TNFRSF12A与肝癌的临床相关性及其与肿瘤免疫调控的相关研究

目的探讨肝癌发病机制中TNFRSF12A分子的作用。方法通过综合分析癌症基因图谱(Cancer Genome Atlas Program,TCGA)和单细胞测序数据,研究TNFRSF12A在肝癌中的表达情况及其与预后的相关性。HPA数据库分析TNFRSF12A在亚细胞内的定位,使用DAVID数据库进行GO和KEGG富集分析。TIME 2.0数据库分析TNFRSF12A与肝癌组织内免疫细胞浸润的相关性。结果TNFRSF12A在肝癌组织中高表达并与患者生存预后呈显著正相关(OS:HR=1.61,P=0.0070;RFS:HR=1.45,P=0.0370;PFS:HR=1.30,P=0.0990;DSS:HR=1.67,P=0.0270),同时与患者的年龄(P=0.0467)和BCLC分期(P=0.0456)也存在显著相关性。TNFRSF12A与肿瘤干细胞标志物(CD24、SOX4、ANPEP)共表达,提示其与肿瘤恶性程度高度相关。分子功能分析揭示其主要存在于细胞质中,并在细胞凋亡、侵袭、蛋白结合等过程中发挥作用。此外,TNFRSF12A与Treg细胞和免疫细胞浸润相关,揭示其在肿瘤免疫调节中可能发挥的作用。结论TNFRSF12A在肝肿瘤中表达显著升高,并与患者预后显著相关。肿瘤细胞可通过其与Treg产生的细胞因子发生互作,重塑肿瘤微环境。

系统性红斑狼疮病人外周血白细胞TNFRSF12mRNA表达的研究

目的 :了解肿瘤坏死因子受体超家族成员 12 (TNFRSF12 )mRNA在系统性红斑狼疮 (SLE)外周血白细胞中的表达是否异常 ,初步判断TNFRSF12是否为SLE的易感基因。方法 :采用TaqManone stepRT PCR方法 ,分别对SLE病人、正常人和类风湿性关节炎 (RA)病人外周血白细胞TNFRSF12mRNA的表达进行检测。结果 :SLE病人TNFRSF12mRNA的表达形式与表达量和正常人相比均存在差异 ,SLE病人白细胞存在TNFRSF12mRNA的两类形式剪切体 ,分别为编码膜结合蛋白形式和分泌形式的TNFRSF12 ,而正常人只有后者 ,在PHA刺激后才开始同时表达前者。并且TNFRSF12mRNA在SLE病人中的表达量与病情活动度和肾脏累及相关。结论 :提示TNFRSF12在SLE的发病机制中起一定作用 ,因此可能是SLE的易感基因。

miR-204-5p/TNFRSF12A轴对甲状腺乳头状癌细胞侵袭能力的影响及机制

背景与目的:前期,笔者通过生物信息学分析和验证发现miR-204-5p在甲状腺乳头状癌(PTC)中呈低表达,并可能是PTC发生发展中的关键分子。因此,本研究进一步探讨miR-204-5p对PTC细胞侵袭能力的影响及机制。方法:采用Transwell实验检测miR-204-5p过表达和敲低对PTC细胞系TPC-1细胞的侵袭能力影响;通过miRDB网站预测miR-204-5p下游靶基因,并采用Western blot实验、Transwell实验、GEPIA数据库分析及双荧光素酶报告基因实验验证。结果:Transwell实验结果显示,过表达miR-204-5p的TPC-1细胞侵袭能力明显降低,而miR-204-5p抑制的TPC-1细胞侵袭能力明显增强(均P<0.05)。miRDB网站预测显示,TNFRSF12A可能为miR-204-5p下游靶基因;Western blot结果显示,过表达miR-204-5p的TPC-1细胞TNFRSF12A表达下调,而miR-204-5p抑制的TPC-1细胞TNFRSF12A表达上调;过表达TNFRSF12A的TPC-1细胞侵袭能力明显增强,TNFRSF12A抑制的TPC-1细胞的侵袭能力明显降低;TNFRSF12A可逆转miR-204-5p对TPC-1细胞侵袭能力的影响(均P<0.05)。GEPIA数据库分析显示,TNFRSF12A在PTC组织中高表达。双荧光素酶报告基因实验结果显示,TNFRSF12A是miR-204-5p的靶基因。结论:miR-204-5p可靶向结合TNFRSF12A mRNA的3’UTR抑制TNFRSF12A的表达,而PTC细胞中miR-204-5p表达下调,削弱了其对TNFRSF12A表达的抑制,从而导致PTC细胞侵袭能力增强。

sCXCL16对弥漫大B细胞淋巴瘤的体外生物学影响与初步机制

目的探讨s CXCL16对弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B cell lymphoma,DLBCL)细胞体外生物学特征的影响,并分析其初步机制。方法采用CCK8法观察DLBCL细胞株增殖能力;应用Transwell法检测细胞的迁徙能力,全基因组表达谱芯片筛选不同干预组差异表达的基因;运用Western blot检测差异基因的蛋白表达。结果外源性s CXCL16重组蛋白对DLBCL细胞增殖影响差异无显著性,但可促进DLBCL细胞自身的迁移并具有剂量依赖性,使用CXCR6抗体可阻断该作用;外源性添加重组蛋白s CXCL16可影响DLBCL细胞多种基因表达,其中趋化因子配体/受体途径相关的13种基因出现上调; Western blot结果证实外源性添加s CXCL16重组蛋白可上调TNFRSF12A蛋白表达,而使用CXCR6抗体则降低其表达。结论 s CXCL16可能通过其自身受体CXCR6,以剂量依赖性模式促进DLBCL细胞的迁移,并调控多种趋化因子配体/受体的表达。