多参数TOX免疫表型法的建立及在母细胞性浆细胞样树突状细胞肿瘤中的应用

目的:建立多参数流式检测胸腺细胞选择相关高迁移率族蛋白(TOX)在PD-1、Tim-3和CD244耗竭性T细胞中的免疫表型法,以及其在1例罕见CD4-CD56^(+)表型的血液恶性肿瘤母细胞性浆细胞样树突状细胞肿瘤(BPDCN)患者中的应用分析。方法:收集1例BPDCN患者骨髓(BM)和外周血(PB),2例非肿瘤手术患者和1例健康者BM以及11例健康者(HI)PB分别作为BM和PB对照组,利用多色流式单抗CD45、CD3、CD4、CD8、CD25、FoxP3、TOX、PD-1、Tim-3、CD244及相应同型对照进行流式细胞检测。结果:流式检测结果提示,BPDCN患者BM和PB中TOX^(+)CD3^(+)、TOX^(+)CD4^(+)和TOX^(+)CD8^(+)T细胞比例均比对照组升高;BPDCN患者BM和PB中TOX^(+)PD-1^(+)CD8^(+)、TOX^(+)Tim-3^(+)CD8^(+)和TOX^(+)CD244^(+)CD8^(+)耗竭性T细胞中的分布比例也显著高于对照组。此外,在BPDCN患者BM和PB的CD4^(+)CD25^(+)FoxP3^(+)Treg细胞中TOX^(+)细胞分布比例高于对照组;同时TOX^(+)细胞在PD-1^(+)CD4^(+)CD25^(+)FoxP3^(+)Treg、Tim-3^(+)CD4^(+)CD25^(+)FoxP3^(+)Treg和CD244^(+)CD4^(+)CD25^(+)FoxP3^(+)Treg耗竭性T细胞中的分布比例也明显高于对照组。结论:成功建立多参数流式细胞术检测PD-1、Tim-3和CD244耗竭性T细胞亚群中TOX免疫表型法,TOX可能是BPDCN患者T细胞免疫调节的重要转录因子。

再生障碍性贫血患者外周血CD8^(+)T细胞TOX与抑制性受体的表达水平及相关性分析

目的探讨再生障碍性贫血(AA)患者外周血CD8^(+)T细胞中胸腺细胞选择相关高迁移率族蛋白(TOX)与不同抑制性受体的表达水平,并进行相关性分析。方法回顾性选择2019年9月至2020年11月天津医科大学总医院血液科AA患者27例,其中男21例,女6例,年龄[M(Q_(1),Q_(3))]48(30,72)岁。健康对照者33名,其中男17名,女16名,年龄46(27,69)岁。通过流式细胞术检测AA患者及健康对照者外周血CD8^(+)T细胞中TOX、程序性细胞死亡受体‑1(PD‑1)、T细胞免疫球蛋白和黏蛋白结构域‑3(TIM‑3)、细胞毒性T淋巴细胞相关抗原‑4(CTLA‑4)、具有免疫球蛋白(Ig)和免疫受体酪氨酸抑制基序(ITIM)结构域的T细胞免疫受体(TIGIT)、穿孔素、颗粒酶B的表达水平。TOX表达水平与不同抑制性受体的相关性采用Pearson相关性分析。结果AA患者外周血CD8^(+)T细胞TOX、PD‑1、TIM‑3、CTLA‑4、TIGIT、穿孔素、颗粒酶B的表达水平分别为47.33%(41.47%,56.61%)、(30.61±12.37)%、(39.94±10.84)%、(6.21±3.40)%、(51.45±20.21)%、(71.32±22.46)%、(52.39±23.99)%,均高于健康对照组的27.32%(21.64%,46.96%)、(21.29±10.01)%、(21.11±3.00)%、(1.31±0.34)%、(30.80±13.40)%、(46.72±22.53)%、(21.75±16.43)%(均P<0.05)。CD8^(+)T细胞TOX的表达水平与PD‑1、TIM‑3、CTLA‑4、TIGIT、穿孔素、颗粒酶B的表达水平均呈正相关(r=0.49、0.65、0.70、0.54、0.58、0.48,均P<0.05)。结论AA患者外周血CD8^(+)T细胞TOX与不同抑制性受体的表达水平均高于健康对照组,且TOX表达水平与不同抑制性受体表达水平均呈正相关。

较低级别胶质瘤TOX基因表达水平与放疗敏感性的关联研究

目的探讨胸腺细胞选择相关高迁移率族蛋白(TOX)基因表达与较低级别胶质瘤(LGG)患者放疗敏感性的关系。方法采用生物信息学研究方法,选取肿瘤基因组图谱(TCGA)数据库中的474例LGG患者作为试验集(TCGA-474集),中国脑胶质瘤基因组图谱(CGGA)数据库中的两个不同的遗传数据集(分别包括412例和171例患者)作为验证集(CGGA-412集和CGGA-171集)。根据是否接受放疗将患者分层,根据TOX基因在LGG中的表达水平分为TOX高表达组和低表达组,绘制患者生存曲线,采用log-rank检验对比分析TOX高表达组和低表达组患者的总生存(OS)和无进展生存(PFS)。结果TCGA-474集患者OS多因素分析显示TOX高表达是OS的保护因素(HR=0.061,95%CI为0.005~0.791,P=0.044)。按放疗与否分层并调整混杂因素后,TOX高表达组患者在TCGA-474集、CGGA-412集、CGGA-171集的HR(95%CI)分别为0.405(0.261~0.629)、0.581(0.418~0.806)和0.464(0.269~0.800),P值分别为<0.001、0.001、0.008。TCGA-474集的放疗患者中,TOX高表达组患者的OS(P<0.001)和PFS(P<0.001)均较低表达组延长,差异有统计学意义。TOX高表达组患者的OS获益在CGGA-412集(P<0.001)和CGGA-171集(P<0.001)均较低表达组延长,差异有统计学意义。结论TOX的高表达可能与LGG的放疗敏感性有关,可能是LGG放疗敏感性的一个基因标记。

胸腺细胞选择相关高迁移率族蛋白在蕈样肉芽肿患者中的表达情况及临床意义

目的探讨胸腺细胞选择相关高迁移率族蛋白(TOX)在蕈样肉芽肿(MF)患者中的表达情况及临床意义。方法选择62例MF患者作为观察组,其中斑片期25例,斑块期24例,肿瘤期13例,同时选取30例良性炎症性皮肤病患者作为对照组。采用免疫组织化学染色法检测两组患者中TOX蛋白的表达情况,比较观察组和对照组患者中TOX蛋白的阳性表达率,比较斑片期、斑块期、肿瘤期MF患者中TOX蛋白的阳性表达率。结果观察组患者中TOX蛋白的阳性表达率为91.94%(57/62),明显高于对照组的30.00%(9/30),差异有统计学意义(P﹤0.01)。斑片期、斑块期、肿瘤期MF患者中TOX蛋白的阳性表达率分别为80.00%(20/25)、100%(24/24)、100%(13/13),差异有统计学意义(P﹤0.05);但两两比较,差异均无统计学意义(P﹥0.05)。结论TOX蛋白在MF患者中的表达水平较高,可能在疾病进展中具有一定作用,值得进一步研究。

蕈样肉芽肿皮损中TOX蛋白的表达及其诊断价值评估

目的探讨TOX蛋白在蕈样肉芽肿(MF)中的诊断价值。方法在四川大学华西医院皮肤科病理室收集2003—2016年获得的63份石蜡组织标本,其中30份为疑似MF病例标本,23份为确诊MF病例标本,10份良性炎症性皮肤病病例标本。采用TOX免疫组化染色,检测并比较TOX蛋白在各组中的表达情况。结果26份(86.7%)疑似MF标本TOX免疫组化染色阳性,20份(87%)确诊MF标本阳性。10份良性炎症性皮肤病标本中,3份TOX阳性。疑似MF组及MF组的TOX蛋白阳性率显著高于良性炎症性皮肤病组,且差异有统计学意义(P<0.05)。结论TOX蛋白在疑似MF和确诊MF病例中均有不同程度表达,且表达阳性率均明显高于良性炎症性皮肤病组,TOX可能作为MF的分子标志物之一。