肿瘤细胞中两种TNFR的表达及新型rhTNF对肿瘤细胞生长的影响

目的 探讨ＴＮＦＲｐ５５和ＴＮＦＲｐ７５在各种肿瘤组织中的表达与新型ｒｈＴＮＦ对肿瘤细胞生长的抑制作用的关系。方法应用免疫组织化学染色法，观察１２０例肿瘤组织和１０株体外培养的肿瘤细胞中，ＴＮＦＲｐ５５和ＴＮＦＲｐ７５的表达及分布。同时应用结晶紫摄入法，观察ｎｒｈＴＮＦ对肿瘤细胞生长的抑制。结果 在肿瘤组织和肿瘤细胞中，ＴＮＦＲｐ５５的阳性表达率分别为８２．５％和９９％，ＴＭＦＲｐ７５分别为 ８４．２％和９８．８％，不同类型肿瘤间的表达无明显差异（Ｐ＞０．０５）．ｎｒｈＴＮＦ可抑制ＳＷ４８０、ＳＧＣ７９０１、８９１０ＳＭＭＣ７７２１和ＢＥＬ７４０２这５株肿瘤细胞生长，但是不能抑制另外５株肿瘤细胞Ａ５４９、ＰＬＡ８０１、Ｈｅｌａ、Ｅｃａ１０９和ＧＲＣ－ｌ的生长。结论ＴＮＦＲ广泛存在于各种肿瘤细胞上，ｎｒｈＴＮＦ抑制肿瘤细胞生长的程度与ＴＮＦＲｐ５５的表达率无相关性。

肿瘤坏死因子受体p55和p75在甲状腺癌组织中的表达及其意义

目的:研究肿瘤坏死因子受体(tumor necrosis factor receptor,TNFR)p55和p75在甲状腺癌组织中的表达及其与临床病理因素之间的关系,从而探索两型受体在甲状腺癌组织中的作用及意义。方法:应用免疫组织化学SP法检测41例甲状腺癌中TNFRp55和TNFRp75的表达情况,并以9例甲状腺腺瘤及7例腺瘤旁形态学正常的甲状腺组织作为对照。结果:①甲状腺癌组织中TNFRp55和TNFRp75的表达水平显著高于甲状腺腺瘤组及正常甲状腺组(P<0.001),而它们在甲状腺腺瘤和正常甲状腺组织中的表达水平无显著性差异(P>0.05)。②两型受体的表达与甲状腺癌的组织学类型密切相关,在乳头状癌组织中的表达水平高于滤泡状癌组织(TNFRp55,P<0.05;TNFRp75,P<0.001);而与甲状腺癌患者的年龄、性别、肿瘤大小、包膜是否受侵、淋巴结有无转移等临床病理因素无关。③在甲状腺癌组织中两型受体的表达呈正相关(r=0.77,P<0.001)。结论:TNFRp55和TNFRp75在甲状腺癌中协同高表达,参与了甲状腺癌的发生、发展过程。它们可以作为甲状腺癌诊断与鉴别诊断的病理学指标之一,但不能用来评估甲状腺癌的生物学行为及预后。

营养补偿和代谢控制提高细胞蛋白表达的研究

为解决连续灌注培养产物因营养物质不能有效利用而导致产率偏低的问题,降低生产成本,通过在发酵过程中测定表达重组肿瘤坏死因子受体p75:Fc(TNFRp75:Fc)蛋白的CHO工程细胞株对氨基酸成分的不同消耗速率,定量添加特定氨基酸作为营养补偿,提高了培养基中氨基酸的综合利用效率。同时,在连续灌注过程中通过对葡萄糖补加的限量控制,使培养体系中葡萄糖始终低于0.5 g／L,减少了乳酸蓄积对细胞的毒性作用,从而有效降低了灌注速率。结果显示, 在30L工作体积发酵规模上经过氨基酸补偿和葡萄糖控制的连续灌注培养工艺使最终重组蛋白产率(mg／L)和最终产量较工艺改进前提高2．1倍和3．7倍,分别达到388mg／L和244．4g,生产周期延长了一周。工艺改进前后重组蛋白的唾液酸含量和体外生物比活没有改变。通过营养补偿和代谢控制工艺策略可以有效提高连续灌注培养工艺重组肿瘤坏死因子受体p75:Fc蛋白的产率和产能,从而降低产业化成本。