TPCA-1抑制破骨细胞的分化及功能分析

目的探讨TPCA-1对破骨细胞的分化作用及NF-κB(Nuclear factor-kappa B)通路的调节作用.方法将不同浓度的TPCA-1作用于小鼠骨髓来源的巨噬细胞(Bone marrow derived macrophages,BMDM),通过抗酒石酸酸性磷酸酶(Tartrate-resistant acid phosphate,TRAP)试剂盒染色测定评估破骨细胞的分化和功能,CCK-8(Cell Counting Kit-8)试剂盒检测细胞活性,Western Blot和实时定量PCR(Quantitative real-time PCR)检测破骨特异性指标,μCT检测卵巢切除导致的骨质疏松模型小鼠的骨量丢失变化.结果TPCA-1可以减少破骨细胞数量和形成,抑制NF-κB通路标志蛋白p65与IKK-2,同时能够有效抑制相关基因及蛋白表达程度.结论TPCA-1能够在体内外抑制破骨细胞分化.

IKK-2受体阻滞剂对角膜基质成纤维细胞的作用及机制

背景:研究证实角膜基质成纤维细胞在脂多糖刺激时表达白细胞介素8。成纤维细胞对脂蛋白或其他炎性递质的不同反应,可能构成了不同组织在炎症反应中的不同特征。目的:观察IKK-2受体阻滞剂(TPCA-1)对脂多糖作用下人角膜基质成纤维细胞分泌炎性细胞因子、趋化因子、细胞间黏附分子的抑制作用及其信号转导途径,与地塞米松进行比较,并联合应用探讨其替代或协同作用。方法:测量培养的人角膜基质成纤维细胞在基础状态下及脂多糖作用下分泌白细胞介素1、肿瘤坏死因子α、白细胞介素6、白细胞介素8水平以及IKK-2受体阻滞剂(TPCA-1)、地塞米松干预后的变化,检测细胞表面细胞间黏附分子1及细胞内白细胞介素6表达水平,从mRNA水平验证细胞间黏附分子1、白细胞介素6、白细胞介素8表达水平的变化。检测上述情况下细胞核因子κB表达。结果与结论:脂多糖诱导了人角膜基质成纤维细胞白细胞介素6,白细胞介素8及细胞间黏附分子1的分泌及表达增加,IKK-2受体阻滞剂(TPCA-1)抑制上述作用,TPCA-1的抑制作用是通过阻断了核转录因子κB信号转导途径实现的,地塞米松表现相似的抑制作用,但是通过不同的信号转导途径实现的。结果提示IKK-2受体阻滞剂与地塞米松有协同作用,可能成为治疗感染性角膜疾病中地塞米松的替代药物或补充。