TNF基因转导肿瘤浸润淋巴细胞的方法学研究

在总结Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ建立的ＴＮＦ－ＮｅｏＲ缺陷型逆转录病毒转染肿瘤浸润细胞（ＴＩＬ）的基础上，选用美国国家卫生院重组ＤＮＡ咨询委员会（ＲＡＣ）批准的逆转录病毒（Ｍｏ－ＭｕＬＶ）的衍生物作载体，对肿瘤坏死因子转导ＴＩＬ进行研究。实验结果提示：ＴＩＬ处于静息期与对数生长后期，当ＴＮＦ－ＮｅｏＲ缺陷型逆转录病毒转导ＴＩＬ细胞时，ＴＩＬ细胞增殖受到影响；最佳转导时间为ＴＩＬ分离培养后９～２５ｄ。各病毒感染复数值病毒转导对ＴＩＬ增殖倍数与生存天数影响不大，但病毒感染复数值越大，转导后ＴＩＬ起始呈抑制现象越大；然而Ｇ_（４１８）筛选后证实，病毒感染复数值越大，转导成功率越大。Ｌ_（９２９）细胞检测转导后ＴＩＬ呈高表达，ＰＣＲ检测ＴＮＦ目的基因已插入宿主ＤＮＡ中。