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FQ-PCR技术在梅毒患者血标本Tp-DNA定量检测中的应用价值 被引量:1
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作者 丁瑞敏 《内蒙古医学杂志》 2020年第12期1440-1441,共2页
目的探究荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)技术在梅毒患者血标本Tp-DNA定量检测中的应用价值。方法选取我院68例疑似梅毒患者(2018年6月至2019年10月),采用FQ-PCR技术对患者治疗前及治疗后3个月、6个月进行Tp-DNA定量检测,并做快速血清反应... 目的探究荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)技术在梅毒患者血标本Tp-DNA定量检测中的应用价值。方法选取我院68例疑似梅毒患者(2018年6月至2019年10月),采用FQ-PCR技术对患者治疗前及治疗后3个月、6个月进行Tp-DNA定量检测,并做快速血清反应(RPR)、梅毒螺旋体颗粒凝集实验(TPPA)检测。以TPPA检测为"金标准",比较FQ-PCR及RPR的检测结果、FQ-PCR及RPR治疗3、6个月的转阴率、FQ-PCR检测治疗前后Tp-DNA定量数值。结果 FQ-PCR检查灵敏度、特异度、准确度分别为94.74%、81.82%、92.65%高于RPR检查73.63%、9.09%、63.24%(P<0.05);治疗后3、6个月FQ-PCR转阴率与TPPA比较无明显差异(P>0.05),RPR转阴率低于FQ-PCR、TPPA(P<0.05);阳性患者Tp-DNA定量数值经治疗后显著下降(P<0.05)。结论采用FQ-PCR技术对梅毒患者血标本Tp-DNA定量检测具有较高诊断效能,且可通过对Tp-DNA定量检测评估患者病情,具有较高疗效判定价值。 展开更多
关键词 荧光定量聚合酶链反应 梅毒 tp-dna定量检测
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梅毒治疗前后血中TP-DNA定量检测 被引量:10
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作者 曹育春 徐祖森 +1 位作者 陈兴平 万沐芬 《华中医学杂志》 CAS 2002年第3期144-145,147,共3页
目的 探讨血中梅毒螺旋体DNA(TP -DNA)定量在梅毒诊断和疗效观察中的临床价值及其治疗前后与联甲苯胺红不加热血清反应素试验 (TRUST)的关系。方法 对 2 9例 (Ⅰ期 12例 ,Ⅱ期 17例 )未经任何治疗的梅毒患者 ,用荧光定量聚合酶链式反... 目的 探讨血中梅毒螺旋体DNA(TP -DNA)定量在梅毒诊断和疗效观察中的临床价值及其治疗前后与联甲苯胺红不加热血清反应素试验 (TRUST)的关系。方法 对 2 9例 (Ⅰ期 12例 ,Ⅱ期 17例 )未经任何治疗的梅毒患者 ,用荧光定量聚合酶链式反应 (FQ PCR)检测苄星青霉素治疗前后血浆中TP DNA定量值并作血清TRUST检测。结果 ①治疗前 ,Ⅰ期TP DNA阳性率为 75 .0 0 % (9/ 12 )、TP DNA定量测定平均值为 (3.38± 2 .34)× 10 4copies/ml;Ⅱ期阳性率为 10 0 .0 0 % (17/ 17) ,TP DNA定量测定平均值为 (5 .73± 1.33)× 10 6copies/ml。②治疗后 3个月 ,Ⅰ期、Ⅱ期梅毒TP DNA阳性例数分别为 1/ 9例、5 /17例。TRUST(+)者 ,TP DNA阳性者定量平均值 :在Ⅰ、Ⅱ期分别为 2 .0 1× 10 2 copies/ml、5 .87× 10 2 copies/ml;TRUST(- )者 ,Ⅰ期无阳性病例 ,Ⅱ期为 3.0 9× 10 2 copies/ml。③治疗后 9个月 ,Ⅰ、Ⅱ期梅毒TP -DNA均为阴性 (零拷贝 ) ,TRUST转阴例数分别为 :12 / 12例、14 / 17例。结论 治疗前、治疗后 3个月、9个月TP DNA与TRUST结果并不完全一致 ,提示血浆TP 展开更多
关键词 梅毒 梅毒螺旋体DNA 定量检测 荧光定量PCR法 诊断 疗效判断
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A Preliminary Study of The Value of Quantitative Testing of TP-DNA In The Treatment of Patients with Syphilis
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作者 曹育春 徐祖森 +1 位作者 陈兴平 万沐芬 《Chinese Journal of Sexually Transmitted Infections》 2002年第1期19-22,共4页
Objectives: To explore the relationship betweenquantitative Treponema pallidum DNA (TP-DNA) PCR testingand the Toludine Red Unheated Serum Test (TRUST) inpatients with syphilis before and after treatment, and evaluate... Objectives: To explore the relationship betweenquantitative Treponema pallidum DNA (TP-DNA) PCR testingand the Toludine Red Unheated Serum Test (TRUST) inpatients with syphilis before and after treatment, and evaluatethe clinical value of quantitative TP-DNA testing in thediagnosis and treatment evaluation of syphilis. Methods: 29 patients with primary (12 cases) or secondary(17 cases) syphilis, who met the criteria set for this study wererecruited as subjects. All patients were treated with 2.4 millionunits benzathine penicillin IM weekly for 3 weeks.Quantitative tests of TP-DNA in the patients' plasma wereperformed using FQ-PCR before and after the treatment.Serologic tests including TRUST and TPPA were alsoperformed. Results: Before the treatment, 9 out of 12 primary syphilispatients (75%) and all secondary syphilis patients (17/17)tested positive for Treponema pallidum (TP) by TP-DNAtesting. The average quantitative test values of TP-DNA inprimary and secondary syphilis patients were (3.38±2.34)×10~4and (5.73±1.33)×10~6 copies/ml, respectively. After threemonths of treatment, 1 of the 9 primary and 5 out of 17secondary syphilis patients were positive upon TP-DNAtesting, respectively. The average quantities of TP-DNA were2.01×10~2 copies/ml in primary and 5.87×10~2 copies/ml insecondary syphilis patients with positive TRUST and TP-DNAtests, and 3.09×10~2 copies/ml for those with negative TRUSTrespectively. After nine months of treatment, all the primaryand secondary syphilis patients were negative upon TP-DNAtesting, while all primary and 14 of 17 (82.35%) secondarysyphilis patients showed negative TRUST results. Conclusion: That the results of TP-DNA tests are notconsistent with those or TRUST before and after treatmentindicates that quantitative TP-DNA testing may have valuableclinical significance in the early diagnosis and evaluation oftreatment regimens for syphilis. 展开更多
关键词 SYPHILIS TREATMENT Quantitative detection tp-dna
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TRUST滴度试验在梅毒治疗中的应用价值 被引量:1
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作者 于谨铭 孙华 李咏梅 《浙江临床医学》 2015年第11期2005-2006,共2页
目的探讨TRUST滴度试验在梅毒治疗及疗效监测中的应用价值。方法梅毒螺旋体抗体阳性患者141例,行血清TRUST滴度试验,同时应用荧光定量聚合酶链反应病毒核酸扩增(PCR)方法对患者分泌物进行梅毒螺旋体检测,分析TRUST滴度试验在梅毒... 目的探讨TRUST滴度试验在梅毒治疗及疗效监测中的应用价值。方法梅毒螺旋体抗体阳性患者141例,行血清TRUST滴度试验,同时应用荧光定量聚合酶链反应病毒核酸扩增(PCR)方法对患者分泌物进行梅毒螺旋体检测,分析TRUST滴度试验在梅毒螺旋体抗体阳性患者中的临床应用。结果141例梅毒螺旋体抗体阳性患者中,分泌物TP-DNA阳性79例(56.0%),TRUST滴度试验在梅毒螺旋体抗体阳性77例(54.6%),两者比较差异无统计学意义(χ2=0.17,P〉O.05)。TRUST滴度试验滴度高低与荧光定量PCR检测结果呈高度正相关(r=0.9459,t=24.89,P〈O.05)。结论TRUST滴度试验可以反映患者临床症状,对梅毒患者临床治疗及疗效监测有一定指导意义。 展开更多
关键词 梅毒螺旋体抗体 TRUST tp-dna
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茶多酚对小鼠肿瘤L_2细胞DNA引物酶-多聚酶α复合体活性的抑制作用 被引量:3
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作者 郝东磊 谢冰芬 +3 位作者 刘宗潮 朱孝峰 冯公侃 潘启超 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2000年第4期314-316,共3页
目的 :探讨茶多酚的抗癌作用机理。方法 :应用DE 5 2和P 11层析柱分离小鼠肿瘤L2 细胞DNA引物酶 多聚酶α复合体 ,并通过闪烁计数仪测定茶多酚对DNA引物酶的影响。结果 :茶多酚对小鼠肿瘤L2 细胞DNA引物酶 多聚酶α复合体活性有抑制作... 目的 :探讨茶多酚的抗癌作用机理。方法 :应用DE 5 2和P 11层析柱分离小鼠肿瘤L2 细胞DNA引物酶 多聚酶α复合体 ,并通过闪烁计数仪测定茶多酚对DNA引物酶的影响。结果 :茶多酚对小鼠肿瘤L2 细胞DNA引物酶 多聚酶α复合体活性有抑制作用 ,半数抑制浓度 (IC50 )值为 2 0 2 8(15 17~ 2 7 13) μg/ml;对DNA引物合成有促进作用 ;对引物延长亦有明显抑制作用 ,其IC50 值为 36 43μg/ml。结论 :茶多酚对DNA引物酶 多聚酶α复合体和引物延长活性有抑制作用 ,DNA引物酶 多聚酶α复合体是茶多酚的靶点之一。 展开更多
关键词 茶多酚 肿瘤细胞 DNA引物酶 多聚酶α 小鼠
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联合检测方法检测血液梅毒的评价 被引量:17
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作者 刘运保 古淦元 +1 位作者 虢娟 谢冬梅 《中国输血杂志》 CAS CSCD 2004年第4期255-256,共2页
目的 对梅毒血清学联合检测方法进行评价 ,寻找合适的梅毒血清学筛查方法。方法 采用联合检测方法RPR +ELISA ,TRUST +ELISA ,RPR +TRUST ,ELISA +ELISA检测献血者血液标本 ,对 4种联合检测方法进行比较 ,并作梅毒螺旋体DNA(TP DNA)... 目的 对梅毒血清学联合检测方法进行评价 ,寻找合适的梅毒血清学筛查方法。方法 采用联合检测方法RPR +ELISA ,TRUST +ELISA ,RPR +TRUST ,ELISA +ELISA检测献血者血液标本 ,对 4种联合检测方法进行比较 ,并作梅毒螺旋体DNA(TP DNA)相关性检测。结果 TRUST +ELISA组分别与各组比较 :TRUST +RPRP<0 .0 1 ;RPR +ELISA P >0 .0 5 ;ELISA +ELISA P >0 .0 5。结论 TRUST +ELISA联合检测方法灵敏度 99.2 4 % ,特异性 99.99% ,与PCR检测TP DNA相关性好 ,TRUST +ELISA联合检测方法可作为目前较为合适的梅毒血清学筛查方法。 展开更多
关键词 梅毒螺旋体(TP) 抗体 联合检测 血液tp-dna
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荧光定量聚合酶链反应技术在梅毒患者检测中的应用价值 被引量:4
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作者 刘燕平 吴忠勇 吴建松 《当代医学》 2013年第18期115-116,共2页
目的探析FQ-PCR技术对梅毒患者的检测价值。方法入选40例疑诊梅毒患者以Tp-DNApolA为靶基因,采用FQ-PCR技术对患者治疗前及治疗后3个月和6个月的血标本进行Tp-DNA定量检测,并做血清TPPA和RPR检测,以期判断FQ-PCR技术进行Tp-DNA定量检测... 目的探析FQ-PCR技术对梅毒患者的检测价值。方法入选40例疑诊梅毒患者以Tp-DNApolA为靶基因,采用FQ-PCR技术对患者治疗前及治疗后3个月和6个月的血标本进行Tp-DNA定量检测,并做血清TPPA和RPR检测,以期判断FQ-PCR技术进行Tp-DNA定量检测对梅毒诊断和疗效判断的价值。结果 FQ-PCR阳性检测率显著高于RPR(P<0.05),与TPPA法无显著差异(P>0.05);6个月时,Ⅰ期和Ⅱ期转阴率均为100%,显著高于RPR(P<0.05),与TPPA检测转阴率无显著差异(P>0.05);阳性患者的Tp-DNA定量平均值经治疗后下降显著(P<0.05)。结论采用FQ-PCR技术进行Tp-DNA定量检测对梅毒诊断敏感度高,具有较高的临床疗效判断价值。 展开更多
关键词 梅毒 检测 FQ-PCR技术 tp-dna
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DNA损伤的化学发光法测定和茶多酚对它的保护作用 被引量:27
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作者 张健 秦静芬 +2 位作者 曹恩华 张仲伦 郑雁珍 《生物物理学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第4期691-695,共5页
本文在CuSO4-Phen—Vc-H2O2-DNA化学发光体系中测量了·OH对DNA的损伤作用及茶多酚对DNA的保护作用。实验观察到,DNA损伤发光强度与DNA浓度成正比;化学发光动力学行为与测量温度有密切关系,... 本文在CuSO4-Phen—Vc-H2O2-DNA化学发光体系中测量了·OH对DNA的损伤作用及茶多酚对DNA的保护作用。实验观察到,DNA损伤发光强度与DNA浓度成正比;化学发光动力学行为与测量温度有密切关系,从而提示,发光测定应在相对恒定的温度下进行;茶多酚明显抑制了DNA损伤发光,在本体系中1.05μmol/L茶多酚即可抑制DNA损伤发光的50%。 展开更多
关键词 DNA损伤 羟基自由基 茶多酚 自由基清除剂
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血清梅毒螺旋体IgM型抗体在梅毒鉴别诊断中的价值
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作者 龙钟仕 《求医问药(下半月)》 2013年第7期170-171,共2页
目的:探讨血清梅毒螺旋体IgM型抗体在梅毒鉴别诊断中的应用价值。方法:选取2009年2月至2011年2月我院收治的98名确诊为梅毒的患者,分别对其血液标本进行TP-IgM检测和TP-DNA检测,并分别比较两种检测方法的阳性率及不同时期梅毒患者TP-Ig... 目的:探讨血清梅毒螺旋体IgM型抗体在梅毒鉴别诊断中的应用价值。方法:选取2009年2月至2011年2月我院收治的98名确诊为梅毒的患者,分别对其血液标本进行TP-IgM检测和TP-DNA检测,并分别比较两种检测方法的阳性率及不同时期梅毒患者TP-IgM检测的阳性率。结果:两种检测方法检测结果的阳性率无显著性差别,P>0.05,无统计学意义;不同时期梅毒患者TP-IgM的检测结果具有显著性差异,P<0.05。结论:血清梅毒螺旋体IgM型抗体在梅毒的鉴别诊断中具有重要的临床应用价值,值得推广和应用。 展开更多
关键词 梅毒螺旋体 tp-dna TP-IgM 鉴别诊断
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TP-M13-SSR技术在麦芽品种鉴定中的应用 被引量:6
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作者 张志军 黄克兴 +3 位作者 岳杰 刘明丽 祁明霞 董建军 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2018年第24期183-188,共6页
利用TP-M13-SSR标记技术构建麦芽品种指纹图谱,从163对简单序列重复(simple sequence repeat,SSR)引物中筛选到4对多态性丰富的SSR引物,每对引物的等位基因为3~10个不等,平均每个引物产生6.75个等位基因。在大批量引物筛选的情况下,M1... 利用TP-M13-SSR标记技术构建麦芽品种指纹图谱,从163对简单序列重复(simple sequence repeat,SSR)引物中筛选到4对多态性丰富的SSR引物,每对引物的等位基因为3~10个不等,平均每个引物产生6.75个等位基因。在大批量引物筛选的情况下,M13通用引物可大大降低SSR引物进行荧光标记的合成成本。利用4对SSR引物进行麦芽品种DNA指纹图谱构建,得到23个麦芽品种的指纹图谱及指纹数据库。该法检测成本低,方法准确可靠,可实现国内主要麦芽品种的鉴定,为啤酒企业在麦芽采购环节提供技术支持。 展开更多
关键词 麦芽 指纹图谱 TP-M13-SSR 品种鉴定
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梅毒孕妇不同治疗时期梅毒螺旋体DNA检测结果 被引量:6
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作者 高红 刘春艳 陈明 《中国预防医学杂志》 CAS CSCD 2018年第1期18-20,共3页
目的探讨不同治疗时期梅毒孕妇血清及阴道分泌物中梅毒螺旋体DNA(TP-DNA)的传染性。方法分析2015年1~12月,宁波市妇女儿童医院分娩的132例梅毒孕妇及其所产婴儿,孕早中期治疗组(56例)、孕晚期治疗组(54例)及未治疗组(22例)梅毒孕妇及其... 目的探讨不同治疗时期梅毒孕妇血清及阴道分泌物中梅毒螺旋体DNA(TP-DNA)的传染性。方法分析2015年1~12月,宁波市妇女儿童医院分娩的132例梅毒孕妇及其所产婴儿,孕早中期治疗组(56例)、孕晚期治疗组(54例)及未治疗组(22例)梅毒孕妇及其分娩婴儿于分娩后24h内检测血清TP-DNA,分娩1周后检测妇阴道分泌物TP-DNA。结果不同治疗时期,孕妇产后血清TP-DNA阳性率(χ~2=16.76,P<0.05)及阴道分泌物TP-DNA阳性率(χ~2=12.39,P<0.05)差异均有统计学意义。不同治疗时期,婴儿血清TRUST阳性率(χ~2=43.50,P<0.05)与TP-DNA阳性率(χ~2=25.70,P<0.05)差异均有统计学意义。随着孕妇TRUST水平的增高,所分娩婴儿血清TP-DNA阳性率有增高趋势,差异有统计学意义(χ~2=19.26,P<0.05)。结论梅毒孕妇及早规范治疗,可以降低血清、阴道分泌物的传染性,有效阻断先天性梅毒的发生。 展开更多
关键词 梅毒 梅毒螺旋体 梅毒螺旋体DNA 妊娠 新生儿 性传播疾病
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女性梅毒患者血清 尿液及阴道分泌物梅毒螺旋体DNA的检测分析 被引量:4
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作者 刘春艳 陈明 高红 《中国艾滋病性病》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期745-748,共4页
目的探讨女性梅毒患者经规范治疗前后,血清、尿液及阴道分泌物的梅毒螺旋体脱氧核糖核酸(TPDNA)含量,观察其泌尿、生殖道感染的情况,评估其体液的间接传染性。方法选取2015年1-12月,规范治疗前后女性梅毒患者110例,用荧光定量聚合酶链... 目的探讨女性梅毒患者经规范治疗前后,血清、尿液及阴道分泌物的梅毒螺旋体脱氧核糖核酸(TPDNA)含量,观察其泌尿、生殖道感染的情况,评估其体液的间接传染性。方法选取2015年1-12月,规范治疗前后女性梅毒患者110例,用荧光定量聚合酶链反应检测其血清、尿液及阴道分泌物TP-DNA,同时进行梅毒螺旋体抗体快速血浆反应素试验(RPR)。结果梅毒女性患者不同临床分期血清、尿液、阴道分泌物阳性率差异均有统计学意义(P<0.05);女性梅毒患者经规范治疗前,其血清、尿液及阴道分泌物TP-DNA阳性率分别为36.36%、7.27%、10.91%,治疗后分别为12.73%、0.91%、1.82%,差异均有统计学意义(P<0.05);两组组内血清、尿液及阴道分泌物中的TP-DNA阳性率之间比较差异均有统计学意义(P<0.05);女性梅毒患者经规范治疗后,RPR无明显变化组血清TP-DNA阳性率为21.43%,高于治疗有效组血清TP-DNA检测阳性率(3.70%),差异有统计学意义(P<0.05);将女性梅毒患者按照血清RPR滴度分为1∶2、1∶4~1∶8和1∶16三组,比较三组血清、尿液、阴道分泌物的TP-DNA阳性率,结果各组TP-DNA阳性率差异均有统计学意义(P<0.05)。血清TP-DNA阳性率与血清RPR滴度呈正相关(r=0.710,P<0.05)。结论女性梅毒患者的血清、尿液、阴道分泌物中存在梅毒螺旋体,治疗后仍有部分血清、尿液及阴道分泌物中检出TP-DNA阳性,体液也是梅毒的间接传染源。 展开更多
关键词 女性梅毒患者 血清 尿液 阴道分泌物 梅毒螺旋体脱氧核糖核酸
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A novel three primers PCR (TP-PCR) method to obtain recombinant DNA molecule independent of restriction enzyme 被引量:2
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作者 Chaoyang Deng Guisheng Song +1 位作者 Junwang Xu Zhen Zhu 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 2002年第24期2067-2070,共4页
In this note, we report a novel and efficient three primers PCR (TP-PCR) method to rapidly generate recombinant DNA molecule at precise junction between two arbitrary DNA fragments. TP-PCR method is characterized by i... In this note, we report a novel and efficient three primers PCR (TP-PCR) method to rapidly generate recombinant DNA molecule at precise junction between two arbitrary DNA fragments. TP-PCR method is characterized by its reaction system with two templates and three primers, which can produce a recombinant DNA molecule in one PCR reaction. The main advantages of this method are the independence of sequences at the recombination site, the rapid-ness, and the easy establishment of adequate conditions. This method has been successfully applied to constructing a fusion protein gene, sck gene. 展开更多
关键词 DNA recombination TP-PCR COWPEA TRYPSIN inhibitor.
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新型载体preS1-tp融合蛋白介导乙型肝炎病毒靶向定位序列小干扰RNA有效抑制乙型肝炎病毒复制和cccDNA合成
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作者 曾艳丽 高飞 +6 位作者 张璨 魏君锋 马力 丁岗强 李威 尚佳 康谊 《中华肝脏病杂志》 CSCD 北大核心 2021年第2期126-132,共7页
目的使用preS1-tp融合蛋白作为新型的载体,介导针对乙型肝炎病毒(HBV)核心蛋白羧基端核定位信号(NLS)区的小干扰RNA(siRNA)进入感染HBV的肝细胞,从而抑制HBV复制和共价闭合环状DNA的形成。方法以慢病毒感染系统为基础,建立表达人牛磺胆... 目的使用preS1-tp融合蛋白作为新型的载体,介导针对乙型肝炎病毒(HBV)核心蛋白羧基端核定位信号(NLS)区的小干扰RNA(siRNA)进入感染HBV的肝细胞,从而抑制HBV复制和共价闭合环状DNA的形成。方法以慢病毒感染系统为基础,建立表达人牛磺胆酸钠共转运蛋白多肽的HepG2.2.15细胞;针对HBV NLS区设计合成siRNA;表达纯化preS1-tp融合蛋白,检测其进入细胞和与DNA结合的能力;以preS1-tp融合蛋白为载体,介导NLS siRNA递送至HepG2.2.15-牛磺胆酸钠共转运蛋白多肽细胞中,观察其对HBV复制和共价闭合环状DNA水平的影响。多组间比较采用方差分析,计量资料用t检验分析组间差异。结果成功构建HepG2.2.15-牛磺胆酸钠共转运蛋白多肽细胞株并合成筛选出显著抑制HBV复制的HBV NLS siRNA。纯化并大量表达preS1-tp融合蛋白,以该融合蛋白为载体靶向输送HBV NLS siRNA,结果显示,融合蛋白可以有效靶向输送siRNA至HepG2.2.15-牛磺胆酸钠共转运蛋白多肽细胞,不仅可有效抑制细胞中HBV mRNA,HBsAg和HBeAg表达,还能显著降低HBV DNA和共价闭合环状DNA的水平。结论preS1-tp融合蛋白利用preS1与肝细胞HBV受体结合,tp与核酸结合的双功能特点,将针对HBV NLS的siRNA靶向至感染HBV的靶细胞,靶向阻断rcDNA转运入细胞核,使siRNA发挥抑制HBV复制和共价闭合环状DNA合成的作用,为HBV感染所致慢性乙型肝炎治疗提供新策略,为彻底清除体内HBV提供新的研究视角。 展开更多
关键词 共价闭合环状DNA 牛磺胆酸钠共转运蛋白多肽 细胞核定位信号干扰RNA HEPG2.2.15细胞 preS1-tp融合蛋白
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