TP53INP2/DOR在转录调控、细胞自噬和相关疾病中的作用

肿瘤蛋白p53诱导的核蛋白2(TP53INP2),也称糖尿病与肥胖调控蛋白(DOR),在骨骼肌、心肌和脑等代谢旺盛的组织中表达水平较高。TP53INP2在细胞核内主要发挥转录辅激活因子的作用,如作为甲状腺激素受体的辅激活因子调控甲状腺激素相关基因的表达。后续研究发现,TP53INP2为细胞内重要的分解代谢途径—细胞自噬所必需,饥饿时TP53INP2出核参与自噬的起始。在骨骼肌中,TP53INP2通过促进自噬导致肌肉流失,而在白色脂肪组织中,TP53INP2则通过促进自噬抑制脂肪前体细胞的分化。此外,在营养丰富的条件下,TP53INP2能够定位于核仁,协助r DNA转录起始前复合物的组装,促进r DNA的转录,参与细胞内重要的合成代谢—核糖体的生物发生。临床统计数据表明,TP53INP2的表达水平与糖尿病和某些类型的癌症早期的发生发展密切相关。本文对TP53INP2在转录调控、细胞自噬和相关疾病如癌症与糖尿病中的生物学功能进行综述。

ITGA3、TP53INP2和AXIN2基因多态性与甲状腺乳头状癌发病的关联性分析

目的:探讨ITGA3、TP53INP2和AXIN2基因多态性与甲状腺乳头状癌(PTC)的关联性,为防治PTC提供依据。方法:收集56例PTC患者(病例组)的血液,同时取50例甲状腺正常人(对照组)血样。应用激光解析电离飞行时间质谱技术检测ITGA3、TP53INP2和AXIN2基因共14个tag SNPs的基因型,比较病例组和对照组各位点基因型频数和等位基因频数分布差异,采用UNPHASED3.1.4软件分析2个及2个以上位点组成的单倍体型与PTC的关系。结果:Hardy-Weinberg平衡定律检验,14个位点在2组研究对象中的基因型频数分布符合Hardy-Weinberg平衡定律(P>0.05)。AXIN2基因的rs11655966、rs3923086和rs7591位点在病例组和对照组各等位基因频数分布差异有统计学意义(χ2=6.029,df=1,P=0.014;χ2=4.518,df=1,P=0.034;χ2=4.674,df=1,P=0.031),TP53INP2基因上rs910870位点在病例组和对照组的各等位基因频数分布差异有统计学意义(χ2=4.583,df=1,P=0.032),ITGA3基因上5个tag SNPs基因型在病例组和对照组各位点基因型频数和等位基因频数分布差异无统计学意义(P>0.05)。多位点联合分析,rs7210356-rs7591-rs4074947-rs11655966-rs3923086-rs4791169-rs224030单倍体系统在病例组和对照组中的分布差异有统计学意义(P<0.05)。结论:AXIN2基因的rs11655966、rs3923086和rs7591位点可能与PTC发病有关联,AXIN2基因中多个位点组成的单倍体型可能与PTC发病有关联;TP53INP2基因的rs910870位点可能与PTC发病有关联,ITGA3可能与PTC发病无关联。

新疆哈萨克族及汉族食管鳞癌中TP53INP2mRNA的差异表达

目的探讨TP53INP2m RNA在新疆哈萨克族及汉族食管鳞癌中的表达情况。方法收集新疆哈萨克族食管鳞癌组织及对应的癌旁正常食管组织和汉族食管鳞癌组织及对应的癌旁正常食管组织各8对,运用q RT-PCR技术检测新疆哈萨克族食管鳞癌组织和汉族食管鳞癌组织及其对应的癌旁正常食管组织中TP53INP2m RNA的相对表达情况。结果 TP53INP2m RNA在哈萨克族食管鳞癌组织中的表达低于哈萨克族癌旁正常食管组织(P<0.05)。TP53INP2m RNA在汉族食管鳞癌组织中的表达低于汉族癌旁正常食管组织(P<0.05)。TP53INP2m RNA在哈萨克族食管鳞癌中的相对表达量低于汉族食管鳞癌(P<0.05)。TP53INP2m RNA在哈萨克族正常组与汉族正常组中的表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论 TP53INP2m RNA可能与新疆哈萨克族及汉族食管鳞癌的发生、发展有关。

干扰TP53INP2抑制牛成肌细胞分化

【背景】肌肉可以维持哺乳动物运动功能并调节机体代谢,它的数量和分布对肉质有重要影响,骨骼肌的生长发育及其遗传特性在很大程度上影响甚至决定家畜的产肉量和肉品质,研究骨骼肌的生长发育具有重要意义。TP53INP2对自噬的调控作用以及对前体脂肪细胞分化的调控机制已有研究,而对于牛成肌细胞分化的影响尚未报道。【目的】探究TP53INP2对秦川牛成肌细胞分化的影响,为肉牛肉用性状分子育种工作提供理论依据。【方法】利用实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR,RT-qPCR)技术检测了TP53INP2在24月龄秦川牛不同组织中的表达特性,同时分析了其在体外培养的牛骨骼肌成肌细胞不同分化时期的表达规律;合成TP53INP2基因siRNA并转染秦川牛成肌细胞,转染后12h进行诱导分化,观察成肌细胞表型变化,并利用RT-qPCR技术和Western Blot技术分别检测其在诱导分化第四天时分化标志基因和蛋白的表达情况。【结果】1.RT-qPCR结果显示,TP53INP2在成年秦川牛背最长肌组织中表达量最高,在小肠组织中表达量最低。TP53INP2在成年牛心脏、肝脏、肾脏、网胃、瘤胃中表达量较高,在其余组织中表达量较低(与背最长肌相比)。2.随着成肌细胞的分化,该基因在第0—4天表达量呈上升趋势且在第4天达到峰值,随后表达量呈下降趋势。3.在成肌细胞中干扰TP53INP2后,试验组肌管的数量和长度均显著低于对照组。4.干扰TP53INP2并提取细胞总RNA,RT-qPCR结果显示,成肌细胞分化标志基因肌细胞生成素(MYOG)和肌球重链蛋白3(MYH3)相对于对照组表达量显著降低。5.干扰TP53INP2并提取细胞总蛋白,Western Blot结果显示,试验组MYOG、MYH3、MYOD的蛋白表达量均降低且与对照组相比差异极显著。【结论】干扰TP53INP2对牛成肌细胞的分化具有抑制作用,提示该基因可能对秦川牛肌肉组织的生长发育具有重要的调控作用,可对其进行深入的功能研究以期用于肉牛的分子育种实践中。

TP53INP1高表达在砷剂杀伤肺腺癌细胞中的增敏作用

目的构建TP53INP1高表达的肺腺癌A549细胞,初步研究提高TP53INP1的表达能否提高砷剂对肺腺癌细胞的杀伤作用。方法构建TP53INP1重组真核表达质粒,以慢病毒为载体将其转染到A549细胞,建立稳定高表达TP53INP1基因的A549-TP53INP1细胞株,以流式细胞术和MTT实验检测As_2O_3处理后A549-TP53INP1细胞的凋亡和存活率。结果成功构建稳定A549-TP53INP1细胞株。流式细胞术结果显示,相同剂量As2O3作用下(5~40μmol/L),A549-TP53INP1细胞凋亡率[(15.6±3.5)%]显著高于A549细胞[(10.0±2.5)%](P<0.05)。MTT实验显示,As_2O_3处理后A549-TP53INP1细胞的IC50值[(44.64±6.84)μmol/L]显著低于A549细胞[(54.25±6.13)μmol/L](P<0.05)。结论 TP53INP1高表达可增加砷剂对肺腺癌细胞的杀灭作用,提示TP53INP1可作为砷剂治疗肺癌的增敏靶点。

miR-630在喉鳞状细胞癌发展中的调控机制研究

目的探讨miR-630在喉鳞状细胞癌(LSCC)发展中的调控机制。方法从武汉科技大学附属孝感市中心医院耳鼻喉科收集获得24例临床LSCC标本和24例癌旁组织。体外培养正常人鼻咽细胞系hacat和人喉癌细胞系TU212,荧光定量PCR测定miR-630和下游靶标TP53INP2的表达情况。miR-630和下游靶标TP53INP2的相关性采用Pearson分析。采用特异性干扰miR-630的SiRNA转染TU212细胞,蛋白印迹监测TP53INP2蛋白表达情况。结果与癌旁组织相比,LSCC组织中miR-630表达明显升高,差异有统计学意义(t=8.882,P<0.000 1);TU212细胞中miR-630的表达明显高于hacat细胞,差异有统计学意义(t=8.303,P<0.000 1)。Ⅲ、Ⅳ期癌组织中miR-630表达比Ⅰ、Ⅱ期癌组织明显升高,差异有统计学意义(t=2.336,P=0.029)。根据预测miR-630的靶基因为TP53INP2。TP53INP2在喉癌组织和细胞系中的表达均下调,差异有统计学意义(P<0.05)。在喉癌组织中TP53INP2的表达与miR-630呈负相关,差异有统计学意义(P<0.05)。在TU212细胞中转染SiRNA后,相对于对照组和NC组,miR-630的表达明显降低,TP53INP2的表达明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 miR-630在LSCC中过表达,与不良预后相关,通过负性调控TP53INP2从而促进肿瘤生长和转移。