山仙颗粒对Lewis肺癌荷瘤小鼠抗肿瘤免疫力及外周血中IFN-γ、TNF-β、IL-10的影响

目的:观察山仙颗粒对Lewis肺癌细胞增殖的影响及对Lewis肺癌荷瘤小鼠抗肿瘤免疫力及免疫微环境的影响,以探究山仙颗粒抑瘤及提高机体抗肿瘤免疫力的分子机制,为其临床应用提供深层次的理论依据。方法:腋下皮肤移植Lewis肺癌细胞建立小鼠荷瘤模型,分为空白组、模型组、化疗组和山仙颗粒组;通过对Lewis肺癌荷瘤小鼠肿瘤组织称重并计算抑瘤率,采用免疫组织化学法检测脾脏组织中淋巴细胞CD、CD8表达情况,采用CCK-8法检测淋巴细胞对Lewis肺癌细胞增殖的影响,采用ELISA法检测外周血中IFN-γ、TNF-β与IL-10的变化。结果:(1)山仙颗粒组对Lewis肺癌的抑瘤率为45.99%,显著高于化疗组(P<0.05);(2)小鼠淋巴细胞可抑制Lewis肺癌细胞的增殖,并与淋巴细胞浓度和作用时间呈正相关;且脾脏组织中CD4^+T细胞、CD4^+/CD8^+比值及淋巴细胞对Lewis肺癌细胞的抑制率,模型组和化疗组显著低于空白组(P<0.05),山仙颗粒组显著高于模型组和化疗组(P<0.05),而山仙颗粒组与空白组比较无显著差异(P>0.05);(3)模型组和化疗组小鼠外周血中的IFN-γ和TNF-β显著低于空白组(P<0.05)、而IL-10显著高于空白组(P<0.05),山仙颗粒组小鼠外周血中的IFN-γ、TNF-β显著高于模型组和化疗组(P<0.05),而IL-10显著低于模型组与化疗组(P<0.05);山仙颗粒组小鼠外周血中的IFN-γ、TNF-β、IL-10与空白组比较无明显差异(P>0.05)。结论:山仙颗粒能明显抑制Lewis肺癌荷瘤小鼠肿瘤组织的生长,并具有提高小鼠脾脏指数、增强T淋巴细胞活性、使外周血中的IFN-γ、TNF-β上调而IL-10下调,提示山仙颗粒的抗肿瘤作用可能通过调节CD4^+T淋巴细胞含量、CD4^+/CD8^+、Th1/Th2比值,恢复肿瘤患者免疫功能稳态,提高机体免疫力、加强免疫监视功能有关。

分时针刺胆经穴位对卵巢缺失大鼠TNF-β、IL-4以及T淋巴细胞亚群的影响

目的:以中医"凡十一藏皆取于胆"理论为指导,观察分时针刺阳陵泉、环跳、悬钟、京门经穴对卵巢缺失大鼠TNF-β、IL-4以及T淋巴细胞亚群的影响。方法:70只SD雌性大鼠,随机分为正常对照组、假手术组、模型组、治疗组(分时针刺胆经干预4个组)。模型组、治疗组切除双侧卵巢,假手术组切除脂肪,治疗组分为平旦组、日中组、日西组、夜半组,分别于此四时进行针刺胆经干预治疗,针刺治疗三个月后处死大鼠,心脏取血,ELISA法测定血清中的TNF-β、IL-4;流式细胞技术测定T细胞亚群CD3、CD4、CD8。结果:经针刺胆经相关穴位治疗后,TNF-β、IL-4均显著升高(P<0.05);日中组、日西组、夜半组CD3+、CD4+也有升高(P<0.05)。结论:分时针刺胆经相关穴位能使卵巢缺失大鼠TNF-β、IL-4以及T淋巴细胞亚群得以复壮。

哮喘合并OSAHS患儿外周血TNF-βIFN-γVEGF表达及其与气道阻力的相关性

目的分析哮喘合并阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)患儿外周血肿瘤坏死因子-β(TNF-β)、干扰素-γ(IFN-γ)、血管内皮生长因子(VEGF)表达及其与气道阻力的相关性。方法将119例哮喘合并OSAHS患儿设为哮喘合并OSAHS组,另选择同期收治的100例单纯哮喘患儿设为单纯哮喘组,检测全部患儿外周血TNF-β、IFN-γ及VEGF表达,并测量其气道阻力,分析TNF-β、IFN-γ、VEGF表达与气道阻力的相关性,并分析哮喘合并OSAHS患儿病情严重程度的影响因素。结果哮喘合并OSAHS组患儿外周血TNF-β、VEGF表达及呼吸道总阻力、中心气道阻力、外周弹性阻力均高于单纯哮喘组(P<0.01),IFN-γ表达低于单纯哮喘组(P<0.01)。Pearson相关分析显示,TNF-β、VEGF表达与呼吸道总阻力、中心气道阻力及外周弹性阻力均呈显著正相关(P<0.01),IFN-γ表达与呼吸道总阻力、中心气道阻力及外周弹性阻力均呈显著负相关(P<0.01)。多因素线性回归分析显示,体质量指数、TNF-β、IFN-γ、VEGF、呼吸道总阻力是影响哮喘合并OSAHS患儿病情严重程度的影响因素(P<0.05或0.01)。结论哮喘合并OSAHS患儿外周血TNF-β、VEGF表达及气道阻力升高,IFN-γ表达降低,三者表达与气道阻力密切相关,TNF-β、IFN-γ及VEGF可能通过影响气道阻力在哮喘合并OSAHS发生发展中发挥重要作用。

TNF-β基因+252位点多态性及幽门螺杆菌感染与非贲门型胃癌易感性的研究

目的探讨肿瘤坏死因子β(TNF-β)基因+252位点多态性和幽门螺旋杆菌(Helicobacter pylori, Hp)感染对非贲门型胃癌易感性的影响。方法选取2015年3月至2018年12月在福建医科大学附属第一医院住院的非贲门型胃癌患者215例为病例组,以同期215例健康体检者为对照组。按Lauren标准将胃癌患者进行病理分型,分析各TNF-β基因+252位点多态性基因型分布与Hp感染、非贲门胃癌临床病理学特征之间的关系。结果与Hp感染阴性者相比,Hp感染阳性者患胃癌的危险度更高(OR=1.881, 95%CI 1.277~2.770)。与G/G基因型相比,G/A和A/A型患者患胃癌危险度更高[OR值分别为1.950(1.151~3.303)、2.226(1.260~3.932)]。在对照组中,Hp感染阴性和阳性患者基因型差异无统计学意义(χ~2=2.801,P=0.246)。在病例组中,Hp感染阳性患者G/A、A/A比例高于Hp感染阴性患者(χ~2=6.265,P=0.044)。肠型胃癌患者中G/A+A/A基因型频率相比对照组增加(χ~2=11.325,P=0.003)。携带TNF-β基因+252位点A等位基因与Hp感染存在交互作用。结论 TNF-β基因+252位点G/A基因型和A/A基因型与非贲门型胃癌的易感性有关,TNF-β基因与Hp感染存在交互作用。

TNF-α、TNF-β在弥漫性大B细胞淋巴瘤中的表达及其意义

目的探讨肿瘤坏死因子α(Tumor necrosis factorα,TNF-α)、肿瘤坏死因子β(Tumor necrosis factorβ,TNF-β)在弥漫性大B细胞淋巴瘤(Diffuse large B-cell lymphoma,DLBCL)中的表达情况及其意义。方法采用免疫组化方法检测61例DLBCL和5例淋巴结反应性增生中TNF-α、TNF-β的表达情况。结果 TNF-α和TNF-β在DLBCL有不同程度的表达。TNF-α、TNF-β在61例DLBCL的阳性表达率分别为85.25%(52/61)和59.02%(36/61)。TNF-α、TNF-β在DLBCL亚型中表达的差异具有统计学意义(P<0.05),TNF-α、TNF-β在DLBCL中non-GCB(非生发中心型)中表达高于GCB(生发中心型)。TNF-α、TNF-β在性别、民族、年龄、部位方面的差异均无统计学意义(P>0.05)。TNF-α和TNF-β在DLBCL中的表达无相关性(P>0.05)。TNF-α、TNF-β在淋巴结反应性增生中表达于滤泡生发中心细胞,副皮质区的免疫母细胞,毛细血管内皮细胞。结论 TNF-α和TNF-β在DLBCL中的高表达,可能与DLBCL的发生、发展有关,且有助于DLBCL不同亚型的诊断和分型。

TNF-α、TNF-β和NF-κBp50在不同类型淋巴瘤的表达及其意义

目的探讨肿瘤坏死因子α(Tumor necrosis factorα,TNF-α)、肿瘤坏死因子β(Tumor necrosis factorβ,TNF-β)与核因子κBp50(Nuclear factor ofκappa Bp50,NF-κBp50)在不同类型淋巴瘤中的表达及其意义。方法收集97例不同类型淋巴瘤患者石蜡组织和5例反应性增生淋巴结组织标本,应用免疫组织化学方法观察组织中TNF-α、TNF-β与NF-κBp50表达情况。结果 TNF-α、TNF-β与NF-κBp50在霍奇金淋巴瘤(HL)和非霍奇金淋巴瘤(NHL)中均有不同程度的表达。TNF-α在淋巴母细胞淋巴瘤(LBL)与周围T细胞淋巴瘤(PTL)、LBL与浆细胞肿瘤(PCN)组间表达差异有统计学意义(P<0.05),其它各亚型组间的差异无统计学意义(P>0.05);TNF-β与NF-κBp50在淋巴瘤各亚型之间的表达差异无统计学意义(P>0.05);TNF-α表达和淋巴瘤临床病理特征差异均无统计学意义(P>0.05);TNF-β表达在国际预后指数(IPI)评分的中-高危组高于低危组,组间差异有统计学意义(P<0.05),其余各组之间的差异无统计学意义(P>0.05);NF-κBp50表达在汉族和少数民族之间差异有统计学意义(P<0.05),其余各组之间的差异无统计学意义(P>0.05);TNF-α、TNF-β及NF-KBp50蛋白表达无相关性(P>0.05)。结论 TNF-α、TNF-β与NF-κBp50在不同类型淋巴瘤组织中均有不同程度的表达,在淋巴瘤的发生、发展中可能起着一定作用;TNF-β表达与IPI评分的中-高危组有关,提示其对淋巴瘤预后判断有一定的参考价值。

TNF-β+252基因多态性及幽门螺杆菌感染与胃癌易感性的关系

目的探讨肿瘤坏死因子-β(TNF-β)+252基因单核苷酸多态性在胃癌(GC)患者及健康人群中的分布,探讨TNF-β+252基因多态性和幽门螺杆菌(Hp)感染对GC易感性的影响。方法用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCRRFLP)技术检测118例GC患者(GC组)和107例体检健康者(对照组)TNF-β+252位点的基因多态性,ELISA检测两组研究对象Hp感染情况,分析各基因型分布和等位基因频率和Hp感染与GC易感性之间的关系。结果 TNF-β+252三种基因型及等位基因频率在GC组和对照组间差异无统计学意义(P均>0.05)。GC组Hp感染率高于对照组(P<0.01)。分层分析显示,Hp感染者中等位基因A携带者(基因型G/A+A/A)分布频率在GC组和对照组间差异有统计学意义(P=0.047)。结论 Hp感染与TNF-β+252 A>G变异协同增加了GC易感性。

针刺夹脊穴对大鼠椎间盘LI-1α、TNF-β浓度及MRI影像影响的实验研究

目的:探究针刺夹脊穴对大鼠椎间盘LI-1α、TNF-β浓度及MRI影像的影响。方法:雄性SD大鼠30只,随机分为3组,每组各10只。针刺干预组、对照组麻醉后腹腔切开,分离后腹膜,暴露L5～6、L6～S1椎间盘左前缘,5号穿刺针分别刺入两椎间盘,深度3 mm,后缝合腹壁。4周后给予针刺干预组夹脊穴针刺,取大鼠双侧L5、L6夹脊穴(脊柱正中旁开3 mm),直刺0.5 mm,每天1次,连续10天。对照组不针刺;正常组不给予任何处理。随后各组随机选取5只大鼠行MRI检查,后将大鼠全部处死,取椎间盘组织离心后行ELISA法LI-1α、TNF-β浓度测定。结果:大鼠椎间盘LI-1α、TNF-β浓度在干预后A组与B组有显著差异(P<0.01);A、B组在造模后及干预后椎间盘MRI影像学分级、椎间盘高度无明显差异(P>0.05)。结论:针刺夹脊穴对腰椎间盘突出症大鼠椎间盘内LI-1α、TNF-β浓度有明显的抑制作用;短期内(4周)针刺夹脊穴对腰椎间盘突出症大鼠MRI影像学表现无影响。

糖尿病足不同辨证分型RAGE TNF-β基因表达

目的:检测不同中医辨分型糖尿病足患者截肢标本中RAGE、TNF-β、基因表达,以探讨其在糖尿病足发病中的作用,并分析其在不同证型间的关联性。方法:选择糖尿病足患者最为常见的气阴两虚瘀阻、气血两虚瘀阻、脉络热毒三种证型,以截肢的肌肉组织为标本,并以正常截肢患者的标本为对照,制备RNA,并逆转录,实时荧光定量PCR技术分析RAGE、TNF-β的含量。结果:三种证型间RAGE、TNF-β的含量无统计学意义,但与正常对照组相比均具有统计学意义,均呈低表达。结论:RAGE、TNF-β基因表达量的改变与糖尿病足的发病有关。

怠性脑梗死患者TNF-α和TNF-β的含量变化及相关因素分析

目的探讨急性脑梗死患者肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、肿瘤坏死因子-β（TNF-β）的含量变化及其相关因素的分析。方法选取65例脑梗死患者为观察组，同期健康体检人群40例为对照组，检测TNFF-α及TNF-β水平。结果观察组TNFF-α与TNF-β水平均明显高于正常对照组，差异有统计学意义（P〈0．05）。TNFF-α和TNF-β水平与神经功能缺损评分、脑梗死面积呈明显正相关（p均〈0．01）。评分越高，脑梗死面积越大，TNFF-α和TNF-β水平增高越明显。TNFF-α与TNF-β水平呈明显正相关（r=0．455，P〈0．01）。结论TNF-α与TNF-β参与了脑梗死早期发病过程。TNFF-α与TNF-β水平与脑梗死病情的严重程度及预后有关。

子宫内膜异位症与TNF-β G252A基因的相关性研究

目的:探讨肿瘤坏死因子(TNF-β)G252A基因在子宫内膜异位症发病机制中作用。方法:80例经腹腔镜和病理确诊的内异症(Ems)患者为Ems组,80例同期需采用腹腔镜排除子宫内膜异位症的健康妇女为对照组,取两组妇女静脉血,采用限制性片段长度多态性聚合酶链反应(PCR-RFLP)技术检测TNF-βG252A基因的基因频率,酶联免疫(ELISA)法测定血清TNF-β的含量,分析子宫内膜异位症与TNFβG252A基因之间的关系。结果:Ems组血清TNF-β的含量明显高于对照组(P<0.05),且Ems组血清中TNF-β的含量与EMT的分期呈正相关(r=0.8532);Ems组的A/A基因型及G/A基因型频率均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);A/A基因型患Ems的危险度是G/G基因型的3.5倍。结论:Ems患者血清中TNF-β的含量与EMT的分期呈正相关,A/A基因型是患Ems的危险基因型。

食管癌、贲门癌患者围术期外周血T细胞亚群、sIL-2R、TNF-β动态观测及相关因素研究

目的 探讨食管癌、贲门癌患者围术期外周血T淋巴细胞亚群、sIL - 2R、TNF - β改变的规律性、相关因素及临床意义。方法 应用SAP法、ELISA法及ABC -ELISA法分别检测 32例食管癌、2 2例贲门癌患者术前、术后 1、2、3周外周血T淋巴细胞亚群、sIL - 2R及TNF - β表达 ,并将所得结果与正常对照组作对比研究。 结果 与正常对照组比较 ,食管癌、贲门癌患者外周血CD3+、CD4+明显减少 ,而CD8+明显增加 ,CD4+/CD8+比值明显下降 (P <0 .0 1) ,sIL - 2R及TNF - β水平明显升高 (P <0 .0 1)。患者免疫功能损害程度与肿瘤TNM分期相关。手术创伤使机体免疫功能在术后短期内受到抑制。Ⅲ期手术探查组患者与同期手术根治组患者比较 ,sIL - 2R及TNF - β水平显著增加 (P <0 .0 1)。结论 食管癌、贲门癌患者存在细胞免疫功能紊乱 ,并与肿瘤的TNM分期相关。手术创伤可引起暂时性免疫抑制。动态检测食管癌、贲门癌患者外周血T淋巴细胞亚群、sIL - 2R及TNF - β表达对评估患者的细胞免疫功能。

TNF-β联合IL-6检测对早期诊断非小细胞肺癌术后放疗导致的放射性肺炎的初探

目的探讨TNF-β联合IL-6检测对早期诊断放射性肺炎(RP)的价值,以利于临床上早期发现RP,进而有利于早期治疗的开展。方法回顾性分析本院收治的27例非小细胞肺癌术后联合放疗的患者血清TNF-β、IL-6以及相关补体水平,对照组20例,均为非小细胞肺癌术后未予联合使用化疗的患者,收集其术后血清TNF-β、IL-6以及相关补体水平相关数值资料,观察组27例,收集其放疗前及放疗后3天、两周及30天对应的血清血清TNF-β、IL-6以及相关补体水平相关数值资料,并尤其关注放疗导致的RP的患者血清相应的参数水平,比较术后放疗病人血清TNF-β和IL-6相比于对照组的差异,分析RP患者血清TNF-β和IL-6水平是否存在时间依赖性,同时关注TNF-β、IL-6联合的诊断价值。结果非小细胞肺癌患者术后联合使用放疗相比于对照组可显著上调TNF-β和IL-6水平,并存在一定的时间依赖性,TNF-β联合IL-6相比于单独TNF-β或IL-6检测有利于发现早期RP患者,进而有利于早期治疗。结论 TNF-β联合IL-6检测可作为早期诊断RP的潜在指标。

TNF-β+252单核苷酸多态性与胃癌恶液质的关系

目的探讨肿瘤坏死因子-β（TNF-β）＋252基因单核苷酸多态性与胃癌病人癌性恶液质的关系.方法 105例营养不良胃癌病人,按照近6个月体质量的减轻率分成3组：A组,0～5%;B组,6%～10%;C组,〉10%.用PCR结合限制性内切酶检测胃癌病人及110例正常志愿者TNF-β＋252单核苷酸多态性.结果 TNF-β＋252A（TNFB2）出现的频率在胃癌组和对照组差异无显著性（P〉0.05）.在胃癌病人中,TNFB2出现的频率在A、B、C各组差异亦无显著性（P〉0.05）;恶液质病人TNFB2出现的频率与对照组比较差异无显著性（P〉0.05）.结论 TNF-β＋252基因单核苷酸多态性与胃癌恶液质的发生无相关性.

肾上腺髓质素对大鼠肾脏机械损伤早期TNF-β及其受体表达的影响

目的探讨外源性肾上腺髓质素(ADM)对肾脏机械性损伤早期肿瘤坏死因子-β(TNF-β)及肿瘤坏死因子受体(TNFR)表达的影响。方法选健康成年普通级Wistar大鼠104只,随机分为四组:对照组8只、单纯创伤组32只、创伤前注射ADM组32只、创伤后注射ADM组32只,后三组的动物分别于创伤后1 h、6 h、12 h和24 h各处死8只。采用自由落体打击仪直接打击大鼠脊肋区制作肾机械性损伤模型。ADM分别于创伤前或创伤后10 min采用腹腔注射法给药。实验动物采用快速心脏采血法处死。迅速解剖动物提取肾脏标本,10%甲醛固定。免疫组化染色观察TNF-β、TNFR在组织中的表达。结果单纯创伤组于创伤早期(1 h和6 h点)TNF-β表达低于对照组,外源性ADM早期(1 h和6h点)可上调TNF-β(P<0.05)。单纯创伤组于创伤早期(1 h和6 h点)TNFR表达低于对照组,外源性ADM(创伤前给药)早期(1 h和6 h点)可上调TNFR(P<0.05)。结论 TNF-β在肾脏损伤中主要参与的是抗损伤过程。TNFR对TNF-β具有动态调节作用。ADM在早期肾损伤过程中可以上调TNF-β、TN-FR,并与其相互协调,共同发挥对损伤器官的保护作用。

妊娠高血压疾病与TNF水平和TNF-β G252A基因多态性的相关性研究

目的研究肿瘤坏死因子(tumornecrosisfactor,TNF)水平和TNF-βG252A基因多态性与妊娠高血压疾病的关系。方法用放射酶联免疫法测定54例妊娠高血压疾病患者和60例健康对照者血清TNF水平,聚合酶链反应扩增TNF-β第一内含子含有1069位核苷酸A→G多态位点的基因片段,NcoⅠ内切酶进行限制性酶切反应。结果54例妊娠高血压疾病患者及60例正常对照者中TNF-β基因型及等位基因频率均无显著性差异(P>0.05),而血浆TNF水平妊娠高血压疾病组为(1.28±0.42)$g/L,显著高于对照组的(0.32±0.21)$g/L,两组之间比较差异有显著性意义(P<0.05)。结论血清TNF水平显著升高提示炎性反应在妊娠高血压疾病病程中有重要作用,TNF-βG252A基因多态性与妊娠高血压疾病无关联。

TNF-β、IL-6联合检测在放射性肺炎诊断中的应用价值

目的探究TNF-β、IL-6联合检测在放射性肺炎诊断中的应用价值。方法回顾性分析本院2016年1月～2018年7月收治的80例非小细胞肺癌患者,所有患者术后均进行放疗治疗,根据患者是否发生放射性肺炎进行分组,26例放射性肺炎患者设为观察组,54例非放射性肺炎患者设为对照组,对比两组患者各时期的TNF-β、IL-6水平变化情况,并采用相关性分析检验TNF-β、IL-6水平与放射性肺炎的相关性。结果观察组患者放疗前、放疗结束后4周TNF-β水平与对照组对比无显著差异(P> 0.05),但放疗中、放疗结束时、放疗结束后2周TNF-β水平均显著高于对照组(均P <0.05);观察组患者放疗前、放疗结束后4周IL-6水平与对照组对比无显著差异(P> 0.05),但放疗中、放疗结束时、放疗结束后2周IL-6水平均显著高于对照组(均P <0.05);TNF-β、IL-6水平均与放射性肺炎有明显相关性(P <0.05)。结论 TNF-β、IL-6水平变化能够提示放射性肺炎的进展情况,可用于放射性肺炎的临床诊断。

内蒙古汉族IgA肾病患者病理类型与TNF-β基因多态性关系的研究

目的:探讨内蒙古地区汉族IgA肾病(IgA nephropathy,IgAN)患者病理类型与肿瘤坏死因子β(tumor nec-rosis factor beta,TNF-β)基因多态性的关系。方法:选内蒙古地区汉族135例IgAN患者及105例健康献血者,盐析法提取外周血基因组DNA,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术确定TNF-β基因型,分析不同基因型IgAN病理类型的关系。结果:TNF-β的3种基因型与IgAN患者的病理类型间无统计学意义(P>0.05)。结论:TNF-β基因多态性与内蒙古地区汉族人群IgAN的病理类型无关。

内蒙古汉族IgA肾病患者TNF-β基因多态性研究

目的:探讨内蒙古地区汉族人群中IgA肾病(IgA nephropathy,IgAN)与肿瘤坏死因子-β(tumornecrosis factor beta,TNF-β)1069位点等位基因多态性的关系。方法:采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(polym erase chain reaction w ith restriction fragm ent length poly-morph ism s,PCR-RFLP)技术对内蒙古地区汉族107例IgA肾病患者及内蒙古地区汉族105例正常人的TNF-β基因的单碱基突变多态性进行分析。结果:IgA肾病患者的TNF-β*2等位基因频率(67.8%)较正常人(53.8%)明显升高(P<0.01)。结论:TNF-β*2等位基因可能为内蒙古汉族IgA肾病的易感基因。