TRAP-SYBR-Green染色法检测大鼠睾丸组织内端粒酶活性的实验研究

目的 研究不同年龄SD大鼠睾丸组织内端粒酶活性表达及其意义。方法 应用TRAP SYBR Green染色法 ,对各年龄组健康雄性SD大鼠睾丸组织中端粒酶活性进行了检测 ,并结合光镜、电镜观察对端粒酶活性在不同年龄SD大鼠睾丸组织内的表达状况进行了研究。结果 从出生后第 1d直到第 2 7个月 ,各年龄组雄性SD大鼠的睾丸组织中均可检测到端粒酶活性的表达 (阳性率 10 0 % )。出生后第 9～ 39dSD大鼠睾丸中可检测到高水平的端粒酶活性。A型精原细胞表达高水平的端粒酶活性。结论 SD大鼠睾丸组织中终生表达端粒酶活性 ,A型精原细胞作为雄性生殖系统的干细胞 。

碱性副品红染色法检测木质部导管栓塞技术改进

染色法是测量导管长度、直径、导管分布以及栓塞脆弱性的重要方法。在测量导管栓塞时,染色压力和时间条件将极大地影响实验结果的准确性。为准确利用染色法测定刺槐Robinia pseudoacacia导管栓塞状况,本研究通过使用充气组(人为栓塞100%)以及冲洗组(完全去除栓塞)对碱性副品红染色法进行了压力、时间条件的改良。结果表明,当压力在0.04kpa,染色时间60min时,实验结果最为准确可靠。在此压力下染色过程不会冲开栓塞导管,配合60 min的染色时间可对未栓塞导管进行充分染色。另外,本研究通过诱导组,利用离心机法对枝条诱导不同程度的栓塞与染色法进行了对比验证,结果表明在该染色条件下,可以很好地反映茎段的栓塞状况,保证了实验结果的准确性。在后续试验中,使用碱性副品红染色法研究木质部栓塞时可以沿用此压力及时间条件。

甲苯胺蓝快速染色法在术中冰冻诊断中的应用研究

目的本研究旨在探究甲苯胺蓝快速染色法和传统HE染色法在术中冰冻诊断中的应用,并比较其染色结果和报告及时率。方法选取宁夏医科大学总医院病理科2023年至2024年术中冰冻标本2403例,应用传统HE染色方法及甲苯胺蓝快速染色方法,比较二者在术中冰冻染色中的区别,验证甲苯胺蓝染色是否可以应用于术中冰冻。结果在术中冰冻中,甲苯胺蓝快速染色法可以将细胞染成不同强度的蓝色,可以很好地鉴别细胞不同结构以及细胞形态,其镜下特点与传统的HE染色方法差别不明显,同时甲苯胺蓝快速染色法还能将鳞癌中的细胞间桥清晰显示,但是HE无法显示;甲苯胺蓝快速染色法染色时间为5~10 s,与传统的HE染色方法染色时间具有明显差别(P<0.05);TB快速染色法方便快捷,经济实用。结论本研究证实了甲苯胺蓝快速染色法在术中冰冻诊断中的应用效果显著,快速且结果稳定。

包头地区1 249例浅部真菌病患者中荧光染色法和KOH湿片法应用对比研究

目的:分析比较荧光染色法和KOH湿片法检测浅部真菌病的效果及不同位置检测结果比较。方法:收集2021年10月至2023年3月在包头医学院第二附属医院皮肤科就诊拟诊断为浅部真菌病患者的标本,分别采用荧光染色法和KOH湿片法直接镜检,比较阳性率检出结果,并进一步针对不同检测部位检测阳性率比较分析。结果:KOH湿片法和荧光染色法分别检测558例和691例患者(阳性率分别为38.35%和58.47%),阳性率差异有统计学意义(P<0.001);且头面部、手部、足部、躯干、腹股沟及甲部位荧光染色法阳性检出率均高于KOH湿片法,差异有统计学意义(P<0.05),差异由大到小依次为足部、头面部、腹股沟、手部、甲部、躯干部(P<0.001)。结论:荧光染色法在浅部真菌病的实验室检验中阳性检出率明显优于KOH湿片法,可以降低临床漏诊误诊率,在甲部、足部、腹股沟、头面部的检测中可作为优选,手部、躯干部则根据临床医生的临床经验在KOH湿片法或荧光染色法中选择,以减轻患者经济负担。

荧光染色法在孢子丝菌病组织病理诊断中的应用

目的:探讨荧光染色法在孢子丝菌病组织病理切片的致病菌检测的应用价值,为孢子丝菌病的诊断提供新方法。方法:收集北华大学附属医院皮肤科就诊的疑诊孢子丝菌病患者的临床资料,取患者皮损处组织,分别进行真菌培养和组织病理学检查,对石蜡包埋组织进行平行试验,染色方法包括苏木精-伊红(HE)染色、过碘酸雪夫(PAS)染色和基膜六胺银(PASM)染色和真菌荧光染色,以真菌培养阳性为金标准,比较其阳性率和染色效果。采用SPSS 24.0软件进行统计学分析。结果:45例临床疑诊孢子丝菌病患者真菌培养阳性36例(80.00%),HE染色均为非特异性肉芽肿性改变,PAS染色阳性30例(66.67%),PASM染色阳性30例(66.67%),荧光染色阳性40例(88.89%)。由真菌培养阳性病例中染色方式与阳性率的交叉列联表及卡方检验结果可知,染色方式与阳性率存在显著的相关关系(P<0.05);9例真菌培养阴性的疑诊孢子丝菌病患者,荧光染色阳性4例,HE、PAS及PASM染色法结果均阴性。结论:荧光染色法检测孢子丝菌病患者组织切片中病原体阳性率高,具有高灵敏、高特异性的优点,可为临床诊断提供依据,具备临床应用前景。

真菌荧光染色法在肺组织冰冻切片中的应用

冰冻切片对临床术中快速诊断意义重大[1]。肺冰冻切片多用于肺部肿瘤的快速良恶性诊断,其中良性病变的真菌感染主要通过常规石蜡切片PAS染色及六胺银染色来明确诊断[2]。近年来荧光染色法检测的应用越来越多[3]。针对石蜡制片耗时长的问题,本研究采用肺冰冻切片真菌荧光染色。

皮肤真菌检查中荧光染色法与KOH法的应用比较分析

目的:对比分析荧光染色法和KOH法在皮肤真菌检查中的效果。方法:将临沂市皮肤病医院2021年1月至2023年6月皮肤科门诊接诊的高度疑似真菌感染患者605例作为研究对象,收取患者的标本分别进行荧光染色法和KOH湿片法检测,对比不同真菌感染的检出率。结果:荧光染色法检测的标本镜下可清晰观察真菌的轮廊与菌丝,真菌轮廊呈现亮蓝色,菌丝与周围的背景容易分辨;KOH湿片法检测的标本镜下可见背景昏暗并且较为杂乱,反差比较小,真菌的结构与杂质之间无法清晰鉴别;荧光染色法的总阳性率为42.48%(257/605),明显高于KOH检测法的22.81%(138/605),且不同部位及不同疾病的检测结果中荧光染色法也均高于KOH法(P<0.05)。结论:与KOH湿片法相比,荧光染色法对皮肤真菌的检测效果更理想,能够辅助临床诊断,值得推广应用。

比较细菌培养法与革兰染色法在阴道细菌检验中的应用分析

目的:对比细菌培养法与革兰染色法在阴道细菌检验中的应用价值。方法:选取2021年10月-2022年10月佛山市第三人民医院就诊的120例细菌性阴道炎疑似患者进行研究,所有患者均经细菌培养法和革兰染色法行细菌检验,对比两种方式不同类型阴道细菌阳性检出率,以Amsel临床诊断标准为“金标准”,对比两种方式疾病诊断价值和不同致病菌检出率,另对比两种方式检查时间和满意度情况。结果:细菌培养法诊断阴道细菌的灵敏度为95.65%、特异度为82.14%、准确性为92.50%,阳性预测值为94.62%,阴性预测值为85.19%,革兰染色法诊断阴道细菌的灵敏度、特异度、准确性、阳性预测值和阴性预测值分别为83.70%、50.00%、75.83%、84.62%和48.28%,差异有统计学意义(P<0.05);细菌培养法对加特纳菌、棒状杆菌和肠球菌的检出率明显高于革兰染色法,差异有统计学意义(χ^(2)=6.628、4.694、7.336,P<0.05);细菌培养法检查时间为(4.21±1.18)h,长于革兰染色法的(0.44±0.08)h,差异有统计学意义(t=34.918,P<0.05);患者满意度高于革兰染色法,差异有统计学意义(Z=2.422,P<0.05)。结论:与革兰染色法比较,细菌培养法可准确诊断不同类型阴道细菌,灵敏度和特异度都比较强,患者更为满意。但前者耗时短,能够快速获得诊断结果,可根据临床需求合理选择检验方式。

术前超声联合术中亚甲蓝染色法前哨淋巴结活检术对乳腺癌腋窝淋巴结转移的预测

分析术前超声联合术中亚甲蓝染色法前哨淋巴结活检术对乳腺癌腋窝淋巴结转移的预测作用。方法 纳入2021年7月至2022年7月65例我院收入的满足研究条件的患者,在术前采用超声进行检查,依据结果对腋窝可疑淋巴结进行标记,术中给予亚甲蓝染色进行前哨淋巴结活检,对于阳性及部分阴性患者实施腋窝淋巴结清扫。通过评估术前超声联合术中亚甲蓝染色法前哨淋巴结活检术的特异性、灵敏度、阴性预测值、阳性预测值以评估该方法对腋窝淋巴结转移的预测价值,同时对并发症发生情况以及患者术后生活质量进行对比,以评估该方法的安全性。结果 术前超声联合术中亚甲蓝染色法前哨淋巴结活检术的准确度为93.33%[(17+25)/45],敏感性94.44%(17/18),特异性92.59%(25/27),阳性预测值89.47%(17/19),阴性预测值96.15%(25/26),与腋窝淋巴结清扫相比无明显差别(P>0.05)。清扫组和未清扫组分别比较2组间并发症发生情况,前者明显偏高,差异有统计学意义(P<0.05);生存质量评估结果提示差异显著,未清扫组术后症状评分变化值更低(P<0.05)。结论 在预测乳腺癌腋窝淋巴结转移时应用术前超声联合术中亚甲蓝染色法前哨淋巴结活检术诊断效能高,能有效预测腋窝淋巴结状态,使患者免于不必要的腋窝淋巴结清扫,改善患者的生存质量。

荧光染色法快速诊断真菌性外耳道炎的意义

目的探讨荧光染色法快速诊断真菌性外耳道炎的临床意义。方法回顾性分析2021年1月-2023年12月在厦门市儿童医院耳鼻咽喉门诊疑诊的真菌性外耳道炎患儿30例,每例均行外耳道分泌物荧光染色法检查和真菌培养,比较荧光染色法检查和真菌培养检出的真菌感染阳性率。结果30例疑诊患儿中,荧光染色法检出真菌感染28例,真菌培养检出真菌感染26例,荧光染色法检测真菌性外耳道炎患儿的阳性率(93.3%)高于真菌培养法(86.7%),差异具有统计学意义(χ^(2)=0.04,P<0.05)。结论荧光染色法诊断真菌性外耳道炎的检出率更高,且操作更简便快捷,值得临床推广应用。

免疫染色法检测杆状病毒滴度方法的建立和优化

目的建立并优化杆状病毒滴度的检测方法。方法按照免疫染色法建立杆状病毒滴度检测方法,并对该方法的适用参数进行优化,通过筛选细胞接种浓度、病毒接种浓度、最适抗体稀释倍数,选择最佳反应条件优化检测方法,通过重复性、适用性实验验证该方法的准确性和特异性。结果细胞接种浓度选择0.65×10^(6)个/ml、病毒接种浓度选择104、抗体稀释倍数选择1∶500时检测结果最佳,应用最适检测参数进行重复验证,检测不同样品,仅杆状病毒组出现特异性病毒噬斑。结论建立并优化了重组杆状病毒滴度免疫染色方法,该方法具有良好的重复性、特异性和准确性,可用于生产中病毒滴度的检测。

改良的Sihler's染色法显示成人输尿管和回肠壁内神经分布

目的探讨改良的Sihler’s染色法显示成人输尿管和回肠壁内神经分布的应用。方法选取教学解剖尸体中输尿管和回肠6具,最终获得12条输尿管和6段回肠进行改良的Sihler’s染色法整体染色,于X线阅片灯下、组织压片、免疫组化观察输尿管和回肠壁内神经分支、分布、走形总结两者肌内神经分支、分布规律及形态学特征。结果大体解剖很难辨认输尿管的神经来源,可见回肠系膜内一些纤细的白色神经支进入肠壁。Sihler’s染色后,见输尿管和回肠呈透明胶冻状,壁内神经支呈深蓝色,浆膜面更为清晰。输尿管外膜层内的神经与血管伴行,近似垂直进入管壁,逐渐向肌层延伸并沿纵轴分布;整体见管壁上、中段神经稀少,分支逐渐变细,相邻分支间交叉较少;输尿管下段神经较为密集,见经膀胱输尿管连接部成簇状进入输尿管下段向近端延伸的粗大神经支,分布密集,向上逐渐分出初级及次级神经支,相邻神经间有分支交错及伴行,每根神经的分支不在一个平面上固定,可观察视野内未发现神经节。回肠外形完整,浆膜层神经分支呈现深蓝色,与动脉伴行,并向肠壁分出初级及次级神经支,部分直接跨越血管网分布至肠系膜侧壁,到达肠壁的壁内神经环形、垂直分布于肠管壁,呈树枝状。相邻的神经分支相互交叉,每根神经束的分支不在一个平面上固定,可观察视野范围内未见明确神经节。Sihler’s染色透明的输尿管、回肠切取组织压片:见两者神经纤维均由外向内至黏膜层分布,输尿管壁内沿纵轴走向,肠壁呈近似垂直向对系膜侧走向,呈网状分布,分支逐渐变细,神经纤维间明显交叉,均未见明确神经节样结构。免疫组化见输尿管肌内神经纤维呈束状、纵行分布,交叉较少;回肠壁内肌间有神经纤维网格状分布,肌间见有大量的神经节结构。结论成人输尿管和回肠壁内神经能被染色,神经分布各具特色。壁外神经均伴随其支配动脉走行,壁内由外向内至黏膜层走行,分支逐渐变细,未见明确神经节。除黏膜下层外,管壁结构类似,环肌与纵行平滑肌均受内脏神经支配,器官壁外神经走向沿其动脉伴行,壁内神经有类似节段性分布规律,此结果可能为临床上回肠代输尿管类似原输尿管蠕动节律性及排尿的神经解剖提供参考。

荧光染色法与KOH湿片法在皮肤真菌直接镜检检查中的应用价值

目的对比荧光染色法与氢氧化钾(KOH)湿片法用于皮肤真菌直接镜检检查中的效果。方法以2022年10月至2023年10月我院接诊疑似皮肤真菌感染患者90例作为研究对象,采集皮损样本,分别通过荧光染色法、KOH湿片法进行镜检检查,以临床综合诊断结果为金标准,对比两种检查方法的阳性检出率。结果临床综合诊断结果显示,31例患者确诊为手足癣,占比34.44%;19例患者确诊为体股癣,占比21.11%;11例患者确诊为头面癣,占比12.22%;20例患者确诊为甲癣,占比22.22%。荧光染色法直接镜检取得的总阳性率高于KOH湿片法(P<0.05)。结论通过荧光染色法进行皮肤真菌直接镜检检查相比KOH湿片法结果更准确,且操作更为便捷、快速。

阴道涂片检查快速染色法在阴道炎临床诊断中应用价值探析

目的:探讨阴道涂片检查快速染色法在阴道炎诊断中的临床价值。方法:选取2023年9月—2024年3月我院收治的120例疑似阴道炎患者,均采集阴道分泌物开展革兰氏染色法、阴道涂片检查快速染色法检查,并以阴道分泌物培养为金标准,统计阴道炎检出情况及诊断价值;并以kappa检验验证不同方法与金标准的一致性;比较不同方法检出霉菌、滴虫、淋球菌、加特纳杆菌情况。结果:120例疑似患者金标准确诊86例,其中革兰氏染色法、阴道涂片检查快速染色法分别检出81例、85例;阴道涂片检查快速染色法诊断灵敏度、准确度、阴性预测值较革兰氏染色法高,差异有统计学意义(P<0.05);kappa检验显示,革兰氏染色法与金标准kappa值=0.705,一致性尚可;阴道涂片检查快速染色法与金标准kappa值=0.939,一致性极好;阴道涂片检查快速染色法病原体检出率较革兰氏染色法高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:阴道涂片检查快速染色法在阴道炎诊断中价值更高,利于早期识别病原体,辅助临床诊断并指导针对性治疗。

荧光染色法测定氨基酸中外源DNA残留含量

目的:建立荧光染色法检测五种氨基酸原料中外源DNA残留量。方法:采用荧光染料与双链DNA特异结合后,使用荧光酶标仪测定,激发波长488 nm,检测波长520 nm。结果:DNA质量浓度在0.5~40 ng/mL范围内,浓度与荧光强度呈良好线性关系(r=0.9999),定量限0.55 ng/mL,不同品种氨基酸回收率在73%~132%。结论:该方法操作简便、快速,适用不同品种氨基酸,为企业开展氨基酸原辅料外源DNA残留量质量控制提供了技术基础。

基于溶液染色法显现潜血指纹的比较研究

潜血指纹作为暴力犯罪现场的重要物证之一,如何高效显现一直是法庭科学研究者和刑事技术人员关注的焦点。基于溶液染色法制备三种显现试剂(氨基黑10B、亮绿SF和考马斯亮蓝G250),用于显现A4纸张、信封纸、陶瓷、玻璃和铝箔纸等客体上的潜血指纹。比对研究三种染色试剂对不同客体和不同遗留时间潜血指纹的显现效果,并采用国际通行的指纹质量评价标准对显现效果进行评判,氨基黑10B和亮绿SF显现效果评分都在3分以上,考马斯亮蓝G250次之。其中对于A4纸张、信封纸和陶瓷等客体,考马斯亮蓝G250表现较差,遗留时间因素对潜血指纹显现效果的影响不明显。通过此研究可在不同客体上的潜血指纹显现中用于选配染色试剂,从而为案件侦破提供技术支撑。

肺腺癌病理鉴别诊断中胸腔积液细胞块切片免疫组化染色法的效能分析

目的 分析肺腺癌病理鉴别诊断中胸腔积液细胞块切片免疫组化染色法的效能。方法 纳入2022年1月至2023年10月院内诊治胸腔积液患者79例,采集胸腔积液细胞标本,分别行细胞涂片检查、细胞块切片免疫组化染色检查,观察诊断效能,包括肺腺癌免疫组化指标(BerEP4、TTF-1、CK17、CD15),间皮细胞免疫组化指标(Desmin、WT-1、CK5/6)。结果 本组79例患者中,综合病理诊断肺腺癌50例,间皮性肿瘤29例,细胞块切片检查的诊断灵敏度为96.00%,特异度为89.66%,准确率为93.67%高于细胞涂片检查方法的80.00%、62.07%、73.42%(P <0.05)。对肺腺癌诊断,细胞块切片与细胞涂片检查免疫组化染色法对Desmin、CK5/6、WT-1、CD15检出率无统计学意义(P> 0.05),细胞块切片对BerEP4、CK17检出率高于细胞涂片(P <0.05)。间皮肿瘤中,不同检测法对CK5/6、BerEP4、WT-1、CD15、CK17检出率无统计学意义(P> 0.05)。细胞块切片法对Desmin检出率高于细胞涂片法(P <0.05)。结论 通过胸腔积液检查进行肺腺癌与间皮肿瘤鉴别诊断中,与细胞涂片法对比,细胞块切片免疫组化染色法诊断效能更高,有助于提高临床诊断灵敏度与特异度,其中BerEP4、CK17对肺癌诊断价值较高,Desmin对间皮肿瘤诊断价值较高。

高温高压染色法负载纳米TiO_(2)制备防紫外线涤纶针织物

为提升普通涤纶织物紫外线防护性能,采用高温高压染色法对涤纶织物染色并进行纳米TiO_(2)的负载,讨论了红、黄、蓝3种颜色分散染料和纳米TiO_(2)用量及一浴法和两浴法对涤纶织物紫外线防护系数(UPF值)、K/S值及耐水洗色牢度的影响。结果显示,10%(owf)TiO_(2)负载白色涤纶针织物时,织物UPF值从14.76提升至50+。3种颜色织物防紫外线能力排序依次为蓝色>红色>黄色。分散黄23和纳米TiO_(2)染色负载涤纶针织物时,一浴法染色负载织物UPF值提升至37.13,两浴法染色负载时织物UPF值提升至40以上,两浴法染色负载织物经耐皂洗色牢度测试工艺后,其UPF值仍在40以上,耐水洗色牢度评级均为4级。

p16/Ki-67双重染色法在宫颈不典型鳞状上皮细胞及低级别鳞状上皮内病变中的应用价值

目的探讨p16/Ki-67双重染色法在宫颈不典型鳞状上皮细胞(ASCUS)及低级别鳞状上皮内病变(LSIL)中的应用价值。方法选取2022年9月至2023年9月江西景德镇第一人民医院收治的105例子宫颈病变患者作为研究对象,其中ASCUS患者52例,LSIL患者53例,均接受p16/Ki-67双重染色法、高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)检测,比较p16/Ki-67双重染色法与HR-HPV在ASCUS及LSIL中的阳性率、检出结果及诊断效能。结果105例子宫颈病变患者中p16/Ki-67双重染色法总阳性率为23.81%,其中ASCUS阳性率为11.54%,LSIL阳性率为35.85%,LSIL阳性率更高。52例ASCUS病例中,阴道镜活检确诊宫颈高级别病变4例,p16/Ki-67双重染色法诊断宫颈高级别病变特异度、准确度均高于HR-HPV。53例LSIL患者中,阴道镜活检确诊宫颈高级别病变9例,p16/Ki-67双重染色法诊断宫颈高级别病变特异度、准确度、AUC值均高于HR-HPV,差异有统计学意义(P<0.05)。结论相比ASCUS,p16/Ki-67双重染色法检测对LSIL的阳性检出率更高,且p16/Ki-67双重染色法检测能够提高对宫颈高级别病变诊断的特异度、准确度,具有较高的诊断价值。

结核杆菌检验中涂片抗酸染色法与荧光定量PCR法的价值对比

目的比较涂片抗酸染色法与荧光定量聚合酶链式反应(PCR)法在检验结核杆菌中的价值,为肺结核诊断提供依据。方法选取2021年8月至2023年8月本中心就诊的60例疑似肺结核患者,采集患者痰液标本,分别采用荧光定量PCR法、涂片抗酸染色法对其进行检测,并将痰培养所得结果作为本研究的“金标准”,就两种检测方法的具体诊断效能(特异度、准确度与灵敏度、阳性预测值、阴性预测值)进行对比。结果在疑似肺结核患者60例当中,通过痰培养确诊肺结核患者38例,所占比重为63.33%;荧光定量PCR法诊断阳性36例,涂片抗酸染色法为34例。荧光定量PCR法检测的特异度(95.45%)、准确度(93.33%)、灵敏度(92.11%)、阳性预测值(97.22%)、阴性预测值(87.50%)均较涂片抗酸染色法(68.18%、70.00%、71.05%、79.41%、57.69%)高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论采用荧光定量PCR法对结核杆菌进行检测,其在诊断肺结核方面的效能,优于涂片抗酸染色法,更具适用性。