TNF-α对人牙周膜成纤维细胞RANKL/OPG mRNA表达的影响

目的探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对人牙周膜成纤维细胞(HPDLFs)的核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)及其饵受体骨保护素(OPG)mRNA表达的影响,了解TNF-α在破骨细胞性骨吸收调节中的作用机制。方法将体外培养的人牙周膜成纤维细胞用不同浓度的TNF-α处理24 h,通过半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)来观察人牙周膜成纤维细胞OPG、RANKL mRNA表达强度变化。结果TNF-α上调人牙周膜成纤维细胞的RANKL mRNA表达,RANKL/OPG比率呈上升趋势。结论TNF-α通过调节人牙周膜成纤维细胞的RANKL/OPG的比值可间接地调节破骨细胞分化和活性,从而影响骨代谢。

白细胞介素17通过激活p38MAPK信号通路调控人牙周膜成纤维细胞RANKL和OPG的表达

目的使用p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号通路抑制剂确定白细胞介素17(IL-17)是否通过该通路参与调控人牙周膜成纤维细胞(HPDLF)核因子κB受体激活蛋白配体(RANKL)和护骨因子(OPG)的表达。方法组织块法分离培养HPDLF,20 ng/mL IL-17分别刺激0、20、40、60、80 min,Western blot法检测HPDLF磷酸化的p38MAPK(p-p38MAPK)蛋白水平。HPDLF随机分为空白对照组、二甲基亚砜(DMSO)组、p38MAPK抑制剂SB203580组、IL-17组、IL-17联合DMSO组、IL-17联合SB203580组。IL-17及联合处理组,分别添加10μmol/L SB203580、20 ng/mL IL-17。实时定量PCR检测HPDLF的RANKL、OPG mRNA水平,Western blot法检测RANKL蛋白水平、ELISA检测OPG蛋白含量。结果p-p38MAPK蛋白水平在IL-17刺激后的0~60 min内随时间增加,在60 min时达到最高,在80 min时下降。IL-17可上调HPDLF中RANKL mRNA及蛋白表达,下调OPG mRNA和蛋白表达。较单纯使用IL-17刺激,添加SB203580通路抑制剂后,RANKL mRNA和蛋白水平均降低,OPG的mRNA水平升高。结论IL-17通过激活p38MAPK信号通路,上调HPDLF的RANKL表达,抑制OPG mRNA表达。