡率为(1.1±0.17)%。RT-PCR结果显示,IFN-γ作用24h后肿瘤细胞TRAIL、DR4、DR5 mRNA表达明显上调。结论:骨巨细胞瘤细胞对TRAIL不敏感,IFN-γ可以明显提高TRAIL诱导骨巨细胞瘤细胞凋亡的敏感性,其机制可能与IFN-γ上调TRAIL、DR4、DR5 mRNA的表达有关。

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体与肿瘤放射治疗

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(Tumor necrosis factor related apoptosis-inducing ligand,TRAIL)或称凋亡素2配体(Apo2L),是肿瘤坏死因子(TNF)超家族中的新成员,通过与受体结合而选择性地诱导肿瘤细胞、转化细胞及病毒感染的细胞发生程序性死亡。TRAIL在选择性地诱导肿瘤细胞凋亡同时对正常组织细胞无毒副作用。研究发现,联合药物治疗或者放射治疗可以增强TRAIL对肿瘤细胞诱导凋亡的敏感性,因此目前受到国内外学者的普遍关注。本文以TRAIL与放射治疗的联合应用为切入点进行论述,以期理解其在肿瘤放射治疗中的作用。

全反式维A酸可促进肿瘤相关诱导配体对多种胰腺癌细胞的凋亡作用

目的:观察全反式维A酸(all-trans retinoic acid,ATRA)是否能促进肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumor necrosis factor related apoptosis induced ligand,TRAIL)对多种胰腺癌细胞的凋亡作用。方法:将携带TRAIL基因的pCA13质粒分别转染SW1990、Patu8988和Bx-PC3等3种胰腺癌细胞,转染24 h后加入ATRA或等体积溶剂。四甲基偶氮唑盐(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法测定细胞活性,流式细胞仪检测细胞的凋亡率和TRAIL受体R1、R2的表达,末端脱氧核苷酸转移酶(terminal deoxynucleotidyl transferase,TdT)介导的dUTP末端标记法(TdT mediated dUTP nick end labeling,TUNEL)和Hoechst双染色法、透射电镜观察细胞凋亡。结果:转染pCA13/TRAIL质粒后再加入ATRA,细胞生长活性与未加ATRA组相比抑制显著(P<0.05)。流式细胞仪检测发现加入ATRA较未加药组明显促进细胞凋亡(P<0.05)。TUNEL和Hoechst双染色法后透射电镜可观察到细胞凋亡表现。但检测TRAIL-R1、TRAIL-R2的表达发现加入ATRA与未加药组差异无统计学意义(P>0.05)。结论:ATRA可促进TRAIL对多种胰腺癌细胞的凋亡作用,其机制与TRAIL-R1、TRAIL-R2的上调无关。

血清可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体、半乳凝素3、摄食抑制因子-1与慢性阻塞性肺疾病合并抑郁的相关性分析

目的探讨血清中可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(s TRAIL)、半乳凝素3、摄食抑制因子-1与慢性阻塞性肺疾病(COPD)合并抑郁的相关性。方法选取2019年7月至2021年5月河北北方学院附属第一医院收治的COPD急性加重期住院患者173例,其中单纯COPD组103例,COPD合并抑郁组70例,记录并比较两组临床资料及血清s TRAIL、半乳凝素3、摄食抑制因子-1水平。采用logistic回归模型分析COPD合并抑郁的影响因素,进一步绘制受试者操作特征(ROC)曲线评估预测效能。结果COPD合并抑郁组COPD评估测试评分、治疗依从性差占比、合并慢性病占比、独居占比及血清s TRAIL、半乳凝素3、摄食抑制因子-1水平均高于单纯COPD组,第1秒用力呼气量占用力肺活量百分率(FEV_(1)/FVC)、第1秒用力呼气容积占预计值百分率(FEV_(1)pred)、职工医疗保险占比均低于单纯COPD组,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素分析结果显示,FEV_(1)/FVC、FEV_(1)pred、治疗依从性、医疗保险类型及血清s TRAIL、半乳凝素3、摄食抑制因子-1均为COPD合并抑郁的影响因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清s TRAIL、半乳凝素3、摄食抑制因子-1三者单独及联合均对COPD合并抑郁有一定的预测价值(P<0.05)。结论COPD患者发生抑郁与多种因素有关,血清s TRAIL、半乳凝素3、摄食抑制因子-1联合检测对COPD患者合并抑郁诊断有一定价值。

重组变构人TNF相关促凋亡配体联合三氧化二砷诱导白血病耐药细胞株凋亡

本研究探讨重组变构人TNF相关促凋亡配体(recombinant mutant human TNF-related apoptosis-inducing ligand,rmhTRAIL)联合三氧化二砷(As2O3)对阿霉素诱导的人慢性髓系白血病红白血病变耐药细胞株K562/AO2(mdr-1+)的促凋亡作用。以亲本阿霉素敏感细胞株K562(mdr-1-)为对照,观察rmhTRAIL作用后细胞形态变化,采用MTT法测定rmhTRAIL、As2O3单药及联合作用后细胞增殖抑制率;碘化丙锭染色的流式细胞术(FACSCalibur)定量检测rmhTRAILL、As2O3单药及联合作用后sub-G1峰占检测细胞的百分比(sub-G1%)。结果表明:rmhTRAIL联合As2O3对K562/AO2和K562增殖的抑制作用优于单药,采用国内金(正均)氏公式判断rmhTRAIL和As2O3联合作用具有协同作用;流式细胞术定量检测sub-G1%显示,rmhTRAIL2 000ng/ml与As2O32μmol/L单独作用下K562/AO2组与K562组凋亡率分别为(34.93±0.10)%、(10.53±0.16)%(p<0.01);(5.95±0.07)%、(3.50±0.01)%(p<0.05),联合作用下细胞凋亡率分别为(50.95±0.91)%、(20.75±0.95)%(p<0.05),K562/AO2组凋亡效应强于K562组。结论:rmhTRAIL可诱导K562、K562/AO2细胞凋亡;rmhTRAIL联合凋亡诱导剂As2O3对白血病耐药细胞株K562/AO2和K562细胞株的凋亡具有协同作用;rmhTRAIL、As2O3对K562/AO2的促凋亡作用优于其亲本K562细胞。

TNF相关的凋亡诱导配体和受体在不同胸腺组织中的差异表达及对细胞凋亡的影响

目的:研究肿瘤坏死因子(TNF)相关的凋亡诱导配体(TRAIL)和受体在不同胸腺组织中的差异表达,为TRAIL在胸腺生物学及疾病治疗中的作用提供参考依据。方法:选择6例伴有胸腺增生和14例伴有胸腺瘤的重症肌无力患者以及10名正常受试者作为研究对象,分别分析正常胸腺、胸腺增生和胸腺瘤组织中的TRAIL及其跨膜受体的差异表达谱、NFκB活化状态和凋亡细胞指数。结果:所有胸腺组织均可表达TRAIL及其受体,胸腺增生组织的死亡受体DR4和DR5的表达水平最高。所有胸腺组织中NFκB的活性形式均未检测到。与正常胸腺相比,胸腺增生和胸腺瘤组织中的凋亡细胞指数更高。结论:TRAIL死亡受体(DR4/DR5)在正常胸腺、胸腺增生和胸腺瘤组织中的表达水平呈现显著差异,TRAIL在选择性诱导胸腺肿瘤细胞凋亡方面具有重要的潜在价值。

人重组TNF相关凋亡诱导配体联合塞来昔布诱导胆囊癌细胞凋亡的作用研究

目的 于体外实验观察人重组肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（rhTRAIL）联合环氧化酶-2选择性抑制剂塞来昔布对胆囊癌的疗效，初步探讨产生疗效的机制。方法 用Western-blot法检测塞来昔布作用于胆囊癌细胞株后，抗凋亡蛋白c-FLIP和死亡受体DR4、DR5表达状况。rhTRAIL联合塞来昔布作用于胆囊癌细胞株SGC-996后，采用3种方法检测细胞凋亡状况：（1）细胞的相差显微镜观察；（2）caspase 3、7活性检测；（3）Annexin染色后凋亡细胞流式细胞仪检测。结果 塞来昔布可下调 SGC-996细胞c-FLIPs的表达，上调DR5的表达，且呈浓度、时间依赖性。rhTRAIL联合塞来昔布作用于胆囊癌细胞后，细胞凋亡水平明显高于单独用药组和对照组。结论 塞来昔布可通过下调c-FLIPs表达和上调DR5表达，显著增强rhTRAIL诱导胆囊癌SGC-996细胞凋亡的作用。

胰腺癌对TNF相关凋亡诱导配体(TRAIL)的抗性与逆转研究

TRAIL(TNF-related apoptosis-inducing ligand)是一种能识别和选择性杀伤肿瘤细胞的蛋白质因子,但研究发现胰腺癌对TRAIL的敏感程度远远不及其他肿瘤,其抵抗机制主要集中于胞内水平的调节,如c-FLIPS、BCL-2/BCL-xL、XIAP表达上调等,且针对性的逆转策略也进行了深入的研究。本文就TRAIL途径在胰腺癌中的研究进展作一概要的介绍。

系统性红斑狼疮患者CD4^+CD8^+T细胞caspase-3及TNF相关凋亡诱导配体受体的表达

目的探求系统性红斑狼疮(SLE)患者CD4+、CD8+T淋巴细胞caspase-3及肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)受体的表达。方法采用免疫磁珠的方法对20例系统性红斑狼疮患者及10名正常人外周血CD4+、CD8+T淋巴细胞进行分离,采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)对CD4+、CD8+T淋巴细胞caspase-3及TRAIL受体的表达进行分析。结果TRAIL-R3及TRAIL-R4在两者之间的表达差异无统计学意义,但SLE患者CD8+T细胞caspase-3(P=0.003)及TRAIL-R2(P=0.024)的表达增加显著高于正常对照。结论TRAIL-R2介导的通路可能在TRAIL诱导SLE患者T淋巴细胞凋亡中发挥重要的作用。

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体单核苷酸多态性及其血清水平在食管癌检验中的应用

目的探讨食管癌检验中肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)单核苷酸多态性及其血清水平的应用。方法回顾性选取2020年2月至2021年2月本院食管癌患者156例为观察组,健康体检人员50例为对照组。统计分析两组基因型与等位基因频率、血清TRAIL(sTRAIL)水平,并统计分析观察组不同病理分期、细胞分化程度患者的TRAIL基因型及血清sTRAIL水平。结果观察组患者基因型1525GG/1588GG/1595CC、1525GA/1588GA/1595CT的比率均高于对照组,1595AA/1588AA/1595TT的比率低于对照组(P<0.05),等位基因1525G/1588G/1595C的比率高于对照组,1525A/1588A/1595T的比率低于对照组(P<0.05),血清sTRAIL水平低于对照组(P<0.05),Ⅰ~Ⅱ期患者的血清sTRAIL水平高于Ⅲ~Ⅳ期患者(P<0.05),基因型1525GG/1588GG/1595CC、1525GA/1588GA/1595CT、1595AA/1588AA/1595TT患者的血清sTRAIL水平逐渐升高(P<0.05),但高分化、中分化、低分化患者的血清sTRAIL水平之间的差异均无统计学意义(P>0.05)。结论食管癌检验中肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体单核苷酸多态性及其血清水平具有较高的应用价值。

肿瘤坏死因子相关诱导凋亡配体及其受体与宫颈癌的关系

宫颈癌是女性生殖系统最常见的恶性肿瘤之一,其发生率呈明显上升且年轻化的趋势。目前,除传统手术及放化疗方式治疗恶性肿瘤外,肿瘤生物学治疗方法的地位逐渐提高。肿瘤坏死因子相关诱导凋亡配体(TRAIL)是近年新发现的肿瘤坏死因子超家族成员之一,与细胞膜表面的特异性受体结合,通过活化天冬氨酸蛋白水解酶或线粒体依赖途径选择性地诱导肿瘤细胞凋亡而正常细胞可凋亡逃逸,这种性质使其被认为是肿瘤治疗中极有潜力的靶向治疗因子,具有十分重要的临床价值。研究发现,TRAIL及其受体在宫颈癌组织中存在异常表达,并成为近年研究的热点。综述TRAIL及其受体的结构、生物学功能,在宫颈癌上皮细胞中的表达情况及其在宫颈癌中的研究进展。

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体对实验性结肠炎小鼠Th17/Treg细胞平衡的影响

背景:Th17/Treg细胞失衡可能是参与克罗恩病(CD)发生的重要环节。肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)信号通路是影响包括CD在内的多种自身免疫性疾病的潜在机制之一。目的:探讨TRAIL基因敲除对实验性结肠炎小鼠Th17/Treg细胞平衡的影响。方法:采用CRISPR/Cas9基因敲除技术获得TRAIL-/-C57BL/6小鼠。分别将TRAIL-/-小鼠和同品系野生型(WT)小鼠各20只随机分为两组,一组不予处理,一组以三硝基苯磺酸(TNBS)诱导实验性结肠炎。评估各组小鼠结肠炎症程度,采用real-time PCR、蛋白质印迹法和ELISA法检测外周血和结肠组织中的Th17、Treg细胞相关转录因子RORγt、Foxp3和细胞因子白细胞介素-17(IL-17)、IL-10表达。结果:与未造模小鼠相比,造模小鼠体质量显著下降,结肠缩短,疾病活动指数评分和组织活动度指数评分升高(P<0.05),TRAIL-/-结肠炎小鼠上述表现更为明显(P<0.05)。WT结肠炎小鼠外周血和结肠组织中的RORγt、IL-17表达较未造模WT小鼠显著升高(P<0.05),Foxp3、IL-10表达显著降低(P<0.05)。TRAIL-/-结肠炎小鼠上述Th17、Treg细胞相关因子表达和RORγt/Foxp3比值均较WT结肠炎小鼠显著升高(P<0.05)。结论:TRAIL基因敲除可能通过Th17/Treg细胞比例上调加重实验性结肠炎小鼠的肠道炎症反应。

可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体在原发性胆汁性肝硬化患者血清中的表达及意义

目的观察人可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(sTRAIL)在原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者外周血中水平的表达,并探讨sTRAIL在PBC发病机制中的作用。方法用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测PBC患者26例(PBC组),慢性肝炎肝硬化患者27例(慢性肝炎肝硬化组)以及健康体检者25例(正常对照组)的sTRAIL并同时测定IgGI、gA、IgM,观察各指标在PBC中的改变。结果PBC组和慢性肝炎肝硬化组sTRAIL浓度均显著高于正常对照组(158.73±42.45)pmol/L,(108.13±41.60)pmol/L vs(73.83±8.60)pmol/L(P<0.01)。PBC组sTRAIL也较慢性肝炎肝硬化组明显升高(P<0.01)。结论sTRAIL在PBC患者及慢性肝炎肝硬化患者血清中均升高,但二者升高程度比较差异有统计学意义,检测sTRAIL对PBC患者的临床诊断中具有辅助作用并有助于PBC发病机制的研究。

TNF相关的凋亡诱导配体及其受体与恶性黑素瘤的凋亡

TNF相关的凋亡诱导配体 (TRAIL)及其受体 (TRAILR)是近年来很受关注的一组凋亡相关分子 ,目前发现的该家族成员包括TRAIL和它的四个受体。恶性黑素瘤细胞表面表达TRAIL和TRAILR ,并可以被其诱导凋亡。由于TRAIL仅能诱导转染细胞或肿瘤细胞凋亡 ,对正常的细胞没有细胞毒作用 ,因此在恶性黑素瘤的治疗中具有良好的应用前景。

TNF相关的凋亡诱导配体与肿瘤

TNF相关的凋亡诱导配体(TNF-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL),属于TNF超家族成员,又称为Apo-2L,TRAIL能诱导多种肿瘤细胞的凋亡,而正常的细胞却对其不敏感,TRAIL主要通过与其受体结合激活caspase-8,启动非线粒体和线粒体依赖途径导致细胞凋亡。部分肿瘤细胞对TRAIL的敏感性较差,其原因与TRAIL的受体、信号转导途径激酶以及相关蛋白存在密切联系。