TNF-α通过CXCL10/CXCR3信号通路促进结肠癌细胞上皮间质化的相关分子机制

目的 探讨TNF-α通过调控结肠癌SW480细胞CXCL10/CXCR3轴的表达影响上皮间质化(EMT)及其分子机制。方法 培养人结肠癌SW480细胞,分别通过TNF-α、siRNA-CXCR3处理细胞,将细胞分为对照组(NC组)、TNF-α刺激组(TNF-α组)及TNF-α刺激+siRNA-CXCR3沉默组(TNF-α+si-CXCR3组)。通过Real-time PCR检测各组细胞CXCL10、CXCR3及上皮间质化相关基因的mRNA表达量;Western Blot检测各组细胞CXCL10/CXCR3通路蛋白及上皮间质化相关蛋白表达量的影响;免疫组化检测细胞中上EMT上皮标志物上皮细胞钙粘蛋白(E-cad)与EMT间质标志物波形蛋白(Vimentin)的变化情况;划痕实验检测各组细胞的迁移能力;Transwell实验检测各组细胞的侵袭能力。结果 TNF-ɑ组细胞中通路基因CXCL10、CXCR3的m RNA水平高于NC组,差异有统计学意义(P<0.05),TNF-α+si-CXCR3组细胞中CXCR3水平低于TNF-α组,差异有统计学意义(P<0.05);TNF-ɑ组细胞中CXCL10、CXCR3、Vimentin与Fibronectin的蛋白表达量高于NC组,E-cad的蛋白表达量低于NC组,差异有统计学意义;TNF-α+si-CXCR3组细胞CXCR3、Vimentin与Fibronectin的蛋白表达量低于TNF-ɑ组,E-cad的蛋白水平高于TNF-ɑ组;TNF-ɑ组中Vimentin的表达量高于NC组,E-cad的表达量低于NC组,差异有统计学意义(P<0.05),TNF-α+siCXCR3组中Vimentin的表达量低于TNF-ɑ组,差异有统计学意义(P<0.05),E-cad的表达量高于TNF-ɑ组;TNF-ɑ组迁移能力高于NC组,差异有统计学意义(P<0.05),TNF-α+si-CXCR3组细胞迁移能力低于TNF-ɑ组,差异有统计学意义(P<0.05)。TNF-ɑ组细胞的侵袭能力高于NC组,差异有统计学意义(P<0.05),TNF-α+si-CXCR3组细胞侵袭能力低于TNF-ɑ组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 TNF-α能够诱导结肠癌SW480细胞发生上皮间质化,并促进其迁移、侵袭水平,这一过程可能与激活CXCL10/CXCR3信号通路有关。

强志组方调控PI3K/Akt/TNF-α信号通路干预抽动障碍的实验研究

目的:基于PI3K/Akt/TNF-α信号通路探究强志组方治疗抽动障碍(TD)大鼠的作用机制。方法:42只SD大鼠随机分为空白组、模型组、硫必利组与强志组方低、中、高剂量组,除空白组外其余大鼠腹腔注射亚氨基二丙腈(IDPN)制备抽动障碍大鼠模型。强志组方低、中、高剂量组分别予以4.455、8.91、17.82 g/(kg·d)强志组方水煎剂灌胃,硫必利组以0.027 g/(kg·d)硫必利混悬液灌胃,空白组与模型组以等剂量生理盐水灌胃,每天1次,连续28 d。采用刻板行为与运动行为评分评估大鼠行为学变化情况;干预结束后,采用蛋白免疫印迹法(Western blot)与实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)检测纹状体PI3K、Akt、TNF-α的蛋白与mRNA表达;酶联反应吸附测定法(ELISA)检测血清IL-6、TNF-α含量。结果:与空白组比较,造模组大鼠出现异常运动行为与刻板行为。纹状体PI3K、TNF-α蛋白表达水平及p-Akt/Akt磷酸化水平升高(P<0.01,P<0.001,P<0.05),PI3K、Akt、TNF-αmRNA表达水平升高(P<0.001,P<0.01,P<0.05),血清IL-6、TNF-α含量升高(P<0.001,P<0.01)。药物干预28 d后,与模型组比较,硫必利组与强志组方各剂量组大鼠运动行为与刻板行为评分降低(P<0.001,P<0.05);强志组方低剂量组大鼠纹状体PI3K、TNF-α蛋白表达水平降低(P<0.05),强志组方中、高剂量组PI3K、Akt、TNF-α蛋白及p-Akt/Akt磷酸化表达水平降低(P<0.001,P<0.05);强志组方中、高剂量组纹状体PI3K、Akt mRNA表达水平降低(P<0.01,P<0.05);硫必利组与强志组方各剂量组血清IL-6水平降低(P<0.01,P<0.001),强志组方低、中、高剂量组血清TNF-α含量下降(P<0.01,P<0.05)。结论:强志组方能改善抽动障碍模型大鼠异常的运动行为与刻板行为,其作用机制可能与PI3K/Akt/TNF-α信号通路相关。

ZEB1-3′UTR促进乳腺癌细胞MCF-7迁移机制的研究

对与ZEB1-3′UTR结合的microR-NAs进行生物信息学分析。结果表明,与对照组相比,过表达ZEB1-3′UTR后MCF-7细胞迁移能力显著增强。采用RNA22、Microrna、Targetscan数据库筛选出与ZEB1-3′UTR结合的microRNAs,三个数据库公共预测的microRNAs有9个,分别是miR-429、miR-200b、miR-200c、miR-494、miR-873、miR-381、miR-300、miR-431和miR-342,其中miR-429、miR-200b、miR-200c、miR-342在乳腺癌中高表达。以上研究表明,ZEB1-3′UTR能够竞争性结合肿瘤细胞表达的内源性microRNAs,促进了MCF-7细胞迁移。

狭缝引导配体13′UTR通过miR-34a-5p/SIRT1轴调节内皮细胞表型

在高等生物的进化过程中,mRNA的3′非翻译区(3′untranslated region,3′UTR)序列显著增加,提示3′UTR在生物功能调节中可能发挥重要作用。我们发现狭缝引导配体1(slit guidance ligand 1,SLIT1)3′UTR在肥厚型心肌病(HCM)患者心肌中水平降低,但其对肥厚心肌中血管功能调节的作用机制不清楚。利用腺病毒介导在主动脉内皮细胞(human aortic endothelial cells,HAECs)中过表达SLIT13′UTR,检测HAECs中一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthases,eNOS)和血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor,VEGFA)表达。分别采用划痕实验和基于Matrigel胶的管腔形成实验检测HAECs的迁移和成管腔能力。结果发现,过表达SLIT13′UTR会升高HAECs中p-eNOS、eNOS和VEGFA水平(P<0.01),并促进HAECs迁移和成管腔能力(P<0.01)。生物信息学预测提示,SLIT13′UTR上有多个微RNA(miRNA)的潜在结合位点,反义RNA纯化技术(RNA antisense purification,RAP)筛选和利用Ago2抗体进行RNA结合蛋白质免疫沉淀(RNA binding protein immunoprecipitation,RIP)结果显示,SLIT13′UTR与miR-34a-5p存在结合作用,而过表达SLIT13′UTR的HAECs中miR-34a-5p水平显著降低(P<0.05)。Western印迹结果证实,miR-34a-5p可逆转过表达SLIT13′UTR对去乙酰化酶SIRT1的上调作用(P<0.05)。在HAECs中转染miR-34a-5p和si-SIRT1,可一致地抑制过表达SLIT13′UTR引起的p-eNOS、eNOS和VEGFA增加(P<0.05,P<0.01),及促进HAECs迁移和成管腔的能力(P<0.01,P<0.001)。因此,SLIT13′UTR可以特异性吸附miR-34a-5p,通过miR-34a-5p/SIRT1轴发挥促进内皮细胞迁移和管腔生成的作用。

TNF-α3′-UTR双荧光素酶报告基因系统的构建及丹参酮类药物筛选

目的构建并鉴定p GL3-TNF-α3'端非翻译区(UTR)双荧光素酶报告基因(DLR)表达系统,以此基于调控TNF-α转录后水平对丹参酮类成分进行筛选。方法反转录人脐静脉内皮细胞HUVEC的mRNA成c DNA,以之为模板,PCR扩增含TNF-α3'-UTR的DNA片段全长,经酶切后连接至荧光素酶报告载体p GL3-control上,构建出p GL3-TNF-α3'UTR全长的荧光素酶报告基因载体并进行鉴定。将所构建的p GL3-TNF-α3'UTR与p SVRenilla质粒组成双荧光素酶报告系统共转染至单核巨噬细胞RAW264.7,经脂多糖诱导后利用该双荧光素酶报告基因表达系统判定丹参酮类成分对TNF-α转录后调控是否有影响。结果成功构建p GL3-TNF-α3'UTR荧光素酶报告基因,克隆获得的DNA片段大小及序列与Genbank报道的一致。脂多糖(LPS)可以明显诱导转入p GL3-TNF-α3'UTR载体细胞的荧光强度。丹参酮类成分中隐丹参酮可以明显降低LPS诱导的p GL3-TNF-α3'UTR载体细胞的荧光素酶活性。结论成功构建含TNF-α3'UTR区的双荧光素酶报告基因表达系统,并以此从丹参酮类化合物中筛选出隐丹参酮,可以对TNF-α的转录后水平进行抑制调控。

基于蛋白组学探讨消癌解毒方通过IL-6/TNF-α/STAT3通路抑制肝癌小鼠肿瘤生长的作用机制

目的通过对H22肝癌荷瘤小鼠血清蛋白质组学检测,探讨消癌解毒方抑制肝癌小鼠肿瘤增殖促进凋亡的作用机制。方法将C57BL/6小鼠随机分为正常组、模型组、消癌解毒方组、顺铂组、消癌解毒方联合顺铂组。构建H22肝癌荷瘤小鼠模型,给药干预,连续给药11 d,次日剥取瘤体、胸腺和脾脏,计算抑瘤率和免疫系数;病理检测肿瘤光镜下差异表现;流式细胞仪检测各组凋亡情况;制备血清,以TMT肽段标记结合LC-MS/MS寻找差异蛋白表达谱,应用IPA软件进行分析;Elisa法检测血清中白细胞介素6(Interleukin6,IL-6)和血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达;蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测信号传导及转录激活因子3(STAT3)、磷酸化信号传导及转录激活因子3(p-STAT3)、c-Myc、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、裂解半胱氨酸蛋白酶3(Cleaved-Caspase-3)和裂解半胱氨酸蛋白酶9(Cleaved-Caspase-9)蛋白含量。结果与模型组比,用药后各组小鼠肿瘤质量均有不同程度的减小(P<0.01);消癌解毒方、顺铂和消癌解毒方联合顺铂组抑瘤率分别为40.59%、53.84%、67.32%;顺铂组免疫指数降低(P<0.05),消癌解毒方和消癌解毒方联合顺铂组免疫系数均较模型组明显上升(P<0.05,P<0.01);病理检测结果显示,与模型组比,各组瘤组织坏死程度加大,分裂增殖程度减轻;流式细胞仪检测结果显示各加药组凋亡率较模型组均明显上升(P<0.01)。蛋白组学检测显示,消癌解毒方与模型组比差异蛋白共132个,其中下调蛋白95个,上调蛋白37个,这些差异表达涉及脂质代谢、凋亡、炎症等方面。Elisa检测提示模型组IL-6和TNF-α的表达量均较正常组上调(P<0.01),各加药组与模型组比明显下降(P<0.05,P<0.01);Western Blot检测结果显示给药后瘤组织中p-STAT3蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01),其下游基因c-Myc、Bcl-2蛋白含量明显降低(P<0.01),Bax、Cleaved-Caspase-3和Cleaved-Caspase-9蛋白含量明显升高(P<0.05,P<0.01)。结论消癌解毒方可以抑制肝癌小鼠肿瘤增殖并促进其凋亡,可能与调控IL-6/TNF-α/STAT3信号通路有关,且消癌解毒方联合顺铂可以提高小鼠免疫功能,减轻顺铂毒副作用,增强抗肿瘤疗效。

草原红牛胰岛素样生长因子Ⅰ受体基因3′UTR序列多态性分析

以58头草原红牛为试验材料,采用PCR-SSCP技术对胰岛素样生长因子Ⅰ受体(IGF-ⅠR)基因3′UTR序列多态性进行了检测。结果表明,在IGF-ⅠR基因3′UTR中发现PCR-SSCP的多态位点,有2种等位基因和3种基因型。对所得基因型与生长和胴体性状的相关性分析结果发现,在3′UTR中AB型的胴体产肉率、肉骨比显著高于AA、BB型(P<0.05);AA型的脂肪覆盖率显著高于BB型(P<0.05),与AB型差异不显著(P>0.05)。

中国美利奴羊DLX3基因3′UTR的多态性及其与羊毛品质性状的关联分析

为探讨DLX3基因的多态性与绵羊羊毛品质及生长性状的关系,本研究以5个品系的中国美利奴羊(新疆军垦型)为试验材料,采用PCR-RFLP方法开展了DLX3基因3′UTR区4个SNPs的多态性检测。通过卡方检验分析了4个SNPs在各品系绵羊中的等位基因频率,采用连锁不平衡分析构建了这4个SNPs的单倍型,最后将单位点和单倍型分别与绵羊羊毛品质和生长性状进行关联分析。结果表明:4个SNPs在5个品系间的等位基因频率均存在极显著差异(P<0.01);超细毛绵羊品系与其他4个品系间的基因型分布均存在极显著差异(P<0.01),2个多胎品系与其他3个品系间的基因型分布同样存在极显著差异(P<0.01);相关分析显示,这4个SNPs及其单倍型均对羊毛卷曲度有显著影响(P<0.05),而对其他羊毛性状及生长性状无显著影响(P>0.05)。由此可见,中国美利奴羊(新疆军垦型)DLX3基因3′UTR区的多态性与绵羊毛发卷曲度性状显著相关,可以尝试使用这些SNPs开展高品质细毛羊的分子标记辅助选择。

火针对膝骨关节炎大鼠关节软骨MMP-3、TGF-β1、TNF-α的影响

目的:探讨火针对膝骨关节炎大鼠关节软骨MMP-3、TGF-β1、TNF-α的影响。方法:20只健康SD雄性大鼠,剃去后肢髋关节至脚趾毛,踝关节背屈70～90度,伸展膝关节至160～180度,纱布固定,将石膏从腹股沟至脚趾缠绕大鼠后肢,脚趾露出,绷带固定,建立KOA大鼠模型,另外10只不作任何处理作为正常组。六周后模型制作成功。20只模型大鼠随机分为2组,模型组和火针组。火针组选取膝前穴、阿是穴和阳陵泉穴,进行火针治疗,每3 d行一次针,共治疗6次。治疗前后对各组大鼠进行Lequesne MG评分评估,全自动生物化学分析仪测定各组大鼠血清MMP-3、TGF-β1、TNF-α的表达水平,HE染色后观察大鼠膝关节软骨病理形态变化,采用放射免疫分析法检测大鼠软骨组织中MMP-3、TGF-β1、TNF-α含量。结果:(1)与对照组比较,模型组大鼠血清MMP-3、TGF-β1和TNF-α表达水平显著增高,差异有统计学意义(P<0. 05)。(2)模型组大鼠膝骨关节软骨表面粗糙,软骨细胞肥大,表层细胞坏死,巢状增生,潮线消失,呈明显退行性病变。(3)与对照组比较,模型组大鼠膝关节软骨组织中MMP-3、TGF-β1和TNF-α含量均显著升高(P<0. 05)。(4)与模型组比较,火针组大鼠血清MMP-3、TGF-β1和TNF-α表达水平均明显降低,差异有统计学意义(P<0. 05)。(5)火针组大鼠膝骨关节软骨表面较光滑,细胞排列规则,表层细胞轻度增生,潮线较完整。(6)与模型组比较,火针组大鼠膝关节软骨组织MMP-3、TGF-β1和TNF-α含量均明显降低,差异有统计学意义(P<0. 05)。结论:火针治疗可有效减轻大鼠膝关节软骨损伤,降低血清及膝关节软骨组织中MMP-3、TGF-β1和TNF-α水平,进而发挥抗炎作用,可能是火针治疗膝骨关节炎的一个作用机制。

三七总皂甙预处理大鼠供肝对细胞凋亡及TNF-α、Caspase-3 表达的影响a(英文)

目的探讨三七总皂甙(PNS)预处理对大鼠供肝的保护作用及其对供肝细胞凋亡和TNF-α、Caspase-3mRNA表达的影响。方法雄性SD大鼠分别用作供、受体,采用Kamada's袖套法建立原位肝移植模型,根据供肝切取前1h是否静脉注射PNS(50mg/kg)将大鼠随机分为2组:PNS预处理组(P组)和NS对照组(N组);另设假手术作对照组(S组)。分别于供肝再灌注后2、6、24h处死各组动物,检测血清ALT、AST,HE切片作组织学检查,TUNEL法检测肝细胞凋亡,RT-PCR法检测TNF-α、Caspase-3mRNA的表达。结果供肝再灌注后2、6、24h各时点,P组大鼠血清ALT、AST水平及肝细胞凋亡指数(AI)均明显低于N组(P<0.05);供肝再灌注后2h、6h,P组大鼠肝组织TNF-α、Caspase-3mRNA的相对表达水平明显低于N组(P<0.05)。结论三七总皂甙(PNS)预处理大鼠供肝,可以有效地减轻移植肝的缺血/再灌注损伤和细胞凋亡,影响TNF-α、Caspase-3的表达,可能为PNS抗细胞凋亡的机制之一。

桃红四物汤对光老化小鼠皮肤组织中MMP-1、MMP-3 mRNA及血清中TNF-α、IL-1含量表达的影响

目的:研究桃红四物汤对光老化小鼠皮肤组织中基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、基质金属蛋白酶-3(MMP-3)mRNA及血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1(IL-1)的影响。方法:将60只小鼠随机分为6组,空白对照组、模型对照组、阳性对照组(VE组)和中药低、中、高剂量组,对模型对照组、阳性对照组(VE组)和中药低、中、高剂量组制备光老化模型,空白对照组正常饲养。空白对照组和模型对照组给生理盐水,高、中、低剂量组给相应剂量药液,阳性对照组(VE组)给予维生素E滴剂,于造模前30 min灌胃。造模完成后,采用Elisa和RT-PCR方法检测血清中TNF-α、IL-1含量和皮肤组织中MMP-1、MMP-3 mRNA含量的表达水平。结果:与空白对照组比较,模型对照组血清中TNF-α、IL-1和皮肤组织中MMP-1、MMP-3 mRNA含量的表达水平显著上升,差异具有统计学意义(P<0.01);与模型对照组组比较,中药低、中、高剂量组血清中TNF-α、IL-1和皮肤组织中MMP-1、MMP-3 mRNA含量的表达水平显著下降,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:桃红四物汤在皮肤光老化过程中具有保护作用。

腰椎间盘突出症微创术后功能锻炼对老年患者血清MMP-3、TNF-α及IL-1β水平的影响

目的研究老年腰椎间盘突出症微创术后功能锻炼对血清疼痛相关因子基质金属蛋白酶(MMP)-3、肿瘤坏死因子(TNF)-α及白细胞介素(IL)-1β水平的影响。方法老年腰椎间盘突出症患者114例,采用随机数字法分为对照组和研究组,每组57例。患者均行椎间盘手术治疗,对照组予常规康复训练治疗,研究组在此基础上加以功能锻炼治疗。比较两组治疗有效率、血清疼痛相关因子水平及生存质量量表(SF-36)评分,同时比较两组不同时点的视觉模拟评分(VAS)及日本矫形外科学会(JOA)下腰痛评分。结果研究组治疗总有效率(98. 25%)明显高于对照组(87. 72%,χ2=4. 84,P=0. 03);两组术后1、7、14 d的VAS、MMP-3、TNF-α、IL-1β水平均较术前明显降低,研究组术后7 d的VAS、MMP-3明显低于对照组(P<0. 05);两组术后7、14 d的下腰痛评分均明显升高,其中研究组术后7、14 d的下腰痛评分显著高于对照组(P<0. 01);研究组社会功能、生理职能、总分等多个项目评分均明显高于对照组,组间差异有统计学意义(P<0. 05)。结论微创术后功能锻炼对腰椎间盘突出症患者的疗效显著,能够有效减轻术后水肿高峰期疼痛,降低血清疼痛相关因子水平,且患者预后较好。

IFN-γ和TNF-α联合对MIN6细胞caspase-3活化的影响

目的研究细胞因子IFN-γ和TNF-α对小鼠胰岛瘤细胞株MIN6中caspase-3活化的影响。方法用IFN-γ、TNF-α单独或联合刺激MIN6细胞后,Western blot分析比较caspase-3活化的情况,并用免疫细胞化学法检测了其活化产物cleaved caspase-3的产生;酶学比色法测定细胞因子IFN-γ和TNF-α联合作用活化caspase-3的时间依赖性以及MTT法比较caspase-3特异性的抑制剂AC-DEVD预处理前后MIN6细胞活性的变化。结果 IFN-γ或TNF-α单独作用不能活化caspase-3,但两者联合作用24 h后可检测到caspase-3活化裂解片段的产生;Caspase-3的活性随着IFN-γ和TNF-α处理时间的增加而升高,呈现明显的时间依赖性;抑制caspase-3的活化可有效改善MIN6细胞的活性,并且呈剂量依赖性。结论 IFN-γ和TNF-α对MIN6细胞活性的抑制作用与caspase-3的活化密切相关。

血清SOCS-3、IL-6、TNF-α在溃疡性结肠炎患者中的变化及其相互关系

目的:观察溃疡性结肠炎(UC)患者血清SOCS-3、IL-6、TNF-α水平变化,探讨其在UC发生发展中的关系及意义.方法:选取UC患者(n=59),其中活动期(n=46),缓解期(n=13),活动期患者中,轻度(n=15),中度(n=24),重度(n=7).采用ELISA法检测各组血清IL-6、TNF-α、SOCS-3含量,并和20例正常体检者进行对照.结果:UC活动组患者血清中IL-6、TNF-α含量均明显高于对照组及缓解组(P<0.01),而血清SOCS-3含量显著低于对照组及缓解组(P<0.01);活动组中,轻、中、重度患者血清IL-6、TNF-α含量随严重程度逐渐升高,血清SOCS-3含量逐渐降低,三级之间差异均具有统计学意义(P<0.05,P<0.01);相关性分析表明,血清IL-6含量与TNF-α含量呈明显正相关(r=0.817,P<0.01);血清SOCS-3含量与IL-6、TNF-α含量均呈明显负相关(r=-0.667、-0.611,P<0.01).结论:UC患者血清SOCS-3水平明显降低,其可能通过负性调节IL-6、TNF-α参与UC的发生发展,且与病情的严重程度有关.

基于死亡受体途径探讨脾肾双补方对离体人早孕绒毛滋养细胞HTR-8凋亡蛋白TNF-α、Caspase-3的影响

目的：探索脾肾双补方对人早孕绒毛滋养细胞中凋亡相关蛋白TNF-α、Caspase-3表达的影响。方法：采用动物含药血清,体外分组培养HTR-8细胞48 h,采用免疫组织化学法检测各组细胞凋亡蛋白TNF-α、Caspase-3表达的情况。结果：与空白对照组比,脾肾双补方高、中剂量组HTR-8细胞凋亡蛋白TNF-α、Caspase-3的表达均降低（P 〈0. 05）,地屈孕酮组HTR-8细胞TNF-α、Caspase-3的表达显著低于空白对照组（P 〈0. 01）;与地屈孕酮组比,脾肾双补方高、中剂量组TNF-α、Caspase-3的表达差异无统计学意义（P〉0. 05）;脾肾双补方高、中剂量组间TNF-α的表达差异无统计学意义（P〉 0. 05）。结论：脾肾双补方含药血清可以促进人早孕绒毛滋养细胞数目增加,其机制可能是：减少人早孕绒毛滋养细胞的凋亡,保护细胞存活,继而有利于早期妊娠的维持,其作用途径可能是：脾肾双补方含药血清通过降低细胞凋亡诱导蛋白TNF-α的表达,抑制死亡受体途径,减少凋亡执行蛋白Caspase-3的表达,从而抑制人早孕绒毛滋养细胞的凋亡,保护细胞存活,维持妊娠。

反复自然流产患者母胎界面SOCS3蛋白、TNF-α及IL-10的表达

目的:研究反复自然流产患者蜕膜组织中细胞因子信号转导抑制因子SOCS3,细胞因子TNF-α及IL-10的表达,并与正常妊娠作对照。方法:Western blot检测SOCS3的表达,免疫组织化学法检测细胞因子TNF-α及IL-10的表达。结果:反复自然流产组蜕膜组织中SOCS3的表达明显降低(P<0.01),差异有统计学意义,IL-10表达降低(P<0.01),TNF-α表达增高(P<0.05),差异有统计学意义。结论:与正常妊娠相比,反复自然流产组蜕膜组织中SOCS3蛋白及IL-10表达降低,TNF-α表达增高,差异有统计学意义,说明反复自然流产患者母胎界面Th1/Th2失衡,SOCS3蛋白可能通过与细胞因子的相互调控作用影响Th1/Th2平衡导致流产发生。

老年湿热证与寒湿证膝关节炎患者血清MMP-3、TIMP-1、TNF-α及IL-1β水平的表达及意义

目的探讨老年湿热证与寒湿证膝关节炎患者血清基质金属蛋白酶(MMP)-3、MMP抑制剂(TIMP)-1、肿瘤坏死因子(TNF)-α及白细胞介素(IL)-1β的表达及意义。方法选择老年膝关节炎患者70例,根据中医辨证分型分为湿热证组(37例)和寒湿证组(33例),另选择同期进行体检的健康老年人30例为对照组。采用双抗体夹心酶联免疫吸附法检测所各组血清MMP-3、TIMP-1、TNF-α及IL-1β水平,分析不同软骨损伤程度膝关节炎患者血清MMP-3、TIMP-1、TNF-α及IL-1β水平的差异。结果膝关节炎组血清MMP-3、TIMP-1、TNF-α及IL-1β水平显著高于对照组(P<0.05);膝关节炎患者随着软骨损伤程度加重,血清MMP-3、TIMP-1、TNF-α及IL-1β表达水平逐渐增高(P<0.05);湿热证组血清MMP-3、TIMP-1水平显著高于寒湿证组(P<0.05);湿热证组血清TNF-α、IL-1β水平与寒湿证组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论老年膝关节炎患者血清MMP-3、TIMP-1、TNF-α及IL-1β呈高水平表达,检测上述指标水平可判断其软骨损伤程度,其中MMP-3和TIMP-1可鉴别湿热证与寒湿证膝关节炎。

黄芪甲苷对辐射诱导损伤小鼠肺脏组织结构及Caspase-3,TNF-α表达的影响

辐射会导致多种器官发生炎症或纤维化现象,而黄芪甲苷(AstragalosideⅣ,AS-Ⅳ)可通过抑制TNF-α和Caspase-3的表达来减轻组织的病理学损伤.本实验通过构建辐射前AS-Ⅳ给药小鼠模型,探讨AS-Ⅳ对辐射诱导的肺损伤的预防作用.将50只清洁级昆明小鼠随机分为对照组、辐射组、10 mg·kg^-1 AS-Ⅳ预防组、20 mg·kg^-1 AS-Ⅳ预防组和40 mg·kg^-1 AS-Ⅳ预防组.小鼠给予AS-Ⅳ灌胃一个月后,以8 Gy的60 Coγ射线进行全身辐射,5 d后采集肺组织,通过HE染色和天狼星红病理学检测观察肺脏形态变化,采用免疫组织化学法检测肺组织中Caspase-3,TNF-α的表达.结果显示,与对照组相比,辐射组肺泡细胞出现炎性细胞浸润和纤维化,肺泡壁增厚,肺泡细胞及呼吸性细支气管壁细胞中Caspase-3,TNF-α的表达较对照组显著增高(P<0.01);AS-Ⅳ给药可显著改善辐射诱导的肺组织形态结构损伤,减少Caspase-3,TNF-α的表达(P<0.01),40 mg·kg^-1 AS-Ⅳ给药组效果显著,基本恢复至正常水平.结果表明,AS-Ⅳ给药能有效降低辐射诱导对肺组织的损伤以及Caspase-3和TNF-α的表达,从而发挥保护作用.

独活寄生汤联合塞来昔布对膝关节骨性关节炎患者膝关节液IL-1β、TNF-α及MMP-3的影响

目的观察独活寄生汤联合塞来昔布对膝关节骨性关节炎患者膝关节液中白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及基质金属蛋白酶(MMP-3)的影响。方法将80例膝关节骨性关节炎患者随机分为治疗组和对照组,对照组给予塞来昔布治疗,治疗组在对照组治疗基础上联合独活寄生汤治疗。结果治疗3个疗程后,治疗组总有效率为98%,对照组为52%,2组相比差异有统计学意义(P<0.05);治疗后2组关节液中IL-1β、TNF-α和MMP-3含量均显著下降(P均<0.05),且治疗组各指标含量下降程度均高于对照组(P均<0.05)。结论独活寄生汤联合塞来昔布治疗膝关节骨性关节炎疗效好,其作用机制可能与降低膝关节液中IL-1β、TNF-α及MMP-3含量相关,值得进一步研究。

β珠蛋白基因3′UTR+101G>C(HBB:c.*233G>C)变异的遗传学效应分析

目的:探讨β珠蛋白基因3′UTR+101G>C(HBB:c.*233G>C)变异是否具有遗传学效应,为地中海贫血的基因诊断和遗传咨询提供依据。方法:应用全血细胞分析和毛细管电泳进行血液学指标分析,采用PCR-流式荧光杂交法检测中国南方人群常见的23种地中海贫血相关突变,采用一代测序方法检测β珠蛋白基因(HBB)的其他变异位点。结果:在463个进行HBB基因测序的病例中共检测到7个病例携带HBB:c.*233G>C变异,其中4例同时携带HBB基因其他致病性变异(2例反式排列,2例顺式排列),均为典型的轻型β地中海贫血的血液学特征,3例同时携带异常血红蛋白变异,均不具有β地中海贫血的血液学特征。结论:本研究的数据显示HBB:c.*233G>C变异无明显遗传学效应,应为多态性位点。